Effects of Heparin on Transforming Growth Factor-β_1 and Extracellular Matrix Components in the Glomeruli of Diabetic Rats

The effects of heparin on the expression of transforming growth factor-β 1 (TGF-β 1) and two extracellular matrix components laminin (LN) and fibronectin (FN) in diabetic rat glomeruli were investigated. Twenty-six rats were randomly divided into control group (C, n=8), diabetic group (D, n=9), and diabetes+heparin group (DH, n=9). After 8-week therapy of heparin (200 U once daily by abdominal injection), TGF-β 1, LN and FN expression in glomeruli was detected by immunohistochemical method. The results showed that the expression levels of TGF-β 1, LN and FN were higher in group D than in group C. It was found that heparin could reduce 24-h urinary albumin excretion and inhibit overexpression of TGF-β 1, LN and FN in glomeruli of diabetic rats. It suggested that the inhibitory effect of heparin on diabetic glomerular sclerosis was at least partly related with the inhibition of TGF-β 1 expression.

达格列净对糖尿病肾病患者肾脏功能的改善作用及机制分析

目的分析达格列净对糖尿病肾病(DN)患者肾脏功能改善作用及机制。方法选取2021年10月至2022年9月该院收治的518例DN患者作为研究对象,根据随机数字表法分为治疗组与对照组,每组259例。对照组采用常规治疗,治疗组在对照组基础上结合达格列净治疗。比较两组疗效及治疗前后糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)和餐后2 h血糖(2 h PG)]、肾脏功能指标[尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER)]、细胞因子指标[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和C反应蛋白(CRP)],以及血清胱抑素(Cys)C、转化生长因子(TGF)-β1和胰岛素样生长因子(IGF)-1水平。结果治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。两组治疗后UAER、FPG、HbA1c、2 h PG、BUN、Scr、IL-6、CRP、TNF-α、CysC、TGF-β1、IGF-1水平低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后UAER、FPG、HbA1c、2 h PG、BUN、Scr、IL-6、CRP、TNF-α、CysC、TGF-β1、IGF-1水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论达格列净对DN患者疗效显著,改善肾脏功能,其机制可能与减轻炎症反应及降低血清CysC、TGF-β1和IGF-1水平有关。

转化生长因子-β_(1)相关血清微小核糖核酸对糖尿病肾病早期诊断的临床价值

目的探讨转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))相关血清微小核糖核酸(miRNA)对糖尿病肾病(DKD)早期诊断的临床价值。方法收集2019年1月至2021年12月在缙云县壶镇镇中心卫生院及缙云县人民医院就诊的2型糖尿病(T2DM)患者260例作为研究对象。根据尿白蛋白排泄率(UAER),研究对象分为单纯T2DM组135例、早期DKD组82例、临床DKD组43例。另选取50名健康志愿者作为对照组。检测各组血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c水平和TGF-β_(1)水平,并进行指标间的相关关系分析。利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNAs对DKD的早期诊断价值。结果单纯T2DM组、早期DKD组和临床DKD组患者血清miR-27a、miR-27b、miR-200c水平及TGF-β_(1)水平均高于对照组,miR-29c水平低于对照组(F=235.624、70.351、108.127、672.304,P均<0.001)。TGF-β_(1)与血清miR-27a、miR-27b、miR-200c呈正相关,与miR-29c呈负相关(r=0.668、0.429、0.618、-0.502,P均<0.001)。血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断曲线下面积(AUC)为0.913、0.775、0.812、0.894,miR-27a和miR-200c的敏感度和特异度均>0.7。验证队列中血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断AUC分别为0.901、0.787、0.802、0.896,差异有统计学意义(Z=-9.012,P<0.01)。结论血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对于早期DKD都有一定的诊断价值。

