大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离体系的建立

为建立和优化大豆蛋白酶解肽蛋白Tricine-SDS-PAGE分离技术,从凝胶的浓度、凝胶中乙二醇的使用、上样缓冲液中甘油的浓度、上样量、染色方法等多个方面对Tricine-SDS-PAGE分离效果进行比较研究。结果显示:凝胶质量分数T为18%、交联度C为5%并加入30%(体积分数)乙二醇能分离分子质量低至1.7 ku的大豆多肽,在含30%甘油的上样缓冲液中大豆酶解肽能得到较好的分离,上样量为20μg的分离效果较理想,考马斯亮蓝G-250染色方法能提高大豆低分子多肽电泳的分辨率,同时利用改进的TricineSDS-PAGE电泳技术对不同蛋白酶酶解液的分子质量分布进行了分析。研究结果表明,通过优化的TricineSDS-PAGE电泳技术能够获得较高分辨率的大豆蛋白酶解肽电泳图谱。

改进Tricine-SDS-PAGE法分析重组牛乳铁蛋白肽

为了有效分离3.1kDa乳铁蛋白肽,试验调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度及凝胶的交联度,并加入适量甘油,改进了传统的Tricine-SDS-PAGE方法。结果表明,该方法与常规的SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE相比较,改进的凝胶不仅可以有效分离3.1kDa的肽,而且对分子量为212kDa的大分子量蛋白也有很好的分离效果,明显优于常规的SDS-PAGE和现有的Tricine-SDS-PAGE方法。

有效分离1kDa小肽的Tricine-SDS-PAGE方法

为了建立能有效分离 1kDa的特小分子肽的Tricine SDS PAGE方法 ,调整分离胶中聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使致密胶中丙烯酰胺和双丙烯酰胺的交联度为 5 %,并加入 36 5 %的尿素 ,用于分离小至 1kDa的小分子肽 ,并与常规的SDS PAGE和先前报道的Tricine SDS PAGE相比较。结果改进的致密胶可以有效分离分子量小至 1kDa的小肽 ,明显优于常规的SDS PAGE和现有的Tricine SDS

面向大数据管理决策研究的全景式PAGE框架

大数据和人工智能的飞速发展增加了管理决策领域的复杂性和动态性,也为研究和应用提供了广袤的拓新空间.全景式PAGE框架作为大数据管理决策研究的方向性框架,在大数据问题特征的映射下形成了一个4×3要素矩阵,在理论范式(P)、分析技术(A)、资源治理(G)、使能创新(E)的研究探索中发挥着重要作用.本文结合NSFC大数据重大研究计划的开展,进一步阐释全景式PAGE框架的内涵和关系逻辑,并面向领域情境讨论重要科学问题、求解路径和新知贡献.本文旨在从大数据管理决策研究的视角为大数据等颠覆性信息技术应用的相关研究提供前沿方向和创新突破上的启迪;同时为管理学科及其相关学科领域开展交叉属性强、应用情境差异化特点突出的科研攻关提供参考.

Tricine-SDS-PAGE法对阿胶的酶解物鉴别

目的 Tricine-SDS-PAGE法分析阿胶酶解物。方法分别采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶和木瓜蛋白酶对阿胶、龟甲胶和鹿角胶进行酶解,然后将酶解液分别进行Tricine-SDS-PAGE小分子电泳。结果阿胶不同酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳谱均出现多条细条带,与酶空白组、样品空白组相比有一定差异。阿胶与龟甲胶、鹿角胶的图谱条带有很大差异。结论采用酶解物联合Tricine-SDS-PAGE法鉴定阿胶,较普通PAGE信息量更大,可以区分其他胶类。

Tricine-SDS-PAGE鉴定不同品质饲料蛋白质的组成

[目的]探讨Tricine-SDS-PAGE技术应用于饲料蛋白质的分析与品质鉴定的可行性。[方法]采用Tricine—SDS—PAGE对菜籽饼粕、棉籽饼粕、菜籽浸出粕、热带假丝酵母固态发酵棉籽粕以及黑曲霉固态发酵棉籽粕分别进行凝胶成像分析，鉴定5种不同品质饲料的蛋白质组成。[结果]采用4．0％C、16．5％T的分离胶，可以取得较好的分离效果。菜籽蛋白和棉籽蛋白样本的凝胶成像结果表明，菜籽饼粕中的蛋白质主要集中在泳道中部，为14．4～60．0kD，而棉籽饼粕中的蛋白则在泳道顶端（约90kD）含量较高，2种饲料蛋白得到了有效区分。同一种样本相同处理方法间的凝胶成像结果表明，用黑曲霉对棉籽饼粕进行固态发酵效果优于热带假丝酵母。[结论]5种饲料之间蛋白成像差异显著、直观，Tricine-SDS—PAGE可以作为饲料蛋白品质鉴定的一种有效方法。

