tribbles同源物1在前列腺癌组织中的表达及与患者临床特征的关系

目的 探讨tribbles同源物1(TRIB1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及与患者临床特征的关系。方法 收集92例PCa患者的PCa组织和癌旁组织,采用免疫组化染色法检测TRIB1蛋白表达情况,采用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测TRIB1 mRNA相对表达量。比较PCa组织和癌旁组织中TRIB1蛋白表达情况及TRIB1mRNA相对表达量,比较不同临床特征PCa患者PCa组织中TRIB1 mRNA表达情况,采用Kendall相关分析法分析TRIB1 mRNA表达与PCa患者临床特征的相关性。结果 PCa组织中TRIB1蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织(P﹤0.01)。PCa组织中TRIB1 mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(P﹤0.01)。92例患者中,TRIB1 mRNA高表达53例,TRIB1 mRNA低表达39例。T3期、前列腺特异性抗原(PSA)水平﹥20 ng/ml、高转移负荷、Gleason评分为8~9分PCa患者PCa组织中TRIB1 mRNA高表达率分别高于T1~2期、PSA水平≤20 ng/ml、低转移负荷、Gleason评分≤7分的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TRIB1 mRNA表达与PCa患者的转移负荷无相关性(P﹥0.05),TRIB1 mRNA表达与PCa患者的T分期、PSA水平以及Gleason评分均呈正相关(P﹤0.05)。结论 TRIB1可能参与PCa的发病过程,同时PCa的恶性程度与TRIB1 mRNA表达水平有关,研究TRIB1 mRNA表达水平对PCa的诊断和临床治疗均具有重要意义。

过表达Tribbles同源蛋白3促进成纤维细胞分泌I型胶原的研究

目的探讨过表达Tribbles同源蛋白3对小鼠成纤维细胞3T3-NIH分泌胶原的影响。方法使用腺病毒载体过量表达Tribbles同源蛋白3,使用PCR以及Western blot方法检测Tribbles同源蛋白3的过量表达情况,使用天狼猩红染色试剂盒以及Western blot检测胶原的表达。结果使用过量表达Tribbles同源蛋白3的腺病毒载体可以增加成纤维细胞3T3-NIH中Tribbles同源蛋白3的转录水平以及蛋白水平的表达,并增加3T3-NIH细胞中I型胶原的蛋白表达水平,降低III型胶原的蛋白表达水平。结论过量表达Tribbles同源蛋白3可以促进小鼠成纤维细胞I型胶原的表达与分泌。

Tribble3与糖尿病大鼠心肌病变的相关性研究

目的:探讨TRB3(Tribble3)在糖尿病大鼠心肌组织中的表达及与心肌细胞凋亡和间质纤维化的相关性。方法:24只SD雄性大鼠随机分对照组12只,糖尿病组12只。建立糖尿病大鼠模型,成模8周后,检测空腹血糖和糖化血红蛋白,HE染色观察心肌组织病理改变,Masson染色观察心肌组织间质胶原含量,Tunel观察心肌细胞凋亡情况,荧光定量PCR、Western blot分别检测心肌组织TRB3 mRNA及蛋白水平的变化。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠空腹血糖及糖化血红蛋白水平明显升高(P<0.01);心肌细胞排列紊乱,肌纤维溶解、萎缩、断裂,炎症细胞浸润;间质胶原表达增加(P<0.01);心肌细胞凋亡明显增多(P<0.01);心肌组织TRB3 mRNA及蛋白水平表达升高(P<0.01)。相关性分析显示,TRB3蛋白表达与心肌细胞凋亡成正相关(r=0.668,P<0.05),与间质纤维化程度成正相关(r=0.595,P<0.05)。结论:糖尿病大鼠心肌组织中TRB3 mRNA及蛋白表达增多。TRB3可能通过促进心肌细胞凋亡,增加间质纤维含量参与糖尿病心肌病的发病机制。

