不同SDS-PAGE分离胶浓度条件下大豆贮藏蛋白亚基的分辨效果

采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、12%、13%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下大豆籽粒主要贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基的分辨效果。结果表明,分离胶浓度大小对大豆贮藏蛋白(7S和11S组分)亚基电泳图谱分辨率的影响非常明显。分离胶浓度为9%和10%时,7S组分亚基(α′、α和β)分辨效果较好;分离胶浓度为13%时,11S组分各亚基(A3、A4A2、A1aA1b、A5、B3、B1aB1bB2和B4)分辨效果较好。如需获得较好的7S和11组分亚基综合分辨效果,以分离胶浓度为12%的凝胶系统为佳。

木本植物蛋白提取和SDS-PAGE分析方法的比较和优化

在几种木本植物上对４种常用蛋白提取方法、４种凝胶染色和脱色方法及影响蛋白定量和ＳＤＳＰＡＧＥ电泳的因素进行了比较研究，发现：利用改良丙酮沉降法提取蛋白，不仅提取效率高，而且杂质干扰少，得到的电泳结果，蛋白条带清晰，数量多；将常规凝胶染色和脱色液中的乙醇改用为甲醇可大大改善染色和脱色效果，获得了没有背景或背景很浅的电泳结果。通过研究确定了一套优化的适用于木本植物的蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、染色、脱色以及干胶制备的方法。利用这一优化方法对胡杨细胞盐胁迫蛋白进行了研究，发现了与高水平盐胁迫有关的６６ｋＤ蛋白和与盐胁迫和干旱胁迫均有关的２８ｋＤ蛋白，获得了满意的蛋白ＳＤＳＰＡＧＥ分析结果。

适于SDS-PAGE分析的苹果叶片蛋白质提取方法

为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HCl法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HCl法等5种蛋白质的提取方法。制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色。结果表明,改良的Tris-HCl法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 min增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条。利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白质差异带,分子量分别为71.9,60.5,52.6,41.1,35.3,18.5 kDa,条带清楚,背景清晰。因此,改良的Tris-HCl法适用于苹果叶片的SDS-PAGE分析。

燕麦麸蛋白质的Osboren分类及SDS-PAGE电泳分析

根据微量凯氏定氮法测定了燕麦麸中蛋白质含量,40～60目之间的燕麦麸蛋白质含量最高,平均为19.42%;并对其进行Osboren蛋白质分类以及分类后各类蛋白质组分含量的测定,结果表明,燕麦麸中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白占蛋白质总量依次为63.40%、15.18%、8.18%、13.24%。SDS-PAGE电泳分析各类蛋白的组成结果表明,燕麦麸中清蛋白含量最高且蛋白质亚基分布广泛。清蛋白必需氨基酸含量高,溶解性好,易于消化吸收,为优质的营养蛋白。

苹果实生树阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS—PAGE）分析了6株苹果实生树（‘红玉’ב金冠’）叶片中蛋白质随节位升高的动态变化。结果表明，随节位升高蛋白质带发生变化，共发现了3条阶段转变特异蛋白质带，分子量分别为55kD、19kD和17kD。其中55kD蛋白质表现为定性变化，有5株实生树在36～75节出现，到101～126节消失；19kD蛋白质在实生树低节位含量高，在86—100节之后含量突然降低；17kD蛋白质在实生树低节位含量低，随着植株的发育蛋白质在36—50节含量突然增加并保持稳定，到91～105节后含量突然下降。认为这3种蛋白质是苹果实生树阶段转变的特异蛋白质。

牛初乳、常乳和免疫乳乳清中主要蛋白的SDS-PAGE分析

采集荷斯坦奶牛初乳、常乳和免疫乳，通过SDS—PAGE电泳对其乳清中的主要蛋白进行分析。结果表明：从SDS—PAGE电泳图谱上可见有5个清晰的条带，自上而下分别为乳铁蛋白、牛血清白蛋白、IgG重链、β-乳球蛋白和α-乳白蛋白。其中32d免疫乳和0～3d初乳可见有IgG轻链，其他乳样IgG轻链条带较弱。0-7d初乳乳清蛋白含量随泌乳天数的增加而逐渐下降，0～5d初乳乳清蛋白含量差异显著，并维持较低水平。免疫乳15和32d各乳清蛋白含量均高于常乳。

