The protective effect and crucial biological pathways analysis of Trametes lactinea mycelium polysaccharides on acute alcoholic liver injury in mice based on transcriptomics and metabonomics

Trametes lactinea mycelia polysaccharides(TLMPS)have a wide range of bioactivities.The potential mechanisms of action of TLMPS against acute alcohol-induced liver injury in vivo were investigated by analyzing the physical and chemical properties of TLMPS and its protective effects on a mouse model of alcoholic liver injury.TLMPS protected the liver against alcohol-induced injury,as evidenced by the reduced alcohol-induced elevation of the liver index,serum biochemical indices,and maintenance of hepatic morphology.Potential mechanisms were analyzed using transcriptome and metabolome analyses.The transcriptome data revealed the involvement of many differentially expressed genes in chemical carcinogenesis,drug metabolism,and metabolism of xenobiotics by cytochrome P450.The metabolome analysis revealed that TLMPS significantly regulated specific metabolites in the liver,including organic acids,lipids,nucleosides,and organic oxygen compounds.KEGG enrichment analysis revealed the signifi cant involvement of different metabolites in choline metabolism,ATP-binding cassette transporters,and glycerophospholipid metabolism.Assessment of the changes in gene expression and metabolites revealed the significantly different expression of several genes encoding key enzymes and metabolites in choline metabolism pathway.The collective fi ndings confi rmed that choline metabolism plays an important role in the protective effects of TLMPS against acute alcoholic liver injury.

大白栓菌的生物学特征及成分检测

目的观察大白栓菌的生物学特征,检识其化学成分。方法通过形态特征、显微结构观察大白栓菌的生物学特征,利用系统成分预试检识其化学成分。结果大白栓菌担子果一年生,无柄,菌盖半圆形,菌管蜂窝状,菌肉多为白色。粉末镜检可见:营养菌丝、骨架菌丝、缠绕菌丝、生殖菌丝和担孢子。电子显微镜下可见孢子表面有众多皱纹及凹陷。大白栓菌含有三萜类、糖类、鞣质类成分。结论大白栓菌具有多孔菌科真菌特征,富含三萜类成分,有良好的开发利用前景。

大白栓菌中3-氢化松苓酸B含量的测定

目的:建立高效液相色谱法测定大白栓菌及人工培养物中3-氢化松苓酸B的含量;方法:采用高效液相色谱法测定,色谱柱YMC-Pack AQ C18,250×4.6 mm,5μm,流动相乙腈-水(95∶5),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长214 nm;结果:大白栓菌中3-氢化松苓酸B的含量为5.71%,人工培养物中3-氢化松苓酸B的含量为0.53%,3-氢化松苓酸B在20～240 mg.L-1呈良好的线性关系(R=0.9999),平均回收率为99.2%(RSD=3.0).结论:采用高效液相色谱法测定大白栓菌中3-氢化松苓酸B的含量简便快速,结果可靠,可用于大白栓菌的质量控制.

高寒乳白栓菌多糖对免疫抑制小鼠免疫活性的调节

观察高寒乳白栓菌多糖(Alpine-TLBP)对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。采用地塞米松(Dex)建立免疫抑制小鼠动物模型,实验动物分为5组:空白组、模型组、Alpine-TLBP高(200 mg·kg-1)、中(100 mg·kg-1)、低(50 mg·kg-1)剂量组。Alpine-TLBP口服给药。称重测定胸腺和脾脏,并计算小鼠胸腺指数和脾脏指数,鸡红细胞法测定腹腔巨噬细胞吞噬功能,并计算吞噬指数和吞噬百分率。结果表明:Alpine-TLBP中、高剂量组,可显著增加经地塞米松免疫抑制后小鼠的胸腺和脾脏的重量,提高脏器指数,且明显增强免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬百分率,并使吞噬指数提高。Alpine-TLBP可以增强地塞米松免疫抑制小鼠的免疫功能。