Tribbles在人单核源性巨噬细胞中的表达及氧化低密度脂蛋白对其的调节作用

目的探讨人单核源性巨噬细胞中Tribbles(TRBs)的表达及氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对TRBs(TRB1、TRB2、TRB3)表达的调节。方法体外培养人单核源性巨噬细胞,应用ox-LDL处理自然分化的人单核源性巨噬细胞,采用Real-Time PCR检测人单核源性巨噬细胞TRBs mRNA的表达情况及其不同浓度的ox-LDL、低密度脂蛋白(LDL)处理不同的时间后三种TRBs mRNA的表达。结果人单核源性巨噬细胞中TRBs的表达以TRB3为主,TRB1、TRB2微量表达;ox-LDL能促进TRB2和TRB3表达,减低TRB1表达。与LDL对照组相比,50μg/mL ox-LDL刺激巨噬细胞后,TRB1 mRNA的表达减少70%(P<0.01),TRB2 mRNA的表达增加5.2倍(P<0.01),TRB3 mRNA增加3.5倍(P<0.05),并且这种调节作用均呈剂量和时间依赖性。结论本研究证实了TRBs基因在人单核源性巨噬细胞中有表达,ox-LDL能调节巨噬细胞TRBs mRNA的表达,推测TRBs特别是TRB3可能参与了ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡过程。

Tribble同源蛋白3表达对胃癌细胞增殖的影响

目的探讨Tribble同源蛋白3(TRIB3)在胃癌中表达及其对胃癌细胞增殖的影响。方法分析TCGA和GSE79973数据集TRIB3在胃癌及癌旁组织中表达及其对预后的影响。胃癌细胞株BGC823和MKN45分别用TRIB3过表达及TRIB3、β-catenin RNA干扰,再用CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测Cyclin D1、c-Myc表达,蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光检测TRIB3与β-catenin结合,染色质免疫共沉淀检测β-catenin与Cyclin D1、c-Myc启动子区结合。结果胃癌组织中TRIB3表达明显高于癌旁组织(TCGA:P<0.01;GSE79973:P<0.05),TRIB3高表达与胃癌患者不良预后相关(P<0.01)。过表达TRIB3促进胃癌细胞增殖(P<0.01),增加β-catenin与其下游靶基因Cyclin D1和c-Myc启动子区结合(P<0.01);干扰β-catenin可消除过表达TRIB3对胃癌细胞的促增殖作用(P<0.01)。结论 TRIB3可通过调控Wnt/β-catenin通路促进胃癌细胞增殖。

Tribbles同源蛋白3参与糖尿病性心肌病的机制探讨

糖尿病可以独立于高血压、心脏瓣膜疾病、冠心病等其他心脏病因素之外,导致心脏结构和功能的异常,引起糖尿病性心肌病。Tribbles同源蛋白3是肥胖、糖尿病和动脉粥样硬化等代谢性疾病的关键性枢纽蛋白,可以通过胰岛素抵抗、内质网应激、脂质代谢等一系列途径,促使糖尿病并发症的形成。

脂多糖致急性肺损伤时Tribbles同源蛋白3表达变化

目的探讨Tribbles同源蛋白3(TRB3)在脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)时的变化及其与p38-MAPK信号通路的关系。方法体内实验:复制LPS致ALI大鼠模型,分5 ml/kg生理盐水组和5 ml/kg LPS刺激组,免疫组织化学法检测肺组织中TRB3蛋白表达,RT-PCR检测肺组织TRB3 mRNA表达。体外实验:体外培养大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),随机分为LPS量效组(0、2、4、10μg/ml LPS分别孵育4 h)、LPS时效组(10μg/ml LPS分别孵育0、4、8、12 h)和p38抑制剂(SB203580)干预组(分为正常对照组、10μg/ml LPS组、10μmol/L SB203580组、10μmol/L SB203580+10μg/ml LPS组)。Western blot法检测TRB3蛋白、p-p38和p38-MAPK表达。结果免疫组织化学法显示大鼠肺泡壁和腺上皮均表达TRB3;RT-PCR法检测大鼠肺组织和大鼠PMVEC均表达TRB3 mRNA;与生理盐水组比较,LPS致ALI大鼠肺组织TRB3 mRNA表达显著增加(t=15.524,P<0.01),LPS刺激的大鼠PMVEC中TRB3 mRNA表达增加(t=7.549,P<0.01);Western blot法显示PMVEC表达TRB3蛋白的表达量随LPS浓度(0、2、4、10μg/ml)增加逐渐升高,差异有统计学意义(F=12.619,P<0.001);时效组TRB3蛋白表达量于4 h达高峰,之后下降,8 h时仍高于0 h,差异有统计学意义(F=11.273,P<0.001)。干预组:与正常对照组比较,10μg/ml LPS组诱导大鼠PMVEC的p-p38、TRB3蛋白表达量增高(t=49.121、15.113,P<0.001);10μmol/L SB203580+10μg/ml LPS组与10μg/ml LPS组比较,p-p38、TRB3蛋白表达量下降(t=7.040、11.900,P<0.05、0.001);10μmol/L SB203580组对大鼠PMVEC表达p-p38及TRB3蛋白无影响,与正常对照组比较,差异无统计学意义。结论 LPS致ALI时TRB3表达增加,TRB3表达受p38-MAPK信号通路调控。

