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Research Advance on Molecular Mechanism of Abiotic and Biotic Stress Resistance in Sweet Potato 被引量:2
1
作者 边小峰 谢一芝 +2 位作者 郭小丁 贾赵东 马佩勇 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2014年第6期901-906,941,共7页
Sweet potato(Ipomoea batatas) is not only an important food crop, but also an important economic crop and energy crop. In recent years, as the develop- ment of molecular biology techniques, more and more abiotic and... Sweet potato(Ipomoea batatas) is not only an important food crop, but also an important economic crop and energy crop. In recent years, as the develop- ment of molecular biology techniques, more and more abiotic and biotic stress-related genes were discovered in sweet potato. These genes can be divided into two categories: the regulatory genes and the functional genes, according to their different roles in stress pathways. This paper reviews the abiotic and biotic stress-related genes cloning, functional analysis and exogenous genes application in sweet potato, and makes expectation for stress resistance research of sweet potato in the future. 展开更多
关键词 Sweet potato Stress tolerance MOLECULAR Gene cloning transcriptionfactor
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JAK2/STAT3信号通路介导薯蓣皂苷元对骨性关节炎软骨细胞代谢的影响 被引量:18
2
作者 刘军 何晓乐 +2 位作者 甄平 周胜虎 李旭升 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期453-460,共8页
目的:在小鼠骨性关节炎(OA)模型中观察薯蓣皂苷元(Dgn)通过酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对软骨细胞代谢和线粒体抗氧化应激能力的影响,以及Dgn在此过程中的作用。方法:15只C57BL/6小鼠随... 目的:在小鼠骨性关节炎(OA)模型中观察薯蓣皂苷元(Dgn)通过酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路对软骨细胞代谢和线粒体抗氧化应激能力的影响,以及Dgn在此过程中的作用。方法:15只C57BL/6小鼠随机分为健康对照组、模型对照纽和Dgn组,相应处理4周后取材,采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化,电子显微镜下观察软骨组织超微结构变化。将模型对照组培养软骨细胞随机分为四组:①模型对照组;②Dgn组;@Dgn+阻断剂组;④阻断剂对照组。运用蛋白质印迹法检测各纽软骨细胞中P-JAK2、p-STAT3、Bax、琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素C氧化酶(COX)蛋白表达,并用比色法测定线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)的含量及活性。结果:软骨组织形态学方面,模型对照组软骨细胞变化最明显,Dgn组细胞形态维持较好,软骨细胞膜完整;电镜下观察发现,模型对照组软骨组织标本表面损伤较为严重,而Dgn组软骨组织标本表面平整。与模型对照组比较,Dgn组p-JAK2、PSTAT3蛋白表达水平上升(均P〈0.05),Bax蛋白表达水平降低(P〈0.05),SDH、COX蛋白表达水平、SOD含量均较模型对照组增加(均P〈0.05);而与Dgn组比较,Dgn+阻断剂组P.JAK2和P-STAT3蛋白的表达减少,Bax蛋白表达增加,SDH、COX蛋白表达水平及SOD含量降低(均P〈0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路与OA软骨细胞病理变化密切相关。Dgn可以通过激活JAK2/STAT3通路,有效减轻OA病理过程中软骨细胞的线粒体氧化应激损伤和细胞凋亡,发挥对OA软骨细胞的保护作用。 展开更多
关键词 骨关节炎/病理学 薯蓣皂甙/药理学 STAT3转录因子 蛋白酪氨酸激酶类 软骨细胞病理学 氧化性应激
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转录因子MoOaf22对稻瘟病菌营养生长、细胞壁完整性和胁迫应答的调控 被引量:3
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作者 齐中强 杜艳 +6 位作者 沈乐融 余振仙 于俊杰 俞咪娜 宋天巧 张荣胜 刘永锋 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期1242-1248,共7页
