富营养化湖泊水体中藻蓝蛋白提取方法的对比

藻蓝蛋白是蓝藻的指示型色素,目前还没有标准的提取方法,特别是萃取剂的选择品种较多,对测量结果影响较大.分别以室内培养的铜绿微囊藻和巢湖夏季野生蓝藻为提取对象,运用液氮反复冻融法破碎蓝藻细胞,分别以AsolctinCHAPS缓冲液(AC)、磷酸盐缓冲液(PBS)和Tris-HCl缓冲液来提取藻蓝蛋白,通过分光光度法分析提取液的吸收光谱、藻蓝蛋白浓度以及藻蓝蛋白浓度与叶绿素a浓度的相关性,比较3种缓冲液的提取效果.结果显示:3种缓冲液提取的藻蓝蛋白提取液在620 nm处都出现了藻蓝蛋白的特征吸收峰,但AC缓冲液和PBS缓冲液提取效率明显高于Tris-HCl缓冲液.另外,虽然AC缓冲液提取效率最高,但其成本昂贵、配制过程复杂且不易控制、难保存,不适宜大规模地推广应用;而PBS缓冲液的提取效率略低于AC缓冲液,但其配制方便快捷,更适合于大规模湖泊水质监测的要求,因此推荐PBS缓冲液作为常用的藻蓝蛋白提取液.

4种黄皮叶片蛋白质提取方法的比较

为了研究不同提取方法对黄皮叶片蛋白质提取质量的影响,以‘杨妃山黄皮’的叶片为材料,采用TrisHCl法、三氯乙酸(TCA)/丙酮法、尿素(Thi)/硫脲(Urea)法、酚(Phe)-甲醇/醋酸铵沉淀法提取叶片组织蛋白质,对获得的蛋白质产量、单向电泳图谱和双向电泳图谱分析比较。结果显示,不同方法的提取效果各异,就提取的蛋白质产率、单向电泳以及双向电泳结果来说,三氯乙酸(TCA)/丙酮法提取效果较理想,单双向电泳图谱辨识度强,蛋白点数多、蛋白点整洁、且纵横纹少。说明该法不但可以较好地去除黄皮叶片中存在的非蛋白物质,而且可以获取高质量的蛋白质。

烟草叶片蛋白3种提取方法的比较研究

使用酚/SDS法、Tris-HCl法及TCA/丙酮沉淀法提取烟草(Nicotiana tabacum)叶片蛋白,从终产物形式、颜色、提取时间、蛋白产量、SDS-PAGE电泳图谱等方面对3种方法进行比较,对提取的烟草叶片蛋白进行Western Blotting检测来评价3种方法提取蛋白的效果。结果表明,与2种常用方法相比,酚/SDS法具有快速、操作方便等特点,提取的蛋白纯度高、种类丰富,可用于Western Blotting检测,是一种合适的提取植物组织中蛋白的方法。

4种金柑叶片蛋白质提取方法比较分析

【目的】采用4种不同方法进行金柑叶片蛋白质提取的相关研究,摸索出一套适合金柑叶片蛋白质的提取方法,也为其他近缘植物高质量蛋白质的提取提供科学参考依据。【方法】选择‘桂金柑一号’为供试材料,分别采用Tris-HCl提取法、尿素提取法、DTT/丙酮提取法和TCA/丙酮提取法提取叶片组织蛋白质,分析比较获得的蛋白质产率、单向电泳图和双向电泳图。【结果】不同方法的提取效果各异,Tris-HCl提取法提取的蛋白质产率、单向电泳以及双向电泳结果较理想,单双向电泳图辨识度高,蛋白点数丰富,蛋白点整齐且少有纵横纹现象。【结论】Tris-HCl提取法能够兼顾产率和质量,在4种方法中综合提取效果最好,是适用于金柑叶片蛋白质提取的理想方法。

Tris—HC1缓冲液温度系数的测定及意义

Tris—HCl缓冲液稳定,与生理体液的相容性好(Tris—HCl与钙、镁离子不会形成沉淀;相反,磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀),而且相同pH、相同浓度的Tris—HCl 缓冲液的离子强度比磷酸盐缓冲液的离子强度低,这对酶类测定尤为重要,因为大离子强度易致有些酶失活.因此,有时用Tris—HCl

均匀设计法优化提取银杏营养贮藏蛋白质及其电泳分析

以蛋白质提取率为考察指标,选取不同溶液提取银杏营养贮藏蛋白质;运用均匀设计法考察提取时间,提取液pH值、浓度和液料比等对银杏营养贮藏蛋白质提取率的影响,得到了蛋白质提取率的回归模型.经优化筛选后得到如下工艺参数:提取时间为10 h,提取pH为9.0,提取液Tris-HCl浓度为0.25 mol.L-1,提取液液料比为10∶1.在此条件下蛋白质提取率为70.22%.SDS-PAGE电泳分析结果表明,该蛋白质提取液主要含有15、18、23、32、36和44 ku 6种蛋白质.

