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Th17 Cells Influence Intestinal Muscle Contraction during Trichinella spiralis Infection 被引量:1
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作者 付妤 王文峰 +4 位作者 童晶晶 潘琦 龙艳芹 钱伟 侯晓华 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2009年第4期481-485,共5页
Trichinella spiralis infection in rodents is a well-known model of intestinal inflammation associated with hypermotility. The aim of the study was to use this experimental model to elucidate if Thl 7 cells are involve... Trichinella spiralis infection in rodents is a well-known model of intestinal inflammation associated with hypermotility. The aim of the study was to use this experimental model to elucidate if Thl 7 cells are involved in the development of gastrointestinal hypermotility. Colonic smooth muscle contractility was investigated in response to acetylcholine. The levels of IL-17, IL-23 and TGF-β1 in colon were measured by Western blotting. Flow cytometric detection of intracellular IFN-7/IL-4/ IL- 17 cytokine production was used to analyze the proportions of CD4+ T cells subsets in colon. Our results showed that colonic muscle contractility was increased 2 weeks post infection (PI) and stayed high 12 weeks PI when no discernible inflammation was present in the gut. The proportion of Th17 cells and the expression of IL-17 were up-regulated in colon 2 weeks PI and returned to normal 8 weeks PI. The content of IL-17 was correlated with the colonic smooth muscle hypercontracility 2 weeks PI. Meanwhile, TGF-β1 was increased 2 weeks PI, while IL-23 was normal. Our results suggest that Th17 cells affect the colonic muscle contractility in mice infected with Trichinella spiralis at intestine stage but not at muscle stage and the effect of Th17 cells on muscle contractility might be induced by TGF-β1. Other cytokines might be involved in the hypercontracility of colonic smooth muscle at muscle stage. 展开更多
关键词 Th 17 IL-23 TGF-Β1 trichinella spiralis intestine contractility
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Preliminary study of immunodiagnosis of trichinosis by ELISA using urea-soluble antigen of Trichinella spiralis
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作者 张津利 赖福春 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1991年第1期84-87,92,共5页
Urea-soluble antigens of Trichinella spiralis infected larva were preparedand the efficiency of the antigens in diagnosis of trichinosis by ELISA wasstudied.Specific IgG antibodies were detected by ELISA using urea-so... Urea-soluble antigens of Trichinella spiralis infected larva were preparedand the efficiency of the antigens in diagnosis of trichinosis by ELISA wasstudied.Specific IgG antibodies were detected by ELISA using urea-solubleantigens in 