围术期叉头翼状螺旋转录因子3mRNA检测与慢性移植肾肾病的关系研究

目的探讨肾移植患者围术期外周血单核细胞(PBMC)中叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)表达水平与慢性移植肾肾病(CAN)的关系。方法选取该院经临床表现及病理确诊为CAN的35例患者作为CAN组,同时选取35例移植肾功正常患者作为对照组。应用实时荧光定量PCR技术对患者围术期外周血PBMC中Foxp3mRNA进行检测比较,为剔除研究Foxp3表达水平对CAN的影响时的干扰因素,对CAN的相关临床影响因素进行了分析。结果 CAN组围术期Foxp3mRNA表达低于正常对照组,两组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。对CAN影响因素筛选显示,两组急性排斥反应(AR)比较,差异具有统计学意义,进行再次分组比较显示,有无AR对CAN组及对照组中Foxp3水平无影响。结论肾移植患者围术期外周血PBMC中Foxp3mRNA水平与远期慢性移植肾肾病具有相关性,可以作为预测移植后慢性移植肾肾病发生危险程度的一个指标,指导个体化治疗。

口腔扁平苔藓患者血清血管生成素-2水平与叉头翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞及疾病活动度的相关性分析

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者血清血管生成素-2(Ang-2)水平与叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)阳性调节性T淋巴细胞(Treg)及疾病活动度相关性分析。方法选取113例不同分型OLP患者为研究对象(试验组),其中网纹型45例,充血型36例,糜烂型32例。另选取健康志愿者76例设为对照组。血清Ang-2和Foxp3+Treg水平分别采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪进行检测。统计OLP患者临床体征评分、OLP网纹-萎缩-糜烂(RAE)病损评分和疾病活动评分。采用Pearson相关性分析明确Ang-2水平与Foxp3+Treg及各评分的相关性。结果与对照组相比,不同分型OLP患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平均升高(P<0.05);与网纹型相比,糜烂型和充血型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05);与充血型相比,糜烂型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05)。糜烂型和充血型患者临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均高于网纹型(P<0.05);与充血型患者相比,糜烂型患者上述指标水平升高(P<0.05)。OLP患者血清Ang-2水平与Foxp3+Treg、临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均呈正相关(r值分别为0.531、0.548、0.554、0.528,P<0.001)。结论血清Ang-2水平在OLP患者体内异常升高,且其升高程度与患者Foxp3+Treg水平、临床体征、病损程度及疾病活动程度呈正相关。

叉头翼状螺旋转录因子基因多态性与广西汉族妇女宫颈HPV感染的关联

目的探讨叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)基因多态性与广西汉族妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法选取96例宫颈HPV感染患者,将其纳入感染组,选取同期69例非HPV感染者,将其纳入对照组,采用基因测序法检测两组人群中FOXP3基因rs3761548和rs2232365位点基因多态性,并评估其相关性。结果感染组和对照组FOXP3基因rs3761548和rs2232365位点基因型频率分布无统计学意义,均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。FOXP3基因rs3761548位点CC基因型、AC+AA基因型和A/C等位基因频率在感染组和对照组中整体比较,差异有统计学意义(P<0.05);FOXP3基因rs2232365位点AA基因型、AG+GG基因型和A/G等位基因频率在感染组和对照组中整体比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOXP3基因rs3761548位点A等位基因和rs2232365位点G等位基因可能会增加广西汉族妇女宫颈HPV感染的发生风险。