为了研究油酸激活型转录因子MoOaf22编码基因MoOAF22(MGG_03413)在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能,利用基因敲除方法将其进行了缺失突变并对突变体进行了一系列的生物学表型分析。结果表明该基因缺失突变体在完全培养基(CM)上营养... 为了研究油酸激活型转录因子MoOaf22编码基因MoOAF22(MGG_03413)在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能,利用基因敲除方法将其进行了缺失突变并对突变体进行了一系列的生物学表型分析。结果表明该基因缺失突变体在完全培养基(CM)上营养生长加快,但在基本培养基(MM)上生长变慢,同时该突变体原生质体释放速度变慢,对荧光增白剂(CFW)和刚果红(Congo Red)耐受性增强,对十二烷基磺酸钠(SDS)、氯化钠(Na Cl)和山梨醇(Sorbitol)敏感,但该突变体在产孢量、附着胞形成及致病性等方面较野生型没有明显变化。说明MoOaf22在稻瘟病菌的营养生长、细胞壁完整性和对外界的胁迫应答过程中具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 转录因子MoOaf22 细胞壁完整性 胁迫
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过表达FOXO4调控Wnt/β-catenin信号通路促进喉癌细胞凋亡的研究 被引量:7
4
作者 陈旭东 唐世雄 张建华 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2017年第11期569-574,共6页
目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组... 目的探讨头框转录因子O家族4(class O of forkhead box transcriptionfactor 4,FOXO4)对喉癌细胞增殖凋亡能力的影响。方法应用Western blot法检测喉癌组织及对应癌旁组织中FOXO4的表达水平。细胞转染FOXO4过表达载体(p-EGFP-C1/FOXO4组)和空载体(p-EGFP-C1组),同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂。Western blot法检测转染后细胞中FOXO4蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Caspase-3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved Caspase-9)、Caspase-9、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt1表达水平。用Wnt/β-catenin信号通路激活剂作用于转染p-EGFP-C1/FOXO4后的喉癌细胞(激活剂组),检测细胞增殖、凋亡情况。结果 FOXO4在喉癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞中FOXO4表达水平明显高于未转染组(P=0.000)。p-EGFP-C1/FOXO4组细胞存活率及β-catenin、Wnt1水平明显低于未转染组(P=0.002,P=0.004,P=0.006),细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Cleaved Caspase-9、C a s p a s e-9表达水平均明显高于未转染组(P=0.0 0 2,P=0.001,h P<0.05,P=0.004,j P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路激活剂可以部分逆转FOXO4抑增殖和促凋亡作用。结论 FOXO4能够促进人喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞增殖,作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 细胞凋亡 细胞增殖 头框转录因子O家族4 WNT Β-CATENIN信号通路
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Diarylheptanoid-myricanone isolated from ethanolic extract of Myrica cerifera shows anticancer effects on HeLa and PC3 cell lines:signalling pathway and drug-DNA interaction 被引量:4
5
作者 Avijit Paul Sreemanti Das +4 位作者 Jayeeta Das Asmita Samadder Kausik Bishayee Ratan Sadhukhan Anisur Rahman Khuda-Bukhsh 《Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2013年第6期405-415,共11页
OBJECTIVE: To test if myricanone (02H2405), a cyclic diarylheptanoid, has anticancer effects on two different cancer cell lines HeLa and PC3. The present study was conducted with a note on the drug-DNA interaction ... OBJECTIVE: To test if myricanone (02H2405), a cyclic diarylheptanoid, has anticancer effects on two different cancer cell lines HeLa and PC3. The present study was conducted with a note on the drug-DNA interaction and apoptotic signalling pathway. METHODS: Several studies like cytotoxicity, nuclear damage, annexin-V-fluorescein isothiocyanate (FITC)/propidium iodide (PI)-Iabelled apoptotic assay and cell cycle arrest, immunoblot and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) were used following standard protocols. Circular dichroism (CD) spectroscopy was also done to evaluate whether myricanone effectively interacted with DNA to bring about conformational changes that could