双参饮片—标准汤剂—成品量值传递研究

为将少数民族用药双参开发成配方颗粒,建立双参饮片、标准汤剂与配方颗粒的高效液相色谱马钱苷酸含量测定方法及薄层色谱鉴别方法,并同时考察双参饮片—标准汤剂—配方颗粒的量值传递关系。采用安捷伦1260Ⅱ液相色谱仪与Waters Symmetry C_(18)柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为240 nm,流速为1 mL/min,柱温为30℃,建立马钱苷酸含量测定方法;以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶1)为展开剂,置紫外光灯(254 nm)下检视,建立薄层鉴别方法;以出膏率、马钱苷酸含量、薄层鉴别图谱为主要评价指标,分析量值传递规律。结果表明:马钱苷酸含量测定、鉴别方法具有较高的稳定性、重复性及可信度;3批双参配方颗粒出膏率均值为18.7%,马钱苷酸含量均值为41.1 mg/g,马钱苷酸含量转移率均值为43.1%,均在15批标准汤剂均值±3SD范围内。马钱苷酸含量测定和薄层色谱鉴别方法可用于双参配方颗粒质量评价,为进一步开展双参配方颗粒研究提供数据基础,并促进少数民族用药现代化。

双参降血糖作用机制研究

[目的]初步阐明双参的降血糖作用机制。[方法]采用四氧嘧啶制作试验性糖尿病小鼠模型,以比色分析法测定心、肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。[结果]双参能提高试验性糖尿病小鼠的心、肝、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,并能降低心、肝和肾组织中MDA的含量。[结论]双参具有降低试验性糖尿病小鼠血糖的作用,而这种作用可能是由清除自由基及抗脂质过氧化过程实现的。

双参降血糖作用的研究

目的:研究双参的降血糖作用。方法:用10%葡萄糖及240μg/kg肾上腺素造成小鼠生理性高血糖模型,用80mg/kg四氧嘧啶造成小鼠糖尿病模型,观察双参对上述模型动物的血糖、体重、饮食量和饮水量的影响,从而观察双参的降血糖作用。结果:双参对正常小鼠无明显降低作用(P>0.05),但能降低葡萄糖及肾上腺素性高血糖小鼠的血糖水平(P<0.01,P<0.001),降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),减少动物的饮水量和饮食量。结论:双参对多种原因引起的高血糖均有一定的降糖作用。

双参对小鼠抗应激作用的实验研究

目的:研究双参对小鼠的抗应激作用。方法:采用常压耐缺氧、耐高温、耐低温、游泳实验,观察双参对小鼠抗应激作用的影响。结果:不同剂量的双参均具有明显的抗应激作用,其中7.8g/kg剂量组有明显的耐缺氧(P<0.001)、耐高温(P<0.001)、耐低温(P<0.001)和抗疲劳(P<0.001)作用。结论:双参有明显的抗应激作用。

药用植物双参的三萜类成分研究

目的:对药用植物双参的化学成分进行研究。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS等多种柱层析方法对双参进行分离纯化,采用现代波谱学技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果:从双参地下部分的乙酸乙酯部位分离得到4个三萜类成分,分别鉴定为3β,28-二羟基-乌苏烷(1)、3β,23-二羟基-12-烯-28-酸(2)、α-香树精(3)和3β-羟基-24-降-乌苏-4(23),12-二烯-28-酸(4)。结论:这4个三萜类成分首次从该药用植物中分离得到。

响应面法优化双参多糖的提取工艺研究

目的:提高双参多糖的提取率。方法:采用苯酚-硫酸法对双参多糖进行定量分析,在单因素实验的基础上,运用响应面法对双参多糖的提取工艺进行优化。结果:响应面法优化所得最好条件分别为料液比1:39(W/V)、温度89℃、提取次数3次和提取时间3.97 h,在最优条件下多糖的平均提取率为5.97%。结论:单因素考察结合响应面法对双参多糖的提取条件优化合理,为后续双参多糖的开发利用提供一定的理论基础。

药用植物双参正丁醇部位化学成分研究

目的:对药用植物双参正丁醇部位的化学成分进行研究,以期寻找活性成分。方法:运用硅胶、AB-8、ODS以及凝胶等分离材料分离双参正丁醇部位,利用NMR技术鉴定化合物结构。结果:从双参正丁醇部位分离得到5个化合物,分别鉴定为(3S,4R,4a S,6S,7R,7a S)-Methyl 3,6-dihydroxy-7-methyloctahydrocyclopenta[c]pyran-4-carboxylate(1)、咖啡酸甲酯(2)、(+)-Lariciresinol(3)、蔗糖(4)和Alyxialactone(5)。结论:这5个化合物首次从该植物中分离得到,其中,化合物1首次从天然产物中分离得到。

