NGF及其受体Trk-A与唾液腺腺样囊性癌相关性研究

目的:通过检测神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体Trk-A在唾液腺腺样囊性癌(adenoid cysticcarcinoma,ACC)中的表达,研究NGF及其受体Trk-A在腺样囊性癌嗜神经性侵袭中的相互关系。方法:采用Envision免疫组织化学二步法,完成病理切片,作半定量病理分析。结果:NGF及其受体Trk-A在腺样囊性癌不同病理类型中阳性表达率有高度统计学差异(P≤0.01),在神经侵袭组明显高于无侵袭组,但在腺样囊性癌对周围组织的浸润和转移方面没有统计学差异(P>0.05)。结论:NGF与其受体Trk-A可能对腺样囊性癌分化起调节功能,二者相互作用可能是ACC强浸润性的生物学机制。

管灸对面神经损伤家兔面神经核内BDNF及其受体TrkB表达的影响

目的研究管灸对面神经损伤家兔面神经核中脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体蛋白激酶B受体(Trk B)表达的影响。方法采用机械压榨法制作家兔面神经损伤模型,将家兔随机分为假手术组、模型组、管灸组、热疗组,通过免疫组化学法检测各组面神经核中BDNF及其受体TrkB的蛋白表达变化。结果家兔面神经损伤后面神经核BDNF及其受体TrkB的表达均明显下降(P<0.05或P<0.01),管灸组面神经核BDNF及其受体Trk B的表达均显著高于模型组(P<0.05)。结论管灸疗法可显著提高面神经核中BDNF及其受体TrkB的表达,这可能对促进面神经损伤后面神经核的再生和修复有重要作用。

NTs家族成员及其受体Trk在卵巢癌中的表达及其与生存期的相关性

目的:分析神经营养素(NTs)家族成员及其酪氨酸激酶受体(Trk)在卵巢癌中的表达情况及其与患者总生存期(OS)的关系,评价其预后价值。方法:利用KaplanMeier plotter(KM plotter)在线数据库收集卵巢癌患者病理信息,分析NTs家族成员(NGF、BDNF、NT-3、NT-5)及其受体Trk(TrkA、TrkB、TrkC)表达与卵巢癌患者预后及临床病理参数的相关性。收集新鲜卵巢癌组织和癌旁组织各6例,Western blot法检测NTs及Trk蛋白表达。结果:BDNF mRNA高表达与卵巢癌患者较好的总生存期(OS)相关(危险比HR=0.78,95%CI为0.68~0.89,P<0.001);NGF、NT-3、NT-5及受体TrkA、TrkB、TrkC表达与卵巢癌患者的总生存期(OS)无关(P>0.05)。BDNF mRNA表达与临床分期Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ期、病理分级Ⅱ级、组织学分型浆液性癌及TP53野生型的卵巢癌患者的OS密切相关(P<0.05)。NGF、NT-3及TrkA表达均与卵巢癌患者的临床病理参数不相关(P>0.05)。NT-5表达与病理分级Ⅱ级的卵巢癌患者的OS相关(P<0.05)。TrkB及TrkC表达与临床分期Ⅲ期的卵巢癌患者的OS密切相关(P<0.05)。Western blot法检测显示,NTs家族中NGF、BDNF、NT-5蛋白在卵巢癌组织中过表达,NT-3蛋白则为低表达;Trk家族中TrkA、TrkB及TrkC在卵巢癌组织中高表达。结论:BDNF表达与卵巢癌患者的预后密切相关,高表达患者的预后更好,可作为潜在的预后指标进行研究;NTs家族其他成员及受体Trk家族均无此预测作用。

