神经母细胞瘤中Trk基因的表达及临床意义

目的本研究通过检测不同分期神经母细胞瘤(NB)患儿中Trk基因家族的表达分布,了解Trk家族表型在不同分期的NB中表达的差异。方法收集2005年-2013年期间中山大学孙逸仙纪念医院儿童肿瘤专科确诊的12例NB患儿病理标本,全部病例取其病理标本切片4张,分别通过免疫组织化学方法检测TrkA、TrkB和Trk C的表达。结果本组NB病例共有Ⅱ期3例,Ⅳ期9例;Ⅱ期NB中有TrkA阳性2例(67%),TrkB阳性2例(67%),TrkC阳性2例(67%);Ⅳ期NB中有TrkA阳性3例(33%),TrkB阳性9例(100%),TrkC阳性2例(22%),分别比较Ⅱ期及Ⅳ期的TrkA、TrkB和Trk C阳性率,发现差异均无显著性(P>0.05)。结论不同Trk基因在不同分期的NB中分布各异,TrkA及Trk C在预后较好的Ⅱ期NB中阳性率为67%,TrkB在预后较差的Ⅳ期NB中全部阳性,说明Trk基因家族的表达分布与NB的分期及预后有关。本组病例组间Trk基因分布无显著差异的原因可能与样本量过少有关。

顺铂及依托泊苷对神经母细胞瘤细胞中Trk基因家族表达的影响及临床意义

目的神经母细胞瘤(NB)是儿童常见的实体瘤,而三种不同Trk基因的表达变化与NB的预后及转归关系密切;为研究如何优化化疗药物疗效以提高NB患儿的生存率,本文检测了顺铂(DDP)及依托泊苷(VP16)对人NB的SK-N-SH细胞系的杀伤作用及对细胞中Trk基因家族表达的影响。方法通过CCK-8药物诱导细胞毒性实验检测不同浓度梯度的DDP及VP16对SKN-SH细胞的杀伤作用以及半数杀伤浓度(IC50);用qRT-PCR方法检测DDP及VP16在不同浓度下分别作用24 h及48 h后,对SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB和TrkC基因表达变化。结果(1)IDDP及VP16药物浓度的增加与其对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈线性关系;且48 h比24 h杀伤作用更明显。(2)SK-N-SH细胞中TrkA及TrkC的表达均随着DDP浓度和作用时间的增加而上调,尤其在10μg/mL浓度、24h最明显;而TrkB的表达在24 h时随着DDP浓度增加而上调,48 h时该促进作用不明显;(3)SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB及TrkC的表达亦随着VP16浓度和作用时间的增加而上调。结论 DDP及VP16对NB细胞SK-N-SH有明显杀伤作用并对其Trk基因家族的表达有影响。

pan-TRK蛋白在肝内胆管细胞癌中的表达及其与Ki67的相关性

目的 通过检测pan-TRK蛋白在肝内胆管细胞癌(ICC)中的表达情况,探讨pan-TRK蛋白在ICC中的表达及其意义。方法 收集126例ICC,根据是否存在复发或转移分为复发转移组及对照组,通过免疫组化方法检测126例ICC中pan-TRK蛋白的表达,分析pan-TRK蛋白的表达情况,比较两组之间pan-TRK蛋白表达的差异,并分析其与病理分型等临床病理特征的关系,及其与Ki67指数的相关性。结果 126例ICC中有8例发现pan-TRK蛋白表达,其中4例胞浆均匀阳性,3例核阳性,1例胞浆散在阳性;所有阳性病例均在复发转移组中(9.64%),对照组未见pan-TRK蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);pan-TRK蛋白的表达与性别、年龄、病理分型等临床病理特征以及Ki67指数均无相关性(P>0.05)。结论 pan-TRK蛋白可在ICC中表达,不同表达模式提示可能存在不同NTRK基因改变,同时提示ICC的发生发展中可能存在Trk信号通路的改变,并且有可能与复发与转移密切相关。

