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血清-βCTX和Total-P1NP联检在前列腺癌骨转移监测中的价值 被引量:4
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作者 王亚萍 黄璇 卢志贤 《放射免疫学杂志》 CAS 2011年第4期435-437,共3页
目的:为探讨血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(-βCTX)和总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(Total-P1NP)在前列腺癌骨转移监测中的意义。方法:用电化学发光免疫分析检测血清β-CTX和Total-P1NP水平。结果:发现前列腺癌骨转移组的血清β-CTX明显高... 目的:为探讨血清Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(-βCTX)和总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(Total-P1NP)在前列腺癌骨转移监测中的意义。方法:用电化学发光免疫分析检测血清β-CTX和Total-P1NP水平。结果:发现前列腺癌骨转移组的血清β-CTX明显高于无骨转移组及正常对照组(P均<0.05),而血清Total-P1NP明显低于无骨转移组及正常对照组(P均<0.05)。结论:检测血清β-CTX和Total-P1NP对前列腺癌患者骨转移的及时诊断有重要的参考意义。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列 总Ⅰ型胶原氨基端延长肽 前列腺癌骨转移
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β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用
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作者 王津 张云 +2 位作者 陈实 李晓艳 张静 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期176-180,共5页
目的探讨β胶原特殊序列(β-crosslaps,β-CTX)、总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)及N端中段骨钙素(N-MID-OT)在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年12月解放军总医院第六医学中心收治的102... 目的探讨β胶原特殊序列(β-crosslaps,β-CTX)、总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)及N端中段骨钙素(N-MID-OT)在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年12月解放军总医院第六医学中心收治的102例绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者的临床资料,将其作为研究组,并根据是否发生骨折将其分为PMOP骨折组(39例)与PMOP未骨折组(63例),另选100名健康体检者作为对照组。记录所有研究对象的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平并进行比较,用ROC曲线评价β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT在绝经后女性骨质疏松性骨折风险评估中的应用价值。结果研究组的平均体重、体质量指数、股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)、左髋总和BMD及L 1~4总和BMD均明显低于对照组(P<0.05);而两组研究对象的平均年龄、平均身高及绝经年龄等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于对照组(t值依次为12.688、37.430、26.599,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于预测PMOP的AUC值为0.978,敏感度为98.04%,特异度为97.00%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT三指标联合检测用于预测PMOP的效能更高。PMOP骨折组的β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT均明显高于PMOP未骨折组(t值依次为6.078、16.363、12.227,P<0.05)。β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的AUC值为0.939,敏感度为94.87%,特异度为95.24%,表明β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测用于评估PMOP骨折风险的效能更高。结论PMOP患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平均明显升高,而PMOP骨折患者β-CTX、t-P1NP及N-MID-OT水平升高更为明显,且β-CTX+t-P1NP+N-MID-OT联合检测可显著提高对PMOP预测及骨折风险评估效能,值得借鉴。 展开更多
关键词 β-CTX t-P1np N-MID-OT 绝经后女性 骨质疏松性骨折 风险评估
