旋毛虫重组35.5ku蛋白免疫诊断价值的研究

目的研究旋毛虫重组35.5ku蛋白的免疫诊断价值。方法通过RT-PCR扩增旋毛虫35.5ku蛋白基因TspSP-1.2,构建重组质粒pUC18-TspSP-1.2,测序正确后亚克隆至表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达载体pET-30a(+)-TspSP-1.2,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白的抗原性。结果构建的重组表达载体pET-30a(+)-TspSP-1.2能够表达旋毛虫35.5ku蛋白,该重组蛋白可被旋毛虫感染小鼠血清、旋毛虫ES抗原免疫鼠血清及旋毛虫患者血清识别,与日本血吸虫、并殖吸虫、华支睾吸虫患者及正常人血清均无交叉反应,但与猪囊尾蚴患者血清有交叉反应。结论旋毛虫重组35.5ku蛋白可作为旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。