美洲大蠊中小分子肽的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分离探索

[目的]探讨适合美洲大蠊中小分子多肽分离、纯化的Tricine-SDS-PAGE方法。[方法]通过比较Tricine-SDS-PAGE中,不同比例3种胶对小分子肽的分离效果,建立更适合小分子肽分离的方法。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳在一定程度上使标准Marker得到了初步分离,样品混合液均在分离胶、夹层胶和浓缩胶中有着不同程度的聚集,未能起到分离的作用。[结论]对于小分子多肽的混合样品,有待于进一步摸索更合适的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离方法或是其他更好的分离方法。

菲牛蛭中多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法研究

试验旨在探讨适合菲牛蛭中小分子多肽的Tricine-SDS-PAGE分离方法。采用电泳纯重组水蛭素验证Tricine-SDS-PAGE的分离效果,对菲牛蛭的水提醇沉粗提物进行分离,建立小分子多肽对数分子量和迁移率的回归关系方程,计算多肽分子质量。结果显示:菲牛蛭中小分子多肽对数分子量和迁移率成正比直线关系,从菲牛蛭中分离得到7个分子量在10~31 kDa的多肽。研究表明,Tricine-SDS-PAGE对菲牛蛭中的小分子多肽具有较好的分离效果。

内蒙古地区传统发酵酸马奶不同发酵时期乳清蛋白SDS-PAGE分析

[目的]探究内蒙古地区传统酸马奶发酵过程中乳清蛋白的变化情况。[方法]以从内蒙古锡林郭勒盟镶黄旗采集的马奶为原料制备传统发酵酸马奶,发酵温度为(22±2)℃,人工捣拌频率5次/d,每次300下;每隔12 h采集1次发酵0~96 h的酸马奶样品;离心提取酸马奶乳清蛋白样品,利用条件优化后的SDS-PAGE电泳技术分析酸马奶乳清蛋白在发酵过程中变化情况。[结果]优化后的SDS-PAGE电泳分析条件为:分离胶浓度12%,浓缩胶浓度5%,分离胶电泳电压180 V、电泳时间300 min,上样浓度0.5μg/μL,上样体积16μL,改良考马斯亮蓝法染色、脱色各12 h。在发酵0~12 h内,酸马奶乳清蛋白含量增加,在12 h时达到最高值(5.12μg/μL),之后随发酵时间延长呈下降趋势,发酵96 h时降低至3.92μg/μL。SDS-PAGE电泳图谱分析显示,在分子量10~70 kDa区间内共获得乳清蛋白有效条带13个。在发酵过程中,β-乳球蛋白、溶酶菌C和α-乳白蛋白3种蛋白质含量呈现不同程度的波动,发酵72 h时三者含量之和最高,占乳清蛋白总含量的85.73%,并且在发酵过程中始终保持较高水平,是传统发酵酸马奶发酵96 h内乳清蛋白的主要组分,其中,β-乳球蛋白含量最高,平均占乳清蛋白总含量的38.92%。分子量在20~40 kDa的酪蛋白含量在发酵24 h之后开始下降,至60 h时条带消失。分子量为10.33 kDa的蛋白质在发酵12 h内被消耗,60 h时再次出现且含量随发酵时间延长逐渐增加,在84 h时达到峰值,占乳清蛋白总含量的9.84%。分子量为49.80 kDa的蛋白质在发酵72 h之后开始出现,含量在96 h时达到乳清蛋白总含量的4.11%。与其他乳清蛋白组分相比,β-乳球蛋白和免疫球蛋白含量在发酵过程中变化较小。[结论]内蒙古地区传统发酵酸马奶在发酵96 h内,分子量为10~70 kDa的乳清蛋白含量表现出有规律的消长,主要被消化分解的蛋白质是酪蛋白。不同发酵阶段酸马奶乳清蛋白组成及含量存在一定差异,但原有主要组分β-乳球蛋白、溶酶菌C和α-乳白蛋白始终保持较高水平。自发酵中期开始,酸马奶乳清蛋白中相对分子质量较小的肽(10.33 kDa)所占比例逐渐升高,由此可见,传统发酵酸马奶中不仅保留马奶中乳清蛋白原有的营养价值,而且通过发酵还增添了易吸收的小分子量蛋白质。

