In vitro porcine brain tubulin assembly inhibition by water extract from a Chinese medicinal herb,Tripterygium hypoglaucum Hutch

AIM： To investigate the effect of Tripterygium hyp-oglaucum Hutch （THH） on the assembly and disassembly process of tubulin and its possible mode of action.METHODS： In vitro porcine brain tubulin assembly assay was employed to analyze the inhibitory effects of THH at different concentrations （0.05 μg/L, 0.07 μg/L, 0.09μg/L）. Colchicine （0.0025 mmol/L, 0.0050 mmol/L, 0.0075 mmol/L） was used as a positive control.RESULTS： THH could significantly inhibit the assembly of isolated porcine brain tubulin at all tested concentrations.CONCLUSION： THH is capable of inducing aneuploidy in mammals via tubulin polymerization inhibition pathway and may pose a genetic risk to human beings.

昆明山海棠在微核实验中非整倍体毒性的研究

本文报道以小鼠着丝粒次要卫星ＤＮＡ探针ＦＩＳＨ和抗着丝粒ＣＲＥＳＴ染色，研究了可疑的非整倍体毒剂昆明山海棠（ＴＨＨ）诱导的小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞微核（ＭＮ）的着丝粒组成情况，结果ＴＨＨ（１０～６０μｇ／ｍｌ）诱导的６２１～６８４％的ＭＮ为ＦＩＳＨ阳性，３５９～４２２％的ＭＮ为ＣＲＥＳＴ阳性，较精确的ＦＩＳＨ结果显示ＴＨＨ具有较强的非整倍体诱发效应，同时认为次要卫星ＤＮＡ探针比ＣＲＥＳＴ染色更适合于ＭＮ的着丝粒检测。

昆明山海棠根部水抽提物对体外微管蛋白聚合的影响

本研究利用猪脑中分离纯化的微管蛋白聚合和解聚反应,分析了非整倍体诱发剂昆明山海棠根部水抽提物(THH)对微管蛋白聚合状态的影响,从该角度探讨了THH诱发哺乳动物非整信体的机制。秋水仙素(COL)为本研究的阳性对照物。结果发现:THH能显著抑制体外微管蛋白的聚合,该抑制效应呈明显的剂量——效应关系。研究结果与我们以往关于THH为非整倍体诱发剂的实验证据相吻合并进一步提示THH可以抑制徽管蛋白聚合作为诱发非整倍体的途径之一。

FISH技术评价昆明山海棠在小鼠骨髓细胞中的非整倍体诱发效应

目的 :研究以荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization ,FISH)技术评价了中草药昆明山海棠根部水抽提物[Tripterygiumhypoglaucum (Level)Hutch ,THH]在小鼠骨髓细胞中的特异染色体不分离效应。方法 :以受试物THH腹腔注射昆明种雄性小白鼠 ,2 4h后取骨髓细胞常规制片 ,以bio 16 dUTP标记的 8号染色体特异性着丝粒重复顺序探针进行FISH ,并以streptavidine Cy3与杂交信号结合。荧光显微镜下分析受试物处理动物后骨髓细胞 8号染色体分离情况。结果 :在3个受试剂量中 ,THH具有与阳性对照秋水仙素类似的作用趋势 ,其所诱发的 8号染色体不分离频率均显著高于溶剂对照。结论 :本研究证实了THH为小鼠骨髓细胞 8号染色体异常分离的诱发因素。