叉头翼状螺旋转录因子3及白细胞介素17在结肠癌中的表达及临床意义

目的 通过观察结肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织中叉头翼状螺旋转录因子3（Foxp3）表达情况,以及检测结肠癌患者和健康人血清白细胞介素17 （IL-17）的水平,探讨调节性T细胞（Treg细胞）和Th17细胞在结肠癌发生和发展过程中的变化.方法 采用免疫组织化学SP法检测56例结肠癌组织及癌旁组织和15例正常结肠组织中Foxp3表达情况,采用酶联免疫吸附法检测其血清IL-17水平.结果 结肠癌患者血清IL-17明显高于健康对照者[（9.1 ±2.3） ng/L比（6.2±1.5）ng/L],差异有统计学意义（P=0.007）.结肠癌组织Foxp3阳性细胞数均显著多于正常对照组织和癌旁组织[（24.1±6.4）个比（2.7±1.1）个和（8.7±2.3）个],癌旁组织显著多于正常对照组织,差异均有统计学意义（P＜0.01）.TNM分期Ⅲ期结肠癌患者血清IL-17显著高于Ⅰ～Ⅱ期[（8.5±2.1） ng/L比（5.4±0.9） ng/L],结肠癌组织Foxp3显著多于Ⅰ～Ⅱ期[（25.8±6.2）个比（18.2±4.4）个],差异有统计学意义（P＜0.01）.病理分级中高分化腺癌血清IL-17与低分化腺癌[（9.4±1.1）ng/L比（8.9±1.8）ng/L]比较差异无统计学意义（P＞0.05）;中高分化结肠癌组织Foxp3显著多于低分化结肠癌组织[（26.8±5.5）个比（17.2±3.2）个],差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 结肠癌患者血清IL-17水平和结肠癌组织Foxp3阳性表达显著高于正常组织,且随TNM分期及病理分级增高而增高,提示IL-17以及Foxp3在结肠癌的生长和转移过程中发挥重要作用.IL-17水平和Foxp3表达与局部肿瘤组织的免疫状态密切相关,联合检测有助于进一步了解肿瘤患者的免疫状态,为肿瘤的免疫治疗提供基础资料.

包含SET和MYND结构域的蛋白3系别混合型白血病基因5对急性期川崎病叉头螺旋翼状转录因子3基因组蛋白甲基化的影响

目的探讨包含SET和MYND结构域的蛋白3/系别混合型白血病基因5（SMYD3/MLL5）对急性期川崎病叉头螺旋翼状转录因子3（Foxp3）基因组蛋白甲基化的影响及其在川崎病免疫发病机制中的作用。方法急性期川崎病患儿42例，正常同年龄对照组26例，川崎病患儿分别于免疫球蛋白（IVIG）治疗前、后直接取血备检。采用染色质免疫共沉淀-荧光定量PCR检测外周血CD4＋ T细胞Foxp3基因组蛋白H3K4me3、H3K27me3甲基化修饰及SMYD3、MLL5结合水平；流式细胞术检测外周血CD4＋CD25high Foxp3＋细胞（调节性T细胞）比例及Foxp3、细胞毒T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）、Ⅱ型转移生长因子β受体（TGF-βRⅡ）、磷酸体SMAD家族成员3（pSmad3）蛋白表达水平；实时荧光定量PCR检测CD4＋ T细胞Foxp3、IL-10、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体（GITR）、TGF-βRⅡ、RARα mRNA表达；ELISA检测外周血浆中TGF-β、RA浓度。采用t检验进行统计分析。结果①急性期川崎病患儿调节性T细胞比例、Foxp3和抑制功能相关分子（IL-10、GITR和CTLA4）表达及启动子、非编码保守序列1（CNS1）、CNS2 H3K4me3水平显著降低[启动子：（5.4±1.8）%和（9.1±2.2）%；CNS1：（2.6±0.9）%和（3.8±1.1）%；CNS2：（2.4±0.8）%和（4.2±1.0）%；t=5.50，6.02，9.56，7.92，7.97，4.76，7.73，5.01，8.66；P均〈0.05]，其中川崎病合并冠状动脉损伤组（川崎病-CAL＋）前述9项指标均低于无冠状动脉损伤组（川崎病-CAL-）[启动子：（4.1±1.4）%和（6.2±1.9）%；CNS1：（2.0±0.9）%和（3.0±1.1）%；CNS2：（1.8±0.6）%和（2.7±1.2）%；t=6.28，3.24，4.56，3.69，3.38，4.40，3.65，3.00，3.51；P均〈0.05]，经IVIG治疗后明显恢复[启动子：（7.2±2.1）%和（5.4±1.8）%；CNS1：（3.6±1.4）%和（2.6±0.9）%；CNS2：（3.6±1.4）%和（2.4±0.8）%；t=5.56，4.59，7.01，6.04，5.89，4.83，4.45，4.00，5.12；P均〈0.05]。各组Foxp3基因CNS3 H3K4me3及H3K27me3差异无统计学意义（t=1.03，0.91，1.48和0.79，0.82，1.53；P均〉0.05）。②急性期川崎病患儿CD4＋ T细胞组蛋白甲基化酶SMYD3、MLL5与Foxp3基因结合水平下调（t=6.63，6.15；P均〈0.05），且与Foxp3 mRNA表达水平呈正相关（r=0.62、0.45；P均〈0.05），经IVIG治疗后均有不同程度恢复（t=5.36，4.56；P均〈0.05）。其中川崎病-CAL＋组SMYD3、MLL5与Foxp3结合水平均低于川崎病-CAL-组（t=4.11，4.31；P均〈0.05）。③急性期川崎病患儿血浆TGF-β、RA浓度及CD4＋ T细胞TGF-βRⅡ、TGF-βRⅡ、pSmad3、RARα表达均显著下调（t=11.54，12.81，7.43，16.10，8.25，12.06；P均〈0.05），其中川崎病-CAL＋组前述6项指标均低于川崎病-CAL-组（t=3.58，3.30，3.82，5.27，4.71，3.78；P均〈0.05），经IVIG治疗后均明显增加（t=8.40，6.24，5.94，11.78，6.27，8.30；P均〈0.05）。结论SMYD3/MLL5结合水平不足所导致的Foxp3基因H3K4me3修饰异常可能与急性期川崎病患儿免疫功能紊乱有关。