strongly inhibit the cancer cell proliferation. RESULTS: Myricanone showed a greater cytotoxic effect on PC3 cells than on HeLa cells. Myricanone promoted G0/G arrest in HeLa cells and S phase arrest in PC3 cells. Nuclear condensation and annexin V-FITC/PI studies revealed that myricanone promoted apoptotic cell death. CD spectroscopic data indicated that myricanone had an interaction with calf thymus DNA that changed DNA structural conformation. RT-PCR and immunoblot studies revealed that myricanone activated the apoptotic signalling cascades through down-regulation of transcription factors like nuclear factor-KB (NF-KB) (p65), and signal transducers and activators of transcription 3 (STAT3); cell cycle regulators like cyclin D1, and survivin and other signal proteins like Bcl-2 and up-regulation of Bax, caspase-9 and caspase-3. CONCLUSION: Myricanone induced apoptosis in both types of cancer cells by triggering caspase activation, and suppression of cell proliferation by down-regulation of NF-KB and STAT3 signalling cascades, which makes it a suitable candidate for possible use in the formulation of therapeutic alent for combatin cancer. 展开更多
关键词 KEYWORDS: Myrica DIARYLHEPTANOIDS plant extracts apoptosis NF-KB STAT3 transcriptionfactor signal transduction
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Streptozotocin-induced expression of Ngn3 and Pax4 in neonatal rat pancreatic α-cells 被引量:5
6
作者 Xiao-Di Liang Yuan-Yuan Guo Ming Sun Ying Ding Ning Wang Li Yuan Wei De 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第23期2812-2820,共9页
AIM: To investigate the mechanism behind β-cell regeneration in neonatal rat pancreas treated with strep- tozotocin (STZ). METHODS: Neonatal Sprague Dawley rats were intra- peritoneally injected with 70 mg/kg STZ... AIM: To investigate the mechanism behind β-cell regeneration in neonatal rat pancreas treated with strep- tozotocin (STZ). METHODS: Neonatal Sprague Dawley rats were intra- peritoneally injected with 70 mg/kg STZ. Body weight, pancreas weight and blood glucose were recorded every two days after the treatment. To identify the expression and location of transcription factors in the rat pancreas, double immunofluorescent staining was performed using antibodies to specific cell markers and transcription factors. RESULTS: Expression of Neurogenin 3 (Ngn3), a marker for endocrine precursor cells, was observed by immunofluorescence in a few β-cells and many a-cells. The expression reached a peak 12 d after treatment. Pax4, a transcription factor that lies downstream of Ngn3 and plays an important role in β-cell differentiation, was also expressed in the α-cells of STZ-treated rats. We did not observe significant changes in Nkx6.1, which is essential for β-cell maturation in the treated rats. CONCLUSION: α-cells dedifferentiated into endocrine precursor cells and acquired the ability to dedifferentiate in the neonatal rat pancreas after STZ treatment. 展开更多
