弓形虫ZS2株抗原基因的扩增及克隆

扩增弓形虫ZS2株P30抗原基因，构建PcDNA3—P30真核表达重组质粒。方法本文采用PCR技术，自行设计一对寡核苷酸引物（P1，P2），从弓形虫ZS2基因组DNA中特异扩增出编码P30抗原的基因片段。扩增的目的片段经纯化后用EcoRI和Hind双酶切后，克隆到真核表达质粒pcDNA3中，转化入大肠杆菌TG1，用氨共青霉素和PCR初筛，将PCR扩增阳性的重组子用EcoRI和Kind双酶切鉴定。结果从弓形虫ZS2株DNA中扩增出1025bP的P30基因，构建重组质粒PcDNA3—P30，酶切产物的大小分别与预期相符。结论成功地对弓形虫ZS2株P30基因进行体外扩增及构建真核表达重组质粒PcDNA3—P30，为重组P30抗原及核酸疫苗研究做好准备。