海南产Ganoderma lingzhi种质的鉴定

灵芝是一类重要而又分布广泛的木腐真菌。本研究采用ITS序列、mt SSU序列构建系统发育树,结合形态特征鉴定3株海南产灵芝种质。结果表明,灵芝Jfl 1502、Jfl 1513和Jfl 1515菌盖呈半圆形,深红色或紫红色,菌盖表面光滑,有菌柄存在,这些形态特征与G.lingzhi相似;在系统发育树上这3株灵芝与G.lingzhi聚为一支,亲缘关系较近。以上结果反映了灵芝Jfl 1502、Jfl 1513和Jfl 1515在分类学上属于G.lingzhi。

扁桃斑鸠菊叶促进灵芝胞外多糖高产条件优化及抗氧化活性研究

胞外多糖(EPS)是灵芝液体发酵的主要活性产物,为提高灵芝胞外多糖含量,在发酵培养基中添加扁桃斑鸠菊叶粉末,采用单因素和正交试验优化发酵条件,红外光谱表征灵芝多糖结构,并分析其抗氧化活性。单因素实验结果表明,扁桃斑鸠菊叶粉末优化的添加量为4 g/L,胞外多糖含量与对照相比提高到167%;正交试验优化的发酵条件为:发酵时间12 d、起始pH5.0、转速120 r/min、扁桃斑鸠菊叶粉末的添加量为4 g/L,在此条件下,胞外多糖含量达到13.05 g/L;红外光谱图表明添加和未添加扁桃斑鸠菊叶粉末的灵芝胞外多糖类型相似;抗氧化活性实验显示扁桃斑鸠菊叶粉末添加对胞外多糖清除ABTS+·的影响较小,但增强了其对·OH、DPPH·清除能力和Fe3+还原能力。扁桃斑鸠菊叶能有效提高灵芝胞外多糖的含量,为灵芝多糖的高效生产提供新思路。

灵芝菌株发菌期对玉米秸秆中木质纤维素的利用

以4株灵芝菌株为试材,采用PDA-愈创木酚培养基、PDA-苯胺蓝培养基、产纤维素酶筛选性培养基、产木聚糖酶筛选性培养基对这些菌株进行产木质纤维素酶能力的初筛,研究了菌株发菌期不同培养料配方中的菌丝生长速率、木质纤维素降解酶活性及其对玉米秸秆木质纤维素的降解,以期为研究灵芝发菌期灵芝利用木质纤维素的规律提供参考依据。结果表明:利用4种培养基筛选出木质纤维素酶活性较高的LZ-10,并用于后续试验。玉米秸秆降解试验中,随着配方1~7中玉米秸秆占比的增加,菌丝生长速度呈现先增加后减小的趋势,其中配方1达到最大值(5.72±0.12)mm·d^(-1)。在灵芝发菌期内,不同配方间木质纤维素酶活性与木质纤维素降解率之间存在差异。在配方5、6中,木质素的降解率最大达到43.08%±0.05%,漆酶和锰过氧化物酶活性最大。木聚糖酶活性最大的配方5、6中,半纤维素的降解率最大达到36.20%±0.23%,而纤维素的降解率变化不明显。综上所述,灵芝发菌期内玉米秸秆添加量为80%~90%时菌丝生长较为缓慢,但对木质纤维素的利用较为全面。

基于ISSR标记分析连云港地区野生灵芝种质资源遗传多样性及亲缘关系

为分析连云港地区野生灵芝种质资源之间的亲缘关系和多样性水平,以连云港地区15株野生灵芝为研究对象,采用ISSR分子标记进行遗传多样性及亲缘关系分析。15株野生灵芝中扩增出多态性条带为40条,片段大小在250~2000 bp之间,平均等位基因位点1.8个,平均有效等位基因数1.2454,平均Nei's遗传多样性0.1742,平均Shannon信息指数0.2925,有效等位基因数(Ne)的变化范围为1.0000~1.6423,Nei's遗传多样性(He)的变化范围为0.1031~0.3911,Shannon信息指数(I)的变化范围为0.2235~0.5799,根据ISSR分子标记的遗传聚类图,15株灵芝相似系数范围在0.415~0.866之间,相似系数为0.63时,可以将15株野生灵芝分为四组。研究结果为连云港地区灵芝种质资源分类、保护和品种创制提供了参考依据。