HMW-GS的SDS-PAGE图谱在小麦品质评价中的应用

采用SDS-PAGE技术对陕西关中地区各时期大面积推广小麦品种、品种资源和新品系的HMW-GS组成进行了分析.在该地区50多年大面积推广的33个品种中,检测出9种HMW亚基 对 及其组成;品种HMW-GS的评分在5～10分之间,平均6.9分;4个时期品种HMW-GS的平均评分有升有降,优质亚基出现的频率普遍偏低;向小麦品种中聚合多种优质HMW-GS将成为陕西关中未来小麦育种的主要目标之一.53种小麦品种资源的亚基或亚基对组合类型比较丰富,具有一批携带优质亚基5+10、1、2*、7+8、14+15或17+18等资源.8个新选品系中,有4个品系携带了多种优质亚基,其中3个品系HMW--GS的评分为10分;Q1043已被审定通过,目前正在陕西关中推广种植.实践证明,采用SDS-PAGE方法对生产上推广品种、品种资源和新选品系的HMW-GS变异研究,有助于在短时间内了解生产上推广小麦品质生产现状、制订育种目标、选配亲本和品系品质性状筛选,是一种非常实用的品质快速检测方法.

利用SDS-PAGE鉴定水稻品种(组合)的真实性和纯度

利用本实验室完善后的SDS-PAGE,分析了8个水稻品种(组合)的贮藏蛋白,结果表明,品种(组合)间贮藏蛋白带谱表现出明显的多态性;并在实际检验工作中,运用水稻品种(组合)贮藏蛋白SDS-PAGE带谱的多态性,进行了种子的真实性或纯度鉴定。

肉苁蓉属4种肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳分析

目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。

鸭病毒性肠炎病毒的提纯及其结构蛋白SDS-PAGE分析

将鸭病毒性肠炎病毒（DEV）分离株SC-1经鸭胚成纤维细胞培养增殖后，采用差速离心结合蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯，获得多量、纯净的完整病毒粒子。病毒粒子主要位于40％～50％蔗糖层交界处，电镜下可观察到DEV具有典型的疱疹病毒特征，完整病毒粒子由囊膜、衣壳和核芯3个部分组成，直径为170～190nm。将纯化的DEV粒子经SDS—PAGE分析，发现其结构蛋白由11种多肽组成，即VP1（190000）、VP2（136000）、VP3（106000）、VP4（88000）、VP5（75000）、VP6（68000）、VP7（56000）、VP8（48000）、VP9（42000）、VP10（38000）和VP11（32000）．其中VP1、VP2、VP3、VP6、VP8和VP9等6条蛋白区带的相对百分含量较高，约占病毒结构蛋白总量的89．04％，为DEV的主要结构多肽。

SDS-PAGE电泳技术分析蛋白质的研究

SDS-PAGE是分析蛋白质的一项技术,重点介绍了其原理、凝胶制备及染色方法,并对双向电泳(2-DE)和电泳后蛋白质鉴定方法进行了简单的介绍。

贵重动物类中药材蛋白质SDS-PAGE的图谱研究

目的:为贵重动物类中药材的真伪鉴别提供科学的依据。方法:用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定人工牛黄、鹿蹄筋、蝮蛇、乌梢蛇、金钱白花蛇及其伪品的主要蛋白质分子量。结果:获得清晰的电泳谱带及相应数据。结论:方法准确、可靠、重复性好,可为蛇类药材、人工牛黄、鹿蹄筋及其制剂的生产、质量控制提供参考。

多倍体麦类作物Wx蛋白检测的SDS-PAGE方法

本文通过对小麦蜡质蛋白的实验和研究 ,详细论述了蜡质蛋白的特性、提取原理、电泳原理和检验原理。对多倍体麦类作物Wx蛋白亚基的检测 ,提出了应用效果良好的电泳系统 ,并就提取方法、凝胶配方和操作步骤进行了描述。本文还列出了部分麦类作物蜡质蛋白亚基基本模式示意图和实验例证 ,具有很好的参考价值。

利用SDS-PAGE法检测火腿肠中大豆蛋白的含量

利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结合凝胶成像来分析测定火腿肠中大豆分离蛋白的含量.试验得出电泳分离肉制品中大豆分离蛋白的优化条件为：浓缩胶为5%、分离胶为12%、上样量为20μL、初始电压为80 V,进入分离胶层后电压100 V.大豆蛋白含量在06%范围内与其酸性A3亚基线性相关,回归方程为Y=2.760 9X-0.383 8,相关系数为0.994 1.

