白腐菌Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理对杨木SCMP性能的影响

研究了白腐菌Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理对磺化化学机械浆(SCMP)性能的影响。结果表明:Lg-9粗酶液预处理可改善SCMP的打浆性能,降低打浆能量消耗,预处理后打浆的纤维平均长度增大,细小组分含量降低,宽度稍有增大。Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理可提高SCMP白度,改善强度。Trametes sp. Lg-9粗酶液预处理的漂后浆纤维平均长度较长,细小组分含量较少,粗酶液用量大于8IU/g浆时,随着粗酶液用量的增大,纤维平均长度有所降低,细小组分含量有所提高。

Trametes sp.LS-10C漆酶催化酸性铬蓝K脱色条件优化

用栓菌Trametes sp.LS-10C漆酶对酸性铬蓝K进行脱色,得到了LS-10C漆酶催化酸性铬蓝K脱色的最适反应条件.在给酶量10U/mL、pH 4.5、温度45℃、染料质量浓度100mg/L、ABTS 10μmol/L的条件下反应2h后,酸性铬蓝K的脱色率达到79.56%.研究表明,栓菌Trametes sp.LS-10C漆酶在处理染料废水脱色领域具有研发和应用前景.

栓菌Trametes sp. G048的化学成分研究

从栓菌属真菌Trametes sp. G048的发酵液和菌丝体中分离并鉴定出6个化合物,经波谱数据分析分别鉴定为isodrimenediol diacetate(1)i、sodrimenediol 2-acetate(2)、脑苷脂D(3)、麦角甾醇(4)、过氧化麦角甾醇(5)和啤酒甾醇(6)。其中化合物1和2为新的天然产物。

栓菌Trametes sp.LS-10C半固态发酵漆酶对吲哚的高效降解

为了有效地清除吲哚这一对人体具有严重危害的环境污染物,本研究以栓菌Trametes sp.LS-10C半固态发酵所产的漆酶为催化剂对吲哚进行降解反应。研究考察了介体的种类和浓度、酶加入量、降解体系的pH值、降解温度等因素对降解吲哚的影响。实验结果表明:在以浓度为3.2 mmol/L的丁香醛为介体、漆酶用量为0.12 U/mL、降解体系的pH值为4.5、降解温度为35℃的条件下,该菌所产漆酶对不同浓度吲哚(2.56 mmol/L、3.2 mmol/L和3.84 mmol/L)的降解率分别达到100%、90.2%和77.6%;对漆酶/丁香醛降解吲哚的动力学研究表明其最大反应速率V_(max)为0.22 mmol/(L·min),米氏常数K_(m)值为9.26 mmol/L。

栓菌420漆酶C基因的克隆、高效表达及重组酶的染料脱色潜能

根据漆酶铜结合保守区氨基酸序列设计简并引物,从新型漆酶合成菌株栓菌420(Trametes sp.420)基因组DNA扩增得到一新的漆酶同工酶基因(lacC)片段,应用长距离反向PCR技术获得其两端侧翼序列。克隆得到的lacC序列长3640bp,包括长2263bp的开放读码框及5′和3′-非编码区。lacC cDNA序列长1560bp,编码一519aa的多肽。推导的LacC蛋白序列内部存在有10个潜在的N-糖基化位点和4个铜原子结合区。将不含自身信号序列的lacC cDNA以pPIC9载体为媒介克隆到表达载体pPIC9K上,转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115细胞。重组菌在含有0.3mmol/LCuSO4和0.8%丙氨酸的BMM培养基中20℃培养9d,重组漆酶(rLacC)产量达到1.62×104U/L。用发酵粗酶液对终浓度50mg/L的染料进行脱色实验,结果表明,6U/L的rLacC对测试的三甲基类和偶氮类染料具有良好的脱色作用,小分子介体ABTS和HBT能够提高rLacC对染料的脱色效率和脱色速度。

栓菌420漆酶同工酶B基因克隆及异源表达

根据铜结合区的保守氨基酸序列设计简并引物,扩增栓菌420(Trametessp.420)基因组,结合长距离反向PCR(LD-IPCR)技术,克隆得到新型漆酶同工酶B基因(lacB),包括结构基因(2255bp)及5′-和3′-非编码序列。lacB含12个内含子,其cDNA序列长1560bp,编码495aa成熟多肽和24aa信号肽。lacB与其它不同来源的真菌漆酶基因具有较高的同源性,而与植物、细菌、昆虫的漆酶基因同源性低于25%。将不含信号序列的lacBcDNA通过质粒pPIC9克隆到表达载体pPIC9K上,电击转化毕赤酵母GS115细胞,经BMM-ABTS平板筛选得到漆酶分泌阳性转化子。