人参皂甙对老龄大鼠海马结构BDNF及Trk B蛋白表达的影响

目的探讨老龄大鼠海马结构BDNF及Trk B蛋白表达的老龄性变化,同时对比观察人参皂甙对其改变的影响。方法雌性Wistar大鼠39只,分为青年组、老龄组、给药组(第17个月始饲以人参皂甙至27月龄)。采用免疫组化及Western blot方法对海马结构BDNF反应产物及Trk B蛋白进行定性、定量分析。结果老龄组CA3、CA1区BDNF含量分别较青年组下降13.3%、10.4%(P<0.05);其给药组和老龄组相比变化不大(P>0.05)。齿状回从青年到老年变化不明显(P>0.05),但给药组比老龄组增加16.7%(P<0.01)。老龄组海马结构Trk B蛋白表达较青年组下调了99.7%;给药组较老龄组上调了78.5%(P<0.01)。结论老龄组海马结构BDNF及Trk B蛋白表达较青年组明显降低,而人参皂甙可明显上调齿状回BDNF含量和海马结构Trk B蛋白的表达。

TrkB信号转导通路在肿瘤中的作用

神经营养因子-酪氨酸激酶受体(NT-Trk)信号通路在神经细胞的发育、生长中发挥重要的调控作用。近年来发现Trk还参与了许多恶性肿瘤的发病机制。研究认为TrkB表达与肿瘤生成有关,脑源性生长因子(BDNF)/TrkB信号转导通路激活赋予肿瘤存活、血管生成、化疗耐药和失巢凋亡抑制能力。该文就TrkB信号转导通路在肿瘤中的作用作一综述。

基于MetroTRK的龙珠嵌入式系统实验平台

本文讨论了利用MetroTRK构建嵌入式系统实验平台的体系结构，以及MetroTRK的协议层模型、运行机制和配置优化，并给出了一个应用示例。

神经母细胞瘤中Trk基因的表达及临床意义

目的本研究通过检测不同分期神经母细胞瘤(NB)患儿中Trk基因家族的表达分布,了解Trk家族表型在不同分期的NB中表达的差异。方法收集2005年-2013年期间中山大学孙逸仙纪念医院儿童肿瘤专科确诊的12例NB患儿病理标本,全部病例取其病理标本切片4张,分别通过免疫组织化学方法检测TrkA、TrkB和Trk C的表达。结果本组NB病例共有Ⅱ期3例,Ⅳ期9例;Ⅱ期NB中有TrkA阳性2例(67%),TrkB阳性2例(67%),TrkC阳性2例(67%);Ⅳ期NB中有TrkA阳性3例(33%),TrkB阳性9例(100%),TrkC阳性2例(22%),分别比较Ⅱ期及Ⅳ期的TrkA、TrkB和Trk C阳性率,发现差异均无显著性(P>0.05)。结论不同Trk基因在不同分期的NB中分布各异,TrkA及Trk C在预后较好的Ⅱ期NB中阳性率为67%,TrkB在预后较差的Ⅳ期NB中全部阳性,说明Trk基因家族的表达分布与NB的分期及预后有关。本组病例组间Trk基因分布无显著差异的原因可能与样本量过少有关。

酿酒酵母TRK1和TRK2钾吸收缺陷型菌株的构建

为更好的进行钾素营养有关基因表达调控和功能性研究,我们采用同源重组法通过重叠引物扩增分别将URA3和HIS3基因替代酿酒酵母的TRK1和TRK2基因,并以酿酒酵母的尿嘧啶合成酶URA3基因和组氨酸合成酶HIS3为标记基因,在不含尿嘧啶和组氨酸的基本培养基筛选转化子获得了钾离子转运蛋白TRK1和TRK2基因缺失的酿酒酵母钾素营养缺陷型菌株,该菌株在低K+培养基中导入拟南芥K+转运体基因AtKuP1可恢复正常生长。

新生儿肠闭锁NT-3与Trk-C表达研究

目的 了解神经节细胞NT - 3、Trk -C、Nf蛋白和神经胶质细胞GFAP蛋白在肠闭锁中的分布情况,并探讨其临床意义。方法 应用免疫组化技术检测15例先天性小肠闭锁患儿肠壁内NT - 3、Trk -C、GFAP和Nf的表达情况,并以死于与肠道发育异常无关的尸检新生儿小肠标本6例作为正常对照。结果 肠闭锁组肌间神经丛NT - 3阳性细胞数明显低于对照组的阳性细胞数(t′=9.90 0 0 ,P <0 .0 5 )。Trk -C在对照组肠壁肌间神经丛中存在高表达,而在肠闭锁组存在低表达(t=2 2 .2 991,P <0 .0 5 )。对照组肠壁肌间神经丛胶质细胞GFAP呈阳性表达,而肠闭锁组GFAP呈强阳性表达。Nf在对照组中的表达明显高于闭锁组。结论 先天性小肠闭锁的近端肠壁内存在有神经节细胞的减少和神经干的变细,支持细胞在闭锁近端肠壁中呈增生表现。这种肠壁肌层神经丛的改变,可能会引起肠腔内压力减低,从而影响闭锁区域肠道的功能。