叉头样／翼状螺旋转录因子3基因多态性与克罗恩病易感性和疾病表型的关系

目的 探讨浙江籍汉族人群叉头样/翼状螺旋转录因子（Foxp）3基因多态性与CD易感性和疾病表型的关系。 方法 纳入2007年1月至2015年12月确诊的268例CD患者和490名健康对照者，采用多重SNaPshot技术检测其Foxp3的rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548 4种单核苷酸多态性（SNP），评价其与英夫利西单克隆抗体疗效的关系，并进行连锁不平衡和单倍型分析。统计学方法采用非条件Logistic回归分析。 结果 31例接受英夫利西单克隆抗体治疗有效与19例无效患者比较，4个SNP的突变等位基因和基因型频率差异均无统计学意义（P均〉0.05）。连锁不平衡分析发现上述4个SNP彼此紧密连锁。男性CD组GCGC单倍型频率为29.20%（40/137），高于男性健康对照组的19.37%（43/222），差异有统计学意义（OR＝1.717，95%CI 1.045～2.820，P＝0.032）；女性CD组ACGA单倍型频率为13.36%（35/262），低于女性健康对照组的19.03%（102/536），差异有统计学意义（OR＝0.656，95%CI 0.433～0.995，P＝0.046）。男性结肠型（L2）ATAC单倍型频率为25.93%（7/27），低于回结肠型（L3）的75.38%（49/65），差异有统计学意义（OR＝0.114，95%CI 0.041～0.320，P〈0.01）；男性结肠型（L2）GCGC单倍型频率为51.85%（14/27），高于回结肠型（L3）的9.23%（6/65），差异有统计学意义（OR＝10.590，95%CI 3.423～32.758，P〈0.01）；男性狭窄型（B2）患者ATAC单倍型频率为73.21%（41/56），高于非狭窄、非穿透型（B1）的47.30%（35/74），差异有统计学意义（OR＝0.328，95%CI 0.156～0.693，P＝0.003）；男性狭窄型（B2）患者GCGC单倍型频率为17.86%（10/56），低于非狭窄、非穿透型（B1）的39.19%（29/74），差异有统计学意义（OR＝2.946，95%CI 1.295～6.784，P＝0.009）；男性穿透型（B3）患者ACGA单倍型频率为71.43%（5/7），高于非狭窄、非穿透型（B1）的12.16%（9/74），差异有统计学意义（OR＝0.055，95%CI 0.009～0.329，P〈0.01）。 结论 Foxp3（rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548）基因多态性与中国汉族CD易感性和疾病表型相关，但与英夫利西单克隆抗体的疗效无关。

新血府逐瘀汤对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉形态及免疫调节因子HMGB-1、Foxp3表达的影响