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慢性心力衰竭患者血清Ⅲ型前胶原氨基末端前肽、高迁移率族蛋白B1、NT-proBNP的表达及临床意义
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作者 郭丽 王雪 《黑龙江医药科学》 2024年第1期29-32,共4页
目的:检测慢性心力衰竭(CHF)患者血清Ⅲ型前胶原氨基末端前肽(N-terminal peptide of typeⅢprocollagen,PⅢNP)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)的表达水平,探讨二者与左室射血分数(LVEF)的相关性以及对CHF的诊断... 目的:检测慢性心力衰竭(CHF)患者血清Ⅲ型前胶原氨基末端前肽(N-terminal peptide of typeⅢprocollagen,PⅢNP)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)的表达水平,探讨二者与左室射血分数(LVEF)的相关性以及对CHF的诊断价值。方法:收集2021年12月至2022年11月期间于佳木斯大学附属第一医院心内科住院治疗的慢性心力衰竭患者90例为实验组,按照LVEF将其分为HFrEF组(n=33)、HFmrEF组(n=27)和HFpEF组(n=30)。此外选取排除心功能不全诊断的同期住院患者30例为对照组。对比各组患者血清中氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、PⅢNP、HMGB1水平的差异,分析PⅢNP、HMGB1水平与心功能指标的相关性,并借助ROC曲线评估NT-proBNP、HMGB1、PⅢNP单独以及联合应用对不同表型CHF患者的诊断价值。结果:HFrEF组PⅢNP、HMGB1及NT-proBNP水平均高于HFpEF组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PⅢNP与HMGB1呈正相关(P<0.05);PⅢNP、HMGB1均与NT-proBNP、LVEDD呈正相关,与LVEF呈明显负相关(P<0.05);HMGB1与LAD呈正相关(P<0.05),PⅢNP与LAD无明显相关性(P>0.05)。血清NT-proBNP、HMGB1、PⅢNP水平诊断HFrEF患者的AUC分别为0.867、0.871、0.779;诊断HFmrEF患者的AUC分别为0.840、0.804、0.760;诊断HFpEF患者的AUC分别为0.851、0.728、0.769。多生物标志物模型NT-proBNP+PⅢNP、NT-proBNP+HMGB1、NT-proBNP+PⅢNP+HMGB1诊断HFrEF患者的AUC分别为0.887、0.954、0.954;诊断HFmrEF患者的AUC分别为0.942、0.937、0.951;诊断HFpEF患者的AUC分别为0.904、0.910、0.914。结论:CHF患者血清PⅢNP、HMGB1明显升高,并且,CHF患者血清PⅢNP、HMGB1水平与心脏功能指标具有良好的相关性,说明PⅢNP、HMGB1可反映疾病的严重程度。PⅢNP、HMGB1对各表型CHF患者均具有诊断价值,并且,多生物标志物联合检测能提高对CHF患者诊断的敏感性。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 左室射血分数 NT-PROBnp PⅢnp HMGB1
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《庄子·内篇》“VP_(1)而VP_(2)”“NP之VP”结构研究
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作者 黄昌杰 《现代语文》 2024年第1期45-50,共6页
连词“而”是一个高频虚词,当它连接两个动词性词语VP_(1)、VP_(2)时,用法较为复杂。根据两个VP之间的句法语义关系,《庄子·内篇》中的“VP_(1)而VP_(2)”结构可以分析为四种类型:连谓、偏正、联合、紧缩。“NP之VP”结构在《内篇... 连词“而”是一个高频虚词,当它连接两个动词性词语VP_(1)、VP_(2)时,用法较为复杂。根据两个VP之间的句法语义关系,《庄子·内篇》中的“VP_(1)而VP_(2)”结构可以分析为四种类型:连谓、偏正、联合、紧缩。“NP之VP”结构在《内篇》中的出现频率也比较高。结构助词“之”置于主谓结构“NP+VP”中间,形成体词性偏正结构“NP之VP”,相当于现代汉语“NP的VP”。该结构在句法上只能分布于主、宾位;在语义上不具有独立性,是谓语核心动词的论元成分;在语用上具有指称功能。 展开更多
关键词 《庄子·内篇》 “VP_(1)而VP_(2)” np之VP” 连词 “而” 结构助词 “之”
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中枢性性早熟儿童25-羟基维生素D3、神经肽吻素与血清P1NP和N-MID OC的相关性
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作者 彭丽琨 何大可 +6 位作者 张翠香 杨巨品 严家威 董宇莹 江泳 黄张杨 段丽梅 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第3期418-420,共3页
