E3泛素连接酶三结构域蛋白59对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨三结构域蛋白59(TRIM59)对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法将非小细胞肺癌细胞系A549分为siControl组、siTRIM59组、Flag-Vector组和Flag-TRIM59组,用CCK-8实验检测细胞增殖活力;用TUNEL染色实验检测细胞凋亡率;用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;用蛋白质免疫印记实验检测AKT表达水平和磷酸化水平。结果与siControl组相比,siTRIM59组细胞增殖活力下降(P<0.05),凋亡比例升高(P<0.05),细胞迁移率降低(P<0.05),侵袭到Transwell下层小室的细胞数减少(P<0.05),AKT磷酸化水平下降。与Flag-Vector组相比,Flag-TRIM59组细胞增殖活力增强(P<0.05),凋亡比例降低(P<0.05),细胞迁移率升高(P<0.05),侵袭到Transwell下层小室的细胞数增加(P<0.05),AKT磷酸化水平上升。结论TRIM59促进非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,以及AKT的磷酸化。

鼻咽癌组织中TRIM59、PPM1B的表达及临床意义

目的研究鼻咽癌(NPC)组织中三结构域蛋白59(TRIM59)、蛋白磷酸酶1B(PPM1B)的表达及临床意义。方法收集2014年2月至2018年2月四川省遂宁市中心医院诊治的97例NPC患者,免疫组织化学染色法检测癌组织和癌旁组织中TRIM59、PPM1B的表达;分析两者的关系及与临床特征的关系。Kaplan-Meier生存曲线分析TRIM59、PPM1B对NPC患者预后的影响。结果与癌旁组织比较,癌组织中TRIM59阳性表达率较高(P<0.05),而PPM1B阳性表达率较低(P<0.05)。TRIM59与PPM1B表达呈负相关(r=-0.524,P<0.01)。Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移的NPC患者TRIM59阳性表达率、PPM1B阴性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的NPC患者(P<0.05)。TRIM59阳性表达者3年生存率低于TRIM59阴性表达者(P<0.05);PPM1B阳性表达者3年生存率高于PPM1B阳性表达者(P<0.05)。结论NPC中TRIM59表达上调,而PPM1B表达下调,两者表达与肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关,在鼻咽癌预后评估上有一定临床意义。

TRIM59通过结合BCLAF1调控人皮肤黑色素瘤SK-MEL-2细胞的恶性生物学行为

目的:探究三结构域蛋白59(TRIM59)调控人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-2增殖、细胞周期、凋亡及迁移侵袭的作用机制,及其与Bcl2相关转录因子1(BCLAF1)之间的关系。方法:qPCR和WB法检测人表皮黑色素细胞HEMn-LP、人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-2、UACC903、A375及36例邢台市人民医院2019年2月至2021年7月收集的皮肤黑色素瘤组织中TRIM59的mRNA和蛋白表达,使用脂质体将si-con、si-TRIM59转染至SK-MEL-2细胞中,WB法检测干扰TRIM59表达对细胞中周期蛋白D1(CCND1)、细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)、肿瘤抑制蛋白基因(TP53)和BCLAF1蛋白表达的影响,CCK-8法、流式细胞术、划痕愈合实验、Transwell实验检测对细胞的活性、凋亡、迁移和侵袭的影响,免疫共沉淀(Co-IP)实验检测对细胞中TRIM59蛋白与BCLAF1结合能力的影响。结果:与HEMn-LP细胞相比,SK-MEL-2、UACC903、A375细胞中TRIM59 mRNA和TRIM59、BCLAF1蛋白均呈高表达(均P<0.05),SK-MEL-2细胞中TRIM59表达水平最高。相较于si-con组和Normal组,沉默TRIM59后,SK-MEL-2细胞的活性显著降低,细胞周期阻滞于G2期,CCND1、CDK2的蛋白表达显著降低,TP53蛋白和细胞凋亡率均显著升高,划痕抑制率明显升高,迁移侵袭细胞数明显降低(均P<0.05)。免疫共沉淀实验结果显示,TRIM59与BCLAF1之间存在蛋白结合关系。TRIM59与BCLAF1在肿瘤组织中的表达呈显著的正相关(r=0.878,P<0.001)。结论:干扰TRIM59表达能够抑制人皮肤黑色素瘤SK-MEL-2细胞的增殖、迁移和侵袭而促进凋亡,抑制SK-MEL-2细胞的恶性生物学行为,其机制可能与TRIM59结合BCLAF1有关。

肝细胞癌组织中miR-548c-3p、TRIM59的表达变化及其意义

目的分析肝细胞癌(HCC)组织中微小RNA 548c-3p(miR-548c-3p)、三基序蛋白59(TRIM59)mRNA的表达及意义。方法运用实时荧光定量PCR检测114例HCC组织及癌旁组织中的miR-548c-3p、TRIM59 mRNA;分析miR-548c-3p、TRIM59 mRNA表达与患者临床病理特征的关系;随访5年,采用Kaplan-Meier法分析不同miR-548c-3p、TRIM59 mRNA表达患者的生存差异。结果HCC组织中miR-548c-3p的相对表达量低于癌旁组织,而TRIM59 mRNA表达高于癌旁组织(P均<0.05)。HCC组织中miR-548c-3p、TRIM59 mRNA表达与TNM分期、淋巴结转移和分化程度有关(P均<0.05)。HCC组织中miR-548c-3p与TRIM59 mRNA表达呈负相关(r=-0.735,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,miR-548c-3p低表达者5年总体生存率(OS)低于miR-548c-3p高表达者;TRIM59 mRNA高表达者OS低于TRIM59低表达者(P均<0.05)。结论HCC组织中miR-548c-3p表达降低,TRIM59 mRNA表达升高,两者与TNM分期、淋巴结转移、分化程度及预后有关,有可能成为新的HCC诊治及预后的分子标志物。