棉叶总蛋白提取及SDS-PAGE电泳的改良

对棉花叶片总蛋白的几种提取方法及影响蛋白定量和SDS-PAGE电泳的因素进行了比较,确立了一套适用于棉花蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、脱色以及干胶制备的方法。发现利用25mmol·L1,pH8.0Tris-HCl缓冲液提取的棉花叶片总蛋白,提取效率高,蛋白齐全。采用改良后的棉花SDS-PAGE电泳方法—改良丙酮沉降法,电泳结果显示,条带清晰、数量多、分辨率高。

SDS-PAGE染色-脱色方法的改良

在传统的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）技术的基础上，对制备的凝胶进行快速染色-水洗脱色及提高灵敏度的探讨，建立改良的SDS—PAGE染色一脱色法。与传统的方法比较，快速法在不影响检测灵敏度的情况下，大大缩短了分析所需时间，整个分析过程只需40～60min，并且降低了实验成本，有重要的推广价值。提高灵敏度法可检测到0．1～0．5μg蛋白／条带。

白果蛋白质提取及SDS-PAGE分析

以白果为原料,采用不同的原料处理及蛋白质提取方法,运用单因素和正交设计的方法,以料液比、提取时间、提取液浓度、提取液pH值为考察因素,研究白果蛋白质提取的最佳工艺条件,并对提取的白果蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳分析。结果表明:经过冷冻干燥处理的白果采用Tris-HCl提取法获得的白果蛋白含量较高;Tris-HCl法提取白果蛋白的最佳工艺为pH8.5、0.15mol/L Tris-HCl溶液、料液比1:20(g/mL)、提取时间4h,白果蛋白质的提取率达到75.01%。白果蛋白SDS-PAGE分析表明,白果蛋白中约含13条亚基,主要为21kD和32kD的两种亚基,白果蛋白的亚基主要集中在31～100kD,占亚基总数的77%。

小麦谷蛋白聚合体的MS-SDS-PAGE及其与面包烘烤品质的关系

选用品质 (微量 SDS沉淀值、稳定时间 )优劣不同的 10个“931116 8/ / / 81831- 1/ pernell/ /京 4 11”的 F6 品系 ,探索多层浓缩胶 SDS- PAGE(MS- SDS- PAGE)的实验方法 ,初步探讨可溶性谷蛋白的分子量分布状况和不溶性谷蛋白(GMP)与面包烘烤品质的关系。结果表明 ,通过 SDS-磷酸缓冲液可将谷蛋白聚合体分成两部分 :分子量较小的 SDS-可溶性谷蛋白聚合体和分子量较大的 SDS-不溶性谷蛋白聚合体 (GMP) ;多层浓缩胶 SDS- PAGE可用于分析可溶性谷蛋白的含量及其分子量分布。总蛋白含量相当时 ,随着醇溶蛋白含量的降低 ,谷蛋白含量增加 ,小麦品质 (微量 SDS-沉淀值、稳定时间 )变优。品质优良材料的 GMP、分子量较大的可溶性谷蛋白的比例高于品质差劣的材料。仅靠蛋白质及其组分的含量、 HMW- GS组成进行品质评价是不够全面的 ,结合谷蛋白聚合体的组成和含量进行评价和选择育种 。

SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱法研究人参蛋白热稳定性

目的研究人参蛋白在不同加热温度及时间下的热稳定性。方法采用中性缓冲液抽提和硫铵分级沉淀法提取人参蛋白,在不同加热温度及时间条件下,对人参蛋白进行SDS-PAGE电泳和高效凝胶过滤色谱分析。结果人参蛋白随着加热温度的升高而发生聚集和解聚;在50℃时,人参蛋白会形成可溶性的大分子聚合物,这一聚合物的浓度随加热时间的延长而不断升高。结论人参中各种蛋白亚基的热敏感性各不相同。

凝胶成像系统SDS-PAGE法测定乳及乳制品中乳铁蛋白

为了建立一种检测市场上乳及乳制品中的乳铁蛋白含量的简便方法——SDS-PAGE法,采集了10种液态奶、4种奶酪、3种乳清蛋白粉、4种酸奶和4种奶粉,利用SDS-PAGE法分离乳铁蛋白,并优化了分离胶的浓度、电压、上样量和染色方法。经优化的SDS-PAGE法的操作条件为:分离胶浓度为12%,浓缩胶电压为120V,分离胶电压为200V,改良的考马斯亮蓝染色,乳铁蛋白标准品的点样浓度为0.1111mg/mL,点样量为12μL。采用此电泳条件分离不同乳及乳制品中的乳铁蛋白,运用凝胶成像系统测得乳铁蛋白含量的相对标准偏差小于10%,且测得的含量均高于其检出限和定量限。同一样品同一块胶,同一样品不同凝胶乳铁蛋白的含量相对标准偏差小于10%,说明利用本方法得到的实验结果准确度高,重复性好。