目的分析25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平、神经肽吻素(Kisspeptin)在中枢性性早熟(CPP)儿童中的表达,及其与血清Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(P1NP)、N端中段骨钙素(N-MID OC)的相关性。方法86例CPP患儿作为CPP组,同时选取50例单纯性乳房早... 目的分析25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平、神经肽吻素(Kisspeptin)在中枢性性早熟(CPP)儿童中的表达,及其与血清Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(P1NP)、N端中段骨钙素(N-MID OC)的相关性。方法86例CPP患儿作为CPP组,同时选取50例单纯性乳房早发育(PT)及50例体检正常的健康儿童,分别作为PT组和健康组。对比各组血清25-(OH)D3、Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平,采用Pearson相关性分析血清25-(OH)D3、Kisspeptin与P1NP和N-MID OC的相关性。结果CPP组25-(OH)D3水平低于PT组和健康组,PT组25-(OH)D3水平低于健康组(P<0.05);CPP组Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平高于PT组和健康组,PT组Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平高于健康组(P<0.05)。25-(OH)D3与血清P1NP及N-MID OC呈负相关(r=-0.259、-0.323,P<0.05)。Kisspeptin与血清P1NP及N-MID OC呈正相关(r=0.426、0.610,P<0.05)。结论CPP患儿表现为25-(OH)D3低水平和Kisspeptin高水平,且患儿25-(OH)D3和Kisspeptin水平与骨代谢标志物P1NP及N-MID OC呈显著相关性,可作为评估CPP患儿骨代谢情况的参考指标。 展开更多
关键词 中枢性性早熟 骨代谢 25-羟基维生素D3 KISSPEPTIN P1np N-MID OC
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血清骨钙素、TP1NP、25(OH)D3水平在绝经后女性T2DM患者并发DKD中的应用价值探讨
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作者 吴泳桦 张亚梅 +1 位作者 安娜 邓蔷 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第8期1321-1325,共5页
目的 分析血清骨钙素(OC)、总I型前胶原N端前肽(TP1NP)、25-羟维生素D3[25(OH)D3]水平在绝经后女性2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病肾病(DKD)患者中的应用价值。方法 收集122例绝经后女性T2DM患者临床资料,其中合并DKD 41例(DKD组),无DKD 81... 目的 分析血清骨钙素(OC)、总I型前胶原N端前肽(TP1NP)、25-羟维生素D3[25(OH)D3]水平在绝经后女性2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病肾病(DKD)患者中的应用价值。方法 收集122例绝经后女性T2DM患者临床资料,其中合并DKD 41例(DKD组),无DKD 81例(对照组),比较两组血清OC、TP1NP、25(OH)D3水平,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清OC、TP1NP、25(OH)D3对绝经后女性T2DM患者合并DKD的诊断价值;并比较不同尿白蛋白/肌酐比值(UACR)的DKD患者血清OC、TP1NP、25(OH)D3水平差异。结果 DKD组血清OC、TP1NP、25(OH)D3水平均低于对照组(P<0.05)。OC、TP1NP、25(OH)D3对绝经后女性T2DM患者合并DKD均有较高诊断价值(P<0.05),且3项联合诊断价值更高(P<0.05)。绝经后女性DKD患者中,UACR>300mg/g者血清OC、TP1NP、25(OH)D3水平明显低于UACR≤300mg/g者(P<0.05)。结论 血清OC、TP1NP、25(OH)D3水平对评估绝经后女性T2DM患者DKD发生、发展进程有利。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 绝经后女性 T2DM OC TP1np 25(OH)D3
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基于DNA链置换反应网络求解0-1背包问题
7
作者 杨静 郑雅雯 +1 位作者 张彤彤 蒋天怿 《安徽理工大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期78-88,共11页
目的基于DNA链置换的化学反应网络可以作为一种有效的编程语言来解决各种数学问题,而0-1背包问题是一个经典的NP问题。为了求解0-1背包问题。方法提出利用DNA链置换反应网络,并利用Visual DSD设计仿真实验。结果通过加权、求和和阈值3... 目的基于DNA链置换的化学反应网络可以作为一种有效的编程语言来解决各种数学问题,而0-1背包问题是一个经典的NP问题。为了求解0-1背包问题。方法提出利用DNA链置换反应网络,并利用Visual DSD设计仿真实验。结果通过加权、求和和阈值3个反应模块进行求解,最后由输出的单链DNA来表达结果。由于浓度的检测存在一定误差,使用带有荧光分子的单链DNA输出表达操作结果。最后,使用DSD仿真软件得到变量转换模块相对应的链置换反应网络图、变量仿真图以及阈值比较图。模型表明,该算法能够有效降低0-1背包问题的复杂度,并且具有较高的求解精度和稳定性。结论所提出的模型进一步丰富了DNA计算,并拓宽了DNA链位移的计算宽度。 展开更多