关键词 Pancreatic remodeling DEDIFFERENTIATION Endocrine precursor cells STREPTOZOTOCIN transcriptionfactors
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胸腺素β4壳聚糖纳米粒的制备及其对NF-κB表达调节治疗兔角膜创伤
7
作者 计岩 赵敏 邬桂玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1466-1470,共5页
目的考察胸腺素β4壳聚糖(thymosinβ4 chitosan,Tβ4/CS)纳米粒的体外性质及其在兔角膜创伤中通过调节核转录因子NF-κB的表达修复角膜的作用。方法采用离子交联法制备Tβ4/CS纳米粒,考察纳米粒粒径、zeta电位、包封率及体外释放情况。... 目的考察胸腺素β4壳聚糖(thymosinβ4 chitosan,Tβ4/CS)纳米粒的体外性质及其在兔角膜创伤中通过调节核转录因子NF-κB的表达修复角膜的作用。方法采用离子交联法制备Tβ4/CS纳米粒,考察纳米粒粒径、zeta电位、包封率及体外释放情况。2.0 mg/L的Tβ4/CS纳米粒混悬液滴兔眼,右眼为实验眼,左眼为对照眼,HE染色观察眼表组织学变化,并观察其是否有眼表毒性。建立兔角膜创伤模型,右眼作为实验眼,采用单纯随机抽样法,分为Tβ4/CS纳米粒组(A组)、Tβ4滴眼液组(B组)、损伤对照组(C组),每组20只。治疗后1、3、7、14 d大体观察及HE染色观察角膜修复情况,并使用RT-PCR方法检测角膜核转录因子NF-κB的表达。结果 Tβ4/CS纳米粒大部分呈规则的球型,粒径为(354.0±1.6)nm,zeta电位为(22.5±0.7)mV,包封率为(76.2±2.8)%,体系较为稳定,具有缓释功能。Tβ4/CS纳米粒滴眼液对兔眼睑、结膜、角膜无损害;明显下调兔创伤角膜中的NF-κB的表达促进角膜修复,各时间点各组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论胸腺素β4壳聚糖纳米粒滴眼液通过下调兔创伤角膜中的NF-κB的表达促进角膜修复,对兔眼表无损害。 展开更多
关键词 角膜创伤愈合 胸腺素Β4 纳米粒 药物缓释 核转录因子
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肝X受体在脂质代谢和炎症反应中的作用 被引量:1
8
作者 班雨 沈洪 《世界急危重病医学杂志》 2006年第3期1315-1321,共7页
近年来,对于核受体的研究进展迅速,肝X受体属于孤核受体家族,是配体依赖性转录因子超家族成员。目前研究发现肝X受体的信号转导对于脂质代谢、炎症反应和先天性免疫意义重大,肝X受体调控下的靶基因改变是脂质代谢、运输、转化、合... 近年来,对于核受体的研究进展迅速,肝X受体属于孤核受体家族,是配体依赖性转录因子超家族成员。目前研究发现肝X受体的信号转导对于脂质代谢、炎症反应和先天性免疫意义重大,肝X受体调控下的靶基因改变是脂质代谢、运输、转化、合成,以及糖代谢的关键调控点。现已证实肝X受体和发育过程的基因表达、细胞分化、代谢等生理过程密切相关。本文将就肝X受体的研究现状进行综述,阐明肝X受体调控下的信号转导途径和靶基因表达改变对脂质代谢和炎症反应的作用。 展开更多
关键词 肝X受体 脂代谢 炎症反应 转录因子 基因调控
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转录因子KLF家族的结构、功能及调控机制研究进展 被引量:7
9
作者 杨堤贻 张子敬 +6 位作者 王大会 安清明 王二耀 王献伟 雷初朝 陈宏 黄永震 《河南农业科学》 北大核心 2019年第7期1-5,共5页
转录因子KLF家族(Krüppel-like factors)成员的C-末端区域中均存在3个保守的Cys2/His2锌指结构,它们能够参与调控真核生物的多种生理过程并发挥重要作用,包括促进脂肪组织和肌肉形成、影响神经系统发育、参与肿瘤发生过程、调控细... 转录因子KLF家族(Krüppel-like factors)成员的C-末端区域中均存在3个保守的Cys2/His2锌指结构,它们能够参与调控真核生物的多种生理过程并发挥重要作用,包括促进脂肪组织和肌肉形成、影响神经系统发育、参与肿瘤发生过程、调控细胞和组织及系统水平的代谢和修复损伤的代谢组织等,是当前生物领域的研究热点。因此,综述了KLF家族成员的共同结构特征,以及KLF3、KLF5、KLF6、KLF7、KLF8、KLF14、KLF15的主要生理功能及其调控机制的研究进展,为未来进一步探讨KLF家族转录因子的作用和相关疾病的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 KLF家族 转录因子 结构 功能 调控机制
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沙冬青子叶原生质体瞬时表达体系的建立及其AmDREB1蛋白的亚细胞定位 被引量:7
10
作者 楠迪娜 薛敏 +2 位作者 唐宽刚 任美艳 王茅雁 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期562-568,共7页
以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.ex Kom.)Cheng f.)幼苗的子叶为材料,对其原生质体的分离、纯化和瞬时表达体系进行了研究。结果表明,子叶原生质体分离的最佳酶解液组成为CPW溶液+3.0%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.3%半纤... 以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus(Maxim.ex Kom.)Cheng f.)幼苗的子叶为材料,对其原生质体的分离、纯化和瞬时表达体系进行了研究。结果表明,子叶原生质体分离的最佳酶解液组成为CPW溶液+3.0%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.3%半纤维素酶+9.0%甘露醇(p H5.8);最佳酶解条件为室温、避光、40 r/min轻摇14 h。采用W5溶液作为漂洗液将酶解物稀释后进行过滤,将过滤液在4℃、700 r/min条件下离心5 min,所得纯化原生质体的产量约为2.50×106cells/g,活力达到90%;以纯化的原生质体作为受体,利用聚乙二醇(PEG)介导法成功将植物瞬时表达载体p BI-GFP导入其中,转化效率达到50.8%。利用本研究建立的原生质体瞬时表达体系,检测到沙冬青脱水应答转录因子Am DREB1定位于细胞核内。 展开更多
关键词 沙冬青 原生质体 瞬时表达 DREB转录因子 亚细胞定位