目的:观察新血府逐瘀汤对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉HMGB-1、Foxp3表达及病理形态学影响,探讨其调节免疫因子抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:雄性SPF级Wistar大鼠48只,按随机数字表法分为空白对照组、模型组、立普妥组、新血府逐瘀汤(NXFZY)低剂量组、NXFZY高剂量组及NXFZY+立普妥组。除空白组外,其余各组复制动脉粥样硬化模型,NXFZY低剂量组新血府逐瘀汤9 g/(kg·d)、NXFZY高剂量组新血府逐瘀汤18g/(kg·d)灌胃,立普妥组给予阿托伐他汀钙2 mg/(kg·d)水溶液灌胃,对照组及模型组灌服等容积生理盐水,8周后HE染色后镜下观察胸主动脉病理学改变,免疫组织化学法检测胸主动脉HMGB-1、Foxp3表达并进行相关性分析。结果:与模型组比较,新血府逐瘀汤可显著降低HMGB-1表达,升高Foxp3表达,两者存在显著负相关性。结论:新血府逐瘀汤可通过下调促炎因子HMGB-1、上调抗炎因子Foxp3表达,调节AS过程中促炎与抗炎因子之间的平衡,发挥抗AS的作用。

Th17、Treg细胞检测在小儿EB病毒感染中的临床意义

目的研究Th17、Treg细胞检测在小儿EB病毒(EBV)感染中的临床意义。方法回顾性选取2021年1月至2023年1月泸州市人民医院收治的60例EBV感染患儿作为研究组,同时选取同一时期入院进行体检的60名健康儿童作为对照组。采用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞内的Th17、Treg细胞,并采用酶联免疫吸附抗体双夹心法测定相关特征性细胞因子[转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素17(IL-17)]水平;同时,采用RT-PCR法测定Th17表达孤核受体(RORγt)mRNA、Treg表达叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达水平。比较两组患者的外周血Treg细胞表达率、Th17细胞表达率、TGF-β、IL-17水平与RORγt mRNA、Foxp3 mRNA相对表达水平。结果研究组患儿外周血Th17细胞表达率为(1.39±0.42)%,明显高于对照组[(0.82±0.19)%],外周血Treg细胞表达率为(3.48±0.84)%,明显低于对照组[(6.07±1.25)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患儿外周血RORγt mRNA相对表达水平为(7.96±3.09)×10^(-5),明显高于对照组[(4.19±2.07)×10^(-5)],外周血Foxp3 mRNA相对表达水平为(3.79±1.25)×10^(-4),明显低于对照组[(15.89±7.51)×10^(-4)],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患儿血清TGF-β水平为(58.58±12.83)ng/L,明显低于对照组[(8.81±3.97)ng/L],IL-17水平为(22.09±10.28)ng/L,明显高于对照组[(80.14±8.95)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EBV感染相关病症发生及发展中Th17、Treg细胞发挥着重要作用,增大Th17、Treg细胞及其相关炎症因子监测力度可为EBV感染患儿的疾病情况及疗效评估提供参考依据。

宫颈癌组织FOXP3、PD-1、PD-L1蛋白表达及其临床意义

为了解宫颈癌组织叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)、程序性死亡受体-l(PD-1)、程序性死亡受体配体-1(PD-L1)蛋白表达与宫颈癌发生发展的关系,选取宫颈癌患者70例、宫颈上皮内瘤变(CIN)患者50例的临床资料,将其分别纳入宫颈癌组和CIN组.比较宫颈癌组与CIN组、HPV感染组(26例)与无HPV感染组(44例)宫颈癌组织FOXP3、PD-1、PD-L1蛋白的表达情况及其与病理特征的关系,采用多因素Logistic回归分析法分析宫颈癌组织中3种蛋白阳性表达的相关危险因素.结果发现,宫颈癌组PD-1蛋白的阳性表达率高于CIN组的数值(P<0.05);HPV感染组宫颈癌组织FOXP3、PD-1、PD-L1蛋白的免疫组化评分均高于无HPV感染组(P<0.05)的评分.PD-1蛋白表达与PD-L1蛋白表达存在明显的相关性(P<0.05).FIGO分期的Ⅲ期或Ⅳ期、组织学分级中低分化、淋巴结转移中有淋巴结转移者FOXP3、PD-1、PD-L1蛋白的阳性表达率较高(P<0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,FIGO分期为Ⅲ期或Ⅳ期、组织学分级为低分化、有淋巴结转移为宫颈癌组织3种蛋白阳性表达的独立危险因素(P<0.05).总之,宫颈病变与HPV感染均可导致FOXP3、PD-1、PD-L1蛋白呈高表达状态,3种蛋白与宫颈癌的发生发展密切相关,在反映患者病情、预后方面具有一定的价值.