2型糖尿病肾病大鼠白细胞介素-6、白细胞介素-10、转化生长因子-β_(1)、组蛋白去乙酰化酶4表达及其与血糖、尿蛋白-肌酐比值的相关性

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)大鼠白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)表达及其与血糖、尿蛋白-肌酐比值(UACR)的相关性。方法采用随机数字表法将64只健康雄性Sprague Dawley大鼠分为对照组(n=32)和DN组(n=32)。DN组大鼠给予高脂高糖饲料及腹腔注射链脲佐菌素40 mg·kg^(-1)制备DN模型,DN模型大鼠造模成功后正常饮食饮水。对照组大鼠正常饮食饮水,经腹腔注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。于造模后第0、4、8、12周分批处死2组大鼠,于每次处死前称大鼠体质量;使用血糖仪及配套试纸检测大鼠血糖;收集尿液,使用全自动生物化学分析仪检测大鼠尿微量白蛋白、尿肌酐水平,并计算UACR;于大鼠处死后立即取出双侧肾脏,其中一侧肾脏去除包膜后称肾质量,并计算肾脏指数(KI)。采用Western blot法检测2组大鼠肾组织中IL-6、IL-10、TGF-β_(1)、HDAC4蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组大鼠血清中IL-6、IL-10、TGF-β_(1)和HDAC4水平,采用Pearson相关分析DN大鼠血清IL-6、IL-10、TGF-β_(1)、HDAC4水平与血糖、UACR的相关性。结果造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠血糖水平及UACR均显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0周,2组大鼠的体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第4、8、12周,DN组大鼠的体质量均显著低于对照组(P<0.05)。造模后第0、4周,2组大鼠的KI比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第8、12周,DN组大鼠的KI显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠血清中IL-6、HDAC4、TGF-β_(1)水平均显著高于对照组,IL-10水平显著低于对照组(P<0.05)。造模后第0周,DN组大鼠肾组织中IL-10相对表达量显著高于对照组(P<0.05);造模后第8周,DN组大鼠肾组织中IL-10相对表达量显著低于对照组(P<0.05);造模后第4、12周,2组大鼠肾组织中IL-10相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠肾组织中IL-6、HDAC4相对表达量均显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0周,2组大鼠肾组织中TGF-β_(1)相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第4、8、12周,DN组大鼠肾组织中TGF-β_(1)相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,DN组大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与血糖呈正相关(r=0.614、0.514,P<0.05),血清IL-10水平与血糖呈负相关(r=-0.448,P<0.05),血清HDAC4水平与血糖无相关性(r=-0.177,P>0.05)。DN组大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与UACR呈正相关(r=0.405、0.470,P<0.05),血清IL-10、HDAC4水平与UACR无相关性(r=-0.134、-0.124,P>0.05)。结论DN大鼠IL-6、TGF-β_(1)、HDAC4表达上调,IL-10表达下调;DN大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与血糖、UACR呈显著正相关,血清IL-10水平与血糖呈显著负相关。

探讨海昆肾喜胶囊联合缬沙坦对老年早期糖尿病肾病患者细胞因子、转化生长因子、基质金属蛋白酶和肾功能的影响

目的观察海昆肾喜胶囊联合缬沙坦对老年早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者细胞因子、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和肾功能的影响。方法选取2018年10月—2021年12月福建医科大学附属第二医院收治的DN患者84例,以随机数字表法分成两组,各42例。对照组接受常规缬沙坦治疗,研究组接受海昆肾喜胶囊联合缬沙坦治疗。比较两组治疗前后的细胞因子、TGF-β1、MMP-2和肾功能指标水平,评价两组临床疗效。结果治疗前,两组患者细胞因子、TGF-β1、MMP-2和肾功能指标水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者细胞因子、TGF-β1、MMP-2和肾功能指标水平较治疗前均下降,且研究组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗总有效率为95.24%显著高于对照组的78.57%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在老年早期DN患者中,实施以海昆肾喜胶囊联合缬沙坦治疗,可显著改善机体细胞因子、TGF-β1、MMP-2和肾功能指标水平,获得良好的治疗效果。