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玉米HMG全长cDNA的克隆及其分析 被引量:2
11
作者 牛林海 杨国栋 郑成超 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期239-241,共3页
关键词 玉米 HMG CDNA 克隆 基因表达 转录因子 雌雄花发育 杂交分析
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转录因子ETS1 RNA干扰质粒的构建及其稳定转染胰腺癌细胞株的建立 被引量:1
12
作者 王钟晗 王彩莲 +2 位作者 陈蓉 周旻 陈岩 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第27期2820-2825,共6页
目的:构建针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒,鉴定并建立干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.方法:分别构建3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒(shRNA-1,shRNA-2,shRNA-3),并将其转染至人胰腺癌PANC-1细胞株,用药物G418筛选出稳定细胞... 目的:构建针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒,鉴定并建立干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.方法:分别构建3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒(shRNA-1,shRNA-2,shRNA-3),并将其转染至人胰腺癌PANC-1细胞株,用药物G418筛选出稳定细胞株,Western blot鉴定稳转细胞株中ETS1表达量.结果:3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒转染胰腺癌PANC-1细胞株后,Western blot检测结果显示干扰质粒1(shRNA-1)具有最佳干扰效果.将具有最佳干扰效果的质粒稳定转染人胰腺癌PANC-1细胞株后,经Western blot鉴定相较于对照组稳定细胞株其ETS1表达量明显降低.结论:成功构建了针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒,并建立其稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株. 展开更多
关键词 胰腺癌 ETS1转录因子 RNA干扰 稳定转染 PANC-1
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转录因子NRF3结构、功能及其表达调控的研究进展
13
作者 吴宇财 钱金钦 +2 位作者 何宇辉 李学松 巩艳青 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1493-1498,共6页
“帽领”(Capncollar,CNC)家族包括果蝇CNC1,线虫Skn-1,脊椎动物核因子E2样蛋白1(nuclear factor E2-like protein 1,NFE2L1)/核因子E2相关因子1(nuclear factor E2-related factor 1,NRF1)、NFE2L2/NRF2和NFE2L3/NRF3,以及相似性较低的... “帽领”(Capncollar,CNC)家族包括果蝇CNC1,线虫Skn-1,脊椎动物核因子E2样蛋白1(nuclear factor E2-like protein 1,NFE2L1)/核因子E2相关因子1(nuclear factor E2-related factor 1,NRF1)、NFE2L2/NRF2和NFE2L3/NRF3,以及相似性较低的BACH1和BACH2蛋白[1]。在信号传递过程中,CNC因子与小Maf家族蛋白形成异源二聚体,以进一步识别并结合多种反应元件如NFE2、Maf识别元件(Maf recognition element,MARE)、抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)、应激反应元件(stress response element,STRE)和亲电子反应元件(electrophile response element,EpRE),进而调控靶基因的表达[2]。 展开更多
关键词 NRF3蛋白 转录因子 表达调控 生物学功能
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热休克因子4b多克隆抗体制备及纯化
14
作者 张原源 杨雅雯 +3 位作者 董光耀 吴一凡 李朋飞 李淑莲 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2015年第4期259-261,共3页
目的制备兔抗人热休克转录因子4b(Hsf4b)多克隆抗体。方法利用实验室已纯化的GST-Hsf4b融合蛋白免疫新西兰大耳白兔3次,制备Hsf4b多克隆抗体血清,ELISA方法检测血清抗体效价,饱和硫酸铵纯化血清多克隆抗体,Western blot检测多克隆抗体与... 目的制备兔抗人热休克转录因子4b(Hsf4b)多克隆抗体。方法利用实验室已纯化的GST-Hsf4b融合蛋白免疫新西兰大耳白兔3次,制备Hsf4b多克隆抗体血清,ELISA方法检测血清抗体效价,饱和硫酸铵纯化血清多克隆抗体,Western blot检测多克隆抗体与Hsf4b蛋白结合能力。结果 ELISA检测显示,经过三次免疫,获得了高效价的兔抗人Hsf4b多克隆抗体;Western blot检测表明,制备的兔抗人Hsf4b多克隆抗体与Hsf4b蛋白结合良好。结论成功制备了高效价的抗Hsf4b多克隆抗体,为研究Hsf4b生物学功能提供了有用的实验工具。 展开更多
关键词 热休克因子4b 融合蛋白 多克隆抗体 ELISA
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生物分子相互作用分析技术应用实例(二)——多聚物和转录蛋白的研究
15
作者 沈平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期286-288,共3页
BIA技术 (biomolecularinteractionanalysis)即生物分子相互作用分析技术的应用范围相当广泛 .这里介绍利用BIAcore研究信号传导中各蛋白质之间的相互作用及多聚物的形成及机理以及转录调节蛋白与启动子 (DNA)的研究 .
