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Degradation effects on dichlorvos by a biocontrol strain,Trichoderma atroviride T23
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作者 SUN Jia-nan SI Gao-yue +3 位作者 LIU Hong-yi LI Ya-qian WANG Xin-hua CHEN Jie 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第9期2746-2758,共13页
Excessive use of organophosphate pesticides(OP),such as dichlorvos,in farming system poses a threat to human health through potential contamination of environment.To date,biodegradation has been prospected most promis... Excessive use of organophosphate pesticides(OP),such as dichlorvos,in farming system poses a threat to human health through potential contamination of environment.To date,biodegradation has been prospected most promising approach to eliminate environmental OP residues.Trichoderma species as a biological control microorganism is often exposed to the chemical pesticides applied in environments,so it is necessary to understand the mechanism of degradation of dichlorvos by Trichoderma.In this study,dichlorvos significantly inhibited the growth,sporulation and pigmentation of T.atroviride T23,and the dichlorvos degradation activity of T23 required the initial induction effect of dichlorvos and the culture conditions,including the nutrient and pH values of the medium.Various changed primary and secondary metabolites released from T23 in the presence of dichlorvos were speculated as the energy and antioxidants for the strain itself to tolerate dichlorvos stress.The results showed that T23 could produce a series of enzymes,especially the intracellular enzymes,to degrade dichlorvos.The activities of the intracellular enzyme generated by T23 were differentially changed along time course and especially relied on initial dichlorvos concentration,ammonium sulfate and phosphate added in the medium.In conclusion,some dichlorvos-induced chemical degradation related enzymes of T23 were proved to be involved in the degradation of dichlorvos. 展开更多
关键词 trichoderma atroviride T23 DICHLORVOS intracellular enzyme induced enzyme activity
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链霉菌菌株A与哈茨木霉T-23原生质体融合条件的研究 被引量:4
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作者 张彩霞 于晓丹 +2 位作者 李颖 吕淑霞 陈捷 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期21-23,共3页
报道了链霉菌菌株和哈茨木霉菌株属间原生质体融合构建生防工程菌的前期研究成果 ,研究结果显示 :链霉菌菌株A与哈茨木霉T - 2 3分别以 10 0 0 μg/ml庆大霉素和 5 0~ 5 3℃热灭活 12 0min作为遗传标记 ;融合系统采用聚乙二醇 (PEG)作... 报道了链霉菌菌株和哈茨木霉菌株属间原生质体融合构建生防工程菌的前期研究成果 ,研究结果显示 :链霉菌菌株A与哈茨木霉T - 2 3分别以 10 0 0 μg/ml庆大霉素和 5 0~ 5 3℃热灭活 12 0min作为遗传标记 ;融合系统采用聚乙二醇 (PEG)作为促融剂 ,通过对PEG最佳分子量、浓度、处理时间的筛选 ,确立最佳融合技术系统 ,即内含 0 .0 5mol/LCa2 + 的 35 %PEG6 0 0 0 ,融合处理15min。所得融合子经过选择再生培养基培养后 ,在 132株融合子中初步筛选出 2株稳定的融合子。经孢子大小和DNA含量测定 ,确立一株为单倍重组体 。 展开更多
关键词 链霉菌菌株A 哈茨木霉t-23 原生质体融合
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nm23-H1基因转染对膀胱癌T-24细胞转移能力及化疗敏感性的影响 被引量:2
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作者 崔曙 唐铁龙 +1 位作者 李响 李虹 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期788-791,共4页
