改良的Tricine—SDS—PAGE电泳检测胸腺肽分子量

目的建立一种分析胸腺肽制剂中多肽分子量分布的简便可行的方法。方法采用改良的Tricine-SD-PAGE电泳方法分析胸腺肽制剂中多肽的分子量分布，并分析其中胸腺素α1的含量。结果采用该法可检出1μg的胸腺肽α1，分析国内市场上的胸腺肽制剂多肽分子量分布范围在3．5～8．5kD。结论该法适用于分析胸腺肽制剂中多肽组分的分子量分布和胸腺肽α1的存在，可用于胸腺肽制剂的质量控制。

Tricine-SDSP-AGE电泳分析小分子多肽

研究旨在解决常规SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对一些小分子多肽进行电泳分析过程中极易扩散丢失,常无着色带显示等问题。实验采用不同类型胶来电泳分析低分子量多肽,比较Tricine SDS PAGE电泳分析小分子多肽时的聚丙烯酰胺浓度和交联度,为小分子多肽的分析与鉴定提供快速准确的条件。

大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离体系的建立

为建立和优化大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离技术,从凝胶的浓度、凝胶中乙二醇的使用、上样缓冲液中甘油的浓度、上样量、染色方法等多个方面对Tricine-SDS-PAGE分离效果进行比较研究。结果显示:凝胶质量分数T为18%、交联度C为5%并加入30%(体积分数)乙二醇能分离分子质量低至1.7 ku的大豆多肽,在含30%甘油的上样缓冲液中大豆酶解肽能得到较好的分离,上样量为20μg的分离效果较理想,考马斯亮蓝G-250染色方法能提高大豆低分子多肽电泳的分辨率,同时利用改进的TricineSDS-PAGE电泳技术对不同蛋白酶酶解液的分子质量分布进行了分析。研究结果表明,通过优化的TricineSDS-PAGE电泳技术能够获得较高分辨率的大豆蛋白酶解肽电泳图谱。

Tricine-SDS-PAGE法对阿胶的酶解物鉴别

目的 Tricine-SDS-PAGE法分析阿胶酶解物。方法分别采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶和木瓜蛋白酶对阿胶、龟甲胶和鹿角胶进行酶解,然后将酶解液分别进行Tricine-SDS-PAGE小分子电泳。结果阿胶不同酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳谱均出现多条细条带,与酶空白组、样品空白组相比有一定差异。阿胶与龟甲胶、鹿角胶的图谱条带有很大差异。结论采用酶解物联合Tricine-SDS-PAGE法鉴定阿胶,较普通PAGE信息量更大,可以区分其他胶类。

改进Tricine-SDS-PAGE法分析重组牛乳铁蛋白肽

为了有效分离3.1kDa乳铁蛋白肽,试验调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度及凝胶的交联度,并加入适量甘油,改进了传统的Tricine-SDS-PAGE方法。结果表明,该方法与常规的SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE相比较,改进的凝胶不仅可以有效分离3.1kDa的肽,而且对分子量为212kDa的大分子量蛋白也有很好的分离效果,明显优于常规的SDS-PAGE和现有的Tricine-SDS-PAGE方法。

牛肉酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳分析

用Tricine-SDS-PAGE电泳法对牛肉酶解物的分子量进行了测定，结果表明产物的分子量分布在1060～24000范围，分子量在5000以下的低分子蛋白成分含量约75％。

Tricine-SDS-PAGE鉴定不同品质饲料蛋白质的组成

[目的]探讨Tricine-SDS-PAGE技术应用于饲料蛋白质的分析与品质鉴定的可行性。[方法]采用Tricine—SDS—PAGE对菜籽饼粕、棉籽饼粕、菜籽浸出粕、热带假丝酵母固态发酵棉籽粕以及黑曲霉固态发酵棉籽粕分别进行凝胶成像分析，鉴定5种不同品质饲料的蛋白质组成。[结果]采用4．0％C、16．5％T的分离胶，可以取得较好的分离效果。菜籽蛋白和棉籽蛋白样本的凝胶成像结果表明，菜籽饼粕中的蛋白质主要集中在泳道中部，为14．4～60．0kD，而棉籽饼粕中的蛋白则在泳道顶端（约90kD）含量较高，2种饲料蛋白得到了有效区分。同一种样本相同处理方法间的凝胶成像结果表明，用黑曲霉对棉籽饼粕进行固态发酵效果优于热带假丝酵母。[结论]5种饲料之间蛋白成像差异显著、直观，Tricine-SDS—PAGE可以作为饲料蛋白品质鉴定的一种有效方法。