Foxp3在Graves病患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的:研究Graves病患者外周血叉头/翼状螺旋转录因子(Foxp3)的表达,探讨其在Graves病免疫发病机制中的作用。方法:取32例Graves病(GD)患者外周血单个核细胞(PBMC),经细胞表面及胞内双重染色后通过流式细胞术(FCM)测定Foxp3的表达,同时采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定血清甲状腺激素、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)的水平。结果:GD组治疗前外周血Foxp3阳性率显著低于正常对照组(P<0.01),且与同时测定的FT3、FT4呈显著负相关(P<0.01);治疗后,随着甲状腺功能的逐渐改善Foxp3水平虽仍低于正常对照(P<0.05)但较治疗前明显升高(P<0.05)。结论:GD患者体内存在Foxp3的表达异常,Foxp3可能参与了GD的发病,而高甲状腺素血症与Foxp3调节性T细胞两者之间有一定关联。

芪黄益气摄血方对免疫性血小板减少症模型小鼠Th17/Treg细胞因子及转录因子ROR-γt/Foxp3表达的影响

目的:研究芪黄益气摄血方对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响。方法:50只BALB/C小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型对照组、芪黄益气摄血方30、60 g/kg组、强的松9.1 mg/kg组,每组10只。采用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)腹腔注射方法,建立ITP小鼠模型;注射APS后的第8 d,各组分别灌胃给药,连续灌胃14 d。观察各组小鼠一般情况;检测外周血血小板计数(PLT)和血红蛋白(Hb)浓度变化;Elisa法检测血清白介素-6(IL-6)、IL-17A、IL-35、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;分离脾脏、胸腺组织,称质量,计算脏器指数;取胸骨做骨髓涂片,显微镜下进行骨髓巨核细胞分类;qRT-PCR法检测脾脏Foxp3、Ror-γt mRNA表达;Western Blot法检测脾脏Foxp3、ROR-γt蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠外周血PLT计数、Hb和血清IL-10、IL-35、TGF-β1含量、骨髓产板巨核细胞数以及脾脏Foxp3 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),而脾脏和胸腺指数、血清IL-6、IL-17A含量、以及脾脏Ror-γt mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,芪黄益气摄血方30、60 g/kg组及强的松9.1 mg/kg组PLT计数、血清IL-10、IL-35、TGF-β1含量、骨髓产板巨核细胞数以及脾脏Foxp3 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05或P<0.01),血清IL-6、IL-17A含量均显著降低(P<0.05或P<0.01),芪黄益气摄血方60 g/kg组Hb浓度明显增加(P<0.05),芪黄益气摄血方30、60 g/kg组脾脏Ror-γt mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01);与芪黄益气摄血方30 g/kg组比较,芪黄益气摄血方60 g/kg组和强的松9.1 mg/kg组PLT计数均明显升高(P<0.05),芪黄益气摄血方60 g/kg组Foxp3 mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论:芪黄益气摄血方能够明显改善ITP症状,增加PLT计数和骨髓产板巨核细胞数,其作用机制可能通过调控转录因子ROR-γt/Foxp3的表达,从而调节Th17/Treg细胞因子平衡,抑制炎症反应。

脱氢表雄酮对小鼠卵巢颗粒细胞AMH、FOXL2和INH B蛋白表达的影响

目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对小鼠卵巢颗粒细胞中抗苗勒氏管激素(AMH)、翼状螺旋/叉头转录因子2(FOXL2)、抑制素B(INH B)蛋白表达的影响。方法体外培养小鼠卵巢颗粒细胞,培养液中加入终浓度分别为0、50、100、200 nM的DHEA作用后,细胞免疫荧光法观察AMH、FOXL2、INH B蛋白表达定位,Western blot法检测AMH、FOXL2、INH B蛋白表达量变化。结果不同浓度DHEA处理后,小鼠卵巢颗粒细胞的细胞核、细胞膜与细胞质处均可见有AMH、FOXL2、INH B蛋白表达;Western blot法检测三种蛋白表达量变化,在50、100、200 nM DHEA浓度作用下,FOXL2和INH B蛋白表达量均低于对照组(P<0.05),而AMH蛋白表达量无显著性差异。结论DHEA能够下调FOXL2、INH B蛋白表达。