关键词 DNA链置换 0-1背包问题 np问题 DNA计算
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非小细胞肺癌NP方案化疗敏感性与DNA修复基因XRCC1多态性的关系 被引量:11
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作者 洪成雨 徐倩 +2 位作者 岳峥 张晔 袁媛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1291-1297,共7页
背景与目的:基因多态预测肿瘤化疗药物敏感性对肿瘤个体化治疗具有重要意义。本研究旨在探讨DNA修复基因XRCC1 codon194及399位点基因多态性与非小细胞肺癌长春瑞滨加顺铂(vinorelbine and cisplatin,NVB and DDP,NP)方案化疗敏感性的... 背景与目的:基因多态预测肿瘤化疗药物敏感性对肿瘤个体化治疗具有重要意义。本研究旨在探讨DNA修复基因XRCC1 codon194及399位点基因多态性与非小细胞肺癌长春瑞滨加顺铂(vinorelbine and cisplatin,NVB and DDP,NP)方案化疗敏感性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测164例非小细胞肺癌患者外周血DNAXRCC1194和399位点的多态性。选择NP方案化疗,化疗两周期后评价疗效,并分析化疗敏感性与基因多态性的关系。结果:携带XRCC1基因Codon194C/T+T/T基因型者化疗有效率(41.8%)是C/C基因型者(26.0%)的2.038倍(P=0.036,95%CI=1.044-3.976)。携带XRCC1基因Codon399G/G、A/G、A/A型的患者化疗有效率(37.1%,34.6%,14.3%)之间的差异无统计学意义(P>0.05)。 展开更多
关键词 DNA修复基因 XRCC1 多态性 肺肿瘤 非小细胞 np方案 化疗敏感性
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猪博卡病毒NP1基因的克隆与原核表达 被引量:17
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作者 李彬 毛立 +9 位作者 何孔旺 温立斌 茅爱华 张雪寒 倪艳秀 郭容利 马俊杰 周俊明 吕立新 俞正玉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期28-31,共4页
猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴... 猪博卡病毒是近年来新发现的一种细小病毒。本研究根据其部分基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了一对引物,采用PCR方法扩增出了猪博卡病毒的NP1基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a-NP1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为46 kDa的融合蛋白,蛋白表达量较高,而且蛋白以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western Blot结果显示,表达的NP1蛋白能与His抗体发生特异性的免疫反应,表明原核表达的NP1蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 np1基因 克隆 原核表达
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血清P1NP、β-CTX检测在老年乳腺癌骨转移诊断中的价值 被引量:9
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作者 孙献甫 崔树德 +3 位作者 孙淼淼 贺亚宁 邵营波 刘慧 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期3827-3828,共2页
目的探讨血清Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)和β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)在乳腺癌骨转移监测中的意义。方法 88例乳腺癌患者分为乳腺癌骨转移组48例,无骨转移组40例,健康体检者40例为正常对照组,用电化学发光免疫分析检测血清P1NP和β-CT... 目的探讨血清Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)和β-I型胶原羧基端肽(β-CTX)在乳腺癌骨转移监测中的意义。方法 88例乳腺癌患者分为乳腺癌骨转移组48例,无骨转移组40例,健康体检者40例为正常对照组,用电化学发光免疫分析检测血清P1NP和β-CTX水平。结果乳腺癌骨转移组的血清P1NP明显低于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05),而血清β-CTX明显高于无骨转移组及正常对照组(均P<0.05);乳腺癌骨转移患者P1NP与β-CTX呈负相关(r=-0.677,P<0.05)。结论血清P1NP和β-CTX对乳腺癌患者骨转移的早期诊断有一定的价值。 展开更多
关键词 乳腺癌骨转移 CTX P1np
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NP9基因的克隆及对细胞周期素D1转录活性的影响 被引量:9