目的探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法将nm23-H1真核表达质粒通过电击穿孔转染技术导入人膀胱癌细胞株T-24,G418筛选阳性克隆,免疫组织化学方法检测nm23-H1基因的表达情况。Transwell小室和冲刷... 目的探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法将nm23-H1真核表达质粒通过电击穿孔转染技术导入人膀胱癌细胞株T-24,G418筛选阳性克隆,免疫组织化学方法检测nm23-H1基因的表达情况。Transwell小室和冲刷实验观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。MTT法检测T-24细胞转染前后对化疗药物敏感性的变化。结果以电穿孔技术将nm23-H1基因转入T-24细胞后,获得稳定表达;免疫组织化学结果显示T-24细胞株在nm23-H1基因转染前后其表达水平有明显差异;转染后T-24细胞侵袭、粘附、趋化运动能力有明显的降低。转染后T-24细胞对顺铂(CDDP)明显增敏。结论nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用。nm23-H1基因能增强T24细胞对顺铂的化疗敏感性。 展开更多
关键词 膀胱癌 t-24细胞株 NM23-H1 化疗敏感性
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大鼠泡型包虫病灶切除手术前后Th17细胞的变化特点及作用 被引量:1
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作者 商少华 巫姜 +3 位作者 李涛 吐尔洪江·吐逊 林仁勇 温浩 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第9期799-802,826,共5页
目的榆测包虫病灶切除术前、术后Th17相关细胞因子(IL-17、IL-23)的表达,探明包虫病灶切除术前、术后免疫状态变化情况。方法将SD大鼠分为健康对照组、泡球蚴感染对照组和泡球蚴病手术组(简称手术组),分别于腹股沟注射感染泡球蚴... 目的榆测包虫病灶切除术前、术后Th17相关细胞因子(IL-17、IL-23)的表达,探明包虫病灶切除术前、术后免疫状态变化情况。方法将SD大鼠分为健康对照组、泡球蚴感染对照组和泡球蚴病手术组(简称手术组),分别于腹股沟注射感染泡球蚴(健康对照组用中理盐水代替),3月后将感染成功的大鼠纳入试验。对手术组大鼠切除皮下包虫病灶,术后第1~7d各处死大鼠6只,第7d处死健康对照组和泡球蚴感染对照组大鼠各6只,采集下腔静脉血液和肝脏组纵,分别用ELISA法检测血清和肝匀浆组织IL-17和IL-23水平,用Real—timeRT—PCR检测肝脏IL-17mRNA和IL-23mRNA表达水平。结果包虫病大鼠血清IL-17和IL-23分别为(8.38±1.04)pg/ml和(352.69±25.04)pg/ml,健康对照组分别为(17.14±1.21)pg/ml和(450.05±29.37)pg/ml,差异有统计学意义(P〈0.05);手术组术后分别于第2d和第3d开始增高,于第6d和第7d开始趋于正常。包虫病大鼠肝匀浆IIL-17和IL-23分别为(7.68±2.21)pg/ml和(336.65±28.73)pg/ml,健康对照组分别为(16.88±2.36)pg/ml和(446.68±24.53)pg/ml,差异有统计学意义(P〈0.05):于术组术后分别于第3d和第4d开始增高,IL-17于第7d趋于正常,IL23第7d仍低于健康对照组。包虫病大鼠肝IL-17mRNA和IL-23mRNA分别为(0.32±0.08)pg/ml和(0.96±0.79)pg/ml,健康对照组分别为(0.73±0.97)pg/ml和(1.57±0.73)pg/ml,羞异有统计学意义(P〈0.05);手术组术后分别于第1d和第3d开始增高.于第4d和第6d开始趋于正常。结论IL-17和IL-23为Th17细胞发挥功能的主要细胞因子。包虫病灶切除后,包虫寄生所致的IL-17和IL-23抑制状态能存较短时间内恢复并趋于正常,进而可能对其他感染或者移植器官产生趋于日常的免疫排斥反应。 展开更多
关键词 泡型包虫病 辅助性t-17细胞 白介素17 白介素-23
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改良ATMT转化技术在深绿木霉基因敲除中的应用 被引量:2
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作者 周于聪 谢秋瑾 +3 位作者 宋凯 杨朝晖 陈捷 李雅乾 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期58-64,共7页
木霉菌是环境中具有重要经济价值的丝状真菌之一。高效率的基因敲除技术是深入研究木霉菌功能的必要手段。研究改进了传统的农杆菌介导的遗传转化技术(ATMT),成功构建深绿木霉T23中碳代谢抑制因子cre1基因敲除突变株。首先查找深绿木... 木霉菌是环境中具有重要经济价值的丝状真菌之一。高效率的基因敲除技术是深入研究木霉菌功能的必要手段。研究改进了传统的农杆菌介导的遗传转化技术(ATMT),成功构建深绿木霉T23中碳代谢抑制因子cre1基因敲除突变株。首先查找深绿木霉全基因组序列,比对并扩增cre1基因侧翼序列,以改造后的p1300qh质粒为骨架构建cre1敲除载体p C1300qh:cre1-up∷hyg∷cre1-down,转化到农杆菌AGL-1。通过优化ATMT转化中木霉菌分生孢子浓度,改良培养方式和延长诱导转化时间等参数,获得最佳转化条件:木霉菌分生孢子浓度为8×10~6,筛选培养基改为IM培养基,诱导转化时间延长,成功筛选到可能的转化子10个。最后,经鉴定有1个转化子为cre1敲除转化子,9个为T-DNA随机插入。因此,为深绿木霉菌基因功能研究提供了可借鉴的高效便捷的遗传转化方法。 展开更多
关键词 深绿木霉T23 农杆菌介导的遗传转化方法ATMT 碳代谢抑制因子CRE1 筛选鉴定 优化
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深绿木霉中碳代谢抑制因子CRE1功能特性研究 被引量:2
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作者 李佩忆 周于聪 +1 位作者 李雅乾 陈捷 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期17-25,共9页
木霉菌(Trichoderma spp.)是一种广泛存在于土壤及植物根系生境中的丝状真菌,具有拮抗植物病原真菌和促进植物生长的双重功效。碳代谢抑制子CRE1全局性调控细胞生长代谢过程,保障木霉在不同生境中的存活及拮抗病原菌特性。比较深绿木... 木霉菌(Trichoderma spp.)是一种广泛存在于土壤及植物根系生境中的丝状真菌,具有拮抗植物病原真菌和促进植物生长的双重功效。碳代谢抑制子CRE1全局性调控细胞生长代谢过程,保障木霉在不同生境中的存活及拮抗病原菌特性。比较深绿木霉(T.atroviride)T23及其Cre1突变株(T23Δcre1)在不同培养基中的生长和代谢特性,结果表明:cre1基因沉默后,T23Δcre1较T23菌丝生长变慢,产孢滞后且降低一个数量级,cre1对菌丝生长和产孢的调控依赖于培养基组分。此外,cre1基因抑制几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶基因转录,区别性调控部分次级代谢合成的非核糖体肽合成酶NRPS和聚酮合成酶PKS基因的表达。综上,碳代谢因子CRE1作为一个多效性的转录调控因子,抑制细胞壁降解酶和代谢产物合成相关的基因表达,赋予木霉菌在环境中的适应性和竞争性,是深绿木霉T23生长的必要因子。 展开更多
关键词 深绿木霉T23 碳代谢抑制因子CRE1 生长 酶活特性 次级代谢合成基因
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