利用TSA/Opal技术实现肾活检石蜡切片多重免疫荧光染色

肾活检病理是肾小球疾病诊断的金标准[1],诊断的手段包括光镜、免疫荧光和电镜。三种观察方法对组织处理的要求不同,因此穿刺的肾活检标本需要人为地进行分割。这一操作容易造成某一观察项目没有肾小球的情况,此外也无法在同一肾小球中同时进行光镜、免疫荧光及电镜观察。尽管在体视镜或普通光学显微镜下分割肾组织可以尽量避免没有肾小球的情况,但操作非常依赖穿刺医师的水平,且对于出现硬化或缺血肾小球的组织,即使在显微镜下辨别穿刺组织中的肾小球亦非常困难。更重要的是,对于仅表现为局灶性病变的疾病,人为分割很可能导致在一个检查项目中观察到病变,在另外的检查项目中观察不到。此外,三种观察手段的观察重点不同,免疫荧光主要观察是否存在免疫复合物及补体的沉积,光镜主要观察整体的形态学改变,电镜则主要观察超微结构异常。尽管三种观察方法是分开的,但我们需要整合三种观察内容对疾病进行整体分析,因此假如在同一肾小球中能同时获得免疫、形态学和超微结构的信息更有利于我们做出准确的诊断和开展发病机制的研究。

非连续性文本阅读学生易错成因及教学对策——基于TSA阅读测试数据的结果分析

非连续性文本是英语阅读测试的重点。随着数字时代的到来,文本呈现出明显的多模态化和多元化特征,对学生的阅读素养提出了更高的要求。文章以沿海S市小学五年级学生为研究对象,利用SOLO理论对受试对象在TSA非连续性文本阅读测试中的表现进行分析。结果显示:学生具备语言基础知识,在低层级区间思维表现较好,但“看”的能力和信息换模态表达能力欠缺,且社会语言知识发展滞后,层级区间思维难以跨越。这一发现与SOLO的层次发展匹配。文章对其症因进行分析,并结合当前教学实际提出相应的教学对策,认为应加强对学生语用知识和能力的培养,重视对学生多重文本和电子文本阅读能力的培养。

基于P-TSA的车联网端边计算任务卸载策略研究

车联网场景中的车载终端不能满足计算任务对时延和能耗的要求,引入移动边缘计算(mobile edge computing,MEC)是解决上述问题的有效途径,但任务较多时依然会增加时延。针对上述问题首先提出了基于端边协同计算的车辆计算网络,该网络中的边缘计算服务器、服务车辆、任务车辆都可在本地提供计算服务;其次,构建了车联网端边协同计算系统模型,并提出计算卸载策略问题;然后,提出了一种基于融合粒子记忆的改进被囊群算法(particle memory-tunicate swarm algorithm,P-TSA),且与任务优先级和计算卸载节点预测相结合的计算卸载策略;最后,在模拟真实道路车况的任务实例下进行了对比实验,与其他卸载方案相比,所提算法显著提高了任务卸载效用,降低了卸载的时延和能耗。

基于TSA-SVM的老人跌倒识别算法

针对老人跌倒检测易受环境影响以及检测不够精确易出现误判的问题,提出了一种基于人体动作传感器的老人跌倒识别检测算法,采用被囊群算法(TSA)优化支持向量机(SVM)模型进行跌倒识别.针对人体动作传感器采集的数据,首先进行特征提取、降维等预处理,然后将预处理后的数据输入SVM模型进行训练,同时利用TSA算法寻找SVM最优参数,得到最优的跌倒识别模型,利用该模型即可进行跌倒识别.实验结果表明,本文所提算法的跌倒识别检测正确率可达96%以上,具有一定的优越性.