健脾益肾方加减对早中期糖尿病肾病患者疗效及血清转化生长因子-β1、胰岛素样生长因子-1、血管内皮生长因子的影响

目的探讨健脾益肾方加减对早中期糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)患者疗效及血清转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法选取2019年6月—2021年6月河南省周口市中医院收治的DN患者90例,采用随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各45例。对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组的基础上采用健脾益肾方加减治疗。治疗3个月后,观察比较两组患者临床疗效、不良反应发生率,治疗前后血清TGF-β1、IGF-1、VEGF水平,中医证候积分、肾功能指标[尿白蛋白排泄率(Urinary albumin excretion rates,UAER)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(Serum creatinine,SCr)、内生肌酐清除率(Endogenous creatinine clearance,CCr)]水平。结果治疗后治疗组临床总有效率84.44%(38/45)与对照组64.44%(29/45)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组中医证候积分较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者UAER、BUN水平均较治疗前降低,SCr、CCr水平均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组UAER、BUN水平均较对照组降低,SCr、CCr水平均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清TGF-β1、IGF-1、VEGF水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组血清TGF-β1、IGF-1、VEGF水平均较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脾益肾方加减对DN的治疗具有积极作用,能明显改善患者临床症状,控制DN患者血糖,保护肾功能,降低血清TGF-β1、IGF-1、VEGF水平。

参麦地黄汤联合坎地沙坦酯治疗早期糖尿病肾病疗效及对患者血清转化生长因子-β1、单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的:探讨参麦地黄汤联合坎地沙坦酯对早期糖尿病肾病的疗效及对患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:选择接受治疗的86例早期糖尿病肾病患者,以随机数字表法分成对照组与观察组,各43例。对照组接受坎地沙坦酯治疗,观察组在对照组的基础上接受参麦地黄汤治疗,两组治疗时间均为8周。对比两组中医症候积分、尿蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血管内皮生长因子(VEGF)、TGF-β1、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、不良反应及临床疗效。结果:治疗后两组的中医症候积分均降低,且观察组更低(P<0.05);治疗后两组UAER、Scr、BUN水平均比治疗前低,且观察组比对照组低(P<0.05);治疗后两组VEGF、TGF-β1水平均比治疗前低,且观察组比对照组低(P<0.05);治疗后两组VEGF、TGF-β1水平均降低,且观察组更低(P<0.05);治疗后两组ICAM-1、MCP-1水平均降低,且观察组更低(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组总有效率比对照组高(P<0.05)。结论:坎地沙坦酯联合参麦地黄汤可改善早期糖尿病肾病微炎症状态、临床症状以及肾功能,疗效确切,降低血清TGF-β1、MCP-1水平。

沙库巴曲缬沙坦灌胃对糖尿病大鼠心肌纤维化的治疗作用及其机制

目的 观察沙库巴曲缬沙坦(Sac/Val)灌胃治疗糖尿病大鼠心肌纤维化的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法 雄性Wistar大鼠20只,随机分为正常对照组、模型组、实验组、培哚普利组,每组5只。模型组、实验组、培哚普利组注射链脲佐菌素制作糖尿病模型,模型组造模后给予生理盐水(每天1 mL/100 g)灌胃,实验组造模后给予Sac/Val 60 mg/(kg·d)灌胃,培哚普利组造模后给予培哚普利2 mg/(kg·d)灌胃;正常对照组不进行造模,予生理盐水(每天1 mL/100 g)灌胃。各组大鼠灌胃8周后,测算左心室/体质量指数(LVW/BW),行Masson染色观察心肌纤维化情况,采用Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中的转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、phos-Smad3、ColⅠ、ColⅢ蛋白。结果 与正常对照组相比,模型组心肌细胞排列紊乱,胶原纤维含量增加;与模型组相比,实验组和培哚普利组心肌胶原纤维减少,纤维化程度减轻。模型组LVW/BW及心肌组织ColⅠ、ColⅢ、TGF-β_(1)、phos-Smad3蛋白表达高于正常对照组,实验组、培哚普利组LVW/BW及心肌组织ColⅠ、ColⅢ、TGF-β_(1)、phos-Smad3蛋白表达低于模型组(P均<0.01)。结论 Sac/Val可减轻糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制TGF-β_(1)/Smad3信号通路有关。

