Tricine-SDS-PAGE鉴定不同品质饲料蛋白质的组成

[目的]探讨Tricine-SDS-PAGE技术应用于饲料蛋白质的分析与品质鉴定的可行性。[方法]采用Tricine—SDS—PAGE对菜籽饼粕、棉籽饼粕、菜籽浸出粕、热带假丝酵母固态发酵棉籽粕以及黑曲霉固态发酵棉籽粕分别进行凝胶成像分析，鉴定5种不同品质饲料的蛋白质组成。[结果]采用4．0％C、16．5％T的分离胶，可以取得较好的分离效果。菜籽蛋白和棉籽蛋白样本的凝胶成像结果表明，菜籽饼粕中的蛋白质主要集中在泳道中部，为14．4～60．0kD，而棉籽饼粕中的蛋白则在泳道顶端（约90kD）含量较高，2种饲料蛋白得到了有效区分。同一种样本相同处理方法间的凝胶成像结果表明，用黑曲霉对棉籽饼粕进行固态发酵效果优于热带假丝酵母。[结论]5种饲料之间蛋白成像差异显著、直观，Tricine-SDS—PAGE可以作为饲料蛋白品质鉴定的一种有效方法。

TRICINE-SDS-PAGE电泳法用于野生全蝎粉鉴定的研究

目的:探索不同产地野生全蝎粉通过TRICINE-SDS-PAGE电泳法鉴别的可行性。方法:用TRICINE-SDS-PAGE系统对全蝎蛋白提取液进行电泳,用Quantity One软件确定各谱带对应的蛋白质分子量。结果:四种产地的全蝎粉用TRICINE-SDS-PAGE法可获得数条分辨率较高且大体位置相当的蛋白质谱带,其对应分子量大体为:42.000,33.515,27.509,25.524,21.615,17.640,15.839,13.994,11.318,10.000,8.357 kDa。结论:TRICINE-SDS-PAGE电泳法可用于不同产地全蝎粉的真伪鉴别。

大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离体系的建立

为建立和优化大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离技术,从凝胶的浓度、凝胶中乙二醇的使用、上样缓冲液中甘油的浓度、上样量、染色方法等多个方面对Tricine-SDS-PAGE分离效果进行比较研究。结果显示:凝胶质量分数T为18%、交联度C为5%并加入30%(体积分数)乙二醇能分离分子质量低至1.7 ku的大豆多肽,在含30%甘油的上样缓冲液中大豆酶解肽能得到较好的分离,上样量为20μg的分离效果较理想,考马斯亮蓝G-250染色方法能提高大豆低分子多肽电泳的分辨率,同时利用改进的TricineSDS-PAGE电泳技术对不同蛋白酶酶解液的分子质量分布进行了分析。研究结果表明,通过优化的TricineSDS-PAGE电泳技术能够获得较高分辨率的大豆蛋白酶解肽电泳图谱。

改进Tricine-SDS-PAGE法分析重组牛乳铁蛋白肽

为了有效分离3.1kDa乳铁蛋白肽,试验调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度及凝胶的交联度,并加入适量甘油,改进了传统的Tricine-SDS-PAGE方法。结果表明,该方法与常规的SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE相比较,改进的凝胶不仅可以有效分离3.1kDa的肽,而且对分子量为212kDa的大分子量蛋白也有很好的分离效果,明显优于常规的SDS-PAGE和现有的Tricine-SDS-PAGE方法。

Tricine-SDS-PAGE法对阿胶的酶解物鉴别

目的 Tricine-SDS-PAGE法分析阿胶酶解物。方法分别采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶和木瓜蛋白酶对阿胶、龟甲胶和鹿角胶进行酶解,然后将酶解液分别进行Tricine-SDS-PAGE小分子电泳。结果阿胶不同酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳谱均出现多条细条带,与酶空白组、样品空白组相比有一定差异。阿胶与龟甲胶、鹿角胶的图谱条带有很大差异。结论采用酶解物联合Tricine-SDS-PAGE法鉴定阿胶,较普通PAGE信息量更大,可以区分其他胶类。

菲牛蛭中多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法研究

试验旨在探讨适合菲牛蛭中小分子多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法。采用电泳纯重组水蛭素验证Tricine-SDS-PAGE的分离效果,对菲牛蛭的水提醇沉粗提物进行分离,建立小分子多肽对数分子量和迁移率的回归关系方程,计算多肽分子质量。结果显示:菲牛蛭中小分子多肽对数分子量和迁移率成正比直线关系,从菲牛蛭中分离得到7个分子量在10~31 kDa的多肽。研究表明,Tricine-SDS-PAGE对菲牛蛭中的小分子多肽具有较好的分离效果。

Tricine-SDS-PAGE法分析腮腺唾液蛋白

多种口腔疾病或系统性疾病的发生、发展过程中，唾液成分的质和量都可能发生改变［１］。唾液蛋白作为唾液的主要有机成分，与唾液的多种生理功能密切相关［２］。因此研究唾液蛋白对于了解机体的生理及病理状况具有重要意义。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－...