胃癌组织中UHRF1、YAP1和FOXP3表达及与患者临床病理特征的关系

目的探讨胃癌组织中类泛素样含环指域蛋白1(UHRF1)、Yes相关蛋白1(YAP1)和叉头翼状螺旋转录因子3(FOXP3)表达及与患者临床病理特征的关系。方法收集2021年1至12月湖州市第一人民医院经手术切除的85例胃癌患者的癌组织与配对癌旁组织,采用免疫组化法测定UHRF1、YAP1和FOXP3的阳性率。比较胃癌组织与癌旁组织及不同临床病理特征患者间UHRF1、YAP1和FOXP3的阳性率。结果胃癌组织中UHRF1、YAP1和FOXP3阳性率均显著高于癌旁组织,差异均有统计学意义(均P<0.01)。不同性别、年龄、BMI和肿瘤直径胃癌患者UHRF1、YAP1和FOXP3阳性率比较,差异均无统计意义(均P>0.05);低分化胃癌患者高于高、中分化胃癌患者,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者,淋巴结转移胃癌患者高于无淋巴结转移胃癌患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胃癌组织UHRF1、YAP1和FOXP3阳性率高,并与患者肿瘤分化程度、临床分期和淋巴结转移等临床病理特征有关。

CD4^+Foxp3^+调节性T细胞在不足月胎膜早破患者外周血中的表达及意义

目的:检测不足月胎膜早破(pPROM)患者外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达,探讨其在pPROM早产中的作用及意义。方法:选取2013年9月至2014年1月在中国医科大学附属盛京医院住院病例及门诊正常体检病例共60例,其中pPROM患者(孕34~36周)30例(pPROM组),正常妊娠对照组30例(孕34~36周)。采每位受试对象抗凝外周血5 ml,分离外周血单个核细胞。使用流式细胞术检测外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达。结果:pPROM组与正常妊娠对照组相比,外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例降低,差异有统计学意义(P=0.0093);pPROM组中分娩发动≥48小时者CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例高于分娩发动的时间<48小时者(P=0.0246);pPROM组中Apgar评分>7分者和≤7分者CD4+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例差异无统计学意义(P>0.05)。结论:pPROM患者外周血中CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达降低,参与pPROM的发病。pPROM患者CD4+Foxp3+调节性T细胞的表达高低与分娩发动时间有关,而与新生儿出生Apgar评分无明显关系。

千金藤素对口腔鳞癌细胞凋亡及FOXL2、Ki67表达的影响

目的:探讨千金藤素对口腔鳞癌细胞系TSCCA的凋亡及翼状螺旋/叉头转录因子(FOXL2)、细胞增殖抗原Ki67表达的影响。方法:培养人口腔鳞癌细胞系TSCCA,采用不同浓度(10,20,30μmol·L^(-1))的千金藤素处理细胞将其分别对应设为LD组、MD组、HD组。MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测FOXL2、Ki67 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测FOXL2、Ki67蛋白表达水平。结果:与正常口腔HIOE细胞系相比,TSCCA细胞FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05);与空白组相比,LD组、MD组、HD组细胞增殖抑制率与凋亡率均显著升高(P<0.05),且HD组显著高于LD组、MD组(P<0.05);与空白组相比,LD、MD、HD组FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),且HD组显著低于LD组、MD组(P<0.05)。结论:千金藤素可有效抑制口腔鳞癌细胞TSCCA的增殖,并可抑制FOXL2与Ki67表达并发挥抗肿瘤的作用进而诱导TSCCA细胞凋亡。