栓菌漆酶在毕赤酵母中高效表达及重组酶的性质

栓菌420（Trametes sp．420）漆酶基因lacD以两种方式在巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）进行异源表达，产生两种重组漆酶：rLacDx（具有天然N-末端）和rLacDe（N-末端带有8个额外的氨基酸残基）。摇瓶发酵18d，rLacDx和rLacDe的产量分别为1．21×10^5u／L、7、38×10^4u／L[以2，2＇-连氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸（ABTS）为底物]。在高密度发酵条件下，rLacDx的产量增加到2．39×10^5u／L，同时其生产周期降至7．5d。两种重组酶对愈创木酚底物的氧化特性相似，且在50℃和pH3～10的范围内均稳定。然而，rLacDx对底物ABTS的比活力（1761u／mg）高于rLacDe（1122u／mg），其表观Km值（427μmol／L）低于rLacDe（604μmol／L）。

Trametes sp. LS-10C漆酶对直接类偶氮染料的脱色作用

利用栓菌(Trametes sp.LS-10C)漆酶在单酶和漆酶-介体体系2种情况下对3种直接类偶氮染料进行脱色。结果表明,在给酶量为10 U·m L^(-1)、染料浓度为100 mg·m L^(-1)条件下反应24 h后,直接蓝86在非介体体系中脱色率达到71.2%,其最适脱色温度和pH范围分别为45~60℃和3.5~5.0;直接橙26在介体体系(10μmol·L^(-1)ABTS)中脱色率达到78.7%,其最适脱色温度和pH范围分别为35~45℃和4.5~6.5;直接红31在介体体系(10μmol·L^(-1)ABTS)中脱色率达到90.7%,其最适脱色温度和pH范围分别为35~45℃和3.5~5.0。

Trametes sp.LS-10C产漆酶发酵培养基优化及其漆酶对偶氮染料的脱色性能

为了提高菌株Trametes sp.LS-10C的漆酶产量并初步研究该酶对偶氮染料的脱色性能,本文通过单因素实验及均匀设计对菌株Trametes sp.LS-10C产漆酶培养基进行了优化,获得最优培养基配方为:葡萄糖14.4 g·L^(-1)、豆渣10.1 g·L^(-1)、麸皮100 g·L^(-1)、NH_4Cl_3g·L^(-1)、KH2PO41.4g·L^(-1)、CuSO_4’5H2O 1 g·L^(-1)、NaCl 1 g·L^(-1)、MgSO_40.8 g·L^(-1)、CaCl_20.5 g·L^(-1).菌株发酵至8 d时漆酶产量为595.15 U·m L^(-1),约是优化前的35.66倍.进一步研究表明,该漆酶-介体系统对酸性红GR、酸性蓝40和酸性铬蓝K等3种偶氮染料脱色10 h后脱色率分别高达96.86%、91.28%和86.31%.相比公开发表的文献,本研究所报道的Trametes sp.LS-10C利用优化培养基发酵产漆酶达到了较高水平,具有酶活力高和发酵时间短等特征,且该漆酶在处理偶氮染料废水脱色领域中具有进一步研发和应用价值.

Trametes sp.LS-10C固态发酵产漆酶培养基优化及其对双酚A的降解

漆酶是一种绿色高效的多酚氧化酶,在降解双酚A方面具有巨大潜力。为降低发酵产漆酶的成本及考察漆酶在双酚A降解中的能力,本研究以麸皮和柚皮为主要基质,优化了栓菌固态发酵产漆酶条件,对优化后获得的漆酶在双酚A降解中的应用进行了研究。结果表明,在培养基组分为:麸皮和柚皮粉比例为6:4(W/W)、固液比1:2.5(W/V)、铜离子2%(W/W)、蔗糖3%(W/W)、硝酸钾2%(W/W)、稻壳20%(W/W)的条件下,栓菌发酵产漆酶的酶活最高,发酵11d后,酶活可达到38.4U/gds。当双酚A初始浓度为10μg/m L时,在55℃条件下酶解140min后,双酚A基本降解完全。