不同栽培条件对段木灵芝性状及营养品质的影响研究

以“沪农1号”灵芝为试验菌株,采用薄膜温室段木栽培方式,设置黄壤土、腐殖土、碎石、细沙4种覆土材料处理和0、60%、75%、90%4个遮阴率处理,探究不同覆土材料和遮阴率对灵芝生长状况、产量,以及灵芝多糖、三萜和甾醇含量的影响。结果:不同覆土材料对菌盖直径和厚度的影响不显著;菌柄直径以碎石处理显著高于其他处理,菌柄长度和子实体干重以腐殖土、碎石处理显著高于沙土和黄壤土处理,孢子粉产量以沙土处理显著高于其他处理;子实体多糖含量以沙土处理最高为1.82%,三萜及甾醇含量则以碎石处理最高,为1.30%。75%遮阴率的菌柄长度、菌盖直径显著高于不遮阴处理,菌盖直径和厚度均优于其他处理,子实体干重和孢子粉产量显著高于其他处理,多糖含量也为组间最高,达到2.24%;三萜及甾醇含量在不遮阴处理下最高,为1.44%。表明以碎石为覆土材料,遮阴率设置为75%时,更有利于段木灵芝的生长发育,实现灵芝的高产优质栽培。

刺五加-灵芝双向固体发酵工艺优化及抗氧化活性评价

发酵中药是传统中药材精细高值化利用的有效途径,可以起到增效减毒、扩大适用范围等作用。通过双向固体发酵技术将药食同源的刺五加与灵芝有机结合,达到协同增效的目的。首先,通过单因素实验考察常规固体发酵参数的最适范围和微生物生长因子种类;其次,通过Box-Behnken设计和响应曲面优化,得到并验证最优的生长因子组合;最后,通过DPPH自由基清除能力、超氧化物歧化酶的活力和总抗氧化能力对发酵前后的刺五加提取物进行活性评价。结果表明,刺五加-灵芝双向发酵的最佳工艺为:粉碎粒度为10目,基质加水量为40%,菌丝体与固体基质的质量比为2∶1;最佳生长因子组合为:MnCl_(2)为84 mmol/kg、NaCl为56 mmol/kg、CaCl_(2)为149 mmol/kg;发酵后的刺五加提取物抗氧化活性显著增强,明显高于刺五加、灵芝及刺五加-灵芝混合提取物,提高了刺五加的保健功效,为系列大健康产品的开发提供了新的活性物质基础。

段木灵芝高效栽培及生物活性研究进展

灵芝是我国传统食药用菌,主要生物活性成分如多糖、三萜等一直是医药、保健领域的研究热点,已被证实在改善癌症、糖尿病和人类免疫缺陷病毒等现代疾病方面具有潜力,因此市场需求不断增加。段木栽培的灵芝品质好,有效成分含量高。本文对段木灵芝的高效栽培、生物活性等研究进展进行了综述,并对其发展前景进行了展望,以期为我国灵芝产业的发展提供依据。

食药物质灵芝(试点)食品安全标准浅析及其思考

自2019年灵芝被纳入食药物质试点管理以来,国内相关企业不断开发出灵芝试点产品并发布了相应标准,为灵芝产业的外延发展迈出了坚实一步。通过检索相关信息,查到以灵芝为原料的试点产品及其标准共282个,其中地方标准2个、团体标准2个、企业标准278个,尚无国家标准;分布于22个省市区,其中福建49个、广西34个、安徽32个、贵州24个、广东21个、浙江17个;产品形式以茶(103个)、饮料/饮品(80个)、配制酒(32个)和压片糖果(21个)等为主。从基原、标准等级、质量评价方法和可操作性等维度探讨现行标准及评价方法的不足,并提出:灵芝食品安全国家标准的制订工作应尽快组织实施,结合灵芝食用方法建立易操作、可行的质量标准,建立可操作的标准及检验项目,并依靠现代科技建立评价灵芝品质等级的标准。