Tribbles同源蛋白3抑制人脂肪间充质干细胞成脂向分化

目的:研究Tribbles同源蛋白3(Tribbles pseudokinase 3,TRIB3)在人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hASCs)成脂分化中的调控作用,为提高hASCs成脂向分化能力、并为基于hASCs的脂肪组织工程与软组织缺损修复提供新靶点与新思路。方法:通过慢病毒转染建立TRIB3稳定敲低(TRIB3敲低组)和过表达(TRIB3过表达组)的hASCs细胞系,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印迹实验(Western blot)检测慢病毒转染hASCs的转染效率和效果。通过油红O染色和定量、qRT-PCR等实验方法,检测敲低、过表达TRIB3对hASCs成脂分化能力的影响。结果:TRIB3敲低慢病毒转染后,TRIB3敲低组hASCs中TRIB3 mRNA表达量较对照组下降84.3%(P<0.01),TRIB3蛋白表达也显著下降,表明成功构建了TRIB3敲低的hASCs细胞系;TRIB3过表达慢病毒转染后,TRIB3过表达组TRIB3 mRNA表达量较对照组增高约1.6倍(P<0.01),TRIB3蛋白表达也显著升高,表明成功构建了TRIB3过表达的hASCs细胞系。在此基础上,油红O染色显示,TRIB3敲低的hASCs成脂诱导后胞浆内红色脂滴明显增多,定量结果表明TRIB3敲低组油红O着色较对照组显著增多(P<0.01)。与之相反,TRIB3过表达的hASCs成脂诱导后胞浆内红色脂滴明显减少,定量结果表明TRIB3敲低组油红O着色较对照组显著减少(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,敲低TRIB3的hASCs成脂诱导后,成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)和白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)mRNA水平显著升高(P<0.01);TRIB3过表达的hASCs成脂诱导后成脂分化相关基因PPARγ、CD36和脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA水平明显下降。结论:TRIB3能够调控hASCs成脂分化能力,敲低TRIB3促进hASCs成脂分化,过表达TRIB3抑制hASCs成脂分化。

敲低Tribbles同源蛋白3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖

目的研究敲低Tribbles同源蛋白(TRIB)3对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响。方法用AngⅡ处理心肌成纤维细胞,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹法检测细胞中TRIB3表达情况。心肌成纤维细胞转染TRIB3siRNA慢病毒载体,经AngⅡ处理后,qRT-PCR和Western印迹检测干扰效率。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,羟脯氨酸法检测胶原合成,Western印迹法检测细胞中Ⅰ型胶原(COLL)Ⅰ、COLLⅡ和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达,硝酸还原法检测培养液中一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)活性。结果AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞中的TRIB3表达水平升高(P<0.01)。TRIB3siRNA慢病毒载体可明显下调AngⅡ条件下心肌成纤维细胞中TRIB3的表达水平(P<0.05)。AngⅡ处理后的心肌成纤维细胞增殖能力升高(P<0.05),细胞胶原合成增多(P<0.05),细胞中COLLⅠ、COLLⅡ蛋白水平升高(P<0.05),MMP-2水平降低(P<0.05),培养液中NO含量降低(P<0.05),iNOS活性降低(P<0.05)。下调TRIB3能够降低AngⅡ条件下心肌成纤维细胞增殖能力(P<0.05),减少细胞胶原合成(P<0.05),降低细胞中COLLⅠ、COLLⅡ蛋白表达(P<0.05),促进细胞中MMP-2蛋白表达(P<0.05),促进细胞分泌NO(P<0.05),提高细胞iNOS活性(P<0.05)。结论敲低TRIB3能够抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖,减少胶原合成,促进细胞分泌NO。

Tribbles相关蛋白及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白在非酒精性脂肪肝中的表达变化

