岷山红三叶愈伤组织诱导和植株再生研究

通过对岷山红三叶下胚轴和子叶再生体系建立的研究，获得愈伤组织诱导的最佳培养基为：Ms＋2mg／L 2，4D＋0．5mg／L 6-BA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，胚性愈伤组织诱导培养基为：MS＋0．1mg／L IAA＋0．5mg／L 6-BA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，芽诱导培养基为：B5＋0．06mg／L NAA＋2％蔗糖＋0．6％琼脂，每瓶可以长出2～10条茎，将茎转入生根培养基后愈伤继代可持续出芽。最佳的生根培养基为：1／2MS＋0．05mg／L NAA＋1．5％蔗糖＋0．8％琼脂。建立再生植株约需160d。

岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产性能、骨矿化及血液指标的影响

试验旨在研究岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产性能、骨矿化、血清生化指标、内分泌激素水平等的影响。将50周龄罗曼蛋鸡450羽,随机分成5组,每组6个重复,每个重复15羽。1组(对照)饲喂玉米-豆粕-杂粕型基础饲粮,2,3,4,5组分别在基础饲粮中添加5,10,20 mg/kg红三叶异黄酮和20 mg/kg大豆异黄酮(参比)。预试期2周,正试期10周。结果表明,1)各组生产性能和蛋品质无显著差异(P>0.05),呈现出添加红三叶异黄酮提高而添加大豆异黄酮(5组)降低蛋壳强度的趋势(P=0.213);2)4组脾脏指数高于1,3(P<0.05)和5组(P=0.150);3)4组胫骨灰含量高于1,2组(P<0.05),3,5高于2组(P=0.140,P=0.152);4)添加红三叶异黄酮各组血清钙含量提高(P=0.091),大豆异黄酮提高血清钙含量的作用似更强;5)4组血清甲状腺素(T4)含量高于1(P<0.05)和2,3组(P=0.150,P=0.20),5组高于1组(P=0.074)。结果提示,饲粮中添加5,10,20 mg/kg红三叶异黄酮和20 mg/kg大豆异黄酮对产蛋后期母鸡产蛋性能无显著影响;添加红三叶异黄酮一定程度上改善了蛋壳强度,添加量20 mg/kg促进了骨矿化。

灌水和施肥对岷山红三叶生产性能的影响

研究了不同灌水量和施肥量对岷山红三叶生产性能的影响。结果表明:鲜草产量和干草产量极显著正相关,株高和干草产量显著正相关,株高和分枝数显著负相关,分枝数和草产量相关性极低。不施磷肥或不灌水的情况下,分别增大灌水量(1 000 m3/hm2)和施肥量(P2O5360 kg/hm2+K2O 90 kg/hm2),岷山红三叶的分枝数较多,草产量较高;如果磷肥施用量增加(P2O5120 kg/hm2+K2O 90 kg/hm2),可适当减少灌水量(500 m3/hm2),分枝数和草产量也较高。灌水量和施肥量对红三叶株高无显著影响。

提高岷山红三叶种子发芽率的研究

试验采用H2SO4、NaOH、KNO3和丙酮药剂对岷山红三叶Trifoliumpratense种子进行浸泡处理,以观察这些药剂对种子休眠的破除效果。结果表明,4种药剂均能有效破除种子休眠,提高发芽率;不同药剂、不同质量分数和不同处理时间对发芽率的影响不同,4种药剂中,用40%H2SO4溶液处理10min的效果最佳,其发芽率比对照(50%)提高37%。其次是30%H2SO4溶液处理15min、0.2%KNO3溶液处理12h、40%NaOH溶液处理10min、30%NaOH溶液处理15min和10min,发芽率分别比对照提高34%、31%、30%、30%和29%。丙酮溶液处理的效果较差,仅使发芽率提高20%。

岷山红三叶草异黄酮合酶基因的克隆及序列分析

从岷山红三叶克隆异黄酮合酶基因,并对序列进行比对和进化分析。建立岷山红三叶愈伤组织培养体系,采用RT-PCR扩增从愈伤组织总RNA中分离了异黄酮合酶基因,并将其克隆到pGEM-T Easy载体,测序,得到全长1575bp的片段。序列分析表明,异黄酮合酶基因含1575个核苷酸,和大豆等其他植物中异黄酮合酶具有很高的同源性。

根癌农杆菌介导IFS基因对岷山红三叶遗传转化研究

以岷山红三叶草为试材,以其子叶和叶柄的愈伤组织为受体,采用根癌农村菌介导法,研究其遗传转化的条件,以期建立根癌农杆菌介导的异黄酮合酶IFS基因遗传转化体系。结果表明:利用该转化体系,获得的抗性愈伤组织,通过提取其基因组进行PCR扩增鉴定,证实为转化子。提示根癌农杆菌介导转化岷山红三叶愈伤组织是完全可行的,为利用基因工程方法改良红三叶的品种并获得高产异黄酮品系奠定了基础。