16个灵芝菌株基于ITS及ISSR标记的遗传多样性分析

应用ITS、ISSR分子标记技术对收集保存的16个灵芝菌株进行遗传多样性分析。基于ITS序列,将2个“白灵芝”鉴定为乳白栓孔菌(Leiotrametes lactinea),并非白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum),其他菌株均为灵芝属。基于ISSR分子标记技术对样品进行聚类分析,结果表明,相似水平在0.64时,16株供试菌株可以聚为三组。第一组中的1号与9号的遗传相似系数在0.95以上,11号与12号菌株的遗传相似系数达到1.00,可能属于同物异名。研究结果将为纠正灵芝种源同物异名、同名异物的问题以及进一步开发利用奠定基础。

灵芝及其制剂的HPLC指纹图谱的研究

目的:研究灵芝及其制剂的指纹图谱的测定方法,确定灵芝HPLC指纹图谱。方法:ZORBAX×300SB-C_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),MeOH-5%HAc(40∶60)溶剂系统等强度洗脱,检测波长252nm,流速0.8mL·min^(-1),进样量10μL,柱温40℃。结果:建立了灵芝及其制剂的指纹图谱。发现12个色谱峰为共有峰,确定了其相对保留时间的范围。结论:利用灵芝指纹图谱可以对灵芝制剂进行鉴别。该方法不需对样品进行任何前处理,快速简捷,精密度高,重现性和准确度良好,可为灵芝制剂的质量控制提供更为科学的依据和有效的鉴别方法。

硒对不同时期开袋灵芝主要活性成分的影响

通过在栽培料中加入亚硒酸钠,研究硒对不同时期开袋灵芝子实体硒富集能力和多糖、三萜含量的影响。采用高效液相色谱法比较不同开袋时间子实体三萜图谱相似性及灵芝酸A、E、F含量,并利用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测三萜关键酶基因的表达量。结果显示:在栽培料中添加亚硒酸钠能够显著提高灵芝的硒含量,其中接种后50 d开袋(第2批)的硒含量最高,为57.8μg/kg,比对照高出34.42%;原种经50 mg/kg亚硒酸钠驯化后,其子实体中有机硒含量比对照提高35.95%;添加亚硒酸钠的菌袋接种后40~70 d开袋(1~4批)能有效提高子实体的多糖含量,其中接种后60 d开袋(第3批)的多糖含量最高,为13.24 mg/g,比对照提高53.95%;但各个批次的子实体三萜含量均显著低于对照;不同批次灵芝的三萜图谱相似度在98%左右,说明不同批次的三萜灵芝酸成分相似;添加亚硒酸钠使灵芝酸A、E、F含量显著低于对照,且对灵芝酸E、F含量的影响更大。qRT-PCR检测结果显示,添加亚硒酸钠的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因HMGR表达量显著降低,说明灵芝对硒的吸收抑制了HMGR的表达。

不同日常食用加工方法对灵芝中活性成分利用的比较

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝(Ganoderma lingzhi)中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多糖基本全部溶出,三萜溶出率分别为85.5%、83.1%、51.1%;50%的白酒浸泡7d后三萜溶出率为95.0%,而多糖溶出率仅为0.31%;用这些方法比较龙芝二号与菌草灵芝的处理结果,结果多糖和三萜溶出效果基本相同;通过比较,焖烧40min能使灵芝片中有效成分大部分溶出。