顺铂及依托泊苷对神经母细胞瘤细胞中Trk基因家族表达的影响及临床意义

目的神经母细胞瘤(NB)是儿童常见的实体瘤,而三种不同Trk基因的表达变化与NB的预后及转归关系密切;为研究如何优化化疗药物疗效以提高NB患儿的生存率,本文检测了顺铂(DDP)及依托泊苷(VP16)对人NB的SK-N-SH细胞系的杀伤作用及对细胞中Trk基因家族表达的影响。方法通过CCK-8药物诱导细胞毒性实验检测不同浓度梯度的DDP及VP16对SKN-SH细胞的杀伤作用以及半数杀伤浓度(IC50);用qRT-PCR方法检测DDP及VP16在不同浓度下分别作用24 h及48 h后,对SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB和TrkC基因表达变化。结果(1)IDDP及VP16药物浓度的增加与其对SK-N-SH细胞的杀伤作用呈线性关系;且48 h比24 h杀伤作用更明显。(2)SK-N-SH细胞中TrkA及TrkC的表达均随着DDP浓度和作用时间的增加而上调,尤其在10μg/mL浓度、24h最明显;而TrkB的表达在24 h时随着DDP浓度增加而上调,48 h时该促进作用不明显;(3)SK-N-SH细胞中TrkA、TrkB及TrkC的表达亦随着VP16浓度和作用时间的增加而上调。结论 DDP及VP16对NB细胞SK-N-SH有明显杀伤作用并对其Trk基因家族的表达有影响。

BDNF/TrkB在唾液腺腺样囊性癌上皮-间质转化过程中的表达及意义

目的:研究BDNF、Trk B和E-cadherin在唾液腺腺样囊性癌(SACC)细胞系中的表达,初步探讨BDNF、Trk B和E-cadherin与SACC高转移性及神经侵袭性之间的关系。方法:以SACC高、低转移细胞系SACC-LM和SACC-83为研究对象,利用实时荧光定量PCR和Western免疫印迹技术检测BDNF、Trk B和E-cadherin在其中的表达差异;在SACC-83细胞系中加入外源性BDNF因子、Trk B抑制剂k252a,分析BDNF/Trk B通路在SACC侵袭转移过程中的生物学作用;利用实时荧光定量PCR、Western免疫印迹、细胞形态观察、细胞迁徙和侵袭实验评估SACC细胞上皮-间质转化(EMT)进程。应用SPSS17.0软件包对数据进行统计学处理。结果:BDNF和Trk B在SACC-LM中的表达高于SACC-83,E-cadherin在SACC-LM中的表达低于SACC-83;外源性BDNF刺激能有效诱导Trk B的激活和表达,降低E-cadherin的表达,提高N-cadherin的表达,使细胞形态呈长梭形改变,促进SACC-83细胞的迁徙、侵袭能力;而Trk B受体抑制剂k252a可有效抑制BDNF的各种作用,降低SACC-83细胞形态变化和迁徙、侵袭能力。结论:BDNF/Trk B信号通路通过介导SACC的EMT过程,促进SACC的迁徙、侵袭能力。