基于CEEMD-ITSA-BiLSTM组合模型的短期负荷预测

准确预测电力系统短期负荷有助于灵活规划系统资源、合理安排机组工作调度以及提高系统运行效率。针对负荷预测精度问题,文中提出了一种基于CEEMD-ITSA-BiLSTM(Complete Ensemble Empirical Mode Decomposition-Improved Tunicate Swarm Algorithm-Bidirectional Long Short-Term Memory)的短期负荷预测模型。对时序性负荷数据进行CEEMD分解,得到若干个平稳的IMF(Intrinsic Mode Function),并对每个IMF进行BiLSTM建模预测。为了提高BiLSTM的精度,采用ITSA算法对BiLSTM的隐含层节点数、学习率和训练次数等超参数进行参数寻优,建立CEEMD-ITSA-BiLSTM负荷预测模型。文中以实际负荷数据进行仿真实验,对比了单一BiLSTM和不同算法优化的BiLSTM模型,结果表明CEEMD-ITSA-BiLSTM模型的RMSE(Root Mean Square Error)、MAE(Mean Absolute Error)和MAPE(Mean Absolute Percentage Error)误差指标相比于BiLSTM模型分别提高了48.54%、51.32%和44.78%,显著低于其他对比模型。

商品化的预制TSA培养基有效期确定方法的探讨

目的:通过对商品化的预制胰酪大豆胨琼脂培养基(tryptone soya agar,TSA),在2~25℃避光条件下贮存不同时间质量稳定性的考察,为该类培养基有效期的确定方法进行探讨。方法:选取2个厂家各连续3个批次商品化的预制TSA培养基,分别置2~25℃避光条件下贮存30、90和180 d,对其进行外观性状检测、pH检测、培养基适用性检查、无菌性检查。结果:2个厂家TSA培养基每批、每个贮存时间点,外观性状检测、pH检测、培养基适用性检查、无菌性检查结果均符合《中国药典》2020年版四部对培养基质量控制的要求。结论:2个厂家生产的TSA培养基在2~25℃避光条件下贮存180 d质量均符合要求,说明两个厂家生产的TSA培养基的有效期均可达到180d。

轻量型Yolov7-TSA网络在茶叶病害检测识别中的研究与应用

针对现有茶叶病害识别方法准确率低、模型运行速度慢和缺乏检测功能等问题,提出一种新的Yolov7-TSA(Yolov7-Tiny-SiLU-Attention)轻量型网络架构对茶叶病害检测和分类。将Yolov7-T网络中的LeakReLU激活函数替换为SiLU激活函数,以提升检测精度,并防止过拟合。同时,通过融合坐标注意力机制进一步提升对目标轮廓和空间位置的特征感知能力。在含8种茶叶病害(含健康茶叶)的数据集上试验。结果表明,Yolov7-TSA网络对茶叶病害的识别准确率达到了94.2%,与Yolov7-T、Yolov7网络相比,分别提升了3.2、1.2个百分点。另外,Yolov7-TSA网络在参数量、浮点运算数、模型大小和单张图片推理时间方面表现出了显著的效果,与Yolov7网络相比,其分别降低了83%、87%、83%和34%。该网络模型实现了对茶叶病害的检测与分类,同时平衡了识别准确率和实时性能。

基于CEEMDAN和CNN-TSA-GRU的滚动轴承故障识别方法研究

为避免复杂噪声对滚动轴承智能诊断模型的准确率干扰,提出一种基于完全集合经验模态分解CEEMDAN和深度时间自注意力卷积网络CNN-TSA的滚动轴承故障识别模型。该模型首先采用CEEMDAN将信号分解为若干固有模态函数(intrinsic mode function,IMF)分量,利用光谱放大因子SAF指标自适应筛选最优高信噪比分量;其次采用改进时间自注意力机制对数据分配权重并采用卷积神经网络CNN提取空间特征,弱化冗余特征信息,保留目标特征;最后利用门控循环单元GRU提取样本数据时间特征,使得网络得到更充分的学习,提高模型鲁棒性。经试验数据验证:所提出的深度学习智能故障识别模型故障识别准确率达到98.87%;对比一维CNN和CNN-LSTM模型,识别准确率分别提高9.15%和8.86%,验证了该模型的有效性和优越性。

Effects of trichostatin A(TSA)on growth and gene expression in HeLa cells

Objective： To investigate the expressions of p53, RB1, Fas, c-fos, Ras, EGFR mRNA in human cervical cancer （HeLa） cell in response to the trichostatin A （TSA）. Methods： We took count of HeLa cells in different incubation times with TSA （0.2μm/L）. The result indicated that HeLa cells changed evidently when HeLa cells were incubated for 36 h. Then, we investigated the genes expression （mRNA levels） of HeLa cells after treatment for 36 h using SYBR green real-time PCR. Results： We demonstrated that trichostatin A （TSA） could make human cervical cancer （HeLa） cell morphological change and induce HeLa cell apoptosis. Furthermore, the data suggest that TSA-induced down-regulation of p53, RB1, Fas, but upregulated c-fos gene expression after treatment for 36 h, and Ras, EGFR did not show obvious response to TSA treatments. Conclusion： TSA has different effects on gene expression.

