市售化橘红总黄酮含量测定研究

目的:测定广州地区流通领域市售化橘红药材与饮片中总黄酮的含量,为化橘红商品药材质量现状调查提供简便依据。方法:以柚皮苷为对照品,采用紫外分光光度法在283 nm处测定30批化橘红样品中总黄酮质量分数。结果:以甲醇为提取溶剂,超声40 min制备供试品溶液,紫外检测得到的30批样品总黄酮质量分数差异较大。结论:收集的30批样品总黄酮含量检测结果证实了市面流通化橘红商品药材存在质量参差不齐的问题,以简单的质量评价方法为市售化橘红商品药材质量调查提供一定参考依据。

奇楠沉香叶的有效成分含量测定及其生物活性评价

【目的】测定不同提取条件下奇楠沉香叶中总黄酮、总多糖、鞣质的含量及其体外抗氧化、抗菌、抗炎活性,同时探讨其相关性。【方法】(1)采用水提法、醇提法,每次加入12倍量的水/70%乙醇对奇楠沉香叶进行加热回流提取,2 h/次,提取2次。(2)以芦丁、D-无水葡萄糖、没食子酸为指标成分,采用紫外-可见分光光度法结合化学显色法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物中总黄酮、总多糖、鞣质的含量。(3)以抗坏血酸(VC)为阳性对照,采用紫外-可见分光光度法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS+·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O)的半数抑制浓度(IC50)以及对铁离子(Fe3+)的还原能力。(4)采用微量稀释法测定奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。(5)采用耳廓肿胀法测定高、中、低剂量奇楠沉香叶水提物组,高、中、低剂量70%醇提物组(3.33、1.67、0.83 g生药/kg)二甲苯所致小鼠耳廓的肿胀度。【结果】(1)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物中的总黄酮、总多糖、鞣质含量依次为:(5.04±0.01)%、(3.78±0.02)%,(6.86±0.11)%、(3.09±0.27)%,(2.16±0.01)%、(1.81±0.01)%。(2)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对DPPH·、ABTS+·、·OH、O的IC50依次为0.31、0.37 mg/mL,0.12、0.16 mg/mL,0.069、0.074 mg/mL,0.71、1.17 mg/mL;同时随着浓度的增加均对Fe3+的还原性增强。(3)奇楠沉香叶水提物、70%醇提物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、沙门氏菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌的MIC范围依次为15.63~>500.0、31.25~>500.0 mg/mL。(4)与空白组比较,高、中剂量奇楠沉香叶水提物组,高、中剂量70%醇提物组小鼠耳廓肿胀度显著降低(P<0.01),但相同剂量水提物组与70%醇提物组相比则无显著性差异(P>0.05)。【结论】奇楠沉香叶中含有较多的总黄酮、总多糖和鞣质成分,同时具有较强的抗氧化、抗菌、抗炎活性,且成分含量与生物活性基本呈正相关性。相比醇提法,水提法制备的奇楠沉香叶提取物具有更多的有效成分和更强的生物活性。

树莓的抗氧化活性与主要化学成分的相关分析

目的研究树莓提取物的抗氧化活性与总花色苷、总多酚和总黄酮含量间的相关性。方法采集不同品种及不同成熟期的树莓,采用DPPH和ABTS法测定各树莓乙醇提取物的清除自由基能力,再分别采用pH示差法、Folin-Ciocalteu法和亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法测定不同树莓中总花色苷、总多酚和总黄酮的含量,利用Pearson相关系数分析树莓的抗氧化活性与各成分含量间的相关性。结果树莓的抗氧化活性与总黄酮和总多酚含量显著相关,尤其与总多酚含量的相关性最高(r>0.91),但与总花色苷含量的相关性不明显。结论多酚类物质是树莓发挥抗氧化作用的主要物质基础。

黄芪总黄酮对病毒性心肌炎小鼠心律失常的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对病毒性心肌炎小鼠心律失常的作用。方法应用CVB3感染BALB／c小鼠制作病毒性心肌炎模型，每日腹腔注射TFA（dOmg／kg）0．1ml；对照组每13腹腔注射生理盐水0．1ml。10d后以BL一420生物机能实验系统对小鼠心电图进行观察和改良CurtisandRavingerovand评分，并进行统计分析。结果应用黄芪总黄酮（TFA）组病毒性心肌炎小鼠与对照组相比较，心律失常发生率明显减少（12例，P〈0．05）。结论黄芪总黄酮可显著降低病毒性心肌炎小鼠心律失常发生率。