神经生长因子Trk A及P75^(NTR)在小鼠缺血肌肉中的表达情况及相互作用机制的研究

近年来外周动脉疾病（peripheral arterial disease,PAD）发病率逐年升高,文献[1]报道60岁以上人群中,其发病率为15.3%. 目前对于PAD患者单纯促血管生成治疗的效果欠佳,进一步的研究[1-3]发现,神经因素在PAD中具有重要作用.神经生长因子（nerve growth factor,NGF）不仅可以促进神经的分化、生长及发育过程,越来越多的研究证实了NGF同样具有促进血管生成的作用[4],我们前期的研究也证实NGF具有促血管生成作用[5,6]. NGF促进血管生成的作用主要是通过它的2种受体：Trk A和P75NTR[7-9]来实现的. 但既往研究仅从＂Trk A或P75NTR为单一切入点去研究,忽略了两者之间的关联性.本研究从NGF、P75NTR以及Trk A三者的关联性出发,来探讨NGF与P75NTR/Trk A三者之间在血管、神经再生过程中的作用机制, 为NGF在临床中的应用提供理论基础.

神经营养因子的两类受体:Trks及p75(综述)

此文简要回顾了神经营养因子的两类受体——酪氨酸激酶受体家族 (Trks)及 p75的分子结构、分布、相互作用 。

原癌基因RET、TRK和PAX8-PPARγ1与甲状腺癌的研究进展

近来许多研究表明一些原癌基因的突变或重排常在甲状腺癌中出现。其中原癌基因RET和TRK的酪氨酸蛋白激酶活性与甲状腺乳头状癌的发病有特殊关系;RET基因的胚系突变,尤其是密码子634的突变可引起多发性内分泌腺瘤综合征Ⅱa和家族性甲状腺髓样癌;甲状腺转录因子.过氧化物酶体增殖物激活受体γ1(PAX8-PPARγ1)融合蛋白可促进不同的甲状腺滤泡腺瘤形成,常在滤泡癌中发现。

红景天甙调控BDNF/TrkB通路对听觉剥夺模型大鼠听皮层可塑性的影响

目的 探讨红景天甙调控脑源性神经生长因子(BDNF)/受体酪氨酸激酶(Trk)B通路对听觉剥夺模型大鼠听皮层可塑性的影响。方法 肌内注射庆大霉素诱导建立听觉剥夺模型大鼠,随机分为模型组、K252a(BDNF/TrkB通路抑制剂,100μg/kg)组、红景天苷(50 mg/kg)组、红景天苷(50 mg/kg)+K252a(100μg/kg)组,每组12只,另取12只大鼠肌内注射等剂量生理盐水,设为对照组,以药物分组处理后,测定大鼠听性脑干反应(ABR)阈值,评测其听力情况;以扫描电镜观察各组大鼠耳蜗组织病理改变;以苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠听皮层神经元病理改变;以试剂盒测定听皮层及耳蜗组织活性氧(ROS)水平;以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清致炎因子白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ水平;以Western印迹法检测大鼠听皮层及耳蜗组织BDNF/TrkB通路蛋白(p-TrkB/TrkB、BDNF)表达。结果 与对照组相比,模型组毛细胞结构改变,大小不一,且排列紊乱,数目缺失,与螺旋神经节细胞周围突结合发生裂隙,同时听皮层神经元萎缩变小,胞质减少,细胞核出现固缩碎裂,且分布杂乱,数目明显减少,听皮层神经元与耳蜗组织均出现明显病理损伤,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平显著升高(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组、红景天苷+K252a组分别相比,红景天苷组听皮层神经元与耳蜗组织病理损伤均减轻,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平均降低(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平均升高(P<0.05);K252a组听皮层神经元与耳蜗组织病理损伤均加重,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平均升高(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 红景天苷可清除ROS,减少炎性因子合成释放,抑制炎症,减轻听觉剥夺模型大鼠听皮层神经元与耳蜗组织损伤,改善其听力降低症状,通过激活BDNF/TrkB通路实现。

神经损伤对三叉神经中脑核神经元Trk受体表达的影响(英文)