91.67% (22/24) of 24 serum samples taken from patients withtrichinosis and 91.67% (11/12) of 12 blood spots on filter paper.Specific IgMantibodies were seen in 95.24% (20/21) of 21 serum samples from patients withtrichinosis using the antigens.Sera of patients infected with Schistosoma japonicumhad some cross teactions to the antigens,but the sera of mice infected withSchistosoma japoni(?) Ancylostoma caninum larva and Plasmodium yoelti were allnegative in the test. 展开更多
关键词 TRICHINOSIS FLISA ANTIGENS trichinella spiralis
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Phenotypic Characterization of the Response to Infection with <i>Trichinella spiralis</i>in Genetically Defined Mouse Lines of the CBi-IGE Stock
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作者 María D. Vasconi Griselda Bertorini +3 位作者 Ana V. Codina Paula Indelman Ricardo J. Di Masso Lucila I. Hinrichsen 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2015年第5期111-122,共12页
Trichinella spiralis (T. spiralis), which is a cosmopolitan nematode that infects humans among other species, presents a complex host-parasite relationship that hinders the development of tools to eradicate the parasi... Trichinella spiralis (T. spiralis), which is a cosmopolitan nematode that infects humans among other species, presents a complex host-parasite relationship that hinders the development of tools to eradicate the parasitosis. The aim of this research was to analyze the host response during a primary infection with T. spiralis in five genetically different mouse lines of the CBi-IGE stock. Adult males from the CBi+, CBi&minus;, CBi, CBi/L and CBi/C lines were infected with 1, 2 or 4 L1 larvae per g of body weight. In the chronic stage, the number of parasites per g of tissue (relative larval load, rLL) showed a significant host genotype-dose interaction, since it did not increase in the same way in the five genotypes. At the lowest dose, both CBii&minus;and CBi/L mice were resistant while CBi+, CBi/C, and CBi were susceptible. At the highest dose, only CBi/L remained resistant, and CBi+ was the most susceptible. The reproductive capacity index of adult worms (RCI = rLL/infective dose) evinced only a genotype effect, allowing rating each line as resistant or susceptible regardless of dose. Animals receiving 2 L1 larvae were also sacrificed in the intestinal phase (6 and 13 days p-i) to determine the number of adult parasites (nAP) recovered in a small intestine segment, and female fecundity (Ff). No differences in nAP were observed among genotypes on day 6 p-i. nAP decreased between days 6 and 13 p-i, this reduction being different among genotypes and significant only in CBi/L and CBi/C. Ff decreased in CBi/L and CBi/C on day 13 p-i. At the time of infection, serum cytokine baseline values showed a Th1 orientation for genotype CBi/L (high IFN-γ and IL-2) and a Th2 for CBi+ (high IL-4 and IL-10).The variability in the response observed in this murine model suggests its potential usefulness to gain insight into the mechanisms that regulate host-parasite relationship. 展开更多