组蛋白乙酰化对A549和BEAS-2B细胞哮喘易感基因ADAM33的影响

目的:研究丁酸钠、曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)及腺病毒E1A相关的300 kD蛋白(adenoviral E1A binding protein of 300 kD,P300)介导的组蛋白乙酰化在人非小细胞肺癌A549细胞及人支气管上皮BEAS-2B细胞中对哮喘易感的解整合素金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因表达的影响。方法:将A549细胞及BEAS-2B细胞分别分为丁酸钠对照组(双蒸水处理)和1、2.5、5 mmol/L丁酸钠组,TSA对照组(0.1%二甲基亚砜处理)和0.2、0.4、0.8μmol/L TSA组,按照组别分别予以相应处理;另将BEAS-2B细胞分为对照组(转染P300突变质粒)和P300组(转染P300表达质粒);采用双荧光素酶报告基因法分析ADAM33启动子活性的变化,实时荧光定量PCR(quantitative real time-PCR,qRT-PCR)检测ADAM33 mRNA表达,蛋白质印迹法检测ADAM33蛋白表达。结果:在人非小细胞肺癌A549细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性明显降低(P<0.01);在BEAS-2B细胞中,与对照组相比,1 mmol/L丁酸钠组及0.2μmol/L TSA组ADAM33基因启动子活性、mRNA及蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。加大丁酸钠、TSA药物浓度,ADAM33表达无显著差异。在人支气管上皮BEAS-2B细胞中,与对照组相比,P300组ADAM33启动子活性、mRNA和蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论:丁酸钠、TSA通过组蛋白乙酰化降低人非小细胞肺癌A549细胞和人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达,P300通过组蛋白乙酰化降低人支气管上皮BEAS-2B细胞中ADAM33表达。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A对大鼠体外循环术后急性肺损伤的保护作用

目的探究曲古霉素A(TSA)对大鼠体外循环肺损伤的影响及作用机制。方法将30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CPB肺损伤组(I/R组)、CPB肺损伤+TSA给药50 ng/kg组(TSA1组)、CPB肺损伤+TSA给药100 ng/kg组(TSA2组)、CPB肺损伤+TSA给药150 ng/kg组(TSA3组),每组各6只。Sham组仅行血管穿刺置管,I/R组和TSA组构建CPB模型,TSA组还需术前使用曲古霉素A。体外循环前(T1)、开放肺门后10 min(T2)和实验结束时(T3)查血气,计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)。取左肺组织HE染色后观察形态和病理损伤评分,ELISA法测肺组织匀浆和肺泡灌洗液中炎症因子含量,WB法测HDAC2、AC-H3及NF-kB P65表达。结果肺功能指标OI在T2、T3时刻表现为TSA组高于I/R组,TSA组中TSA3组最高,RI与之相反(P<0.05);病理损伤评分表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β含量以及BALF中TNF-α、总蛋白含量均表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低(P<0.05);肺组织中HDAC2表达表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低,AC-H3的表达与之相反(P<0.05);NF-κBp65在胞核内表现为TSA组低于I/R组、TSA组中TSA3组最低,胞质内与之相反(P<0.05)。结论TSA可减轻大鼠体外循环肺损伤,且存在浓度依赖性,其机制可能是增加了组蛋白乙酰化,降低NF-κBp65在细胞核内的表达,从而减轻肺部炎症反应。

TSA对滩羊成纤维细胞作为供体细胞的作用

为探索成纤维细胞作为供体细胞的潜能和TrichostatinA(TSA)处理供体细胞的适合浓度,提高克隆胚胎的发育水平。本研究分别利用100、50、25、10ng·mL-1TSA处理滩羊成纤维细胞,观察细胞形态,统计细胞活率,利用流式分选技术分析处理前后细胞的周期时相,同时通过间接免疫荧光法检测细胞乙酰化水平,并以经过10～50ng·mL-1TSA处理的成纤维细胞作为供体细胞,检测其重构胚发育水平。结果发现,当TSA的浓度达100ng·mL-1时,细胞大量死亡,不同浓度TSA处理细胞24h后,细胞周期被明显抑制在G0/G1期,乙酰化水平明显高于对照组,其中供体细胞经10ng·mL-1TSA处理的克隆胚胎卵裂率和囊胚率明显升高(P<0.05,(85.2±3.4)%vs(68.6±6.7)%,(35.6±5.7)%vs(10.4±8.3)%)。结果表明,经10ng·mL-1TSA处理的滩羊成纤维细胞周期同步化明显,乙酰化维持较高水平,重构胚胎发育水平明显提高,适合作为成纤维细胞的处理方法和浓度。