复方血栓通胶囊联合常规西药治疗早期糖尿病肾病患者的效果

目的:观察复方血栓通胶囊联合常规西药治疗早期糖尿病肾病(DN)患者的效果。方法:选取2020年1月至2021年1月该院收治的94例早期DN患者进行前瞻性研究,按照随机数字表法将其分为对照组和观察组各47例。对照组采用常规西药治疗,观察组在对照组基础上采用复方血栓通胶囊治疗。比较两组临床疗效,治疗前后肾功能指标[血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24 h-UP)]水平、实验室指标[血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))]水平,以及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为93.62%(44/47),高于对照组的76.60%(36/47),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清Scr、BUN、24 h-UP、MCP-1、TNF-α、TGF-β_(1)水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方血栓通胶囊联合常规西药治疗早期DN患者可提高治疗总有效率,降低肾功能指标和实验室指标水平,效果优于单纯常规西药治疗。

心衰康胶囊对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制初步研究

目的验证心衰康胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用并初步研究其可能机制。方法将28只无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组7只和模型组21只。模型组大鼠采用高脂饲料及尾静脉注射链脲佐菌素致糖尿病大鼠模型,模型制备成功后,随机分为模型组、心衰康胶囊组、阳性药物缬沙坦组,每组7只。心衰康胶囊按照1 g·kg^(-1)·d^(-1)的剂量、阳性药物缬沙坦组按照30 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量均灌胃10周。对照组及模型组灌胃0.9%氯化钠注射液,定期测定各组大鼠血糖、体质量,采用苏木素-伊红染色和马松染色观察肾组织病理变化;免疫组织化学法测定肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平。结果与正常组比较,糖尿病组大鼠体质量增加缓慢,肾脏组织中TGF-β1表达明显上调(P<0.01),肾组织可见明显胶原组织沉积、纤维化改变,肾结构破坏明显;与模型组比较,心衰康组糖尿病大鼠体质量增长较快(P<0.05),肾组织中TGF-β1表达明显减少(P<0.01),胶原组织沉积减少、纤维化减轻,肾结构破坏不明显。结论心衰康胶囊可能通过抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达,从而减缓糖尿病大鼠肾间质改变,保护改善肾功能。

参麦地黄汤联合坎地沙坦酯治疗早期糖尿病肾病的疗效研究

目的研究参麦地黄汤+坎地沙坦酯在早期糖尿病肾病中的使用价值。方法选取郑州大桥医院2021年1月至2022年12月收治的86例早期糖尿病肾病患者,按照随机数字分配法分组,分为常规组(单一坎地沙坦酯治疗)、治疗组(参麦地黄汤+坎地沙坦酯治疗),各43例,观察组间肾功能指标、肾间质纤维化指标、免疫炎症指标、生活质量量表评分、不良反应情况。结果治疗前,两组肾功能指标、肾间质纤维化指标、免疫炎症指标、生活质量量表评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组治疗后肾功能指标水平,血管内皮生长因子(VEGF)及TGF-β1水平、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及MCP-1水平低于常规组,生活质量得分高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论参麦地黄汤+坎地沙坦酯在早期糖尿病肾病中作用显著,不但能改善患者肾功能指标,还可提升患者生活质量。