药用植物双参中环烯醚萜类成分研究

目的:对药用植物双参的环烯醚萜类成分进行研究。方法:通过AB-8型大孔吸附树脂、ODS、硅胶以及Sephadex LH-20等方法对双参提取物进行纯化,利用核磁共振对得到的化合物结构进行鉴定。结果:从双参提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为马钱苷元(1)、马钱子苷(2)、马钱苷酸(3)、6’-O-β-吡喃葡萄糖马钱苷(4)、大花双参苷A (5)、3’-O-β-D-glucopyranosylsweroside (6)、secologanol (7)。结论:化合物1～7均首次从该植物中分离得到。

不同分子量双参多糖抗氧化活性研究

目的:对不同分子量双参多糖的抗氧化活性研究。方法:双参经水提醇沉法、sevag法脱蛋白、大孔吸附树脂脱色素得粗多糖,采用40%、60%、80%乙醇分级醇沉得到三个不同分子量的双参多糖TGPA、TGPB和TGPC,利用HPGPC色谱分析三个不同醇沉部位的双参多糖分子量。采用DPPH自由基和超氧阴离子自由基体系对其进行抗氧化活性评价。结果:TGP (A-C)分子量范围在1600~2000 KDa、630~2000 KDa和230~2000 KDa。TGPA主要的分子量为2000KDa、TGPB主要分子量为691830KDa、TGPC主要分子量为575439KDa。不同分子量的双参多糖体外抗氧化活性均呈浓度浓度依赖性,其中分子量小的双参多糖具有较高的清除作用。结论:双参多糖具有一定的抗氧化作用,为其进一步均一多糖的分离纯化、结构表征和活性探索奠定基础。

药用植物双参粗多糖的抗氧化活性研究

本实验对药用植物双参粗多糖组分及其抗氧化活性进行了研究。双参经70%乙醇加热提取,提取液经正丁醇萃取得到脂溶性部分和水溶性部分,水溶性部分经sevag法脱蛋白、AB-8大孔吸附树脂柱层析分离,得到四个部位,用90%乙醇醇沉分别得到LTGP-A-D四个粗多糖组分。利用苯酚-硫酸法测定各粗多糖的含量,并测定其体外抗氧化活性。结果表明双参粗多糖LTGP-A-D在水溶性组分中的含量分别为10.91±0.57%、5.61±1.34%、7.04±2.05%和3.58±0.71%。四个粗多糖组分具有一定的体外抗氧化活性,其中清除羟基自由基和超氧阴离子的作用较显著,清除DPPH自由基的作用最弱。本实验为双参多糖的分离纯化、生物活性测定奠定了基础。

双参粗提组分对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的影响

研究药用植物双参对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的影响,本实验对双参进行水提,水提液经脱蛋白、脱色素以及95%乙醇醇沉,得到双参粗提组分。检测该组分对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞异常增殖的抑制作用,以及其对高糖模型细胞中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,该双参粗提组分可明显抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的异常增殖,同时可显著提高模型细胞中SOD的活力,降低MDA的含量,提示其对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞具有保护作用。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术快速鉴定彝族药双参的化学成分

目的应用超高效液相色谱-电喷雾/四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)技术快速鉴定双参药材的化学成分。方法采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以体积分数0.1%甲酸水溶液(A相)-乙腈(B相)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),采用电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下采集数据,扫描范围m/z 100~2000,通过与对照品的保留时间及质谱数据信息对比,并结合精确相对分子质量、质谱裂解规律、质谱数据库(ChemicalBook,ChemSpider,Pubmed等)及相关文献,对双参的化学成分进行快速鉴定。结果从彝族药双参中共鉴定出59个化合物,其中包括11个环烯醚萜类、23个有机酸类、14个三萜类、4个糖苷、其他类(1个香豆素类、1个生物碱类、2个酯类、1个多酚类、2个核苷类),其中通过与对照品对比鉴定了8个化合物,分别为绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、马钱苷、马钱苷酸和樟芽菜苷。结论该研究首次采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对彝族药双参的成分进行了研究,为其质量控制、药效物质基础及体内代谢物分析提供可靠的依据。

双参均一多糖TGP-1的分离纯化及其抗肿瘤活性

目的从双参中分离纯化得到均一多糖,并研究其结构和抗肿瘤活性。方法双参粗多糖经DEAE-FF和Sephadex G-100串联柱色谱分离,得到组分TGP-1。采用HPGPC、IR、UV、PMP-HPLC对TGP-1的结构进行表征,并考察TGP-1对3种不同肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果TGP-1为酸性均一多糖、其相对分子量为501.19 k Da,由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成,其摩尔比为0.6∶50∶0.6∶10.8∶10.4。Smith降解显示TGP-1可能存在1→3、1→3,4、1→3,6、1→2,4等键型。体外TGP-1可抑制肝癌Hep G2细胞的增殖。结论TGP-1是一种高度支化的均一相对分子质量的酸性多糖,其化学结构及抑制肝癌HepG2细胞的增殖作用机制有待研究。