灵芝子实体中三萜酸的提取及其稳定性

研究不同提取方法对灵芝（Ganodermalingzhi）子实体中三萜酸提取率的影响，结果表明，采用乙醇回流法所得三萜酸的提取得率最大，影响提取的关键因素为液料比、提取时间和提取次数；采用Box．Behnken设计及响应面分析法对这3个因素进行优化，并通过回归拟合，建立了预测灵芝三萜酸提取的多项式模型，可预测灵芝子实体中三萜酸提取率的回归模型如下：Y=0．335-0．003125X1＋0．021X2—0．014X3＋0．0005X1 X2—0．019X1X3—0．005X2X3—0．044X12—0．040X2^2-0．032X3^2经响应面最优分析，获得3个因素的最佳水平为：液料比25：1，提取时间2h，提取次数3次。经实际试验验证，在该条件下，灵芝子实体三萜酸提取率可达0．335mg／g，与预测值相比，实测值低1．18％。稳定性试验结果表明，在较低温度下（25℃以下），三萜酸化合物较稳定；但在50℃及以上温度条件下，三萜酸存在明显的降解现象，三萜酸的稳定性与温度及保藏时间呈负相关。

灵芝菌丝中三萜酸的提取研究

采用经典回流法试验了灵芝(Ganoderma lingzhi)发酵菌丝体中三萜酸的提取工艺。单因素试验表明:灵芝菌丝三萜酸最佳提取溶剂为无水乙醇、液料比为10:1(mL/g)、提取时间2 h、提取次数为2次。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken试验设计结合响应面分析法对灵芝菌丝三萜酸的提取工艺进行优化,建立了预测三萜酸提取的多项式模型:Y=0.52+0.022A+0.027B+0.064C+0.021AB-0.013AC+0.010BC-0.056A^2-0.094B^2-0.057C^2,经响应面最优分析,菌丝三萜酸提取的最优工艺参数为液料比为11:1(v/m,mL/g)、提取时间2 h、提取次数3次。在此条件下,灵芝菌丝三萜酸提取率可达0.537mg/g干菌丝,与预测值(0.542 mg/g干菌丝)相比,相对标准偏差为0.65%。

灵芝对氟他胺大鼠肝毒性的预防作用

目的 :研究灵芝对大鼠ig氟他胺引起肝毒性的预防作用。方法 :大鼠ig灵芝 5 0 0mg/kg 2d ,再ig氟他胺 ,测定转氨酶活性、谷胱甘肽含量及其相关酶的活性。结果 :大鼠连续ig氟他胺 10d后 ,血清转氨酶活性明显升高 ,氟他胺 2 0 0mg/kg可明显降低肝谷胱甘肽含量 ,升高谷胱甘肽 S转移酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。大鼠ig灵芝 5 0 0mg/kg 2d后 ,再同时ig氟他胺 2 0 0mg/kg ,可明显抑制氟他胺引起的转氨酶活性升高 ,抑制GSH含量降低。结论

一个灵芝新品种的选育与分子鉴定

以国家认定品种“泰山赤灵芝1号(TL-1)”和野生灵芝菌株“4895”为亲本,通过原生质体单核化杂交育种技术选育出集亲本优势于一体的灵芝新品种“TL-3”,与TL-1相比,其在子实体形态特征、产量、生物学效率、子实体有效成分含量方面具有更大的优势。TL-3菌丝洁白浓密,子实体肾圆形,菌盖中等偏大,菌盖厚度显著高于TL-1(P<0.01),平均单产和生物学效率比TL-1分别提高12.23%和12.37%,子实体多糖和三萜含量比TL-1分别提高1.87%和37.5%,具有较高的应用推广价值。

灵芝孢子粉废料中粗多糖提取工艺的研究

为探究脱油后灵芝孢子粉废料的再利用价值,对其中的粗多糖的提取工艺进行优化。以单因素实验结果为基础,以液料比、提取温度、提取时间为自变量,粗多糖得率为响应值,采用Box-Behnken实验设计方案,研究各自变量及其交互作用对粗多糖得率的影响,提取温度与液料比、提取温度与提取时间交互作用较明显,液料比与提取时间交互作用相对不明显;并确定灵芝孢子粉废料粗多糖提取的理论最佳条件为液料比25.00∶1,提取温度100.00℃,提取时间3.00 h,在此条件下粗多糖理论得率达13.320%。实际提取条件为液料比25∶1,提取温度100℃,提取时间3 h,实测值为13.204%,理论值与实测值误差小于1%。利用响应面方法优化的工艺参数可用于灵芝孢子粉废料粗多糖的提取,获得最大得率。