白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏保护作用及部分机制

目的探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾脏保护作用及部分机制。方法应用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病模型,同时每日灌胃给予TGP(50,100,200mg·kg-1,连续8wk。结果TGP给药呈剂量依赖性降低糖尿病大鼠AER的增加。TGP给药(50mg·kg-1)大鼠肾小球平均容量(VG)明显低于模型组,肾小管-间质损伤指数(TII)较模型组有所下降,但差异无统计学意义;TGP给药(100,200mg·kg-1VG与TII均明显低于模型组。模型组肾组织MDA含量明显高于对照组,TGP给药(200mg·kg-1)大鼠肾组织MDA含量明显低于模型组。Western blot显示模型组肾组织1α(IV)Ⅳ型胶原蛋白表达较对照组增加2.7倍,TGP给药(50、100、200mg·kg-1)8wk分别可使肾组织1α(IV)Ⅳ型胶原蛋白表达下降47.9%、60.4%与72.9%。模型组肾组织ICAM-1及TGFβ1蛋白表达明显高于对照组,TGP给药(50,100,200mg·kg-1)肾组织ICAM-1与TGFβ1蛋白表达明显低于模型组。结论TGP对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制部分与其抑制肾组织中ICAM-1及TGFβ1蛋白表达有关。

氯沙坦钾对2型糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β_1、CD68和MCP-1表达的影响

目的:探讨氯沙坦钾对2型糖尿病肾病大鼠转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、CD68(巨噬细胞标记物)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的影响,进一步说明氯沙坦钾对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法:雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组、模型组和治疗组,每组10只。15周后,观测肾组织形态学、肾功能和24 h尿蛋白定量等指标的变化,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1、CD68和MCP-1表达水平的变化。结果:(1)与正常对照组相比,模型组及治疗组大鼠体重均降低,血糖、甘油三酯、胆固醇及MCP-1、CD68、TGF-β1的阳性细胞数升高,模型组24 h尿蛋白和肌酐升高;(2)与模型组相比,治疗组血肌酐、24 h尿蛋白、甘油三酯及MCP-1、CD68、TGF-β1的阳性细胞数明显降低。结论:在2型糖尿病肾病大鼠中氯沙坦钾可以通过减少肾组织MCP-1表达,阻止巨噬细胞的浸润,下调TGF-β1表达,对糖尿病肾病病变起到保护作用。

木犀草素对STZ诱导的糖尿病肾脏的保护作用

目的:探讨木犀草素对糖尿病肾脏的保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、糖尿病模型组、木犀草素低、中、高剂量组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,生化方法测定血糖、尿蛋白、血及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及肾组织丙二醛(MDA)的含量;W estern blotting检测肾皮质转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组相比,木犀草素治疗组大鼠血糖水平明显降低(P<0.01)、24 h尿蛋白明显减少(P<0.01),血清及肾组织SOD、CAT活性升高(P<0.01),肾组织MDA含量显著降低(P<0.01),木犀草素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:木犀草素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用及降低肾组织TGF-β1、PAI-1的蛋白表达有关。