目的:对Tribbles相关蛋白3(Tribbles related protein 3,TRB3)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)在高脂高糖饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达变化进行研究并探讨他们在NAFLD中的作用.方法:将30只Wistar大鼠随机分为正常组和NAFLD模型组,每组各15只.模型组大鼠采用高脂高糖饮食诱导NAFLD,正常组大鼠则给予普通饲料喂养,造模时间总计为16 wk.血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein,HDL)和低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,LDL)的含量采用全自动生化分析仪进行检测;应用PCR技术对肝脏中TRB3及CHOP m RNA水平的改变进行检测;应用免疫组织化学技术对肝脏中TRB3及CHOP蛋白水平的改变进行检测;采用流式细胞仪检测细胞凋亡改变.结果:模型组大鼠血清中TC、TG和LDL含量较正常组大鼠显著升高(P<0.05),而HDL则明显低于正常组(P<0.05);与正常组相比,模型组大鼠肝脏中TRB3及CHOP m RNA水平均显著增加(P<0.05或P<0.01);免疫组织化学结果显示模型组大鼠肝脏中TRB3及CHOP蛋白表达水平较正常组大鼠显著升高(P<0.01);此外流式细胞仪对大鼠肝细胞凋亡进行检测发现,模型组大鼠肝细胞凋亡与正常组相比明显增多.结论:TRB3和CHOP在基因及蛋白水平表达上调可能与高脂高糖诱导的NAFLD的发生发展有关.

Tribbles同源蛋白3与糖尿病及其并发症研究进展

糖尿病是以高血糖为特征的一组代谢性疾病。Tribbles同源蛋白3(Tribbleshomologyprotein3,TRIB3)是发现于果蝇体内一种应激相关蛋白,参与多个信号转导通路,可发挥广泛的生物学功能。其在血糖和脂质代谢,细胞凋亡,分化和应激中发挥重要作用。几项研究均表明TRIB3在胰岛素靶组织中的上调表达可介导胰岛β细胞的凋亡和胰岛素抵抗。因此与2型糖尿病及其并发症的发生发展密切相关。

辛伐他汀对脂多糖刺激人脐静脉内皮细胞Tribbles表达的影响

目的研究脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)肿瘤坏死因子(TNF-α)和TribblesmRNA表达变化及辛伐他汀对其表达的影响。方法实验分为12 h组和24 h组,各组又分为空白对照组、脂多糖(100 ng/ml)组、辛伐他汀(5μg/ml)组、辛伐他汀(5μg/ml)和脂多糖(100 ng/ml)共作用组,用实时荧光定量PCR测定LPS刺激后12 h和24 h HUVECsTNF-α和Trb1、Trb2及Trb3的mRNA表达变化。结果与对照组相比,脂多糖组TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达均明显增加(P均<0.05);与脂多糖组相比,辛伐他汀和脂多糖共作用组TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达均明显降低(P均<0.05)。结论辛伐他汀可抑制HU-VECs的TNF-α、Trb1及Trb3的表达。

Tribbles同源蛋白3在肝脏疾病中的作用和调控机制

Tribbles同源蛋白3(TRIB3)是假激酶Tribbles家族的一员,在调节各种细胞应激与代谢过程中发挥重要作用。近期研究揭示TRIB3与多种蛋白质结合,充当衔接蛋白发挥其生物学功能。在慢性肝病和肝癌发病过程中,TRIB3表达上调并通过多种机制促进疾病进展和肿瘤耐药。通过调节TRIB3表达及干扰其与靶蛋白的相互作用可减缓肝病进程并抑制肿瘤生长。现就TRIB3在肝脏疾病中的作用及其调控机制进行综述,以期为肝病的预防和治疗提供新思路。

Tribble 3在糖尿病心肌病心肌间质重构时的表达和缬沙坦干预的影响

目的探讨Tribble3(TRB3)基因在大鼠Ⅱ型糖尿病心肌病心肌间质重构中的可能作用及缬沙坦干预的影响。方法32只Wistar大鼠以高脂高热量饮食诱导加小剂量链脲佐菌素注射建立Ⅱ型糖尿病心肌病动物模型,随机分为糖尿病心肌病组和缬沙坦治疗组(缬沙坦30mg·kg-1·d-1灌胃),以8只正常大鼠作对照。采用Masson染色测定心肌胶原含量,实时定量逆转录-聚合酶链反应检测心肌TRB3mRNA表达。结果与对照组比较,糖尿病心肌病组左室心肌组织胶原含量显著高(11·01±3·05比16·92±3·18,P<0·01),与糖尿病心肌病组相比,缬沙坦组心肌胶原含量明显低(16·92±3·18比13·23±3·14,P<0·05),心肌组织胶原含量与空腹血糖呈明显正相关(r=0·746,P<0·01);与对照组相比,糖尿病心肌病组大鼠心肌TRB3mRNA表达水平明显高(0·0198±0·0082比0·1108±0·0933,P<0·05);与糖尿病心肌病组比较,缬沙坦组TRB3mRNA表达水平明显低(0·1108±0·0933比0·0367±0·0234,P<0·05);与对照组比较,缬沙坦组TRB3mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0·05);糖尿病心肌病组大鼠心肌TRB3mRNA表达与血糖正相关(r=0·69,P<0·05),与心肌组织胶原含量正相关(r=0·67,P<0·05)。结论首次证实TRB3基因在大鼠心肌中表达,发现了TRB3基因可能参与了糖尿病心肌病心肌间质重构,缬沙坦干预减轻糖尿病心肌病心肌间质重构,改善左室舒张和收缩功能,下调TRB基因的表达。