关键词 Host Genotype-Parasite Relationship Gastrointestinal NEMATODE trichinella spiralis Infectivity Resistance
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Analysis of Diagnostic Efficiency of Excretory-Secretory Antigens for <i>Trichinella spiralis</i>and <i>Trichinella nativa</i>in ELISA
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作者 Irina Odoevskaya Sergey Movsesyan +1 位作者 Mikhail Voronin Nataya Chiljuta 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2014年第9期183-189,共7页
The comparative studies of diagnostic efficiency of excretory-secretory antigens of Trichinella spiralis and Trichinella nativa were performed using blood sera of rats from Wistar line experimentally infected with Arc... The comparative studies of diagnostic efficiency of excretory-secretory antigens of Trichinella spiralis and Trichinella nativa were performed using blood sera of rats from Wistar line experimentally infected with Arctic trichinellae. For animal infection and antigen preparation Trichinella from muscles of wild carnivorous mammals from Arctic regions of Russia were used. When antigen from T. nativa larvae was used to analyze titers of sera of rats experimentally infected with Arctic Trichinella, a significant increase in efficacy ofELISAwas detected. E.g., sera of rats infected with trichinellae from ringed seals retained in ELISA with T. nativa antigen values higher than diagnostic level at titers of 1:6400 - 1:12800, while titer of those same sera when using T. spiralis antigen was no higher than 1:200 - 1:400. 展开更多
关键词 ELISA trichinella nativa Diagnostic Efficiency Laboratory Infection Wistar Rats Blood SERA Excretory-Secretory Antigen
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RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM(RFLP) ANALYSIS OF GENOMIC DNA OF 5 STRAINS OF TRICHINELLA SPIRALIS IN CHINA
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作者 王虹 张月清 +1 位作者 劳为德 吴赵永 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1995年第3期131-135,共5页
RESTRICTIONFRAGMENTLENGTHPOLYMORPHISM(RFLP)ANALYSISOFGENOMICDNAOF5STRAINSOFTRICHINELLASPIRALISINCHINAWangHon... RESTRICTIONFRAGMENTLENGTHPOLYMORPHISM(RFLP)ANALYSISOFGENOMICDNAOF5STRAINSOFTRICHINELLASPIRALISINCHINAWangHong(王虹)ZhangYueqing... 展开更多
关键词 RFLP 旋毛虫 DNA 寄生虫 基因组
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旋毛虫钙网蛋白对小鼠巨噬细胞和大鼠PBMC免疫功能的影响
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作者 张朝莹 文兆海 +6 位作者 张玥 李嫄 徐立新 陆明敏 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-8,共8页