Tricine-SDS-PAGE分离鼻咽癌血清多肽方法初探

目的建立鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）血清多肽稳定且灵敏的Tricine-SDS-PAGE电泳体系。方法通过Tricine-SDS-PAGE电泳分离鼻咽癌血清多肽,比较乙腈处理与非处理血清,以及电泳时间长短等条件对分离效果的影响。结果鼻咽癌原始血清样本量200μL、经1.2倍体积乙腈沉淀,冷冻干燥后加入40μL的生理盐水溶解,取12~18μL上样,6.7%浓缩胶、夹层胶60 V,之后60 V的电压至电泳结束,电泳时间4 h 20 min,分离10 kDa以下的鼻咽癌血清多肽效果最佳。结论建立鼻咽癌血清多肽的Tricine-SDS-PAGE稳定电泳分离方法,电泳效果与样本的处理方法和电泳条件有关。

SDS-PAGE凝胶电泳对驴皮胶及常见伪品胶中的蛋白分析研究

目的:研究驴皮胶及常见伪品胶马皮胶和牛皮胶的蛋白凝胶电泳行为。方法:自制3种皮胶,计算出胶率,BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白含量,计算上样量,使上样量为20~30μg。垂直电泳仪进行SDS-PAGE凝胶电泳,采用考马斯亮蓝及银染法显色。结果:3种皮胶的凝胶电泳行为相似,蛋白成分主要集中在分子量大于25 kDa段上,银染法灵敏度更高,可显示较多条带。结论:3种皮胶分子量分布宽泛,具有共同的条带,进一步可用多肽蛋白质谱鉴定技术对各混合物组分进行更深入分析。

Exploration on Separation of Periplaneta Americana Small Peptides with Tricine-SDS-PAGE System

[ Objective] This study aimed to explore a Tricine-SDS-PAGE method for separation and purification of Periplaneta Americana small peptides. [ Method] By comparing the separation effects of three types of gels with different ratios on P. Americana small peptides, an appropriate Tricine-SDS-PAGE method for separation of small peptides was established. [ Result] Standard low molecular weight Marker was preliminarily separated to a certain extent with polyacrylamide gel electraphoresis, while the sample mixture was not separated due to the different levels of aggregation in separating gel, spacer gel and stacking gel. [Condusion] More appropriate polyacrylamide gel electrephoresis separation method or other better separation methods were to be further explored for separating peptide mixture with smaller molecular weight.

Weighted PageRank Algorithm Search Engine Ranking Model for Web Pages

As data grows in size,search engines face new challenges in extracting more relevant content for users’searches.As a result,a number of retrieval and ranking algorithms have been employed to ensure that the results are relevant to the user’s requirements.Unfortunately,most existing indexes and ranking algo-rithms crawl documents and web pages based on a limited set of criteria designed to meet user expectations,making it impossible to deliver exceptionally accurate results.As a result,this study investigates and analyses how search engines work,as well as the elements that contribute to higher ranks.This paper addresses the issue of bias by proposing a new ranking algorithm based on the PageRank(PR)algorithm,which is one of the most widely used page ranking algorithms We pro-pose weighted PageRank(WPR)algorithms to test the relationship between these various measures.The Weighted Page Rank(WPR)model was used in three dis-tinct trials to compare the rankings of documents and pages based on one or more user preferences criteria.Thefindings of utilizing the Weighted Page Rank model showed that using multiple criteria to rankfinal pages is better than using only one,and that some criteria had a greater impact on ranking results than others.

牛肉酶解物的Tricine-SDS-PAGE电泳分析

用Tricine-SDS-PAGE电泳法对牛肉酶解物的分子量进行了测定，结果表明产物的分子量分布在1060～24000范围，分子量在5000以下的低分子蛋白成分含量约75％。

Tricine-SDS-PAGE电泳定量检测人体泪液中溶菌酶含量

目的建立一种定量检测人体泪液中溶菌酶含量的方法。方法通过改进的Tricine-SDS-PAGE电泳,分析正常人体天然泪液中分子量在3~30 k Da的蛋白质分布,使泪液溶菌酶与其它泪液蛋白有效分离,用Image J软件对溶菌酶电泳条带进行灰度分析,定量测定其中溶菌酶的含量。结果泪液溶菌酶和其它小分子蛋白可用改进的Tricine-SDS-PAGE电泳有效分离,对于人体泪液中的溶菌酶检测专属性良好;上样量10~30μg范围内,溶菌酶含量和电泳条带灰度面积线性关系良好(r=0.9934);分析17例人体泪液的样本,其中溶菌酶的含量在1.38~3.07 mg/m L。结论改进的Tricine-SDS-PAGE电泳法简单直观,并能批量性的一次分析多个样本,可用于科研及临床上人体泪液中溶菌酶的含量检测。