巴东红三叶胚性细胞悬浮系的建立

以红三叶(Trifolium pratense)野生品种巴东红三叶的叶片为外植体,在MB-1至MB-9的固体培养基上诱导愈伤组织,筛选出最佳培养基MB-9。愈伤组织形成以后,均经MB-9固体培养基上继代培养3～4次后,获得胚性愈伤组织,然后转至改良的MB-9液体培养基中,经强化培养两个月后,获得胚性细胞悬浮系。结果表明,缩短换液时间,每隔3～4d换液1次,可加快胚性细胞悬浮系的建立。

岷山红三叶与冬小麦保护播种技术研究

通过比较岷山红三叶与冬小麦保护播种,岷山红三叶春播后生长期喷施盖草能化学除草和岷山红三叶春播苗期人工除草3种不同处理的株高、草产量、投入、产出等各项指标,结果表明:运用岷山红三叶与冬小麦保护播种技术,比盖草能除草和人工除草经济适用,不仅降低了播种当年杂草对岷山红三叶的危害程度,且播种第2年的株高、鲜干草产量均和其他2处理组差异显著(P<0.05),同时提高了岷山红三叶播种当年和第2年后的经济效益,是目前人工防治田间杂草的有效措施。

岷山红三叶示范推广及产业化开发进程

从岷山红三叶Trifolium pratense品种来源、品种特性、示范推广及产业化进程,产业化过程中存在的问题和风险等方面进行了论述,最后提出了解决这些问题的建议。

岷山红三叶改良亚高山草甸退化草地效果研究

研究了岷山红三叶对亚高山草甸退化草地的改良效果,结果表明:运用岷山红三叶改良退化的亚高山草甸草地,可抑制马先蒿等毒害草的生长,迅速提高天然草地的草丛高度,使地上植物量提高30%,可食植植量所占百分比显著增加,极大地改善了亚高山草甸草地的质量和生产能力,表明运用岷山红三叶改良亚高山退化草地技术具有推广应用价值。

定西南部高寒阴湿地区特色草产业发展现状及对策探讨

分析了岷山红三叶Trifolium pratens和岷山猫尾草Phleum pratense在定西南部高寒阴湿地区特色草产业发展及当地农业产业结构调整中的重要性,探讨了定西南部特色草产业发展现状和存在的问题,并从基地建设、龙头培育、技术服务和市场流通等环节提出了解决问题的对策。

岷山红三叶茎叶分离技术研究

通过研究岷山红三叶Trifolium pretense cv. Minshan茎叶分离技术表明,传统方法加工脱粒种子费工费时,成本高,效率低,种子浪费较大;茎叶分离技术加工种子省时省工,成本低,效率高,种子纯净度高。用人工铡刀切短全株鲜草加工鲜草时,工作量大,费工费时,成本高,加工速度慢;用茎叶分离技术加工鲜草时,大大缩短了加工时间,用工量少,成本低,提高了鲜草就地烘干打捆的效率,而且加工的草捆无粗老茎秆,异黄酮含量相应提高。

岷山红三叶总异黄酮提取方法的研究

为选择提取岷山红三叶中总异黄酮的最佳方法,本文研究了用回流法、冷浸法和索式提取法提取岷山红三叶中总异黄酮的效果。通过紫外分光光度法测定提取液中的总黄酮含量,结果表明:回流提取法提取效果优于冷浸法和索式提取法,具有安全、简便和提取率高的优点。

岷山红三叶总异黄酮提取工艺的研究

通过正交试验,对影响岷山红三叶异黄酮提取工艺中乙醇浓度、温度、料液比、提取时间等因素进行探讨。试验结果表明,影响提取效果因素的主次顺序为:温度>提取时间>乙醇浓度>料液比。最佳提取工艺参数为:乙醇浓度80%,温度70℃,料液比1∶15,提取时间4h。

种植密度对“蒙农1号”红三叶种子产量及其构成因子的影响

以"蒙农1号"红三叶为试材,对4种不同种植密度下单株分枝数、每枝花序数、每花序小花数、单株种子数、单株结实率、千粒质量及单株种子产量进行了测定,研究不同种植密度对种子产量及其构成因素的影响。结果表明:行株距60 cm×40 cm、60 cm×50cm、50 cm×40 cm、50 cm×50 cm 4个处理都对"蒙农1号"红三叶单株种子产量产生了影响,其中密度为50 cm×40 cm的单株种子产量最高,达到9.6 g,且显著高于其它3个种植密度处理(P<0.05),其它3个种植密度的单株种子产量没有显著性差异(P<0.05)。单株分枝数、单株种子数、千粒质量是"蒙农1号"红三叶种子产量的主要构成因子。不同种植密度主要对单株分枝数和单株种子数2个种子产量构成因子有调控作用,对千粒质量无影响。