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作者 刘启才 方嬿 +2 位作者 李晓艳 梁卫江 曾益新 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第7期725-728,共4页
背景与目的:NP9基因是我们在鼻咽癌中克隆到的一个新的表达下调的基因(GenBank登录号:BF718797),为了进一步研究该基因的功能,我们构建了人NP9基因编码区序列的真核表达质粒,并研究其表达对细胞周期素D1(cyclinD1)的影响。方法:通过核... 背景与目的:NP9基因是我们在鼻咽癌中克隆到的一个新的表达下调的基因(GenBank登录号:BF718797),为了进一步研究该基因的功能,我们构建了人NP9基因编码区序列的真核表达质粒,并研究其表达对细胞周期素D1(cyclinD1)的影响。方法:通过核苷酸同源序列比较(BlastN)得到NP9EST的同源cDNA,RT-PCR扩增其编码区序列并构建真核表达重组质粒pRc/CMV2-NP9,脂质体转染后G418筛选出稳定、高效转录NP9基因的细胞克隆;再通过脂质体转染cyclinD1promoterLuc和NF-κB-Luc质粒到稳定表达NP9基因的细胞克隆,测定荧光素酶的活性以确定NP9基因对cyclinD1和NF-κB转录活性的影响;同时亚克隆NP9基因编码序列到载体pEGFP-C1中,脂质体转染细胞以确定NP9蛋白在细胞中的定位。结果:融合的绿色荧光蛋白出现于细胞核。G418抗性克隆中,RT-PCR扩增证实部分克隆表达NP9基因,且强弱不同。表达NP9基因的细胞克隆在瞬间转染cyclinD1promoterLuc和NF-κB-Luc48h后,荧光素酶的活性较其对照组分别下降46%和63%。结论:NP9蛋白在细胞核内表达;NP9基因通过抑制核转录因子NF-κB的转录活性下调cyclinD1的表达。 展开更多
关键词 np9基因 克隆 细胞周期素D1 转录活性 影响 鼻咽肿瘤
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小麦中外源基因瞬间表达调控研究及兔防御素(NP-1)基因的转化 被引量:21
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作者 郭殿京 傅荣昭 +4 位作者 李文彬 陈颖 张晓东 张利明 孙勇如 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期168-173,共6页
将不同5’上游调控序列驱动下的GUS基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织,通过组织化学分析法和荧光分析法对GUS基因的表达进行定量检测,比较了几种启动子和烟草花叶病毒(TMV)增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的... 将不同5’上游调控序列驱动下的GUS基因用基因枪法导入小麦幼胚和胚性愈伤组织,通过组织化学分析法和荧光分析法对GUS基因的表达进行定量检测,比较了几种启动子和烟草花叶病毒(TMV)增强子序列对小麦中外源基因瞬间表达的调控作用;然后将其中效率最高的玉米Ubil启动子与兔防御素(NP-1)基因连接起来,并加上Nos终止子,构建成NP-1基因小麦表达载体,并转化小麦幼胚。经PCR-Southernblot分析,初步确定NP-1基因已整合到小麦基因组中。转基因植株的抑菌试验正在进行中。 展开更多
关键词 小麦 外源基因 防御素基因 表达调控
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利用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入小麦的研究 被引量:13
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作者 周春江 葛荣朝 +3 位作者 赵宝存 黄占景 沈银柱 何聪芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期26-28,共3页
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂... 兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂交,证实了NP-1基因已经整合到转基因植株的基因组中,并稳定遗传到T1。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病有较强的免疫力和抗性,但对于蚜虫的抗性没有明显提高。 展开更多
关键词 小麦 兔防御素np-1基因 转化 花粉管通道
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NP9对鼻咽癌细胞系CNE1基因表达谱的影响 被引量:3
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作者 刘启才 李晓艳 +2 位作者 彭燕 李晓岩 李冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期982-985,共4页
目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差... 目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差异。结果:所分析的14500个基因中,266个检测出有表达差异,其中82个基因呈现表达上调(RA>1),184个基因显示表达下调(RA<1)。显著上调和下调的基因分别为34个(RA>1.5)和75个(RA<1.5)。结论:NP9基因的表达导致了CNE1细胞中与细胞周期调控、细胞增殖和分化、细胞信号转导、细胞黏附相关基因表达的改变,为NP9的功能及分子机制研究提供了新的线索。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 基因 np9 基因表达 CNE1细胞