关键词 生物学技术 生物分子 BIA技术 多聚物 转录蛋白
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转录因子E2F1在垂体瘤中的表达变化及对垂体瘤细胞糖代谢的影响
16
作者 梁甲宁 宋雅璇 +2 位作者 申法政 李凡 王向阳 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第7期1502-1505,共4页
目的探讨转录因子E2F1在垂体瘤中的表达变化及对垂体瘤细胞糖代谢的影响。方法选取2021年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的102例垂体瘤组织和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质免疫印迹和荧光定量PCR分析癌旁组织和垂体瘤... 目的探讨转录因子E2F1在垂体瘤中的表达变化及对垂体瘤细胞糖代谢的影响。方法选取2021年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的102例垂体瘤组织和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质免疫印迹和荧光定量PCR分析癌旁组织和垂体瘤组织中转录因子E2F1蛋白和mRNA表达水平;人垂体瘤细胞株AtT20随机分为对照组和E2F1 KD组, 采用对照短发卡RNA(shRNA)和E2F1 shRNA慢病毒感染细胞, 建立稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析对照组和E2F1 KD组细胞增殖能力。采用蛋白质免疫印迹和荧光定量PCR技术分析肿瘤和细胞系糖酵解关键酶(己糖激酶、6-磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶)蛋白和mRNA表达水平;采用试剂盒测定肿瘤和细胞系中乳酸、丙酮酸和烯醇式丙酮酸磷酸的水平。组间计量数据比较采用t检验。结果垂体瘤组织中E2F1蛋白表达水平(1.53±0.17)明显高于癌旁组织表达水平(0.70±0.15), 差异有统计学意义(t=37.420, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.86±0.06)明显高于E2F1 KD组细胞(1.40±0.11), 差异有统计学意义(t=9.169, P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(68.57±9.87)%]明显高于E2F1 KD组细胞[(33.53±3.99)%], 差异有统计学意义(t=8.059, P<0.05)。对照组细胞己糖激酶、6-磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶表达水平(1.31±0.08、0.98±0.10、1.27±0.11、0.96±0.06)明显高于E2F1 KD组细胞(0.88±0.07、0.52±0.14、0.71±0.14、0.64±0.06), 差异有统计学意义(t=10.250、6.486、7.878、9.001, P<0.05)。对照组细胞己糖激酶、6-磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶mRNA表达水平(1.05±0.07、1.11±0.09、0.93±0.10、1.06±0.09)明显高于E2F1 KD组细胞(0.68±0.05、0.73±0.07、0.65±0.11、0.62±0.10), 差异有统计学意义(t=10.070、8.091、4.728、7.887, P<0.05)。对照组细胞乳酸、丙酮酸和烯醇式丙酮酸磷酸相对浓度(21.83±3.43、17.33±2.94、22.33±2.42)明显高于E2F1 KD组细胞(15.33±1.75、12.83±1.47、15.50±1.87), 差异有统计学意义(t=4.134、3.349、5.469, P<0.05)。结论转录因子E2F1在垂体瘤组织中表达水平显著增加, 通过调节糖酵解基因表达, 参与垂体瘤细胞的增殖过程。 展开更多
关键词 转录因子E2F1 垂体瘤 糖酵解 乳酸
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拟南芥ATLP-3基因的表达模式探究
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作者 郭苏娴 罗文杰 +1 位作者 高子栋 万智远 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第6期1910-1917,共8页