NTRK基因融合和TRK抑制剂在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌是癌症相关死亡的主要原因之一,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌全部病例数的80%~85%。大部分NSCLC患者初诊时即为晚期,尽管传统化疗、免疫治疗等取得了显著的进展,其总体预后仍然较差。近年来,随着精准医学的不断进步,新兴靶点及相应药物研究越来越多,使靶向治疗的前景日趋广阔。目前,NTRK基因融合已被证实与多种实体瘤的发生发展密切相关,其在NSCLC中的发生率约为0.2%,且通常不与其它常见致癌驱动基因重叠。研究显示,原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin receptor kinase,TRK)抑制剂在NTRK基因融合阳性的实体瘤中表现出了良好的疗效和安全性,难治性NSCLC患者可从中明显获益。本文就NTRK基因融合和TRK抑制剂在NSCLC中的研究进展进行综述。

拉罗替尼治疗TRK融合儿童肿瘤中国专家共识

神经营养酪氨酸受体激酶(neurotrophic receptor tyrosine kinase,NTRK)融合在儿童肿瘤的发生率显著高于成人。某些特定瘤种中,如婴儿型纤维肉瘤(infantile fibrosarcoma,IFS)、先天性中胚叶细胞肾瘤(congenital mesoblastic nephroma,CMN)和累及乳腺或唾液腺的分泌性癌,儿童肿瘤患者NTRK基因融合存在高频异常。拉罗替尼(larotrectinib)是一代高选择性口服原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin receptor kinase,TRK)抑制剂,其胶囊剂型和口服液制剂已在中国上市。中国抗癌协会小儿肿瘤专业委员会和中国研究型医院学会基于循证医学证据制定本共识,旨在为中国儿科医师应用拉罗替尼提供规范指导,并为进一步开展相关临床研究提供思路。

软腭唾液腺分泌性癌1例并文献复习

唾液腺分泌性癌(secretory carcinoma of salivary glands,SCSG)是一种罕见的恶性唾液腺肿瘤。2023年2月,大理大学第一附属医院收治1例左侧软腭见1个肿物的35岁女性患者。显微镜下该肿物形成微囊状、小管状结构,腔隙内充满嗜酸性胶样分泌物。免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)示:广谱原肌球蛋白受体激酶(pantropomyosin receptor kinase,pan-TRK)、乳腺球蛋白(mammaglobin)、S100钙结合蛋白(S100 calcium binding protein,S100)均阳性,钙激活氯通道蛋白1(anoctamin-1,ANO1)阴性。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)示:ETS变异转录因子6(ETS variant transcription factor 6,ETV6)基因断裂阳性,ETV6-神经酪氨酸激酶受体3(neurotrophic receptor tyrosine kinase 3,NTRK3)基因融合阳性,MET原癌基因受体酪氨酸激酶(MET proto-oncogene,receptor tyrosine kinase,MET)基因断裂阴性。患者最终被诊断为SCSG,随后接受了“左侧腭部肿物切除术+邻近皮瓣修复术”,截至2024年2月未见复发或转移。本文回顾性分析1例发生于软腭的SCSG,并总结此前国内外发生于软腭的SCSG共12例。

原肌球蛋白激酶小分子抑制剂研究进展

原肌球蛋白相关激酶(Tropomyosin-associated kinase,Trk)是一类神经生长因子受体,属于受体酪氨酸激酶一类。Trk家族包含三个高度同源性的原肌球蛋白相关激酶A、B、C(TrkA、TrkB、TrkC)。3个神经营养因子受体酪氨酸激酶基因(neurotrophic receptor tyrosine kinase)融合导致的3个Trk受体结构激活是泛癌种的致癌原因之一。近年来,Trk的小分子抑制剂治疗癌症成为一种新的手段。由于Trk下游通路多样且在各癌种中共享,Trk抑制剂的开发已成为研究热点。本文综述了部分代表性的Trk抑制剂的最新研究进展,并讨论了其分子抑制的机制以及未来的发展方向。