[目的]本文旨在研究旋毛虫钙网蛋白(TsCRT)对宿主免疫系统的影响。[方法]将原核表达纯化的重组旋毛虫钙网蛋白(rTsCRT)进行Western Blot验证;将rTsCRT与小鼠巨噬细胞共孵育,检测该蛋白对小鼠巨噬细胞增殖、NO释放和凋亡的影响;将rTsCRT... [目的]本文旨在研究旋毛虫钙网蛋白(TsCRT)对宿主免疫系统的影响。[方法]将原核表达纯化的重组旋毛虫钙网蛋白(rTsCRT)进行Western Blot验证;将rTsCRT与小鼠巨噬细胞共孵育,检测该蛋白对小鼠巨噬细胞增殖、NO释放和凋亡的影响;将rTsCRT与大鼠外周血单核细胞(PBMC)共孵育,检测该蛋白对大鼠PBMC转录因子和细胞因子的影响。[结果]Western blot结果显示,rTsCRT可以被感染旋毛虫的大鼠血清所识别;rTsCRT可促进小鼠巨噬细胞的增殖和NO的分泌,抑制小鼠巨噬细胞的凋亡;rTsCRT下调大鼠PBMC转录因子T-bet、Gata-3和PU.1的转录水平,上调Foxp3、Ahr、RORγt和Bcl-6的转录水平;rTsCRT上调大鼠PBMC细胞因子IFN-γ、IL-17、IL-10、TGF-β、Il-9和IL-22的转录水平,下调IL-4和IL-21的转录水平。[结论]旋毛虫钙网蛋白可刺激宿主产生Th1、Th17、Treg、Th9和Th22等多种类型的免疫反应,抑制Th2和Tfh免疫,对宿主免疫调节作用复杂。 展开更多
关键词 旋毛虫 钙网蛋白 巨噬细胞 PBMC 免疫调节
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旋毛虫免疫逃避机制的研究进展
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作者 钱艳红 宋帅 +4 位作者 温肖会 贾春玲 吕殿红 袁子国 罗胜军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期70-75,共6页
旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种全球分布的食源性人兽共患寄生虫病,对动物生产和人兽公共卫生安全造成严重危害。旋毛虫发育史复杂,整个生命周期都在同一宿主体内完成,为了能与宿主相互共存,其进化出各种免疫逃避机制来躲避宿主的免疫清... 旋毛虫病是由旋毛虫引起的一种全球分布的食源性人兽共患寄生虫病,对动物生产和人兽公共卫生安全造成严重危害。旋毛虫发育史复杂,整个生命周期都在同一宿主体内完成,为了能与宿主相互共存,其进化出各种免疫逃避机制来躲避宿主的免疫清除,从而建立长期的慢性感染。本研究从旋毛虫抗原变异、对宿主的免疫调节作用和通过形成包囊产生免疫隔离3个方面,对其免疫逃避机制进行阐述,将为深入了解旋毛虫的致病机制提供重要帮助。 展开更多
关键词 旋毛虫 感染 免疫逃避
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旋毛虫病疫苗研究进展
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作者 杨承鑫 孙希萌 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2024年第1期46-52,共7页
旋毛虫病是一种由旋毛虫感染而引起的人兽共患病,人因食入生的或未煮熟肉类而患病。该病在世界上广泛分布,从发现至今已有188年的历史。通过肉类制品的传播可能导致旋毛虫病的暴发,从而产生更广泛的社会影响。本文通过梳理近10年的文献... 旋毛虫病是一种由旋毛虫感染而引起的人兽共患病,人因食入生的或未煮熟肉类而患病。该病在世界上广泛分布,从发现至今已有188年的历史。通过肉类制品的传播可能导致旋毛虫病的暴发,从而产生更广泛的社会影响。本文通过梳理近10年的文献,综合分析旋毛虫病疫苗研究进展,为基于疫苗的旋毛虫病防控工作提供参考。 展开更多
关键词 旋毛虫 旋毛虫病 疫苗 防治
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基于蛋白组学分析旋毛虫原肌球蛋白过表达对小细胞肺癌NCI-H446细胞蛋白组分的影响 被引量:1
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作者 王灏轩 朱莹莹 +2 位作者 程露阳 郭文平 杜娈英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期758-765,共8页
目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞... 目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞蛋白组分的影响。比较旋毛虫Tm(Tm-pcDNA3.1)过表达和转染空载体(pcDNA3.1)48 h后NCI-H446细胞的蛋白组分,利用Uniprot数据库检索差异表达蛋白(Differentially expressed protein,DEPs)并对所得DEPs进行基因本体论(GO)富集分析。从STRING数据库获得DEPs相互作用数据,利用Cytoscape 3.9.0软件构建蛋白互作网络并筛选中心节点蛋白。通过Western blot对随机选取的中心节点蛋白NDRG1进行验证。结果旋毛虫Tm转染NCI-H446细胞48 h后,筛选出DEPs 70个,其中34个上调,36个下调;GO功能富集分析显示,DEPs主要涉及转录后的调控、免疫应答的调节等生物学功能;分析蛋白互作网络获得5个下调的中心节点蛋白:细胞周期蛋白G相关激酶(GAK)、组蛋白H3-7(H3-7)、辛普勒金Symplekin(SYMPK)、N-myc下游调节因子1(NDRG1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(PKN2);Westrne blot结果显示旋毛虫Tm降低NCI-H446细胞中NDRG1的表达。结论旋毛虫TM能引起NCI-H446细胞蛋白组分的显著变化;旋毛虫Tm可能通过下调NCI-H446细胞中GAK、H3-7、SYMPK、NDRG1、PKN2的表达发挥其生物学作用。 展开更多
关键词 旋毛虫 原肌球蛋白 小细胞肺癌NCI-H446细胞 蛋白组学