积雪草对转染TGF-β1基因的大鼠肾小球系膜细胞Smad 2/3、Smad 7和胶原蛋白Ⅳ表达的影响

目的:通过细胞转基因技术,获得稳定表达转化生长因子β1(TGF-β1)的系膜细胞(MC)克隆,观察积雪草(CA)对Smad 2/3、Smad 7和胶原蛋白1V表达及Smad 2/3磷酸化的影响。方法:采用脂质体的方法将TGF-β1表达质粒转入MC细胞,采用G418筛选并建立稳定表达TGF-β1的细胞株。将MC细胞株分为3组:对照组(未转染TGF-β1的MC+RPMI 1640+10%正常大鼠血清),TGF-β1转染组(稳定表达TGF-β1的MC+RPMI 1640+10%正常大鼠血清),积雪草(CA)组:稳定表达TGF-β1的MC+RPMI 1640+10%含高浓度CA的大鼠血清。实验重复5次。ELISA法检测各组培养上清中TGF-β1和胶原Ⅳ的含量;RT-PCR方法检测各组细胞TGF-β1、Smad 2/3、Smad7的mRNA表达水平;Western印迹法检测各组细胞TGF-β1、Smad 2/3、p-Smad 2/3、Smad 7、胶原Ⅳ的蛋白质水平。结果:TGF-β1转染组细胞上清液中的TGF-β1和胶原蛋白Ⅳ水平显著升高,积雪草能显著降低TGF-β1和胶原蛋白Ⅳ水平;TGF-β1转染组细胞中TGF-β1、Smad 2/3的mRNA和蛋白质表达水平及Smad 2/3的磷酸化水平均显著升高,而CA可显著降低MC细胞中TGF-β1、Smad 2/3的mRNA和蛋白质表达水平及Smad 2/3的磷酸化水平;TGF-β1转染组细胞中的Smad 7 mRNA水平显著降低,而CA能使Smad 7的mRNA水平显著升高。结论:稳定表达TGF-β1的MC细胞能激活TGF-β1/Smad信号通路,并引起胶原蛋白Ⅳ表达增加,而CA通过抑制此通路的激活,进而抑制胶原蛋白Ⅳ的表达而减缓糖尿病肾病(DN)的发生。

积雪草对早期糖尿病肾病大鼠TGF-β_1表达及相关下游信号的影响

目的:通过研究积雪草(CA)对早期糖尿病肾病大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达及相关下游信号的影响,阐明积雪草防治早期糖尿病肾病(DN)的分子机制。方法:60只雄性SD大鼠,按体重随机分为假手术组(n=10)和造模组(n=50)。造模组大鼠进行右肾切除术,1周后给以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg,连续给3d;72 h后测血糖,以≥16.7 mmol/L,尿糖+++以上及尿量大于对照组的50%为DN模型成模标准。假手术组进行右肾被膜损伤,并注射相应量生理盐水。造模组通过灌胃给药,分为:DN模型组(模型组)、DN+福辛普利组(蒙组1.6 mg/kg·d)、DN+积雪草高剂量组(高剂量组16.8 mg/kg·d)、DN+积雪草中剂量组(中剂量组11.2 mg/kg·d)和DN+积雪草低剂量组(低剂量组5.6 mg/kg·d)(n=10),连续给药16周,每日上午1次灌胃。利用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测肾组织中TGF-β1、TβR1、TβR2、Smad2/3、p-Smad2/3及Smad7 mRNA和蛋白的表达。结果:与假手术组相比,DN组TGF-β1、TβR1、TβR2、Smad2/3 mRNA和蛋白表达及Smad2/3蛋白的磷酸化水平显著增加(P<0.05)、Smad7 mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05),而福辛普利和高剂量积雪草能倒转DN引起的TGF-β1、TβR1、TβR2、Smad2/3 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)及Smad7 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论:积雪草可能通过调控TGF-β1/Smad信号通路起到防治DN的作用。

单核细胞趋化蛋白-1和转化生长因子β_1及结缔组织生长因子在2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在链脲佐菌素(STZ)诱发的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达。方法将35只SD雄性大鼠随机分为对照组14只和糖尿病肾病组21只。糖尿病肾病组给予高脂饮食,产生胰岛素抵抗后一次性腹腔注射STZ,35 mg/kg;对照组给予常规饲料,腹腔注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。采用免疫组织化学法检测两组大鼠肾组织3种因子的表达。结果 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中(主要在肾小管)有较强的表达,糖尿病肾病组大鼠3种因子的平均吸光度分别为(0.29±0.04)、(0.20±0.02)、(0.20±0.02),对照组大鼠分别为(0.21±0.02)、(0.17±0.01)、(0.16±0.02),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCP-1、TGF-β1、CTGF在STZ诱导的2型糖尿病肾病大鼠肾组织中表达增强,参与了糖尿病肾病早期的发病。

尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏抗炎抗氧化保护作用及对TGF-β_1/p38MAPK信号通路影响的研究

目的探讨尿毒清胶囊对糖尿病肾病大鼠的抗炎、抗氧化作用及对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机分为10只正常组,60只模型组。模型组大鼠腹腔注射45 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)造模,取造模成功的60只大鼠随机分为12只模型组,12只厄贝沙坦阳性组,12只尿毒清颗粒低剂量组(0.04 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒中剂量组(0.08 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒高剂量(0.16 mg·kg^(-1)),灌胃给药12周,模型组和空白组给予生理盐水。每周称量体质量,每周检测24 h尿蛋白量。给药治疗12周后,取血检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;麻醉处死大鼠,各取8只对肾组织行HE染色,观察肾组织的病理形态;并取肾组织进行RT-PCR和免疫组化观察TGF-β_1/p38MAPK信号转导等转化因子的mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著增高(P<0.05),NO、SOD含量显著降低(P<0.01),肾组织胞浆中TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);通过治疗后,与模型组对比,尿毒清颗粒高剂量组和阳性组肾脏病理损害明显减轻,尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著降低(P<0.05),NO、SOD含量明显增高(P<0.05),肾组织内TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 m RNA及蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论尿毒清颗粒能降低24 h尿蛋白量,降低TG和MDA含量及升高NO、SOD含量,通过调控TGF-β_1/p38MAPK从而治疗糖尿病肾病的肾组织受损部位,改善肾功能和减轻病理损伤,能有效地保护糖尿病肾病组织。

槲皮素对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响

目的 探讨槲皮素治疗糖尿病肾病的机制。方法 对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠动物模型 ,给予槲皮素10 0 mg/ (kg· d) ,治疗共 8周。放免法测定尿白蛋白排泄量 ,免疫组化及 RT- PCR检测方法观察槲皮素对糖尿病大鼠肾脏皮质 TGF-β1 蛋白及基因表达的影响。结果 治疗 2周及 8周时 ,槲皮素治疗组糖尿病大鼠尿白蛋白排泄量明显下降 ,肾脏皮质 TGF-β1 免疫染色强度比未治疗组明显减轻 ,TGF-β1 m RNA水平比未治疗组明显下降 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论 槲皮素可抑制糖尿病大鼠肾脏皮质 TGF-β1 蛋白及基因过度表达 ,其防治糖尿病肾病的作用可能部分通过抑制TGF-β1 过度表达有关。

SnoN蛋白在糖尿病大鼠肾组织中的表达及其意义

目的:动态观察核转录共抑制因子SnoN蛋白在糖尿病大鼠肾组织中的表达变化,探讨其在糖尿病肾病(DN)发病机制中的作用。方法:SD大鼠随机分为3组,分别为糖尿病2周(DM2)、4周(DM4)和8周(DM8)组,每组均设相应的正常对照,链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型;免疫组织化学法检测肾组织中SnoN、TGF-β1、Smad2/3、APC的表达;Western印迹法检测肾皮质SnoN蛋白的水平;生化方法测定血糖、血肌酐及24h尿蛋白量;光镜检查肾组织的形态改变。结果:Western印迹和免疫组化检测发现DM2大鼠肾组织中SnoN的表达与正常组相比差异无显著,DM4组明显减少(P<0.01),至8周时减少为正常对照组的42%。DM2组,大鼠肾小管上皮细胞中TGF-β1、Smad2/3、APC较正常组显著增多,并随病程进展而增加(P<0.01);DM4和DM8组,SnoN蛋白表达的减少与TGF-β1、Smad2/3、APC表达增多呈显著负相关(P<0.01)。结论:糖尿病大鼠肾脏TGF-β1表达增多,可能通过APC依赖的泛素化作用使SnoN蛋白降解,从而在DN的发病机制中起重要作用。