TSA促进转基因猪体细胞核移植胚胎发育和外源基因表达

不完全的表观遗传重编程是造成转基因克隆动物效率低下的主要原因,组蛋白修饰作为表观遗传修饰的一个重要部分,可以直接影响克隆胚胎的发育和外源基因的表达情况。TSA(Trichostatin A)作为一种组蛋白去乙酰化抑制剂,可以改变组蛋白的乙酰化水平,促进表观遗传重编程,提高克隆动物的效率。同时TSA能改变染色质结构,使转录因子易于与DNA序列结合,促进外源基因的表达。文章确定了TSA处理转基因猪成纤维细胞和核移植胚胎的最佳条件,分别为250 nmol/L、24 h和40 nmol/L、24 h,通过进一步正交实验发现,TSA同时处理供体细胞和克隆胚胎可以显著的促进核移植胚胎的体外发育。此外,无论TSA处理转基因猪成纤维细胞或核移植胚胎,都可以提高外源基因的表达水平。

曲古抑菌素(Trichostatin)A对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育能力的影响

曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化抑制剂,用TSA处理鼠核移植胚胎可显著提高胚胎的囊胚率。检验TSA对猪卵母细胞体外成熟以及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟液及胚胎培养液中添加TSA,比较不同浓度TSA对卵母细胞成熟的影响,不同浓度TSA对孤雌胚胎发育能力的影响以及TSA处理不同时间对孤雌胚胎发育能力的影响。结果发现:(1)5 nmol/L TSA处理对卵母细胞体外核成熟无显著影响,却显著提高了卵母细胞孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(P<0.05);(2)50 nmol/L TSA处理显著提高了孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05);(3)50 nmol/L TSA处理24 h能显著提高胚胎的卵裂率及囊胚率(P<0.05,82.1%±2.6%和37.4%±3.1%)。结果表明TSA对猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎发育具有显著的促进作用。5 nmol/L的添加量对卵母细胞的体外胞质成熟具有促进作用;胚胎培养基中添加50 nmol/L TSA处理24 h能提高孤雌胚胎的发育能力。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA诱导人乳腺癌细胞凋亡及自噬

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素(TSA)对人乳腺癌细胞凋亡及自噬的作用及其可能的分子机制。方法采用MTT法检测T47D细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡的变化;Western blot法检测凋亡及自噬相关蛋白的表达。结果 TSA对人乳腺癌细胞T47D具有增殖抑制作用(P<0.05);TSA诱导T47D细胞发生凋亡,下调BCL-2/Bax比值,上调Caspase-3的表达(P<0.05);同时自噬相关蛋白LC3B及Beclin-1的表达也明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论 TSA体外能抑制乳腺癌细胞的增殖,其机制与诱导细胞凋亡和自噬作用有关。

一种用于浅层探冰雷达的改进型宽带小型化TSA天线

该文介绍了一种用于高分辨率浅层探冰雷达(工作于500 MHz-2 GHz)的小型化TSA天线。该天线采用共面波导到槽线的转换结构实现馈电,天线的两侧边采用波纹结构,构成波纹结构的金属细条带的长度从馈点端到辐射孔径端逐渐减小。仿真结果表明,比之传统的TSA天线,该天线的工作频带可向低频扩展,同时低频段端射向增益能够提高3 dB。测试结果表明,除550 MHz附近的一个窄频带(S11<-8.2 dB)外,天线的阻抗带宽(S11<-10 dB)大于10:1。此外,在500 MHz-2 GHz内测量得到的端射向增益大于3.9 dBi,测量得到的辐射方向图与仿真值有较好的一致性。

