肠道病毒71型灭活疫苗TritonX-100残留检测方法的建立与验证

目的建立适合于肠道病毒71型（Vero细胞）灭活疫苗原液TritonX-100残留检测方法并加以验证。方法使用分光光度法对TritonX-100残留进行检测,并按照《中华人民共和国药典》（2010年版）二部中的相关规定对检测方法进行验证及初步应用。结果本方法在5~50μg/ml浓度范围能定量检测TritonX-100残留量,取不同浓度TritonX-100检测其回收率在85.97%~107.31%,RSD≤4.05%;重复性检测的RSD≤0.25%,中间精密度试验RSD≤3.18%;对检测中影响结果的参数：检测持续时间、检测温度、检测波长和检测试剂苯酚浓度在一定范围内适度变化后,检测理论浓度的TritonX-100,其平均回收率在86.42%~107.80%,RSD≤3.54%;340nm波长扫描PBS、5%苯酚、PBS＋苯酚的A值均〈0.01,TritonX-100及5%苯酚反应物的A值明显高于此值。结论本方法的准确度、精密度、专属性以及耐用性均符合规定,方法准确稳定,可用于对肠道病毒71型（Vero细胞）灭活疫苗原液中TritonX-100残留量的检测。

一种检测曲拉通X-100残留的HPLC方法研究

曲拉通X-100是生物制品制备过程中常用的表面活性剂,但是尚没有其高效液相色谱法(HPLC)的统一检测标准。本研究对其检测进行了方法学研究。用水对待测生物羊膜/绒毛膜材料样品进行24 h的浸提处理,以30%甲醇-水为流动相A、乙腈为流动相B,采用Waters Symmetry300 C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5μm),在流速1.0 mL·min^(-1)、检测波长230 nm、柱温40℃、进样量20μL的条件下进行检测。结果表明:曲拉通X-100质量浓度在0.0436~48.4242μg·mL^(-1)范围内与峰面积线性关系良好(R=0.9996);检测下限(S/N=3)为0.262 ng,定量下限(S/N=10)为0.873 ng,回收率为108.51%。本方法操作简便、准确、重复性好,可用于曲拉通X-100与前杂的分离和曲拉通X-100残留量检测。

血浆制品中Triton X-100残留量测定方法的建立

目的 建立血浆(SD法病毒灭活)中Triton X-100残留量测定方法。方法 采用新型Oasis固相提取小柱进行样品预处理,用反相SymmetryShield RP18色谱柱的HPLC方法检测SD灭活法血浆中Triton X-100残留量,并对该方法进行讨论。结果 用固相提取方法可获得良好的回收率(99.2％),检测限达到1.0ppm,检测精度CV值为3.04％。结论 该方法快速、简便、准确,重现性好,可作为实验室SD病毒灭活血浆中Triton X-100检测方法。

呼吸道上皮细胞与致病菌相互作用——上皮细胞内吞细菌实验研究

目的:呼吸道上皮细胞在防御这类机会致病菌感染时发挥了重要的作用.本研究旨在探讨上皮细胞能否清除胞内的绿脓杆菌,胞内模式识别受体Nods蛋白家族是否参与胞内杀菌,防御素是否能通过促经克雷伯杆菌粘附到上皮细胞而被上皮细胞内在化而清除.

SPE-HPLC法测定马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2中Triton X-100残留量

目的：建立固相萃取高效液相色谱（SPE-HPLC）法测定马破伤风免疫球蛋白F（ab’）2中灭活剂Triton X-100的残留量。方法：采用Oasis固相萃取小柱对样品进行预处理,以水和5%甲醇为淋洗剂,以甲醇为洗脱剂,收集甲醇洗脱物用于HPLC分析。采用ZORBAX Extend-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（80∶20）,流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果：Triton X-100浓度在0.56～55.34μg·mL-1范围内,与峰面积线性关系良好（r=0.9998）;检测限（S/N=3）为2.03 ng,定量限（S/N=10）为4.06 ng;提取回收率为91.8%。结论：本方法操作简便、准确、重复性好,可用于Triton X-100的残留量测定。