侧耳木霉T9对褐煤的生物降解作用

采用微生物降解方法,以煤样粒度、菌液用量、煤浆浓度和生物降解时间为影响因子,测定侧耳木霉T9对山西褐煤的生物降解作用。结果表明:各因素对褐煤生物降解率的影响大小依次为:煤样粒度>菌液用量>煤浆浓度>生物降解时间。采用正交试验,筛选出最优组合为:煤粒度0.1mm、菌液用量10mL、煤浆浓度2%和生物降解时间14d,对褐煤的生物降解率最高达60.00%。

侧耳木霉T2-1植酸酶基因的序列分析及蛋白结构预测

利用GenBank发表的植酸酶A编码序列设计的引物,通过PCR的方法对侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)T2-1基因组DNA进行扩增,获得了一条长约1.7 kb的特异性DNA片段。序列测定结果表明,该DNA片段含有植酸酶编码基因的完整序列和3段内含子序列,其中植酸酶基因全长1 443 bp,编码480个氨基酸,5'端有一段编码23个氨基酸的信号肽序列,其余的457个氨基酸残基为成熟植酸酶的氨基酸序列。对该基因编码的氨基酸序列进行三级结构预测,发现它为磷酸单酯酶。已将侧耳木霉T2-1植酸酶基因序列在GenBank中注册(登录号:GQ325590)。这是目前中国在GenBank注册的第一个完整的木霉植酸酶编码基因。

灵芝哈茨木霉病害生防细菌的筛选及菌剂制备研究

为防治灵芝的哈茨木霉病害,对土壤细菌进行筛选,得到1株具有抑菌效果的菌株,编号为JSW-0601,初步测定了JSW-0601对哈茨木霉的抑菌效果,并与11种生防药剂进行对比,通过分子生物学方法和生理生化特性鉴定了JSW-0601的分类地位,确定了JSW-0601的发酵条件,对菌剂制备进行初步探究。细菌菌体制成的菌液对病原菌有抑制作用,其中20μL的菌液抑菌率为63. 33%,作为毒介质菌体原液的抑菌率最高可达94. 93%,2. 5%滤菌液抑菌率达30. 80%,20%灭菌液抑菌率也可达80. 20%,菌体分泌的胞外活性物质和化学物质均有较好的抑制效果。JSW-0601为短小芽胞杆菌,抑菌效果优于11种生防药剂,最佳发酵条件为0. 1%接种量、培养48 h,培养机制为麦芽糖0. 25%、蛋白胨1%、硫酸镁0. 5%,最优载体为硅藻土。筛选得到的短小芽胞杆菌对灵芝哈茨木霉病害的抑制作用较好,为灵芝木霉病害的生物防治提供科学参考,同时也为短小芽胞杆菌的应用提供了新方向。

一株灵芝病原真菌的分离鉴定及生长环境初探

为明确灵芝病原真菌的归属,采用组织分离法[1]获得病原菌株,结合形态学及分子生物学方法对分离菌株进行鉴定,从显微特征和分子生物学对其进行分析鉴定;测定不同温度、pH、光照等条件下对病原菌产孢量、尖端菌丝数量的影响。结果表明:形态学鉴定及分子生物学鉴定为侧耳木霉,通过SPSS数据分析不同温度,pH对病原菌的产孢量与菌丝尖端数量有明显差异,光照则无明显差异。温度在15℃时产孢量为零,温度在15℃与30℃时尖端菌丝数量最少;pH为5与9时产孢量、尖端菌丝数量最少,因此灵芝病原菌为侧耳木霉,温度在15℃与30℃,pH为5与9时对产孢量和尖端菌丝数量影响最大。

一株侧耳木霉的鉴定及其产木聚糖酶研究

以分离自平菇栽培污染菌包的一株菌株ZJ-03为研究对象,采用形态学观察和分子生物学相结合的方法对其进行鉴定,并对其定性、产木聚糖酶活力和木聚糖酶生产低聚木糖进行了研究。结果发现,菌株ZJ-03的形态与侧耳木霉(Trichoderma pleuroticola)形态相似,系统进化树分析发现ZJ-03与T.pleuroticola ICMP:2080亲缘关系较近,聚为一类,将该菌株归属为侧耳木霉。菌株ZJ-03可产木聚糖酶,活性在3000 IU/g以上;木聚糖酶可产低聚木糖,占总糖含量72.0%。该结果可为进一步研究侧耳木霉产木聚糖酶用于生产低聚木糖的可行性奠定基础。

侧耳木霉产漆酶酶活力测定和脱色方法

为研究木霉粗酶液胞外分泌物的生物活性,从愈创木酚的用量、反应温度、缓冲液种类、缓冲液pH、缓冲液浓度5个因素,对木霉粗酶液胞外分泌物漆酶的酶活力进行研究;从反应时间、反应温度、缓冲液pH、染料浓度、缓冲液浓度、酶液稀释倍数6个因素对木霉粗酶液的胞外分泌物漆酶对染料的脱色作用进行研究。结果表明:木霉漆酶在反应温度为25℃,琥珀酸缓冲液的pH为4.0,琥珀酸缓冲液浓度为0.045 mol/L,愈创木酚用量为0.04 mol/L时,木霉粗酶液胞外分泌物漆酶酶活力最优;木霉粗酶液的胞外分泌物漆酶其脱色作用在反应温度为30℃,pH为3.5,染料浓度为0.01 g/L,醋酸缓冲液浓度为0.2 mol/L时,木霉粗酶液的胞外分泌物漆酶脱色作用最好。