Tricine-SDS-PAGE分离鼻咽癌血清多肽方法初探

目的建立鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）血清多肽稳定且灵敏的Tricine-SDS-PAGE电泳体系。方法通过Tricine-SDS-PAGE电泳分离鼻咽癌血清多肽,比较乙腈处理与非处理血清,以及电泳时间长短等条件对分离效果的影响。结果鼻咽癌原始血清样本量200μL、经1.2倍体积乙腈沉淀,冷冻干燥后加入40μL的生理盐水溶解,取12~18μL上样,6.7%浓缩胶、夹层胶60 V,之后60 V的电压至电泳结束,电泳时间4 h 20 min,分离10 kDa以下的鼻咽癌血清多肽效果最佳。结论建立鼻咽癌血清多肽的Tricine-SDS-PAGE稳定电泳分离方法,电泳效果与样本的处理方法和电泳条件有关。

改良的Tricine—SDS—PAGE电泳检测胸腺肽分子量

目的建立一种分析胸腺肽制剂中多肽分子量分布的简便可行的方法。方法采用改良的Tricine-SD-PAGE电泳方法分析胸腺肽制剂中多肽的分子量分布，并分析其中胸腺素α1的含量。结果采用该法可检出1μg的胸腺肽α1，分析国内市场上的胸腺肽制剂多肽分子量分布范围在3．5～8．5kD。结论该法适用于分析胸腺肽制剂中多肽组分的分子量分布和胸腺肽α1的存在，可用于胸腺肽制剂的质量控制。

Exploration on Separation of Periplaneta Americana Small Peptides with Tricine-SDS-PAGE System

[ Objective] This study aimed to explore a Tricine-SDS-PAGE method for separation and purification of Periplaneta Americana small peptides. [ Method] By comparing the separation effects of three types of gels with different ratios on P. Americana small peptides, an appropriate Tricine-SDS-PAGE method for separation of small peptides was established. [ Result] Standard low molecular weight Marker was preliminarily separated to a certain extent with polyacrylamide gel electraphoresis, while the sample mixture was not separated due to the different levels of aggregation in separating gel, spacer gel and stacking gel. [Condusion] More appropriate polyacrylamide gel electrephoresis separation method or other better separation methods were to be further explored for separating peptide mixture with smaller molecular weight.

牛肉酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳分析

用Tricine-SDS-PAGE电泳法对牛肉酶解物的分子量进行了测定，结果表明产物的分子量分布在1060～24000范围，分子量在5000以下的低分子蛋白成分含量约75％。

Tricine-SDS-PAGE电泳定量检测人体泪液中溶菌酶含量

目的建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法。方法通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 k Da的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定量测定其中溶菌酶的含量。结果泪液溶菌酶和其它小分子蛋白可用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳有效分离,对于人体泪液中的溶菌酶检测专属性良好;上样量10~30μg范围内,溶菌酶含量和电泳条带灰度面积线性关系良好(r=0.9934);分析17例人体泪液的样本,其中溶菌酶的含量在1.38~3.07 mg/m L。结论改进的Tricine-SDS-PAGE电泳法简单直观,并能批量性的一次分析多个样本,可用于科研及临床上人体泪液中溶菌酶的含量检测。

Tricine电泳优化方法在针灸效应小分子蛋白检测中的应用

目的改进一种适合分离、鉴定针灸效应小分子蛋白的Tricine-SDS-PAGE电泳体系。方法研究调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度和凝胶交联度并加入适量甘油,从而优化Tricine电泳系统。结果与常规Glycine-SDS-PAGE电泳系统比较,分离胶聚丙烯酰胺浓度为l6.8%、交联度为5.8%、含10.4%甘油的Tricine-SDS-PAGE电泳明显减少10 kD分子量蛋白的弥散,成功分离了分子量为11.0 kD的S100A8和11.8 kD的S100A11等两个针刺抗哮喘小分子蛋白。结论优化的Tricine-SDS-PAGE电泳系统可有效分离针灸效应小分子蛋白。

Tricine-SDSP-AGE电泳分析小分子多肽

研究旨在解决常规SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对一些小分子多肽进行电泳分析过程中极易扩散丢失,常无着色带显示等问题。实验采用不同类型胶来电泳分析低分子量多肽,比较Tricine SDS PAGE电泳分析小分子多肽时的聚丙烯酰胺浓度和交联度,为小分子多肽的分析与鉴定提供快速准确的条件。