大白栓菌的人工培养条件优化

目的探讨大白栓菌的人工大规模培养条件。方法采用正交实验设计筛选大白栓菌的固体及液体培养条件。结果固体培养基的最佳配方为栗木屑含量70 g,玉米粉含量35 g,石膏含量2 g,白糖含量1 g;大白栓菌液体培养的最佳条件是玉米粉4.2 g/100 ml,栗木汁5.0 g/100 ml,溶氧条件为静置培养。结论大白栓菌可以采用人工大规模培养,为进一步开发利用创造了条件。

大白栓菌乙酸乙酯萃取部位的降糖机制研究

目的:研究大白栓茵乙酸乙酯萃取部位的降糖机制。方法:建立2型糖尿病小鼠模型,选取造模成功的小鼠随机分为4组,分别给予大白栓茵丝体乙酸乙酯萃取部位低、高剂量,二甲双胍和等体积的0.5%CMC-Na溶液。4周后检测各组小鼠血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数,测定肝、肌糖原含量。采用酶联免疫试剂盒测定小鼠血清TNF-α、IL-6、CRP含量,小鼠胰腺组织中TNF-α、IL-6含量。结果:与模型组比较,大白栓茵乙酸乙酯萃取部位能够提高胰岛素敏感性和肝糖原含量(P<0.01),降低糖尿病小鼠血糖、血清IL-6、CRP及胰腺组织中TNF-α、IL-6含量(P<0.01)。结论:大白栓茵乙酸乙酯萃取部位能够降低2型糖尿病小鼠血糖,其降糖机制与改善肝糖原代谢,抑制炎症因子生成,提高胰岛素敏感性有关。

1株栓孔菌的分离鉴定、生物学特性及胞内多糖抗氧化性研究

试验对分离自栓孔菌子实体的1株大型真菌进行鉴定,分析其生物学特性,并测定菌丝体胞内多糖的抗氧化性。结果显示,菌株TL2019为奶油栓孔菌(Trametes lactinea)。菌丝生长的最适条件为碳源为葡萄糖,氮源为牛肉膏,生长因子为维生素C,pH值7.0,生长温度28℃。经测定胞内多糖提取量为13.32 mg/g,胞内多糖对羟基自由基(IC50=0.64 g/L)和超氧阴离子自由基(IC50=0.41 g/L)具有一定的清除活性。

大白栓菌的研究现状

国内外对大白栓菌的研究越来越多,已有研究表明大白栓菌可以产生多种活性物质,具有降血糖、抗氧化、增强免疫力、抵抗癌细胞等功能。但目前对大白栓菌的研究尚处于初始阶段,该菌有巨大的研究和开发利用价值。该文较系统地归纳了近年来大白栓菌的研究报道进度,以期为大白栓菌进一步的研究提供参考。

高寒乳白栓菌多糖免疫调节及体外抗氧化活性研究

目的观察高寒乳白栓菌多糖（Alpine-TLBP）的免疫调节功能及体外抗氧化活性。方法以Alpine-TLBP（50、100、200 mg/kg）口服给药,测定正常小鼠胸腺指数、脾脏指数和腹腔巨噬细胞吞噬功能水平;水杨酸捕捉法测定Alpine-TLBP对·OH的清除能力;邻苯三酚自氧化法测定Alpine-TLBP对O_2的清除能力。结果在50~200 mg/L Alpine-TLBP能显著增加正常小鼠的胸腺和脾脏的质量,提高脏器指数,且明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数;且在50~500μg/mL具有较强的清除·OH和O2的能力,IC50分别为142.2μg/mL和203.2μg/mL,呈剂量相关性。结论 Alpine-TLBP能增强正常小鼠的免疫功能,且具有较强的清除·OH和O2的能力。