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H1N2亚型猪流感病毒HA、NP、NA、M和NS基因的克隆与序列分析 被引量:3
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作者 蒙雪琼 陈义祥 +3 位作者 刘棋 郑敏 施开创 胡杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期221-227,共7页
对3株H1N2亚型猪流感病毒(SIV):Sw/GX/17/05、Sw/HN/I/05和Sw/GX/13/06的血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因进行克隆和序列分析。结果显示:3株分离毒株HA、NP、NA、M和N... 对3株H1N2亚型猪流感病毒(SIV):Sw/GX/17/05、Sw/HN/I/05和Sw/GX/13/06的血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因进行克隆和序列分析。结果显示:3株分离毒株HA、NP、NA、M和NS基因之间核苷酸同源性分别为91.3%~98.0%、98.4%~98.8%、97.4%~98.3%、98.8%~99.8%和98.1%~98.4%。遗传进化分析显示:分离毒株与美国分离的三源基因重排HIN2sIV具有较近的亲缘关系;在HA、NP、M和NS基因进化树中,3株分离毒株均位于古典H1N1亚型SIV群,在NA基因进化树中,3株分离毒株则位于人流感病毒群。HA和NA基因推导氨基酸序列分别与代表毒株古典H1N1SIVA/swine/Maryland/23239/1991(H1N1)和人H3N2流感病毒A/BuenosAires/4459/96(H3N2)比较分析显示:HA(95.4%~96.1%)和NA(96.6%~97.2%)具有较高的氨基酸同源性;糖基化位点、抗原位点和受体结合位点(HA)处氨基酸存在一定的差异,这些氨基酸差异对病毒生物学特性的影响有待于进一步研究。 展开更多
关键词 H1N2亚型SIV HA基因 np基因 NA基因 M基因 NS基因 克隆 序列分析
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犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:2
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作者 闫琰 张茜 +3 位作者 马婧 李建宁 张薇 孙玉宁 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期864-869,I0006,共7页
目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘... 目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 犬博卡病毒 np1基因 多克隆抗体
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彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究 被引量:6
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作者 张红艳 李冠 李仁敬 《新疆大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期94-98,共5页
选用彩色棉优良品种(棕色):新彩1号、新彩2号.以下胚轴和子叶作为外植体,确立了5~6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体.不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用,2,4-D是愈伤组织诱导中重要的激素,在附加有0.1mol/L... 选用彩色棉优良品种(棕色):新彩1号、新彩2号.以下胚轴和子叶作为外植体,确立了5~6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体.不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用,2,4-D是愈伤组织诱导中重要的激素,在附加有0.1mol/L2,4-D+0.1mol/LKT的MSB培养基上,诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛,有利于分化为胚性愈伤.比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应,在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中,愈伤组织诱导率均为100%,但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长,蔗糖的诱导效果次之;麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖;甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长.在胚性愈伤组织的诱导培养中,KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生.在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP-1转化过程中,外植体经农杆菌浸染10min,共培养48h较为合适,在添加头孢霉素500mg/L、卡那霉素50mg/L的培养基中筛选抗性愈伤组织. 展开更多