Foxp3、NRP1和NRP2在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的研究叉头/翼状螺旋转录因子(Foxp3)、神经纤毛蛋白(NRP)在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达及其临床意义,并探讨Foxp3、NRP1和NRP2表达的相关性。方法采用免疫组化En Vision法检测108例乳腺IDC、45例纤维腺瘤和66例正常乳腺组织中Foxp3、NRP1和NRP2的表达,分析3者的表达与乳腺癌临床病理因素及基因分型的关系。结果在正常乳腺组织、纤维腺瘤和乳腺IDC中Foxp3、NRP1和NRP2阳性表达率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。乳腺IDC中Foxp3表达与组织学分级、淋巴结转移和TNM分期有关(均P<0.05);NRP1和NRP2表达均与淋巴结转移和TNM分期有关(均P<0.05)。Foxp3、NRP1和NRP2表达两两均呈正相关(均P<0.05)。结论乳腺IDC中Foxp3、NRP1和NRP2呈现高表达,联合检测Foxp3、NRP1和NRP2对于评估乳腺癌的生物学特性、预后和指导治疗具有重要的临床价值。

孕晚期胎膜早破孕妇阴道内菌群变化、外周血单个核细胞FoxP3、STAT5表达及妊娠结局

目的:孕晚期胎膜早破(PROM)孕妇阴道内菌群变化、外周血单个核细胞叉头翼状螺旋转录因子3(FoxP3)、信号转导与转录激活因子5(STAT5)表达及其妊娠结局分析。方法:收集2020年6月-2021年12月本院收治的PROM孕妇(PROM组)123例和正常妊娠晚期孕妇(对照组)120例临床资料,检测分娩前阴道分泌物微生物分布,外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平及血清IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10水平,分析两组阴道菌群分布与FoxP3、STAT5 mRNA表达水平的差异。结果:PROM组乳酸杆菌患者占比(51.2%)低于对照组(75.0%),革兰阳性杆菌(15.5%)、革兰阳性球菌(13.0%)、溶血性葡萄球菌(21.1%)、粪肠球菌(25.2%)、阴沟肠杆菌(17.9%)占比高于对照组(6.7%、5.0%、8.3%、10.0%、7.5%),外周血单个核细胞FoxP3(0.78±0.12)、STAT5 mRNA(1.04±0.22)表达水平均低于对照组(1.26±0.34、1.75±0.42)(均P<0.05);与对照组比较,PROM组血清IFN-γ、IL-12水平升高,IL-4、IL-10水平降低,且PROM组阴道微生态失调孕妇外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平低于阴道微生态正常孕妇,妊娠结局不良者外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平低于妊娠结局良好者(均P<0.05)。结论:PROM患者外周血单个核细胞FoxP3、STAT5 mRNA表达水平降低,与患者阴道内菌群变化和妊娠结局有关,可能是PROM发生的相关机制。

不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响

目的探究不同范围冷消融治疗对Lewis肺癌小鼠Tregs细胞的影响。方法采用Lewis小鼠肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,选取造模成功的小鼠随机分为对照组、冷消融低范围组、冷消融中范围组、冷消融全范围组,每组5只。冷消融组予以不同冷冻范围的冷消融手术,冷消融低范围组消融面积为肿瘤的50%~60%,中范围组为60%~90%,全范围组为100%;对照组予以假手术治疗。术后14日取外周血、脾脏及肿瘤组织。流式细胞仪检测肿瘤组织、脾脏中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞数量;Western blot法检测肿瘤组织中Foxp3蛋白表达情况;qRT-PCR检测肿瘤组织中Foxp3 mRNA表达;ELISA检测外周血中细胞因子白介素(IL)-2、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果与对照组相比,冷消融中范围组脾脏组织中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞比例降低(P<0.05),冷消融各组组间相比差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,冷消融全范围组肿瘤组织中CD4^(+)CD25+FoxP3^(+)T细胞比例降低(P<0.05),冷消融各组组间相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,冷消融各组Foxp3蛋白、mRNA表达低(P<0.05),中范围、全范围组低于低范围组(P<0.05),中范围组与全范围组相比差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,冷消融各组外周血中IL-2水平均高(P<0.05),中范围组、全范围组均高于低范围组(P<0.05),全范围组低于中范围组(P<0.05)。与对照组相比,冷消融低范围组、中范围组、全范围组TGF⁃β水平均低(P<0.05),低范围组、全范围组均高于中范围组(P<0.05),全范围组高于低范围组和中范围组(P<0.05)。结论冷消融治疗不仅可直接引起肿瘤组织机械性损伤,而且可能通过抑制Tregs细胞表达抑制残余肿瘤的生长;冷消融范围60%~100%的效果优于冷消融低范围50%~60%。