奶油栓孔菌子实体多糖的理化性质、抗氧化活性与保肝作用

本研究旨在探讨奶油栓孔菌子实体多糖(TLFPS)的化学性质和酒精性肝损伤的保护作用。首先用水提醇沉法提取得到多糖,通过化学组成分析、紫外吸收光谱法、傅里叶红外光谱法和刚果红染色法对多糖结构进行初步表征,以DPPH、ABTS、超氧阴离子自由基的清除能力和铁离子还原能力为指标评价了多糖体外抗氧化能力,在小鼠急性肝损伤之前连续灌喂多糖8d,比较各组小鼠血清和肝的相关生化指标以及组织病理切片来确定多糖对酒精性肝损伤小鼠的保护作用。结果显示:多糖具有β-吡喃糖环结构,含有较高含量的糖醛酸和硫酸根基团,空间构型不具备三股螺旋结构。在体外抗氧化活性方面,多糖对DPPH、ABTS和超氧阴离子自由基均有良好的清除活性,铁离子还原能力也呈良好的剂量依赖性。在小鼠保肝实验中,与模型组相比,多糖能够显著延长小鼠的醉酒时间和缩短醒酒时间,降低了酒精性肝损伤小鼠的肝指数,并且显著降低血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和肝脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,同时明显提高了肝脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性。结果证实奶油栓孔菌子实体多糖具有良好的抗氧化能力,可以减轻由酒精引起的急性肝细胞损伤,而且对机体的毒害作用很小。肝组织病理切片也进一步证实了奶油栓孔菌多糖的保肝活性。研究结果不仅丰富了奶油栓孔菌的药用价值,而且对多糖在功能食品领域的应用提供了药效基础。

大白栓菌降糖活性部位筛选

目的:研究大白栓菌提取物的降糖活性,筛选其降血糖的活性部位。方法:用肾上腺素致高血糖小鼠模型评价大白栓菌乙醇提取物不同萃取部位的降糖效果;对活性更好的乙酸乙酯部位采用四氧嘧啶糖尿病高血糖小鼠模型进行验证,测定血糖水平、胰岛素水平,并计算胰岛素敏感性指标ISI,同时测定乙酸乙酯部位的α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果:大白栓菌乙醇提取物不同萃取部位高、低剂量组与模型组血糖值有显著性差异;乙酸乙酯部位高、中、低剂量组与模型组血糖值有显著性差异;乙酸乙酯部位对酵母α-葡萄糖苷酶有抑制活性,但对大鼠α-葡萄糖苷酶无抑制活性。结论:大白栓各萃取部位都具有降糖作用,其中乙酸乙酯部位最好;乙酸乙酯部位对大鼠α-葡萄糖苷酶无抑制活性,其降糖机制可能与提高胰岛素敏感性有关。

奶油栓孔菌菌丝体多糖的提取工艺优化、结构表征及抗氧化活性

奶油栓孔菌Trameteslactinea是一种生物活性丰富的大型真菌。本研究在单因素试验的基础上,通过响应面法优化其菌丝体多糖的提取工艺,利用DEAE-Cellulose-52阴离子交换柱和SephadexG-200层析柱对粗多糖进行分离纯化,获得TLMPS-0、TLMPS-1和TLMPS-3均一多糖组分。采用化学组成分析、UV-vis、FTIR、刚果红实验对3种多糖组分进行结构分析,并检测了多糖清除自由基的能力和还原力。结果表明,奶油栓孔菌菌丝体多糖最优提取工艺为:提取温度99℃、料液比1:30(g/m L)、提取时间5h,提取次数2次。在此工艺条件下,多糖提取率为4.01%。TLMPS-0、TLMPS-1和TLMPS-3的糖醛酸含量分别为12.91%±0.44%、8.24%±0.22%、7.50%±0.66%,硫酸基含量分别为22.24%±1.88%、14.55%±0.56%、18.68%±0.69%,并且证明TLMPS-0是一种α-吡喃型多糖或β-吡喃型多糖,而TLMPS-1是一种β-吡喃型多糖,均不具备三螺旋空间构象,此外,3种多糖组分均具有一定的清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的能力和铁离子还原能力,其中TLMPS-0抗氧化活性最强。研究结果为奶油栓孔菌多糖的功能研究与挖掘提供了研究基础与理论依据。