胞嘧啶与3,3’,5,5’-四溴间甲酚磺酞反应体系研究

采用UV-Vis法对胞嘧啶(Cy)与3,3',5,5'-四溴间甲酚磺酞(XJFL)反应体系进行了研究.研究了在酸性条件下温度、时间、离子强度等对反应体系的影响;测得反应的线性范围为0～32μg·mL-1,最大结合数n=16,摩尔吸光系数ε=1.32×103 L·cm-1·mol-1等;并对反应机理进行了研究.同时测定了无机物,生物物质,表面活性剂对反应体系的干扰情况.

血液保养液的细菌内毒素测定时鲎试剂溶媒的改进

目的 :建立血液保养液的细菌内毒素检查法。方法 :用自制 Tris- Hc缓冲液代替细菌内毒素检查用水做鲎试剂溶媒 ,按中国药典 2 0 0 0年版二部收载的细菌内毒素检查法进行实验。结果 :Tris- Hcl缓冲液做鲎试剂溶媒能排除血液保养液对鲎试剂凝胶反应的干扰。结论 :鲎试剂溶媒改进后 。

溴甲酚绿与DNA相互作用的分光光度研究

用UV-Vis分光光度法研究了溴甲酚绿(BCG)与DNA基本的反应条件,BCG与DNA结合物的最大吸收波长是444nm,反应的最佳酸度为pH5.23;测定了反应时间、温度、离子强度、表面活性物质等因素对体系的影响;求出了BCG与DNA反应生成物的线性范围:(0.61～7.30)×10-7mol/L,表观摩尔吸光系数:1.29×105L·cm-1·mol-1,结合数:43,离解度:0.16,检出限为7.74×10-8mol/L,建立了DNA的反应体系。

系统性红斑狼疮特异性抗原60KD Ro/SSA的提取和纯化

目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原在Tris-HCl缓冲液(pH8.3)中的硫酸铵沉淀范围是硫酸铵饱和度50%～60%。60KDSSA抗原在50mMTris-HCl缓冲液(pH8.3)+NaCl中的DE52离子交换层析洗脱范围为电导值35～40ms/cm。结论结合硫酸铵沉淀和DE52离子交换层析两种纯化方法所得的60KDSSA抗原相对于其它ENA有较高的纯度,并能有效分离中SSA中60KD、52KD两个组分。

昆虫蛋白质提取工艺现状

该文主要根据已有文献对昆虫蛋白质的提取工艺进行研究与总结,分析不同方法的优缺点。主要有盐提法、碱提法、酶提法。对这几种方法进行分析,为昆虫蛋白质的开发利用提供依据。

火龙果茎基因组DNA提取方法改良

火龙果(Hylocereus undulatus)是近年发展起来的一种新兴热带水果,其茎富含多糖、多酚及其它次生代谢物,黏性极大,很难从中提取高质量的DNA。特别是一年生以上的老茎,目前尚未有较好的DNA提取方法。为了解决这一难题,该研究对CTAB+Tris-HCl洗涤法进行了3种方式的改良。结果表明,"改进三"方法可不受取样时期和取样部位的限制,从一年生以上火龙果茎中提取的DNA质量最好且不含黏性物质,可用于酶切与分子标记等生化和分子生物学实验。该研究探索了一条较为理想的火龙果茎DNA提取方法,值得推广应用。

几种缓冲溶液简介及应用

缓冲溶液是许多生化反应、生产、实验过程中的重要溶液,对稳定溶液的酸碱度有重要的影响。以磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)-HCl缓冲溶液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(简称HEPES)缓冲溶液为例,介绍缓冲溶液的组成、缓冲原理及其在生物化学方面的应用。为初学者深入了解缓冲溶液和在实验中选择合适的缓冲溶液提供参考。

《环境与职业医学》杂志发表论文可直接使用的英文缩写名单

本刊发表论文可直接使用的英文缩写如下。常用名词：ICR、SD、AIDS、WHO、HE、SPF培养基：RPMI-1640、DMEM/F12、DMEM、DEME、IMDM、MEM、OPTI实验方法 ：ELISA、PCR、MTT、TUNEL、Bradford、Lowry试剂：Tris、Tris-HCl、Triton X-100、EDTA、EDTA-2Na／EDTA-Na2、TBST、TBS、PBS、Annexin V、Annexin V-FITC、RNase、