一株盖姆斯木霉TW20050的鉴定及功能评价

明确木霉菌株TW20050的分类地位,并评价其生物学功能。通过形态学特征结合ITS、tef1及rpb2序列分析进行种类鉴定,利用菌丝生长速率法测定菌株的抑菌能力,利用透明圈大小定性检测菌株的水解酶活性。结果表明:菌株TW20050的形态学特征与Trichoderma gamsii一致,其ITS、tef1和rpb2序列与Trichoderma gamsii的同源性均达到99%以上,在以rpb2构建的系统发育进化树中,TW20050与Trichoderma gamsii strain S488[KJ665270.1]位于同一分支。菌株TW20050在PDA平板上对10种植物病原真菌均有抑制作用,对终极腐霉的抑制率最高,达92.0%。菌株TW20050具有蛋白酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶及纤维素酶活性,其中蛋白酶活性和纤维素酶活性较高,透明圈宽度分别为9.8 mm和6.5 mm。综合形态学特征和序列分析,将菌株TW20050鉴定为盖姆斯木霉。菌株TW20050不但对植物病原真菌具有广谱抗性,而且具有多种水解酶活性,是一株较有潜力的生物防治菌株。

盖姆斯木霉分离鉴定及菌丝体发酵条件的研究

在对野生牛肝菌分离母种菌丝的过程中获得1株内生真菌(Trg-12),经对其菌落、菌丝、孢子形态显微镜观察及rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分子生物学鉴定,明确其为盖姆斯木霉(Trichoderma gamsii)。进一步对菌株在综合马铃薯液态培养基中的菌丝量进行研究,采用L9(34)正交试验设计,接种量5%,发酵时间8 d时,对装液量、摇床转速、初始p H值及培养温度进行优化,结果显示:250 m L三角瓶装液量100 mL,摇床转速160 r/min,初始p H6,培养温度29℃,菌丝量为4.43 g/L。用平板对峙培养法测定该菌株与牛肝菌常见腐败菌尖孢镰刀菌和黄瘤孢菌的抑制率分别为(53.7±1.9)%和(74.7±1.6)%,表明牛肝菌内生真菌盖姆斯木霉Trg-12对腐败菌具有拮抗作用,可为生物防治提供优良的菌株。