Ranking of Web Pages in a Personalized Search

The basic idea behind a personalized web search is to deliver search results that are tailored to meet user needs, which is one of the growing concepts in web technologies. The personalized web search presented in this paper is based on exploiting the implicit feedbacks of user satisfaction during her web browsing history to construct a user profile storing the web pages the user is highly interested in. A weight is assigned to each page stored in the user’s profile;this weight reflects the user’s interest in this page. We name this weight the relative rank of the page, since it depends on the user issuing the query. Therefore, the ranking algorithm provided in this paper is based on the principle that;the rank assigned to a page is the addition of two rank values R_rank and A_rank. A_rank is an absolute rank, since it is fixed for all users issuing the same query, it only depends on the link structures of the web and on the keywords of the query. Thus, it could be calculated by the PageRank algorithm suggested by Brin and Page in 1998 and used by the google search engine. While, R_rank is the relative rank, it is calculated by the methods given in this paper which depends mainly on recording implicit measures of user satisfaction during her previous browsing history.

新闻媒体网页归档方法与策略研究

新闻媒体网页归档是保存新闻资源的重要手段,但是当前领域内实践尚处于起步阶段。在梳理国内外研究现状的基础上,剖析了我国在体制机制、法律政策、关键技术等方面存在的问题,进而从宏观和微观两个层面提出了完善顶层设计、明确责任权利、统一标准规范、创新技术应用、拓展服务利用等优化策略和对策建议,以期推动新闻网页归档工作走向规范化、制度化、常态化。

鼠伤寒沙门氏菌细菌铁蛋白(Bfr)的生物信息学分析及原核表达载体构建

为了获得高纯度的鼠伤寒沙门氏菌细菌铁蛋白(Bfr),试验利用生物信息学软件对Bfr的结构、翻译后修饰和抗原表位等进行预测分析;通过PCR扩增鼠伤寒沙门氏菌Bfr基因,将其与pET-32a(+)载体连接并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,通过SDS-PAGE分析和Western-blot检测表达及纯化后的目的蛋白。结果表明:Bfr由476个氨基酸组成,分子式为C_(1440)H_(2406)N_(476)O_(606)S_(85),相对分子质量为38808.87,理论等电点为5.25;无信号肽和跨膜区,二级结构包含α-螺旋(81.01%)、无规则卷曲(13.19%)、β-折叠(3.16%)和延伸链(1.90%);含有9个线性B淋巴细胞抗原表位和5个T淋巴细胞抗原表位,以及10个磷酸化位点和10个互作蛋白,Bfr和Bfrd蛋白表面匹配良好、结合稳定。试验成功克隆出Bfr基因,其大小约为476 bp,获得大小约为35 ku的高纯度重组蛋白Bfr。说明Bfr蛋白具有良好的反应原性,有可能成为鼠伤寒沙门氏菌的疫苗开发和疾病诊断的候选蛋白。

基于媒体查询技术的响应式网页实践研究

随着移动互联网的普及,移动互联终端应用不断丰富,但传统网页在不同终端上显示存在效果不佳问题。结合不同设备尺寸,以媒体查询技术为基础,进行响应式网页设计,介绍基于媒体查询的响应式网页设计原理、设计思想与相关技术,并结合实践案例分析响应式网页在移动小屏幕、中小屏幕以及大屏幕上显示效果的设计步骤与技术要点,为响应式网页开发提供技术参考。

某省三甲医院住院病案首页填报质量的影响因素及对策

目的研究三甲医院住院病案首页填报质量的影响因素及对策。方法选取某省三甲医院2022年2月—2023年10月共3976份住院病案作为研究对象,同时根据3976份住院病案调查对应249名住院医师具体个人信息,并以此进行影响因素分析。结果参与本研究住院医师中男性群体占比较高,达到61.85%;医师主要来源于临床职工,达到54.62%;医师学历中硕士占比较高,达到53.41%;工作时间也多数在1年以上。在进行住院医师住院病历首页填写培训中,整体还有较大改善空间,同时住院医师自主学习主动性也有待提升。住院医师对病案首页信息填写质量认知水平整体较低,有待提升。多因素logistic回归分析结果显示,住院医师工作时间、住院医师规范化操作培训、病案首页信息填写培训、首页抽查质控均为影响住院病案首页信息填写质量的主要因素(P<0.05)。结论住院医师工作时间、住院医师规范化操作培训、病案首页信息填写培训、首页抽查质控均为影响住院病案首页信息填写质量的主要因素,通过及时根据影响因素采取相应改善措施,可高效促使住院病案首页填写信息的质量显著改善,促进后续病案信息管理质量不断提升。