黄芪总黄酮对急性心肌梗死大鼠心脏血流动力学及心肌细胞钙电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮(TFA)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心脏血流动力学及心肌细胞钙电流的作用。方法大鼠开胸左前降支结扎造成AMI,开胸前5min实验组大鼠舌静脉注射剂量为(20mg/kg)TFA溶液50μl,并设正常对照组,AMI组及TFA实验组,后行血流动力学检查;酶解分离心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术记录左前降支供血区心外膜细胞的L型Ca2+电流(L-Ica)的作用。结果①应用TFA(20mg/kg)后与AMI组比较,血流动力学指标明显改善(P<0.05,n=7)。与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05,n=7)。②应用TFA(20mg/kg)后与AMI对照组比较,L-型钙电流(L-ICa)由给药前的(0.31±1.09)nA增加到给药后的(0.49±0.89)nA(P<0.01,n=7)。结论TFA可以明显改善AMI大鼠心脏血流动力学,增加心室肌细胞L-型钙电流的幅值。

三种杜仲原料栽培平菇效果的比较

采用矮林杜仲叶、乔林杜仲叶和乔林杜仲叶渣替代40%棉籽壳栽培平菇,考察其对平菇菌丝生长过程和平菇蛋白质、脂肪以及相关微量元素含量的影响,并采用紫外可见分光光度法测定了各组平菇总黄酮的含量、荧光法测定了各组平菇硒的含量。结果表明,乔林杜仲叶渣组平菇发菌实验结果最好,且蛋白质、脂肪、Cu和Mn含量最高,分别为对照组的1.13、1.73、3.75、2.71倍;乔林杜仲叶组平菇总黄酮、Ca、Na、K和Mg含量最高,分别为对照组的1.49、2.20、7.20、1.08、1.03倍;矮林杜仲叶组平菇Fe、Zn和Se含量最高,分别为对照组的1.72、2.10、2.38倍,且硒的含量为0.07524μg·g-1,达到了富硒标准。

响应面法优化野生五叶草莓总黄酮提取工艺

采用超声波辅助乙醇浸提法探索甘肃陇南产野生五叶草莓中总黄酮的最佳提取工艺条件。在单因素试验基础上,以料液比、超声时间、超声温度和乙醇体积分数为自变量,总黄酮提取率为因变量,利用Box-Behnken四因素三水平中心组合设计,对总黄酮提取工艺进行优化。结果表明,最佳提取工艺为:液料比12∶1(m L/g)、超声时间27 min、超声温度59℃和乙醇体积分数61%,野生五叶草莓总黄酮提取率实际可达10. 68 mg/g。超声波辅助乙醇浸提法的总黄酮得率为传统水浴回流法的2. 1倍,且该方法操作简单,重复性好。研究结果能为五叶草莓总黄酮的开发利用提供参考。

响应曲面法优化超声辅助提取化橘红总黄酮

研究了响应曲面法超声辅助提取化橘红中黄酮化合物的工艺。在单因素实验的基础上,对总黄酮提取进行优化。选择乙醇体积分数,料液比,超声功率,超声温度四因素,采用Box-behnken设计方法,研究自变量及其交互作用对总黄酮提取率的影响。利用Design Expert 6.0.1软件对数据进行回归分析,得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明化橘红总黄酮的最优提取条件是乙醇体积分数30%,料液比1∶100 g/mL,超声功率150 W,超声温度80℃。在此条件下,获得化橘红黄酮最大得率为0.884%。

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞钠电流的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对嗜心性柯萨奇B3病毒（CVB3m）感染心肌细胞钠电流的作用。方法采用体外培养小鼠新生心肌细胞方法，建立柯萨奇B3病毒感染心肌细胞模型，采用全细胞膜片钳记录技术记录心室肌细胞钠电流（INa）。结果应用黄芪总黄酮（TFA）组与柯萨奇B3病毒感染模型组相比较，INa峰值从（-7．79±1．53）nA下降到（-5．64±1．67）nA，差异有统计学意义（P〈0．01，n=6）。结论黄芪总黄酮可显著降低柯萨奇B3病毒感染心肌细胞钠电流的幅值。

黔产犁头草中总黄酮的含量测定

以芦丁为对照品,三氯化铝为显色剂,紫外分光光度(UV)法测定,通过单因素及正交试验对总黄酮的提取方法进行研究。建立黔产犁头草中总黄酮的含量测定方法。芦丁在浓度为0.005~0.04 mg/mL范围内呈良好线性关系,回归方程A=4.290 5C-0.000 4(R^2=0.999 9),平均回收率为97.60%,RSD=0.03%(n=3)。结果表明:贵州不同产地犁头草中总黄酮含量在2.10%~4.04%之间。建立了黔产犁头草中总黄酮含量测定方法,该方法简便快速,回收率高,可为黔产犁头草的质量控制标准提供科学依据。