三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞Trk基因家族表达的影响

目的神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童常见的实体瘤,三氧化二砷(Arsenic troxide,As_2O_3)现已广泛应用于治疗实体肿瘤,为了探讨As_2O_3治疗NB的可行性,本研究检测As_2O_3对人SK-N-SH细胞周期及Trk基因家族表达的影响。方法通过流式细胞术检测4μmol/L浓度的As_2O_3作用48h后SK-N-SH细胞细胞周期的变化;qRT-PCR法检测As_2O_3在1、2和4μmol/L浓度下对SK-N-SH细胞分别作用24和48h后,对SK-N-SH细胞内TrkA、TrkB和TrkC基因表达的影响。结果用4μmol/L As_2O_3作用48h后,SK-N-SH细胞的G2/M期细胞比例为(30.93±0.34)%,而对照组G_2/M期细胞比例为(5.29±0.23)%,两组间差异有统计学意义,P<0.01。1μmol/L As_2O_3作用SK-N-SH细胞24h的TrkA比值为1.43±0.17,48h为3.88±0.26,两者比较差异有明显统计学意义,P<0.01,但随着As_2O_3浓度继续增大至4μmol/L TrkA反而下调。SK-N-SH细胞的TrkB及TrkC基因表达均随着As_2O_3浓度增加而上调,4μmol/L浓度下与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),48h比24h上调更明显。结论初步研究结果表明,As_2O_3不仅对NB的SK-N-SH细胞有明显杀伤作用,使其阻滞在G_2/M期,还能使与NB预后密切相关的Trk基因的表达发生变化,As_2O_3有用于NB治疗的潜在临床价值。

甲状腺乳头状癌中NTRK基因融合变异的检测比较

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中NTRK基因变异频次,分析免疫组织化学法检测TRK蛋白预测NTRK基因融合变异的可行性。方法:收集2017年6月至2020年6月深圳市人民医院病理科存档的848例PTC组织样本,其中男性242例,女性606例,患者年龄范围9~83岁。利用免疫组织化学检测848例PTC组织中TRK的表达情况;利用基于DNA的下一代测序检测150例PTC中NTRK融合变异。结果:免疫组织化学检测TRK阳性病例120例,下一代测序检测发现NTRK融合病例13例,PTC中NTRK融合频次为1.5%(13/848)。免疫组织化学检测PTC中NTRK融合的灵敏度和特异度分别为100%和21.9%,免疫组织化学检测弱阳性、中等阳性和强阳性的特异度分别为23.8%、76.9%、93.8%;预测NTRK基因融合的特异度随免疫组织化学染色强度增加而增加;在BRAF V600E阴性的样本中,免疫组织化学检测TRK弱阳性和中等阳性的特异度提升至62.5%和96.8%。下一代测序检测出EML4、ETV6、CDH1、GJD2、TPR、TFG和SQSTM17种融合伴侣基因。结论:PTC中存在较低的NTRK基因变异频次;免疫组织化学检测TRK可用作PTC中NTRK融合变异的筛查方法;提高免疫组织化学染色阳性细胞数阈值、染色强度或结合BRAF V600E阴性检测结果可进一步提高检测的特异度。

黑曲霉TRK基因家族的全基因组鉴定与分析

TRK是一种与钾离子吸收转运相关的基因,在调节生物体生命活动方面起着重要的作用。本研究建立在黑曲霉(Aspergillus niger)基因组数据库基础上,利用生物信息学手段鉴定黑曲霉TRK基因家族成员,分析其基因结构特征和系统进化关系;并利用MEGA 6.06软件,采用最大似然法(MLT)构建系统发育树;使用PAL2NAL软件进行da/ds估算,利用GSDS 2.0软件进行基因结构分析,MEME程序进行Motif分析。在黑曲霉基因组中共鉴定TRK基因家族4个成员:An Trk1、An Trk2、An Trk3、An Trk4,发现均含有TRK特征结构域和保守的Motif基序,不同基因间结构差异较大,但聚类关系较近的基因其结构相似。黑曲霉中TRK基因家族成员在基因结构特征等方面与酵母存在着显著差异,亲缘关系和蛋白互作网络分析进一步验证了这个结论,因此推断黑曲霉中TRK基因还存在其他的调节途径,这个结论为进一步研究黑曲霉TRK渗透胁迫相关蛋白功能、作用机制提供理论依据,从而为了解黑曲霉的渗透调节机理奠定基础。