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旋毛虫鸟氨酸脱羧酶对旋毛虫抗酸能力调控的研究
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作者 侯嘉茗 杨啸 +7 位作者 王雪莹 薄禄琪 王爽 张博涵 张鉴慧 阮入琳 宋铭忻 白志坤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期302-309,共8页
为探究旋毛虫体内是否存在鸟氨酸依赖性抗酸系统(AR5)及旋毛虫鸟氨酸脱羧酶(TsODC)对旋毛虫抗酸能力的调控作用,本实验分别采用p H1.5、p H2.5、p H4.5、p H6.6的培养液以及PBS(pH7.4)作为对照组分别培养0.5 h、1 h和2 h后,通过统计旋... 为探究旋毛虫体内是否存在鸟氨酸依赖性抗酸系统(AR5)及旋毛虫鸟氨酸脱羧酶(TsODC)对旋毛虫抗酸能力的调控作用,本实验分别采用p H1.5、p H2.5、p H4.5、p H6.6的培养液以及PBS(pH7.4)作为对照组分别培养0.5 h、1 h和2 h后,通过统计旋毛虫肌幼虫的存活率、采用荧光定量PCR(qPCR)和western blot,分别筛选旋毛虫肌幼虫体外最适酸处理条件。结果显示,在酸度为p H2.5培养2 h时,肌幼虫的存活率为51%(此时死亡数与存活数基本相等)及Ts ODC基因的转录和表达水平最高。因此,p H2.5培养2 h为旋毛虫肌幼虫体外最佳酸处理条件。于培养液中分别添加不同浓度的精氨酸、Ts ODC多抗血清、姜黄素和雷帕霉素,以PBS作为对照组分别培养12 h、24 h和48 h后,采用上述最佳酸处理条件处理后,通过计算肌幼虫存活率,采用q PCR检测Ts ODC基因的转录水平并初步筛选不同制剂的最佳培养浓度及时间,并在各最佳浓度和时间培养后,再经最佳酸处理条件处理,采用western blot检测Ts ODC蛋白的表达,分析各制剂对旋毛虫抗酸能力的调控作用;从旋毛虫感染42 d的小鼠中收集肌幼虫并采集小鼠的膈肌,分别制备冰冻切片,采用间接免疫荧光试验(IFA)检测Ts ODC蛋白在肌幼虫中的分布。存活率结果显示,与PBS对照组相比,当添加浓度为10μg/mL的精氨酸培养24 h时,肌幼虫存活率提高27%,Ts ODC基因转录水平和蛋白表达水平分别提高83.3%和68%(P<0.01);当添加浓度为1 mg/mL的Ts ODC多抗血清、20μmol/L的姜黄素和2μmol/L的雷帕霉素均培养48 h时,肌幼虫存活率分别下降13%、18%和26%,Ts ODC基因转录水平分别降低24.1%、27.1%和37.7%(P<0.01)及其蛋白表达水平分别降低11.6%、25.8%(P<0.05)和47.8%(P<0.01)。IFA结果显示,绿色荧光信号主要出现在肌幼虫的表皮层、头部的唇乳突及尾部的生殖原基。上述结果表明,精氨酸可以通过上调Ts ODC基因的转录和表达水平提高旋毛虫的抗酸能力,而Ts ODC多抗血清、姜黄素和雷帕霉素则通过降低Ts ODC基因的转录和表达水平消弱旋毛虫的抗酸能力;Ts ODC可能是分泌蛋白且与旋毛虫的生长发育和繁殖有关。综上所述,本研究首次证实在旋毛虫肌幼虫中存在AR5,且其中的Ts ODC能够正调控旋毛虫的抗酸作用,为深入研究旋毛虫抗酸机制提供参考依据。 展开更多
关键词 旋毛虫 旋毛虫鸟氨酸脱羧酶 抗酸性 精氨酸 姜黄素 雷帕霉素
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6种活性化合物对旋毛虫各期虫体的体外杀伤作用
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作者 徐媛滨 张念章 +5 位作者 李文卉 刘垠鞠 牛栋玉 陈卫刚 付宝权 孙晓林 《动物医学进展》 北大核心 2023年第8期53-58,共6页
为了筛选有效活性化合物对旋毛虫不同发育时期虫体的体外杀伤作用,采用体外培养的方式测定三氯生等6种活性化合物对旋毛虫的体外杀伤效果,用倒置显微镜观察旋毛虫形态并计数。结果显示,三氯生对旋毛虫肌幼虫、成虫、新生幼虫均有明显杀... 为了筛选有效活性化合物对旋毛虫不同发育时期虫体的体外杀伤作用,采用体外培养的方式测定三氯生等6种活性化合物对旋毛虫的体外杀伤效果,用倒置显微镜观察旋毛虫形态并计数。结果显示,三氯生对旋毛虫肌幼虫、成虫、新生幼虫均有明显杀伤作用(P<0.01),没食子酸辛酯对旋毛虫成虫和新生幼虫有明显杀伤作用(P<0.01),吡咯-2-羧酸、邻羟基苯乙酸、亚精胺盐酸盐、1,5-戊二胺仅对旋毛虫新生幼虫有杀伤作用(P<0.05)。亚精胺盐酸盐在高浓度下对肌幼虫有杀伤作用但效果不佳。结果表明,这6种活性化合物对旋毛虫各时期有虽有不同程度的杀伤作用,但只有三氯生对旋毛虫3个时期均具有明显的杀伤效果,该筛选结果为进一步开展体内试验研究提供了依据。 展开更多
关键词 活性化合物 旋毛虫 三氯生 体外试验 杀伤作用
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旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2对宿主免疫功能的影响
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作者 孙晓轲 陆滢滢 +6 位作者 齐萌 陈伟 陆明敏 徐立新 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期727-737,共11页