Tricine-SDS-PAGE电泳定量检测人体泪液中溶菌酶含量

目的建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法。方法通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 k Da的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定量测定其中溶菌酶的含量。结果泪液溶菌酶和其它小分子蛋白可用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳有效分离,对于人体泪液中的溶菌酶检测专属性良好;上样量10~30μg范围内,溶菌酶含量和电泳条带灰度面积线性关系良好(r=0.9934);分析17例人体泪液的样本,其中溶菌酶的含量在1.38~3.07 mg/m L。结论改进的Tricine-SDS-PAGE电泳法简单直观,并能批量性的一次分析多个样本,可用于科研及临床上人体泪液中溶菌酶的含量检测。

菲牛蛭中多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法研究

试验旨在探讨适合菲牛蛭中小分子多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法。采用电泳纯重组水蛭素验证Tricine-SDS-PAGE的分离效果,对菲牛蛭的水提醇沉粗提物进行分离,建立小分子多肽对数分子量和迁移率的回归关系方程,计算多肽分子质量。结果显示:菲牛蛭中小分子多肽对数分子量和迁移率成正比直线关系,从菲牛蛭中分离得到7个分子量在10~31 kDa的多肽。研究表明,Tricine-SDS-PAGE对菲牛蛭中的小分子多肽具有较好的分离效果。

Tricine-SDS-PAGE分离鼻咽癌血清多肽方法初探

目的建立鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）血清多肽稳定且灵敏的Tricine-SDS-PAGE电泳体系。方法通过Tricine-SDS-PAGE电泳分离鼻咽癌血清多肽,比较乙腈处理与非处理血清,以及电泳时间长短等条件对分离效果的影响。结果鼻咽癌原始血清样本量200μL、经1.2倍体积乙腈沉淀,冷冻干燥后加入40μL的生理盐水溶解,取12~18μL上样,6.7%浓缩胶、夹层胶60 V,之后60 V的电压至电泳结束,电泳时间4 h 20 min,分离10 kDa以下的鼻咽癌血清多肽效果最佳。结论建立鼻咽癌血清多肽的Tricine-SDS-PAGE稳定电泳分离方法,电泳效果与样本的处理方法和电泳条件有关。

燕麦麸蛋白质的Osboren分类及SDS-PAGE电泳分析

根据微量凯氏定氮法测定了燕麦麸中蛋白质含量,40～60目之间的燕麦麸蛋白质含量最高,平均为19.42%;并对其进行Osboren蛋白质分类以及分类后各类蛋白质组分含量的测定,结果表明,燕麦麸中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白占蛋白质总量依次为63.40%、15.18%、8.18%、13.24%。SDS-PAGE电泳分析各类蛋白的组成结果表明,燕麦麸中清蛋白含量最高且蛋白质亚基分布广泛。清蛋白必需氨基酸含量高,溶解性好,易于消化吸收,为优质的营养蛋白。

肉苁蓉属4种肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳分析

目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。

SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱法研究人参蛋白热稳定性

目的研究人参蛋白在不同加热温度及时间下的热稳定性。方法采用中性缓冲液抽提和硫铵分级沉淀法提取人参蛋白,在不同加热温度及时间条件下,对人参蛋白进行SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱分析。结果人参蛋白随着加热温度的升高而发生聚集和解聚;在50℃时,人参蛋白会形成可溶性的大分子聚合物,这一聚合物的浓度随加热时间的延长而不断升高。结论人参中各种蛋白亚基的热敏感性各不相同。

IEF/SDS PAGE双向电泳技术的建立

IEF/SDS PAGE双向电泳的高分离度是各种类型的单向PAGE无法比拟的.以Bio—Rad公司的PROTEAN Ⅱ xi 2-D电泳系统为基础,初步研究了IEF/SDS PAGE双向电泳技术建立的条件.