参附注射液对失血性休克大鼠肺损伤的影响

目的观察参附注射液对大鼠失血性休克(HS)致肺损伤的影响并探讨潜在机制。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠36只,16~17周龄,体重400~600 g。采用随机数字表法将大鼠分为三组:假手术组(SH组)、失血性休克组(HS组)和参附注射液组(SF组),每组12只。SH组麻醉后仅分离出右股静脉和股动脉,不行动静脉置管,HS组和SF组制备HS大鼠模型。HS组经静脉导管进行液体复苏,复苏液为所失自体血加1.5倍失血量的复方氯化钠注射液与生理盐水10 ml/kg,SF组复苏液为所失自体血加1.5倍失血量的复方氯化钠注射液与参附注射液10 ml/kg,灌注时间约60 min。于术后24、48 h随机处死6只大鼠,取肺组织检测湿重与干重比(W/D),采用ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)浓度,采用PCR法检测肺组织视黄酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达量,采用Western blot法检测RORγt、Foxp3、HIF-1α、水通道蛋白1(AQP1)和AQP5蛋白含量,肺组织行HE染色后在光镜下观察病理学改变并行肺损伤评分。结果与术后24 h比较,术后48 h SF组肺组织W/D、IL-6和IL-17浓度、RORγt和HIF-1αmRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分均明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β浓度、Foxp3 mRNA表达量及蛋白含量、AQP1蛋白含量均明显升高(P<0.05)。与SH组比较,术后24、48 h HS组和SF组W/D、IL-6、IL-17、IL-10和TGF-β浓度、RORγt、Foxp3和HIF-1αmRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分均明显升高(P<0.05),AQP1、AQP5蛋白含量明显降低(P<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏,肺泡间质充满大量水肿液,其间浸润着大量炎性细胞。与HS组比较,术后24、48 h SF组W/D、IL-6和IL-17浓度、RORγt和HIF-1αmRNA表达量及蛋白含量、肺损伤评分明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β浓度、Foxp3 mRNA表达量及蛋白含量、AQP1和AQP5蛋白含量均明显升高(P<0.05),光镜下可见肺泡结构紊乱改善,水肿程度减轻,炎性细胞数量减少。结论参附注射液可调节促炎因子IL-6、IL-17与抗炎因子IL-10、TGF-β平衡,升高肺组织AQP1、AQP5蛋白含量,降低肺组织W/D和肺损伤评分,减轻HS大鼠肺损伤,机制可能与调节HIF-1α-RORγt/Foxp3平衡有关。

卵巢粒层细胞瘤的诊断和治疗研究进展

卵巢粒层细胞瘤(GCT)是一种卵巢生殖细胞肿瘤,发病率低,疾病进展缓慢,但有复发风险。卵巢GCT有明显的激素相关性临床症状,如闭经、不规则阴道出血、月经紊乱等,有助于诊断。FOXL2基因突变检测有助于诊断成人型粒层细胞瘤(AGCT),准确率较高。此外,影像学检查如超声、CT和MRI等也是重要的诊断手段,能帮助医生确定肿瘤的位置、大小和侵犯范围。血液标志物,如抗苗勒管激素、抑制素可用于AGCT患者的早期诊断和术后随访。卵巢GCT的最终诊断仍需依靠病理诊断,通过组织活检可以明确肿瘤的组织学类型和恶性程度,为患者制定合理的治疗方案提供重要依据。卵巢GCT的治疗以手术为主,必要时辅以化疗及放射治疗。手术方式包括卵巢切除术和子宫全切术。化学治疗方案主要包括铂类药物、紫杉醇类药物等,这些药物可以单独使用,也可以联合使用以提高治疗效果。除了传统的治疗方法外,一些新的治疗策略包括激素治疗、靶向治疗也取得了进展,如醋酸亮丙瑞林在二线治疗及复发性AGCT治疗方面安全有效。