[目的]本文旨在分析旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2(GLIPR1L2)对宿主免疫功能的影响。[方法]用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆旋毛虫GLIPR1L2基因,构建表达载体,获得重组蛋白(rGLIPR1L2),用Western blot分析rGLIPR1L2的反应原性。将大鼠... [目的]本文旨在分析旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2(GLIPR1L2)对宿主免疫功能的影响。[方法]用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆旋毛虫GLIPR1L2基因,构建表达载体,获得重组蛋白(rGLIPR1L2),用Western blot分析rGLIPR1L2的反应原性。将大鼠外周血单核细胞(PBMC)与rGLIPR1L2共孵育,用免疫荧光检测技术(IFA)检测rGLIPR1L2与大鼠PBMC的结合,分析rGLIPR1L2对细胞增殖、迁移、NO分泌、吞噬功能和细胞凋亡的影响。大鼠腹腔注射rGLIPR1L2后,测定血清中IL-4、IL-9、IL-17、TGF-β、IFN-γ等细胞因子的变化。背部皮下多点注射对小鼠进行免疫后,ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体的变化,收集旋毛虫成虫和肌肉幼虫并计数,分析rGLIPR1L2的免疫保护作用。[结果]体外试验表明,rGLIPR1L2能够促进大鼠PBMC的增殖与迁移,增强细胞NO分泌和吞噬功能,一定浓度下可提高细胞凋亡比例。体内试验显示rGLIPR1L2能促进大鼠IL-4分泌,但对细胞因子IFN-γ、IL-9、IL-17和TGF-β的分泌无显著影响。rGLIPR1L2免疫小鼠可引起其体内特异性IgG抗体水平显著升高,且可显著减少受感染小鼠的肌肉幼虫数。[结论]旋毛虫胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2能通过多种途径影响宿主免疫功能。 展开更多
关键词 旋毛虫 胶质瘤致病相关蛋白1样蛋白2 外周血单核细胞 免疫保护
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siRNA-757干扰旋毛虫Ts-ODC基因对其抗酸能力的影响
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作者 薄禄琪 王雪莹 +7 位作者 侯嘉茗 张力 张鉴慧 阮入琳 张博涵 王爽 宋铭忻 张子群 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2114-2125,共12页
旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最... 旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最佳干扰siRNA分子及最佳干扰条件;并在pH 1.5、2.5、4.5和6.6的条件下将肌幼虫分别培养0.5、1和2 h,从肌幼虫Ts-ODC基因转录水平、酶活性及存活率等方面分析Ts-ODC基因干扰对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响;将Ts-ODC基因被干扰的旋毛虫肌幼虫感染小鼠,在7和42 d时分别收集成虫和肌幼虫,分别计算其减虫率;将子一代肌幼虫在pH 2.5的酸性条件下培养2 h,计算其存活率,对Ts-ODC基因干扰的遗传性进行分析。结果显示,Ts-ODC siRNA-757为最佳干扰分子,转染12 h、浓度为2μmol·L^(-1)培养3 d时为最佳干扰条件;各组pH 2.5培养2 h时Ts-ODC基因转录水平最高,pH 1.5培养2 h时虫体的存活率明显低于其他培养条件(P<0.01),pH 4.5培养0.5 h时虫体体内酶活性最高;转染Ts-ODC siRNA-757的肌幼虫接种小鼠后,7 d时成虫和42 d时肌幼虫的减虫率分别为58.95%和65.91%;其子一代肌幼虫在pH 2.5的培养液内培养2 h时其存活率为49%。综上表明,旋毛虫肌幼虫体内具有鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究首次通过siRNA技术干扰旋毛虫肌幼虫Ts-ODC基因,且证实干扰Ts-ODC基因可降低肌幼虫抗酸能力,为后期旋毛虫病的防治提供新思路。 展开更多
关键词 旋毛虫 鸟氨酸脱羧酶 RNA干扰 抗酸系统
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IDO和Treg在旋毛虫感染小鼠脾脏病理损伤中的作用
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作者 马晓 刘东明 +3 位作者 刘昊 杨雪娇 李晓云 韩彩霞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期53-57,共5页
为探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)和调节性T细胞(Treg)在旋毛虫免疫耐受和减轻宿主损伤中的作用机制,本试验将旋毛虫感染小鼠作为试验组,并设立空白组,在第7、15、25、35、50天时取材,采用苏木精-伊红(H.E.)染色法检测脾脏病理变化,免疫组... 为探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)和调节性T细胞(Treg)在旋毛虫免疫耐受和减轻宿主损伤中的作用机制,本试验将旋毛虫感染小鼠作为试验组,并设立空白组,在第7、15、25、35、50天时取材,采用苏木精-伊红(H.E.)染色法检测脾脏病理变化,免疫组化检测脾脏IDO表达量,对二甲氨基苯甲醛比色法检测小鼠血清中L-色氨酸浓度,流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg含量。结果显示,试验组小鼠感染旋毛虫后脾脏受损,但在第25天后所受损伤逐渐减轻;试验组小鼠脾脏IDO表达量于感染后逐渐升高,且在第25天时表达量最高,此时血清中L-色氨酸浓度也降为最低;除第50天外的其余4个时间点,试验组小鼠脾脏Treg含量极显著多于空白组(P<0.01),且在第25天时含量最高。结果表明,旋毛虫能促进小鼠IDO的表达,降低血清中L-色氨酸浓度,使脾脏Treg含量升高,共同促进宿主免疫耐受并减轻宿主所受损伤,本试验结果为阐明旋毛虫免疫耐受机制提供数据支持。 展开更多
关键词 旋毛虫 吲哚胺2 3双加氧酶 调节性T细胞 免疫耐受
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旋毛虫海藻糖酶(TsTRE)蛋白的表达及其间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 侯嘉茗 张博涵 +5 位作者 阮入琳 张鉴慧 刘坤 陈颢元 宋铭忻 张子群 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1174-1180,共7页