关键词 彩色棉 影响因子 愈伤组织 兔防御素np-1 外植体确定 根癌农杆菌 遗传转化 糖源诱导效应
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猪博卡病毒非结构蛋白NP1基因的克隆及基因分型研究 被引量:2
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作者 陈如敬 吴学敏 +5 位作者 车勇良 王隆柏 严山 魏宏 刘玉涛 周伦江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第2期292-297,共6页
为明确猪博卡病毒福建株非结构蛋白NP1的特征,本研究根据GenBank中登录的非结构蛋白NP1的基因特征,设计特异性引物从一份患有断奶仔猪多系统衰竭综合征的仔猪肺脏和淋巴结基因组DNA中扩增到猪博卡病毒非结构蛋白NP1的全长基因序列。测... 为明确猪博卡病毒福建株非结构蛋白NP1的特征,本研究根据GenBank中登录的非结构蛋白NP1的基因特征,设计特异性引物从一份患有断奶仔猪多系统衰竭综合征的仔猪肺脏和淋巴结基因组DNA中扩增到猪博卡病毒非结构蛋白NP1的全长基因序列。测序结果显示,本试验克隆的猪博卡病毒非结构蛋白NP1的基因全长为675bp,编码有224个氨基酸,其与美国株猪博卡病毒(OH110株)核苷酸同源性最高,达97.3%,但与美国株猪博卡病毒(IN109-1株)核苷酸同源性仅为81.8%;与英国北爱尔兰野猪博卡病毒(F41株和64-1株)同源性均不高,分别为82.5%和80.9%;与猪博卡病毒(H18株)核苷酸同源性最低,仅为43.8%。通过对猪博卡病毒代表株进行核苷酸同源性比对分析发现,猪博卡病毒存在3个主要的基因群,不同基因群非结构蛋白NP1的核苷酸同源性均低于50.0%。结果提示需对猪博卡病毒进行明确的划分,不同来源的猪博卡病毒可细分为3个明显的代表种。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 非结构蛋白np1 克隆 序列分析 基因分型
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NP1和GAFP双价抗病基因植物表达载体的构建 被引量:2
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作者 陈英 戴咏梅 +3 位作者 王义琴 孙勇如 黄敏仁 王明庥 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期7-10,共4页
防御素对病毒、细菌和真菌都具有一定的抗性。天麻抗真菌蛋白可抑制多种真菌的生长。笔者利用DNA重组技术,将这两个抗病机制不同、抗菌谱均较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBinGAFP-NP1上,为... 防御素对病毒、细菌和真菌都具有一定的抗性。天麻抗真菌蛋白可抑制多种真菌的生长。笔者利用DNA重组技术,将这两个抗病机制不同、抗菌谱均较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBinGAFP-NP1上,为一次性地获得含双价抗病基因的植株奠定了基础。 展开更多
关键词 防御素基因np1 天麻抗真菌蛋白基因GAFP 双价抗病基因 表达载体
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猪流感H1N1亚型NP基因杆状病毒表达载体构建及其在昆虫细胞中的表达 被引量:1
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作者 段博芳 张利仙 +5 位作者 段纲 董俊 叶玲玲 周晓黎 徐志斌 艾军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1118-1122,共5页
目的获得研发A型猪流感病毒ELISA检测试剂盒和制备NP蛋白单克隆抗体的抗原物质。方法根据已报道的猪流感病毒H1N1亚型NP基因序列(GenBank登录号:GQ422386)人工合成NP基因,通过XbaⅠ和EcoRⅠ特异性酶切,将NP基因克隆于昆虫杆状病毒表达载... 目的获得研发A型猪流感病毒ELISA检测试剂盒和制备NP蛋白单克隆抗体的抗原物质。方法根据已报道的猪流感病毒H1N1亚型NP基因序列(GenBank登录号:GQ422386)人工合成NP基因,通过XbaⅠ和EcoRⅠ特异性酶切,将NP基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTB,经PCR、酶切、测序鉴定后,获得携带NP基因的重组质粒pFast-BacHTB-NP。该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态细胞,经抗生素、PCR筛选,获得转座的杆粒Bac-mid-NP。在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,再感染细胞,收获目的蛋白。结果通过SDS-PAGE和Westernblotting分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物活性,大小约为57KD。结论实验结果表明已成功构建了携带NP基因的重组质粒pFastBacHTB-NP和转座的杆粒Bacmid-NP,转染后在sf9昆虫细胞上成功的表达。 展开更多
关键词 H1N1 np基因 杆状病毒表达载体 昆虫细胞
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