真空气流细胞破壁技术对橄榄总黄酮提取的影响

以橄榄为原料，通过单因素及Box-Benhnken中心组合法研究橄榄切片厚度、质构保护液浓度及真空气流细胞破壁技术（VAPB）对橄榄总黄酮提取率及破果率的影响。结果表明，切片橄榄最适宜厚度为4-5mm；质构保护最佳处理工艺为：首先在浓度为0．20g／100mL的海藻酸钠溶液中浸泡20min，接着在浓度为0．15g／100mL的氯化钙溶液中浸泡60min；真空气流细胞破壁前处理最佳工艺为：泄压温度110℃、压力差122kPa、停滞时间16min、泄压重复次数3次；最后采用亚临界水提取，其总黄酮提取率为64．93％，破果率20．60％，相比切片后直接进行亚临界水提取对照组，总黄酮提取率提高了21．23％，而破果率仅增加了3．89％。提取过总黄酮的橄榄切片79．40％结构保持完整，可以作为广式凉果原料。

凤眼莲总黄酮的提取及纯化工艺研究

以乙醇为溶剂,以超声波为辅助条件,通过单因素和正交实验,对凤眼莲中总黄酮类的提取及纯化进行了研究。实验结果表明,凤眼莲中总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度70%,料液比1︰40,超声时间30 min以及超声温度70℃;而提取液总黄酮的纯化则以聚酰胺为纯化剂,60%的乙醇为洗脱液。

NaCl胁迫对银柴胡药材活性成分含量及其积累量的影响研究

[目的]研究盐胁迫对银柴胡药材产量和活性成分相对含量及积累量的影响,以明确盐胁迫对银柴胡药材产量和质量的影响效应,为银柴胡的规范化栽培提供理论依据。[方法]盆栽控盐试验栽培柴胡一年生幼苗,土壤盐含量设置为2、3、4 g/kg 3个水平;利用紫外分光光度法测定银柴胡药材中总黄酮和总皂苷的相对含量,并结合产量计算其积累量。[结果]随着土壤中NaCl含量的增加,银柴胡药材产量呈现逐渐下降的趋势;药材中总黄酮和总皂苷相对含量呈现逐渐升高的趋势,而其积累量呈先升高后降低的趋势。[结论]盐胁迫显著提高银柴胡药材产量、总黄酮和总皂苷的含量,当土壤盐含量为3 g/kg时,银柴胡药材总黄酮和总皂苷积累量均较高,有利于银柴胡药材的优质高产栽培。

不同产地朝鲜淫羊藿中总黄酮含量测定

目的测定不同产地朝鲜淫羊藿总黄酮含量,比较不同产地朝鲜淫羊藿的质量;方法按2005版药典紫外一可见分光光度法,以淫羊藿苷为标准品,在270nm波长下测定吸光度,计算总黄酮含量;结果在0.15mg^0.52rug范围内,淫羊藿苷mg数与吸光度A值线性关系良好,平均回收率为100.14%,RSD=1.66%,r=0.9989。不同产地朝鲜淫羊藿总黄酮含量分别为敦化基地(茎6.49%,叶18.75%,地上部分17.63%)、敦化野生(茎4.24%,叶18.18%,地上部分11.85%)、临江野生(茎5.10%,叶14.29%,地上部分13.12%)、北朝鲜野生(茎3.83%,叶11.47%,地上部分10.30%);结论不同产地朝鲜淫羊藿总黄酮含量差异较大,敦化基地的含量最高,依次是临江野生、敦化野生、北朝鲜野生。同一产地的朝鲜淫羊藿不同部位总黄酮含量也有较大差异。

正交实验法优选青皮的醇提工艺

目的优选青皮的最佳醇提工艺。方法以橙皮苷为标样,采用HPLC归一化法测定出的总黄酮提取率为考察指标,先比较不同浓度的乙醇对青皮的提取效果,然后采用L9(34)正交试验法,考察乙醇用量、提取时间及提取次数对提取效果的影响。结果 60%乙醇的提取效果最好,提取次数对考察指标具有显著性影响。结论青皮的最佳醇提工艺为加8倍药材量的60%乙醇,加热回流提取3次,每次1.0h。