拟南芥(Arabidopsis thaliana) ATLP-3 (AT1G75030)基因编码蛋白是类甜蛋白家族(Thaumatin-Like Protein Superfamily)成员之一。目前对于类甜蛋白功能的研究主要集中于抗病和环境胁迫响应两方面,而对于蛋白的基础功能解析和调控机理研... 拟南芥(Arabidopsis thaliana) ATLP-3 (AT1G75030)基因编码蛋白是类甜蛋白家族(Thaumatin-Like Protein Superfamily)成员之一。目前对于类甜蛋白功能的研究主要集中于抗病和环境胁迫响应两方面,而对于蛋白的基础功能解析和调控机理研究较少。本实验通过分析转录组数据发现ATLP-3基因在花器官发育过程中高量表达,通过构建ATLP-3启动子连接GUS的转基因植株,染色并进行石蜡切片分析发现该基因在花药发育的第5期到第10期绒毡层中特异表达,说明该蛋白可能参与调控绒毡层的功能。进一步分析发现花药发育过程中发挥调控功能的转录因子TDF1、AMS和MS188在ATLP-3启动子区均有结合位点,高通量测序结果显示ATLP-3表达量在以上转录因子的突变体中相比于野生型显著下调。进一步实验发现,将ProATLP-3:GUS引入AMS功能缺失的突变体背景中,GUS信号相比于野生型明显下降,说明ATLP-3的表达受到AMS的正向调控。本实验还获得了ATLP-3基因功能缺失突变体并分析其花粉表型。以上研究结果将为深入探究ATLP-3基因的功能提供依据,为更多类甜蛋白家族成员功能的解析提供参考。 展开更多
关键词 拟南芥 ATLP-3基因 花药绒毡层 表达分析 转录因子AMS
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转录因子FoxM1在恶性肿瘤中的研究进展
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作者 李炎宸 耿瑞璇 +3 位作者 赵珂 陈野野 郑庆飞 郑志博 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2023年第9期1239-1246,共8页
叉头框转录因子(Forkhead box M1,FoxM1)是转录因子的一种,被认为是多种癌症中肿瘤发展、细胞周期进展、侵袭和转移的主要调节因子,与细胞增殖等过程密切相关.近些年,随着人们对FoxM1的关注,科研人员做出了大量有价值的研究,对FoxM1的... 叉头框转录因子(Forkhead box M1,FoxM1)是转录因子的一种,被认为是多种癌症中肿瘤发展、细胞周期进展、侵袭和转移的主要调节因子,与细胞增殖等过程密切相关.近些年,随着人们对FoxM1的关注,科研人员做出了大量有价值的研究,对FoxM1的调控和功能的了解也逐步加深.许多学者以其为靶点,探索关于利用FoxM1的小分子抑制剂作为治疗癌症的新型药物.本文回顾了有关文献,系统阐述了FoxM1的基本结构、功能及在不同肿瘤中的作用,以期为诊断肿瘤性质、评估肿瘤恶性程度、选择新的治疗靶点提供参考. 展开更多
关键词 转录因子 FOXM1 恶性肿瘤
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桔梗皂苷D通过FOXO3a通路介导前列腺癌PC-3细胞程序性坏死 被引量:9
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作者 宋伟 王佳佳 +6 位作者 王贺 朱明星 吴长蓬 贺英 黎娜 卢宗亮 许红霞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期85-93,共9页
目的:研究天然化合物桔梗皂苷D(platycodin D)对前列腺癌PC-3细胞程序性坏死的影响,并初步探索转录因子叉头转录因子O3a(forkhead transcription factor O3a,FOXO3a)在桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死中的相关作用机制。方法:分别采... 目的:研究天然化合物桔梗皂苷D(platycodin D)对前列腺癌PC-3细胞程序性坏死的影响,并初步探索转录因子叉头转录因子O3a(forkhead transcription factor O3a,FOXO3a)在桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死中的相关作用机制。