目的 以原核表达的旋毛虫海藻糖酶(Trichinella spiralis trehalase, TsTRE)重组蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。方法 本实验采用RT-PCR技术扩增TsTRE基因,将其与pCold I表达质粒连接并于E.coli BL21感受态细胞中表达。... 目的 以原核表达的旋毛虫海藻糖酶(Trichinella spiralis trehalase, TsTRE)重组蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。方法 本实验采用RT-PCR技术扩增TsTRE基因,将其与pCold I表达质粒连接并于E.coli BL21感受态细胞中表达。应用亲和柱层析技术获得纯化rTsTRE,分别利用间接免疫荧光技术和Western-blot技术定位TsTRE和检测rTsTRE的免疫反应原性。与此同时,以rTsTRE蛋白为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法,并对其抗原包被浓度和待测血清稀释度、抗原包被条件、封闭液种类和封闭条件、酶标二抗稀释度和孵育条件、TMB显色时间等进行优化。确定该方法的临界值及评估该方法的重复性、敏感性、特异性和临床检出率等性能。结果 免疫荧光结果显示,在肌幼虫的杆状体、尾部和表皮等部位含有大量的海藻糖酶;Western-blot结果显示,rTsTRE可结合感染旋毛虫42 d小鼠的阳性血清且蛋白分子量约为60 kDa。建立的间接ELISA抗体检测方法的阳性临界值为0.384;批内和批间变异系数分别在5.504%~7.630%和4.664%~9.929%,且均不超过10%;最低检出效价为1∶1 280;与华支睾吸虫、血吸虫、猪蛔虫、猪弓形虫和弓首蛔虫抗体均无交叉反应,特异性较强;临床阴性检出率为0%。结论 本实验成功表达rTsTRE,以该蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法具有良好的重复性、敏感性、特异性和临床检测性,可应用于临床样本的检测。 展开更多
关键词 旋毛虫 海藻糖酶 原核表达 间接ELISA方法
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诱导的肠道免疫保护作用研究
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作者 那皮沙·居热提 何灵 +1 位作者 艾尼瓦尔·吾买尔 白杰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期650-656,共7页
目的 研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原... 目的 研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原免疫组(Ts-Es)。空白组小鼠腹腔注射PBS;抗原免疫组小鼠腹腔注射0.1 mL的Ts-Es抗原与等量弗氏完全佐剂;旋毛虫感染组腹腔注射PBS和弗氏完全佐剂,每隔7 d注射1次,共3次,末次注射后7 d旋毛虫感染组和Ts-Es抗原免疫组用400条/mL旋毛虫感染性幼虫灌胃攻击感染。解剖取材,检查肠道成虫及肌肉幼虫减虫率,用HE染色法观察肠道病理变化,RT-qPCR法检测小肠中目的基因mRNA表达水平。结果 与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组成虫和肌幼虫减虫率分别为49%(t=8.109,P<0.05)和67%(t=8.090,P<0.05);与空白对照组相比旋毛虫感染组小肠T-bet(t=5.25,P<0.05)、GATA3(t=2.50,P<0.05)、RORγ-t(t=4.71,P<0.05)、IFN-γ(t=3.17,P<0.05)、IL-4(t=2.60,P<0.05)、IL-5(t=3.05,P<0.05)、IL-17A(t=4.88,P<0.05) mRNA表达量升高,Foxp3表达量没有统计学差异(t=1.55,P>0.05);与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组T-bet(t=4.23,P<0.05)、RORγ-t(t=4.30,P<0.05)、IFN-γ(t=3.02,P<0.05)、IL-17A(t=3.17,P<0.05) mRNA表达量下降;GATA3(t=3.96,P<0.05)、Foxp3(t=2.76,P<0.05)、IL-4(t=5.16,P<0.05)、IL-5(t=3.69,P<0.05)、IL-10(t=2.61,P<0.05) mRNA表达量升高;与空白对照组相比Ts-Es抗原免疫组GATA3(t=6.4,P<0.05)、Foxp3(t=4.32,P<0.05)、IL-10(t=2.6,P<0.05)、IL-4(t=7.26,P<0.05)、IL-5(t=6.3,P<0.05) mRNA表达量升高均有统计学差异;RORγ-t(t=0.41,P>0.05)、T-bet(t=1.02,P>0.05)、IFN-γ(t=0.09,P>0.05)、IL-17A(t=1.80,P>0.05) mRNA表达量无统计学差异;肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转,肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转。结论 Ts-Es抗原免疫小鼠后可诱发转录因子GATA3,Foxp3相关的混合型免疫应答,并抑制旋毛虫感染引起的T-bet、RORγ-t所介导的炎症型免疫反应,抑制炎型细胞因子的释放,诱导宿主产生抗旋毛虫感染的免疫保护效果。 展开更多
关键词 旋毛虫肌幼虫 排泄分泌抗原 肠道免疫 免疫保护作用
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旋毛虫钙网蛋白表达纯化及其与补体C1q互作位点的初探