微小RNA-224靶向Tribbles同源蛋白1调控前列腺癌细胞DU145的迁移和侵袭

目的观察微小RNA-224（miR-224）对前列腺癌细胞DUl45迁移和侵袭能力的影响以及对靶基因Tribbles同源蛋白1（TRIBl）表达的影响。方法通过慢病毒转染前列腺癌细胞株DU145使其过表达miR-224，利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力；采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和Westernblot检测细胞TRIBl表达水平的变化，并通过荧光素酶实验验证miR-224与TRIBl基因的直接调控关系。设计拯救实验并重新利用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭。结果划痕实验24h后DUl45—224和DU145-vector组细胞的迁移细胞数目分别为（103．2±20．6）、（189．8±34．7）个，miR-224过表达组细胞迁移能力明显下降（P〈0．01）；Transwell细胞侵袭实验显示，DUl45-224组和DU145-vector组细胞分别为（140．8±13．1）、（283．4±15．4）个，组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。过表达miR-224后，DUl45细胞TRIBl的蛋白表达下调（P〈0．05）。荧光素酶报告实验结果显示实验组荧光素酶活性值为0．42±0．06，比对照组（0．97±0．09）显著降低（P〈0．01），提示miR-224能明显抑制TRIB1—3’端非编码区域（3’-UTR）的荧光素酶活性。拯救实验结果表明在miR-224过表达的DUl45细胞中进一步转入高表达TRIBl质粒后，迁移细胞数目为（203．2±31．2）个、侵袭细胞数目为（328．6±25．9）个，对比单纯miR-224过表达DUl45细胞[迁移细胞数目为（73．2-4-17．8）个；侵袭细胞数目为（101．2±13．1）个]，迁移和侵袭能力增强，组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论过表达miR-224可能通过靶向降低TRIBl基因的蛋白表达，抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力。

Tribbles同源蛋白3的功能研究进展

Tribbles同源蛋白3 (TRB3)具有广泛的生物学功能,如参与肿瘤调控、胰岛素抵抗的发生、内质网应激反应、炎症调节和细胞生长分化的调控等。TRB3作为关键的"压力调节开关",参与众多疾病的调控,并作为很多疾病的生物标志物和潜在的治疗靶点。本文就近年来有关TRB3的生物学功能研究做一概述,以期为TRB3功能的进一步研究提供一定的理论基础。

大鼠Tribble3基因真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建并鉴定大鼠Tribble3基因的真核表达载体。方法:根据Gen Bank数据库提供的基因序列,设计合成大鼠Tribble3基因CDS扩增引物,RT-PCR法获得目的基因,T载体连接测序后,构建p EGFP-N1-Tribble3真核表达载体,双酶切鉴定。结果:RT-PCR扩增大鼠Tribble3基因片段为1047bp,与预期大小相符;测序结果表明该目的基因序列与Gen Bank公布序列一致;构建的重组质粒p EGFP-N1-Tribble3双酶切鉴定正确。结论:成功构建了大鼠Tribble3基因的真核表达载体。