三结构域蛋白59、核因子抑制蛋白在胃癌组织中表达及其与患者化疗效果和预后的关系

目的检测胃癌组织中三结构域蛋白59(TRIM59)、核因子抑制蛋白(IκBα)表达情况,并分析两者与患者化疗效果和预后的关系。方法选取2020年1月至2023年1月于嘉兴学院附属第二医院行手术治疗的胃癌患者103例,选取手术切除的距离癌组织边缘>2 cm的癌旁组织作为对照。比较胃癌组织、癌旁组织TRIM59、IκBα表达。经Pearson相关性分析法分析胃癌组织中TRIM59、IκBα表达的相关性。所有患者化疗3个周期后根据化疗效果分为耐药组、敏感组。比较耐药组、敏感组一般资料及胃癌组织TRIM59、IκBα表达。经Logistic回归模型分析胃癌化疗效果的影响因素;绘制Kaplan-Meier曲线分析胃癌组织TRIM59、IκBα表达与胃癌进展及生存的关系。计数资料表示为[例(%)],用χ^(2)检验;K-S检验符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较用独立样本t检验。结果免疫荧光实验显示,TRIM59和IκBα可在相同的细胞区域内观察到两种不同的荧光信号,表现为细胞核内的共定位;胃癌组织的TRIM59表达水平高于癌旁组织(17.39±4.04比8.35±2.05,t=20.251,P<0.01);胃癌组织的IκBα表达水平高于癌旁组织(15.40±3.82比7.16±1.97,t=19.457,P<0.01)。Pearson相关性分析显示,胃癌组织中TRIM59、IκBα表达呈正相关(r=0.341,P<0.01);Logistic回归分析显示,年龄、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期、未/低分化、TRIM59表达、IκBα表达是胃癌患者化疗效果的影响因素(P<0.05);耐药组胃癌组织的TRIM59表达水平高于敏感组组织(19.35±3.47比14.42±2.96,t=7.473,P<0.01);耐药组胃癌组织的IκBα表达水平高于敏感组组织(17.21±3.19比12.65±3.04,t=7.234,P<0.01)。103例胃癌患者失访15例,其余88例随访8~39个月,将胃癌组织中TRIM59、IκBα表达高于中位值的分为高TRIM59表达、高IκBα表达,低于中位值的分为低TRIM59表达、低IκBα表达。高TRIM59表达的中位无进展生存期(PFS)短于低TRIM59表达[24(22,25.5)个月比39(28,50)个月,χ^(2)=6.885,P<0.05];高IκBα表达的PFS短于低IκBα表达[24(17.5,30.5)个月比33(20,39)个月,χ^(2)=7.145,P<0.05];高TRIM59表达的中位总生存期(OS)短于低TRIM59表达[33(20,46)个月比38(36,40)个月,χ^(2)=4.340,P<0.05];高IκBα表达的OS短于低IκBα表达[30(19.5,40.5)个月比38(36,40)个月,χ^(2)=7.283,P<0.05]。结论胃癌组织中TRIM59、IκBα表达升高,表达水平为正相关,且两者均与胃癌化疗效果及预后密切相关。

非小细胞肺癌患者癌组织异常纺锤体样小头畸形相关蛋白和三结构域蛋白59表达及意义

目的观察非小细胞肺癌患者癌组织异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(abnormal spindle-like microcephaly-associated protein,ASPM)、三结构域蛋白59(tripartite motif-59,TRIM59)表达变化,探讨其与非小细胞肺癌患者预后的关系。方法79例非小细胞肺癌患者均行手术治疗。取手术切除癌组织和癌旁组织标本,采用免疫组织化学法检测ASPM、TRIM59阳性表达率;Spearman相关法分析癌组织ASPM与TRIM59表达的相关性;比较不同年龄、性别、病理类型、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移非小细胞肺癌患者癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率;绘制ROC曲线,评估癌组织ASPM、TRIM59阳性表达诊断非小细胞肺癌的价值;随访24~36个月,Kaplan-Meier法分析癌组织ASPM、TRIM59表达与非小细胞肺癌患者预后的关系。结果癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率(56.96%、73.42%)均高于癌旁组织(24.05%、29.11%)(P<0.05)。癌组织ASPM与TRIM59表达呈正相关(r=0.672,P=0.002)。癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率在临床分期Ⅲ~Ⅳ期(73.81%、85.71%)、低分化(70.59%、84.31%)、有淋巴结转移者(75.76%、87.88%)分别高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期(37.84%、59.46%)、高分化(32.14%、53.57%)、无淋巴结转移者(43.48%、63.04%)(P<0.05);不同年龄、性别、病理类型者癌组织ASPM、TRIM59阳性表达率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。癌组织ASPM、TRIM59阳性表达诊断非小细胞肺癌的AUC分别为0.812(95%CI:0.781~0.855,P<0.001)、0.803(95%CI:0.763~0.839,P<0.001),灵敏度分别为78.48%、75.95%,特异度分别为74.68%、72.15%,准确率分别为76.58%、74.05%;二者联合诊断非小细胞肺癌的AUC为0.875,灵敏度为82.28%,特异度为77.22%,准确率为79.75%。79例患者随访期间死亡18例,癌组织ASPM、TRIM59阳性表达者中位生存期(18.98、17.51个月)均短于阴性表达者(22.58、20.29个月)(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者癌组织ASPM、TRIM59表达上调提示临床分期晚、分化程度低、有淋巴结转移、预后差,二者联合诊断非小细胞肺癌有较高价值。