Tricine系统检测低分子量蛋白酶抑制剂的电泳方法研究

目的建立一种能够检测不同分子大小(尤其是低分子量)蛋白酶抑制剂的电泳方法。方法根据特异蛋白酶抑制剂抑制靶蛋白酶活性的原理,借助明胶-Tricine-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品,胶板经蛋白酶水解后,以考马斯亮蓝染色。结果小分子量的胃蛋白酶抑制剂与较大分子量的BBI均能在该方法中显示出活性带,并且利用该方法检测到山合欢种子中含有一种胰蛋白酶抑制剂。结论该方法能够满足不同分子大小、不同类型蛋白酶抑制剂检测的需要。山合欢胰蛋白酶抑制剂的发现对山合欢进一步的研究和综合开发有重要意义。

应用SDS-PAGE显示小分子多肽技术的探讨

为探讨显示小分子多肽技术 ,应用SDS PAGE寻找更简单、快捷的分析小分子多肽的方法。采用 8%T ,3%C的丙烯酰胺浓缩胶和含 6mol/L脲 (或含 2 4 %的甘油 )的 16%T ,6%C的丙烯酰胺分离胶的双层不连续SDS PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准 ( 2 512～16 94 9kD)和待测样品 ,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至 2 512kD的多肽 ;多肽样品在含脲和在含甘油的 2L T SDS PAGE中均有较好的显带 ;蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r =- 0 966和r =- 0 964。它们是显示小分子多肽和估测其相对分子质量及对多肽分子进行进一步分析的更为简便易行的方法。

多倍体麦类作物Wx蛋白检测的SDS-PAGE方法

本文通过对小麦蜡质蛋白的实验和研究 ,详细论述了蜡质蛋白的特性、提取原理、电泳原理和检验原理。对多倍体麦类作物Wx蛋白亚基的检测 ,提出了应用效果良好的电泳系统 ,并就提取方法、凝胶配方和操作步骤进行了描述。本文还列出了部分麦类作物蜡质蛋白亚基基本模式示意图和实验例证 ,具有很好的参考价值。

白果蛋白质提取及SDS-PAGE分析

以白果为原料,采用不同的原料处理及蛋白质提取方法,运用单因素和正交设计的方法,以料液比、提取时间、提取液浓度、提取液pH值为考察因素,研究白果蛋白质提取的最佳工艺条件,并对提取的白果蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳分析。结果表明:经过冷冻干燥处理的白果采用Tris-HCl提取法获得的白果蛋白含量较高;Tris-HCl法提取白果蛋白的最佳工艺为pH8.5、0.15mol/L Tris-HCl溶液、料液比1:20(g/mL)、提取时间4h,白果蛋白质的提取率达到75.01%。白果蛋白SDS-PAGE分析表明,白果蛋白中约含13条亚基,主要为21kD和32kD的两种亚基,白果蛋白的亚基主要集中在31～100kD,占亚基总数的77%。

凝胶成像系统SDS-PAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白

为了建立一种检测市场上乳及乳制品中的乳铁蛋白含量的简便方法——SDS-PAGE法,采集了10种液态奶、4种奶酪、3种乳清蛋白粉、4种酸奶和4种奶粉,利用SDS-PAGE法分离乳铁蛋白,并优化了分离胶的浓度、电压、上样量和染色方法。经优化的SDS-PAGE法的操作条件为:分离胶浓度为12%,浓缩胶电压为120V,分离胶电压为200V,改良的考马斯亮蓝染色,乳铁蛋白标准品的点样浓度为0.1111mg/mL,点样量为12μL。采用此电泳条件分离不同乳及乳制品中的乳铁蛋白,运用凝胶成像系统测得乳铁蛋白含量的相对标准偏差小于10%,且测得的含量均高于其检出限和定量限。同一样品同一块胶,同一样品不同凝胶乳铁蛋白的含量相对标准偏差小于10%,说明利用本方法得到的实验结果准确度高,重复性好。

新风胶囊中水溶性蛋白的SDS-PAGE分析方法研究

目的:建立新风胶囊中水溶性蛋白SDS-PAGE的分析方法。方法:采用SDS-PAGE电泳方法,根据分子量大小不同,分离新风胶囊中水溶性蛋白;电泳条件:1.0 mm×25齿试样格,浓缩胶浓度为4.5%,分离胶浓度为12.5%,分离电压100 V,上样量5μL,染色2 h,脱色4 h。结果:新风胶囊中水溶性蛋白成分含量不均,其中主带有2条,分子量为16.38、17.07 kDa左右。结论:SDS-PAGE电泳方法可以用于新风胶囊中水溶性蛋白成分测定,为建立该制剂电泳特征图谱提供依据。