方法:分别采用广谱的caspase抑制剂Z-VAD-FMK和特异性针对caspase-3的抑制剂AC-DEVD-CHO预处理PC-3细胞,再用不同浓度的桔梗皂苷D处理72 h,MTT法检测PC-3细胞的存活率。分别采用锥虫蓝染色及乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)释放实验检测桔梗皂苷D对PC-3细胞膜完整性(锥虫蓝染色率和LDH释放率)的影响。蛋白质印迹法检测桔梗皂苷D对PC-3细胞中程序性坏死关键因子混合谱系激酶结构区域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)、磷酸化MLKL(phospho-MLKL,p-MLKL)以及p-MLKL四聚体表达水平的影响,以及对FOXO3a及其下游分子自杀相关因子配体(factor-associated suicide ligand,FasL)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factorrelated apoptosis-inducing ligand,TRAIL)蛋白表达的影响。免疫荧光法检测FOXO3a蛋白在细胞核内的表达情况。采用脂质体转染法将FOXO3asiRNA和阴性对照(negative control,NC)-siRNA转入PC-3细胞,蛋白质印迹法检测siRNA对FOXO3a蛋白表达水平的影响。FOXO 3a基因沉默后,分别采用MTT法、锥虫蓝染色及LDH释放实验检测沉默FOXO 3a基因表达后桔梗皂苷D对PC-3细胞存活率和细胞膜完整性(锥虫蓝染色率和LDH释放率)的影响。结果:随着桔梗皂苷D浓度的提高,PC-3细胞的存活率明显降低,呈浓度依赖性;同一桔梗皂苷D浓度下,Z-VAD-FMK和AC-DEVD-CHO组PC-3细胞的存活率与对照组相比,差异均无统计学意义(P值均>0.05),提示桔梗皂苷D对PC-3细胞增殖的抑制作用是非caspase依赖性的。桔梗皂苷D处理PC-3细胞后,锥虫蓝染色率和LDH释放率均明显升高(P值均<0.05)。桔梗皂苷D可上调PC-3细胞中程序性坏死关键因子MLKL、p-MLKL和p-MLKL四聚体蛋白的表达水平(P值均<0.05),并以p-MLKL四聚体的效果最显著。桔梗皂苷D促进了FOXO3a向细胞核内转位,同时上调FOXO3a及其下游分子FasL及TRAIL蛋白的表达水平。FOXO3a-siRNA转染PC-3细胞后,FOXO3a蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。相对于NC-siRNA+桔梗皂苷D组,FOXO3a-siRNA+桔梗皂苷D处理组细胞存活率上升(P<0.05),锥虫蓝染色阳性率降低(P<0.05),LDH释放率下降(P<0.05),提示沉默FOXO 3a基因表达削弱了桔梗皂苷D诱导的PC-3细胞程序性坏死。结论:桔梗皂苷D可诱导PC-3细胞呈caspase非依赖性坏死样死亡;桔梗皂苷D可能通过FOXO3a通路及促进MLKL的磷酸化介导了前列腺癌PC-3细胞程序性坏死。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 桔梗皂苷D 程序性坏死 叉头转录因子O3a
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核转录因子在肝星状细胞激活中的作用 被引量:6
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作者 赵进军 吕志平 张绪富 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2002年第3期227-228,共2页
肝纤维化的形成是多种类型细胞、氧化压力、细胞因子和生长因子等一系列复杂作用的结果[1].库普弗细胞和肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化发生过程中两个重要的步骤[2].HSC可合成以I型为主的多种胶原,形成细胞外基质(ECM),破坏肝脏的固... 肝纤维化的形成是多种类型细胞、氧化压力、细胞因子和生长因子等一系列复杂作用的结果[1].库普弗细胞和肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化发生过程中两个重要的步骤[2].HSC可合成以I型为主的多种胶原,形成细胞外基质(ECM),破坏肝脏的固有结构,是目前研究的热点. 展开更多
关键词 核转录因子 肝星状细胞 激活 肝纤维化 NF-ΚB
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