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作者 余文 黄京京 +3 位作者 李京默 张冬琬 贾智惠 诸欣平 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2023年第1期25-31,38,共8页
旋毛虫钙网蛋白(Trichinella spiralis calreticulin,Ts-CRT)可以通过与宿主补体C1q互作后,帮助虫体逃避宿主补体系统介导的免疫杀伤。为研究Ts-CRT与C1q相互作用的分子结构基础,本研究首先通过分子克隆和亲和层析等方法获得了高纯度的... 旋毛虫钙网蛋白(Trichinella spiralis calreticulin,Ts-CRT)可以通过与宿主补体C1q互作后,帮助虫体逃避宿主补体系统介导的免疫杀伤。为研究Ts-CRT与C1q相互作用的分子结构基础,本研究首先通过分子克隆和亲和层析等方法获得了高纯度的重组蛋白Ts-CRT^(380);其次通过微量热涌动(microscale thermophoresis,MST)实验测定Ts-CRT^(380)与C1q相互作用能力;然后利用Discovery Studio软件模拟Ts-CRT与C1q的分子对接,分析Ts-CRT上参与互作的关键位点,并与4种蠕虫CRT相应位点进行序列比对,分析其保守性。结果显示,Ts-CRT^(380)与C1q解离常数K_(d)值为149μmol/L,证明二者存在中等强度的相互作用,Ts-CRT通过K145、W323、F77和K47等17个氨基酸残基与人源C1q互作,序列比对证实这17个氨基酸位点在5种蠕虫CRT中高度保守。本研究结合MST实验与生物信息学分析,获得了Ts-CRT与人源补体组分C1q的互作位点,有助于理解旋毛虫逃避宿主补体攻击的分子结构和机制;通过序列比对发现旋毛虫CRT与C1q互作位点在其他蠕虫CRT中高度保守,可为以CRT为靶点研制抗蠕虫新药提供依据。 展开更多
关键词 旋毛虫钙网蛋白 补体C1Q 免疫逃逸 微量热涌动 分子对接
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《动物性食品卫生学》案例教学设计与实践
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作者 普琦琦 师亚玲 +2 位作者 王丽屏 张家翔 信吉阁 《现代畜牧科技》 2023年第2期124-126,共3页
为引导动物医学专业的学生高效学习《动物性食品卫生学》基础专业课程,该文以生猪屠宰检疫之旋毛虫检查实验为案例教学设计,通过选取具体案例、解析知识点、案例实施、效果评价等措施,培养学生将理论知识运用于实践的能力。案例教学充... 为引导动物医学专业的学生高效学习《动物性食品卫生学》基础专业课程,该文以生猪屠宰检疫之旋毛虫检查实验为案例教学设计,通过选取具体案例、解析知识点、案例实施、效果评价等措施,培养学生将理论知识运用于实践的能力。案例教学充分提高学生的主动性和参与性,加强课程的教学效果与质量,丰富课程教学内容,以期为相关课程案例库建设提供参考。 展开更多
关键词 案例教学法 旋毛虫检查 动物性食品卫生学
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利用改进的一步法提取本地毛形线虫总RNA
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作者 郑宝亮 付守申 +5 位作者 郜相君 马辉 郑鸣 赵绪永 郭宏伟 杨向科 《郑州牧业工程高等专科学校学报》 2007年第2期1-2,5,共3页
利用胃蛋白酶消化小鼠肌肉,获取了旋毛虫种本地毛形线虫(T.nativa)的肌幼虫虫体。利用TRIZOL混合虫体直接提取肌幼虫的总RNA,通过分光光度计Ultrospec 3000检测结果,以及用RT-PCR方法扩增出了编码T.na- tiva 49 kDa的ES蛋白结构基因,后... 利用胃蛋白酶消化小鼠肌肉,获取了旋毛虫种本地毛形线虫(T.nativa)的肌幼虫虫体。利用TRIZOL混合虫体直接提取肌幼虫的总RNA,通过分光光度计Ultrospec 3000检测结果,以及用RT-PCR方法扩增出了编码T.na- tiva 49 kDa的ES蛋白结构基因,后续试验结果显示改进的一步法提取本地毛形线虫总RNA效果很理想。 展开更多
关键词 trichinella nativa 肌幼虫 总RNA
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我国首次发现乡土旋毛虫的研究报告 被引量:23
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作者 许汴利 崔兆麟 +2 位作者 张玉林 蔺西萌 夏胜利 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期257-262,共6页
目的 :对我国两株旋毛虫进行虫种归属鉴定。方法 :通过生物学特性的比较研究。结果 :单对虫体杂交试验 ,表明河南猪株与黑龙江犬株存在生殖隔离现象 ;冷冻耐力试验 ,在 - 15℃下 ,前者 9d即死亡 ,后者可存活 1年以上 ;在 4℃ ,前者肌肉... 目的 :对我国两株旋毛虫进行虫种归属鉴定。方法 :通过生物学特性的比较研究。结果 :单对虫体杂交试验 ,表明河南猪株与黑龙江犬株存在生殖隔离现象 ;冷冻耐力试验 ,在 - 15℃下 ,前者 9d即死亡 ,后者可存活 1年以上 ;在 4℃ ,前者肌肉期幼虫呈圆盘状卷曲 ,后者呈螺旋状卷曲 ;生殖力指数 ( RCI)在小鼠试验分别为 195.7和 6.2 ( P<0 .0 1) ,在大鼠分别为 191.3和 14.4 ( P<0 .0 1) ;前者对家猪易感 ,后者不易感 ;随机扩增多态性 DNA指纹分析其扩增后产物的 DNA片段电泳带型 ,河南猪株旋毛虫与 T.spiralis基本相同 ,黑龙江犬株旋毛虫与 T.nativa一致。结论 :我国至少存在上述两种旋毛虫 ,即 :河南猪株旋毛虫系 T.spiralis,黑龙江犬株旋毛虫系 T.nativa。 展开更多
关键词 旋毛虫 乡土旋毛虫 多态性 DNA 生殖力 冷冻耐力
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