HDAC抑制剂TSA增强卵巢癌细胞株A2780对腺病毒基因转染效率的体外研究

背景与目的:腺病毒感染依赖于靶细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的表达,肿瘤细胞CAR表达的缺失和下调是造成腺病毒为载体基因治疗效果不佳的根本原因。本研究通过观察组氨酸去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂TrichostatinA(TSA)对卵巢癌细胞株A2780CAR表达水平的影响,探讨HDAC抑制剂在腺病毒载体基因治疗中应用的可能性。方法:分别在TSA作用A2780细胞前后检测CARmRNA和蛋白水平的表达,同时采用流式细胞术测定病毒转染效率,MTT实验评价腺病毒携带的胸苷激酶(ADV/TK)的体外抗瘤效应。结果:TSA处理后,A2780细胞内CARmRNA和蛋白表达明显增高。通过流式细胞仪分析GFP/ADV转染后GFP的表达发现,未处理组细胞转染率为(1.24±0.14)%;5nmol/L和100nmol/LTSA处理48h后,细胞的转染效率分别为(7.58±0.32)%和(7.94±0.28)%。MTT结果表明,ADV/TK介导的体外杀伤作用在5nmol/L和100nmol/LTSA处理组较未处理组增强了4～10倍。结论:TSA可以增强针对卵巢癌细胞的腺病毒基因转染效率,为增强卵巢癌基因治疗效果提供可能的方法。

5-aza-2’deoxycytidine联合trichostatin A抑制乳腺癌细胞增殖能力的研究

背景与目的:晚近报道应用DNA甲基转移酶抑制剂5-aza-2’deoxycytid ine(AZA)联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂trichostatin A(TSA)作用于多种肿瘤,可以达到治疗肿瘤的目的。本文在此探讨通过AZA联合TSA作用,抑制乳腺癌细胞株增殖能力。方法:联合应用两种药物作用于肿瘤细胞,应用RT-PCR的方法检测MDA-MB-435细胞株p21和p27的mRNA转录水平的改变。通过W ST方法来检测乳腺癌细胞的增殖能力变化,将MDA-MB-435细胞根据药物处理共分四组:①对照组;②AZA+TSA组;③AZA+TSA+4-OH TAM组;④4-OH TAM组。并且采用流式细胞仪来分析肿瘤细胞周期分布的改变,将MDA-MB-435分成另外四组:①对照组;②AZA+TSA组;③AZA+TSA+E2组;④AZA+TSA+E2+4-OH TAM组。结果:TSA以及AZA联合应用能使肿瘤细胞MDA-MB-435的p27的mRNA水平增加,而p21mRNA水平略减弱。增殖分析的四个组中:AZA+TSA组细胞增殖能力减弱(P<0.01),同时出现细胞阻滞于S期,加入雌激素后细胞阻滞稍减弱。AZA+TSA+4-OH TAM组增殖能力进一步减弱(P<0.01)。4-OH TAM组增殖能力没有改变。细胞周期分析的四个组中:AZA+TSA组出现细胞阻滞于S期,AZA+TSA+E2组细胞阻滞稍减弱。AZA+TSA+E2+4-OH TAM组细胞阻滞再次提高。结论:两种药物联合应用能使得乳腺癌肿瘤细胞增殖能力下降,对于肿瘤细胞有一定抑制作用。

5-aza-dc和TSA对广西陆川猪体细胞核移植的影响

为探讨甲基转移酶抑制剂5-aza-dc、去乙酰基转移酶抑制剂TSA对广西陆川猪体细胞核移植效率的影响,用5-aza-dc、TSA处理供体细胞和重构胚。结果显示,5-Aza-dc联合TSA处理供体细胞、重构胚以及连续处理供体细胞和重构胚,桑椹胚率均显著高于对照组(P<0.05),但各组间囊胚率差异不显著。说明5-aza-dc联合TSA处理供体细胞和克隆胚能提高猪克隆胚的发育能力,尽管差异不显著。

TSA与I/O法评价旅游经济效应的比较研究

旅游卫星账户(TSA)和投入产出(I/O)法是评价旅游经济效应的有效方法,并在实践中被广泛使用。旅游卫星账户是作为国民经济的附属账户,通过构造子账户对旅游经济效应进行评价;投入产出法则是在投入产出理论的基础上分析旅游经济效应。二者在评价机理、理论视角、假设基础等方面都不相同。文章在分析这两种方法不同之处的基础上,以期在实际评价过程中将二者融合。