黄芪总黄酮对心肌细胞内游离钙离子浓度的影响

目的研究黄芪总黄酮（Total flavonoids of Ast ragalus，TFA）对体外培养的乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度的作用。方法实验应用钙离子荧光指示剂Fluo-3AM负载原代培养的乳鼠心肌细胞，通过激光共聚焦扫描显微镜上机检测，记录其荧光强度变化，同时观察黄芪总黄酮对乳鼠心肌细胞及化学处理因素H2O2损伤大鼠心肌细胞的荧光强度的作用。结果①H2O2损伤的乳鼠心肌细胞游离钙离子[Ca^2＋]i平均荧光强度值为（1346．89±65．36）nmol／L，与对照组平均荧光强度值（743．15±34．78）nmol／L相比，差异有统计学意义（P〈0．01，n=7）；同时H2O2（0．3mmol／L）使予给TFA（20mg／kg）组乳鼠心肌细胞的[Ca^2＋]i平均荧光强度值由（668．29±41．15）nmol／L下降到（649．31±39．17）nmol／L，差异无统计学意义（P〉0．05，n=7）。结论H2O2可明显升高乳鼠心肌细胞游离钙离子浓度，黄芪总黄酮可对抗H2O2的这种作用。

黄芪总黄酮对急性心肌梗死大鼠心室肌细胞L-型钙电流及钠电流的作用

目的研究黄芪总黄酮（TFA）对急性心肌梗死（Am）大鼠心室肌细胞L-型钙电流（L—ICa）及钠电流（INa）的作用。方法设正常对照组、AMI组及TFA实验组。大鼠开胸左前降支结扎造成AMI，开胸前5min实验组大鼠舌静脉注射剂量为20mg／kg的TFA溶液50ul。用胶原酶酶解法急性分离AMI模型大鼠心室肌细胞，采用全细胞膜片钳记录技术记录左前降支供血区心外膜细胞的L—ICa及INa的作用。结果①应用TFA（20mg／kg）后，L—ICa从（0．313±0．14）nA增加到（0．402±0．27）nA，差异有统计学意义（P〈0．01，n=6）。②应用TFA（20mg／kg）后与对照组比较，峰值从（-8．43±2，03）nA下降到（-6．37±1．58）nA，差异有统计学意义（P〈0．01，n=6）。结论TFA可以增加AMI大鼠心室肌细胞L—ICa的幅值，TFA可显著降低AMI大鼠心室肌细胞INa的幅值。

紫外分光光度法测定益寿地仙颗粒中总黄酮含量的分析

目的建立紫外分光光度法测定益寿地仙颗粒总黄酮含量的方法。方法采用紫外分光光度法测定益寿地仙颗粒总黄酮的含量。结果总黄酮在0.0052-0.0416 mg/ml与吸光度线性关系良好,回归方程为y=12.15x+0.0035,r2=0.995,总黄酮含量为5.86%;样品在测定的100min内稳定、重现性良好;RSD为1.24%,回收率平均为95.51%,准确性相对偏差为0.9396%。结论方法简便可行,重现性好,为益寿地仙颗粒的质量控制提供了方法。

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对嗜心性柯萨奇B3病毒（CVB3m）感染心肌细胞动作电位的作用。方法采用体外培养小鼠新生心肌细胞方法，建立柯萨奇B3病毒感染心肌细胞模型，应用膜片钳技术中电流钳记录柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位。结果应用TFA组与柯萨奇B3病毒感染模型组相比较，动作电位幅值（APA）下降，差异有统计学意义（P=0．0065，n=8），动作电位时程（APD）明显延长（P=0．00724，n=8）。结论黄芪总黄酮可显著降低柯萨奇B3病毒感染心肌细胞动作电位幅值（APA），延长动作电位时程（APD）。

立地条件对昆仑雪菊品质的影响

目的:探索栽培环境对昆仑雪菊品质的影响,以确定昆仑雪菊的道地性。方法:采用薄层色谱法对不同产地的昆仑雪菊总提物成分比对;采用分光光度法测定新疆不同产地昆仑雪菊中总黄酮的含量;采用浸泡法比对不同产地昆仑雪菊浸出液的色度。结果:在GF254预制硅胶板上,以乙酸乙酯∶甲醇∶水(8∶1∶1)为展开剂,证实不同产地昆仑雪菊成分构成基本相似,与金鸡菊有明显差异;不同产地昆仑雪菊总黄酮含量有明显的差异,含量分别为18.33%、27.05%、32.93%、24.57%、26.94%、17.33%、26.17%、20.47%、23.68%、17.49%、24.25%;不同产地昆仑雪菊浸泡6次后色泽变化有显著差异。结论:不同海拔及不同采收期与昆仑雪菊的品质具有相关性,提示昆仑雪菊具有产品道地性。