SDS—PAGE垂直板电泳技术鉴定脆弱类杆菌及相关菌株的探讨

本文报告了采用SDS—PAGE垂直板电泳技术对脆弱类杆菌及相关菌株超声波粉碎的可溶性蛋白抗原进行了电泳谱分析。结果证明这些菌株有三种共同的蛋白抗原组分,但不同菌种间蛋白成分存在着差异。

中国大鲵可溶性蛋白制备及SDS-PAGE电泳分析

采用超声法制备大鲵可溶性蛋白质;从提取温度、时间、液料比方面确定适宜的工艺参数,并对所得可溶性蛋白的分子量进行研究。均匀设计实验结果表明:在提取温度为45℃、提取时间为30min、液料比为10∶1时,大鲵可溶性蛋白溶出量最多,达63.57mg/g。SDS-PAGE电泳分析可溶性蛋白的组成表明,大鲵可溶性蛋白亚基分布广泛,分子量低,易于消化吸收,为优质的营养蛋白。

牛带绦虫可溶性抗原SDS-PAGE电泳初步分析

目的 分析牛带绦虫可溶性抗原蛋白组分。方法 用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)对牛带绦虫成虫、牛囊尾蚴及牛带绦虫虫卵的可溶性抗原进行分析。结果 牛带绦虫不同抗原的蛋白质区带主要分布于 14～ 116kD之间。成节显示 3 7条 ,主带 14条 (分子量分别为 10 0 ,68,63 ,45 ,43 ,41,3 7,3 5 ,2 9,2 5 ,2 0 ,17,15 ,13kD ) ;孕节显示 3 5条 ,主带 11条 (分子量分别为 68,63 ,45 ,43 ,3 5 ,2 9,2 5 ,2 0 ,17,15 ,13kD) ;虫卵显示 9条 ,主带 3条 (分子量分别为 68,3 8,2 5kD) ;囊尾蚴显示 12条 ,主带 6条 (分子量分别为 68,3 6,3 5 ,16,14 ,12kD)。结论 成虫的成节和孕节的蛋白图谱差别不大但与囊尾蚴的蛋白图谱有显著差别 。

应用SDS-PAGE显示小分子多肽技术的探讨

为探讨显示小分子多肽技术 ,应用SDS PAGE寻找更简单、快捷的分析小分子多肽的方法。采用 8%T ,3%C的丙烯酰胺浓缩胶和含 6mol/L脲 (或含 2 4 %的甘油 )的 16%T ,6%C的丙烯酰胺分离胶的双层不连续SDS PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准 ( 2 512～16 94 9kD)和待测样品 ,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至 2 512kD的多肽 ;多肽样品在含脲和在含甘油的 2L T SDS PAGE中均有较好的显带 ;蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r =- 0 966和r =- 0 964。它们是显示小分子多肽和估测其相对分子质量及对多肽分子进行进一步分析的更为简便易行的方法。

尿素改善SDS-PAGE分离小分子肽的效果

目的 :探讨尿素对Tricine-SDS -PAGE系统分离小分子蛋白的影响。方法 :利用常规SDS -PAGE和Tricine -SDS - PAGE分离小分子肽 ,比较不同组成的分离胶的分离效果。结果 :调整聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的交联度为 5 .0 5 % ,能够改善小分子肽的分离效果。加入 36 %的尿素比加入甘油可以更有效分离 1kD的小肽。但尿素胶聚合太快影响分离效果。结论 :尿素改善SDS -PAGE分离小分子肽的效果 ,制作尿素胶时 ,宜采用低浓度的AP和TEMED使凝胶慢速聚合。

转基因小麦Puroindoline蛋白SDS-PAGE方法的研究与应用

小麦嘌呤吲哚蛋白(Puroindoline)是优质遗传特性硬度的生化标记,对小麦磨粉品质起决定性作用。对目前分析此类蛋白的两类Triton-X-114和Tricine-SDS-PAGE系统进行了优化和比较,建立了详细的适合半子粒分离Pin蛋白的电泳方法。采用此法检测转pinA基因的硬粒小麦P34的后代以及转基因硬粒小麦之间杂交子代的外源基因pinA的表达情况,取得了良好的效果。该方法为Puroindoline蛋白的进一步研究奠定了基础,为小麦品质生化和分子标记辅助育种提供了方法。