不同副产物基质配方对食用菌产量及品质的影响

【目的】探明皇竹草及中药渣、白酒酒糟等副产物原料在香菇和灵芝等食用菌栽培原料中应用的可行性及适宜添加量,为拓展食用菌菌材来源途径提供参考。【方法】采用单因素试验,研究皇竹草及中药渣、白酒酒糟等副产物原料替代部分香菇和灵芝生产常规配方中的栽培原料阔叶树木屑(占栽培料总量的78%),即香菇用皇竹草(20%~60%)+中药渣(5%~15%)+白酒酒糟(5%),灵芝用皇竹草(10%~50%)+中药渣(5%~25%)+白酒酒糟(5%)替代部分阔叶树木屑的不同基质配方对香菇和灵芝菌丝生长、子实体产量及品质(多糖)的影响。【结果】香菇和灵芝在不同添加副产物基质上均能正常生长,香菇和灵芝的菌丝生长速率、子实体产量和子实体粗多糖含量分别依次为4.5~8.4 mm/d、280.9~457.9 g、10.31~13.82 g/100 g和3.2~5.6 mm/d、118.5~372.4 g、1.55~2.97 g/100 g;香菇的优选配方为皇竹草30%+阔叶树木屑38%+中药渣15%+白酒酒糟5%+麦麸10%+红糖1%+石膏1%,在此条件下菌丝生长速率为6.0 mm/d,与CK差异不显著,子实体袋均产量为457.9 g,子实体粗多糖含量为13.82 g/100 g,较CK分别提高8.4%和28.7%;灵芝最佳配方为皇竹草40%+阔叶树木屑33%+中药渣10%+白酒酒糟5%+麦麸10%+糖1%+石膏1%,此时子实体袋均产量与CK相近,达368.2 g,菌丝生长速率为4.9 mm/d,子实体粗多糖含量为2.97 g/100 g,较CK分别提高14.0%和58.8%。【结论】皇竹草及中药渣、白酒酒糟等副产物可替代部分常规配方中阔叶树木屑在香菇和灵芝等食用菌栽培原料中应用,可降低香菇和灵芝的生产成本,提高生产效率及子实体品质。

灵芝对小鼠空间分辨学习与记忆的影响

本文用Y-型迷宫法测试小鼠空间分辨行为。实验结果表明,每日ig灵芝2.58/kg共7d,有明显促进学习的作用。每日ig灵芝2.5g/kg共7d或ig灵芝5g/kg共7d都能显著地拮坑东莨菪碱所致学习障碍的作用。此外,学习训练后立即ig灵芝2.5g/kg或ig灵芝5g/kg也有明显地改善东莨菪碱损害记忆巩固的作用。

“扶正祛邪”与灵芝的抗病毒作用

“扶正祛邪”是中医防病治病的重要理论。灵芝既可通过增强机体免疫力,间接地抑制病毒入侵人体及在体内增殖(“扶正”),还可直接抑制并杀灭病毒(“祛邪”)。灵芝及其有效成分对流感病毒、疱疹病毒、乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、新城疫病毒、登革病毒和肠病毒等具有抗病毒作用。灵芝制剂单用或与抗病毒药物联合应用对乙型肝炎、带状疱疹、复发性生殖器疱疹、尖锐湿疣、儿童EB病毒感染的传染性单核细胞增多症、宫颈人乳头瘤病毒感染以及获得性免疫缺陷综合征有一定疗效。本文综述了灵芝及其有效成分的抗病毒作用和灵芝制剂治疗病毒感染性疾病的临床研究,并讨论了灵芝防治新型冠状病毒肺炎的可能性。