Db/db小鼠肾脏中Tribble3的表达及其与肾脏纤维化的关系

目的探讨假性激酶Tribble3(TRB3)在db/db小鼠不同阶段肾脏组织中的表达及其与糖尿病肾病(DN)所致肾脏纤维化的关系。方法 12周龄雄性db/db小鼠15只为模型组(DN),db/m小鼠15只为对照组(C)。每周监测随机血糖,分别在16、20、25周龄取材并检测体质量(WB)、24 h尿蛋白量(UAE)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)。通过苏木精-伊红(HE)染色、高碘酸-无色品红(PAS)染色、马松三色(Masson)染色观察肾组织病理改变,并检测肾小球系膜基质相对面积和间质纤维化程度,免疫组化法检测TRB3在肾组织中的表达,RT-PCR、Western blotting分别检测TRB3、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及蛋白水平的变化。结果与同周龄C相比,DN的UAE、Scr和BUN均明显升高(P<0.05,P<0.01);肾小球系膜及基底膜相对面积在20、25周龄时差异有统计学意义(P<0.01),肾间质纤维组织相对面积在16、20、25周龄时差异均有统计学意义(P<0.01);20周DN的TRB3 mRNA及蛋白、TGF-β1mRNA与25周DN的TRB3、TGF-β1 mRNA及蛋白水平均显著升高(P<0.05,P<0.01),且均随病程进展呈上升趋势;相关性分析结果显示,DN的TRB3蛋白表达与TGF-β1表达水平呈正相关(r=0.944,P<0.01),与肾间质纤维化程度呈正相关(r=0.857,P<0.05)。结论与同周龄db/m小鼠相比,TRB3在db/db小鼠的肾脏组织中表达量升高,且与纤维化因子TGF-β1的表达量及间质纤维化程度具有正相关性。

微小RNA-29b通过靶向调节Tribbles假激酶2的表达促进结直肠肿瘤的衰老

目的探讨结直肠肿瘤中微小RNA(miRNA,miR)-29b对Tribbles假激酶2(TRIB2)调节的机制.方法利用网上在线数据库分析潜在结合TRIB2的3'端非编码区(3'UTR)的miRNA,选取其中评分最高的miR-29b进行研究;利用真核细胞转染技术,干扰结直肠肿瘤细胞中miR-29b的表达;蛋白质印迹法(Western blot)以及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测各组细胞中TRIB2的蛋白及mRNA表达差异;利用双荧光素酶报告基因实验确认miR-29b结合在TRIB2-3'UTR上的具体位置;β-半乳糖苷酶染色法检测miR-29b对结直肠肿瘤细胞衰老的影响.统计学分析均应用SPSS 24.0软件进行,两组间统计学差异通过双尾t检验进行分析.结果在结肠癌细胞株中过表达miR-29b后,与对照组比较,TRIB2的mRNA水平下降至(63.468±4.154)%和(43.145±7.523)%(t=5.351,P<0.01和t=6.074,P<0.01);转入针对miR-29b的inhibitor后,TRIB2的mRNA水平则升高至(205.033±27.070)%和(233.353±18.649)%(t=4.663,P<0.01和t=9.411,P<0.01).与上述结果一致,转入miR-29b则抑制,inhibitor则上调TRIB2的蛋白水平.而在结肠癌细胞中过表达miR-29b后,野生型TRIB2-3'UTR质粒的荧光素酶活性分别下降至(53.531±3.787)%和(45.051±1.728)%(t=6.928,P<0.01和t=15.570,P<0.01),而突变型TRIB2-3'UTR质粒的荧光素酶活性只有轻微下降[下降至(87.366±3.825)%和(92.839±3.171)%,t=5.578,P<0.01和t=2.245,P>0.05].过表达miR-29b后,结肠癌细胞中衰老的细胞比例从41.473%升高至62.085%(χ^2=19.731,P<0.01),同时过表达TRIB2后,则下降至46.866%(χ^2=12.031,P<0.01).结论miR-29b可靶向调控TRIB2的表达,促进结直肠肿瘤的衰老.

Highlights of the 2nd International Symposium on Tribbles and Diseases: tribbles tremble in therapeutics for immunity, metabolism, fundamental cell biology and cancer

The Tribbles(TRIB) family of pseudokinase proteins has been shown to play key roles in cell cycle, metabolic diseases, chronic inflammatory disease, and cancer development. A better understanding of the mechanisms of TRIB pseudokinases could provide new insights for disease development and help promote TRIB proteins as novel therapeutic targets for drug discovery. At the 2 nd International Symposium on Tribbles and Diseases held on May 7–9, 2018 in Beijing, China, a group of leading Tribbles scientists reported their findings and ongoing studies about the effects of the different TRIB proteins in the areas of immunity, metabolism, fundamental cell biology and cancer. Here, we summarize important and insightful overviews from 4 keynote lectures, 13 plenary lectures and 8 short talks that took place during this meeting. These findings may offer new insights for the understanding of the roles of TRIB pseudokinases in the development of various diseases.