本研究应用免疫荧光结合逆行束路追踪技术观察了轴突切断对支配咬肌的三叉神经中脑核(Me5)神经元所含Trk受体蛋白,即TrkA、TrkB和TrkC表达的影响。通过大鼠咬肌神经给予荧光金,标记支配咬肌的Me5神经元;分别于切断咬肌神经后7和14 d对脑切片进行免疫组织化学染色并观察荧光金(FG)标记的Me5神经元表达的三种Trk受体。以双标记神经元占荧光金标记神经元总数的百分率为指标进行统计学分析,结果显示:(1)神经切断后7和14 d,TrkA免疫反应阳性神经元比例有显著性增加(P<0.05);(2)神经切断后随着存活时间的延长,TrkB免疫阳性神经元比例逐渐增加,但无显著性区别(P>0.05);(3)TrkC表达无显著性变化(P>0.05)。本研究结果提示,咬肌神经切断对三种Trk受体的表达有不同的影响,Trk受体表达的模式可能反应出Me5神经元对外周神经损伤后的一种适应。

老年前列腺癌组织中Nedd4L对TrkA的泛素化调控

目的探讨神经前体细胞表达发育调控样蛋白(Nedd4L)通过泛素化降解癌蛋白神经生长因子酪氨酸激酶受体(Trk A)抑制老年前列腺癌的分子作用机制。方法收集手术切除的43例老年前列腺癌组织及对应癌旁组织标本。免疫组化染色检测Nedd4L及Trk A的表达,在人前列腺癌LNCa P细胞中转染Nedd4L特异性si RNA后,采用q RT-PCR及Western印迹检测LNCa P细胞内Trk A m RNA及蛋白的表达变化。结果Nedd4L蛋白在老年前列腺癌组织中表达明显降低,而Trk A表达显著升高(P<0.05);二者呈显著负相关(P<0.05),Nedd4L的表达降低与Trk A表达升高均与肿瘤淋巴结转移、高TNM分期显著相关(P<0.05);在体外,下调Nedd4L表达后可显著升高Trk A蛋白的表达水平(P<0.05),而对Trk A m RNA表达无明显影响(P>0.05)。结论 Nedd4L及Trk A在老年前列腺癌组织中异常表达,Nedd4L可能通过泛素化降解癌蛋白Trk A实现其抗肿瘤作用。

连续态数值波函数归一化的近似计算及TRK求和中余项的积分处理

采用改进的Numerov格式，对连续态波函数及其归一化问题作了细致的计算．指出了Cowan在ε→0时状态波函数的归一化中存在的问题，给出了更加准确、有效的归一化计算方法．为了检验这一算法，计算了氢原子各状态（l=0.3）下的Thomas-Reiche—Kuhn（TRK）和．利用最小二乘法，给出了TRK求和中无穷项的渐近函数形式，并由此采用积分方法得到了余项的近似计算结果．

pan-TRK蛋白在肝内胆管细胞癌中的表达及其与Ki67的相关性

目的 通过检测pan-TRK蛋白在肝内胆管细胞癌(ICC)中的表达情况,探讨pan-TRK蛋白在ICC中的表达及其意义。方法 收集126例ICC,根据是否存在复发或转移分为复发转移组及对照组,通过免疫组化方法检测126例ICC中pan-TRK蛋白的表达,分析pan-TRK蛋白的表达情况,比较两组之间pan-TRK蛋白表达的差异,并分析其与病理分型等临床病理特征的关系,及其与Ki67指数的相关性。结果 126例ICC中有8例发现pan-TRK蛋白表达,其中4例胞浆均匀阳性,3例核阳性,1例胞浆散在阳性;所有阳性病例均在复发转移组中(9.64%),对照组未见pan-TRK蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);pan-TRK蛋白的表达与性别、年龄、病理分型等临床病理特征以及Ki67指数均无相关性(P>0.05)。结论 pan-TRK蛋白可在ICC中表达,不同表达模式提示可能存在不同NTRK基因改变,同时提示ICC的发生发展中可能存在Trk信号通路的改变,并且有可能与复发与转移密切相关。

RT-PCR检测R2L1细胞中Trk受体家族基因的表达

在Trk受体家族基因的非同源区中分别设计对TrkA ,TrkB和TrkC受体基因特异的引物 ,采用RT -PCR法检测大鼠小脑神经细胞系R2和转染并表达了神经营养因子低亲和力受体 p75NTR的R2细胞系R2L1细胞中Trk受体家族基因的表达 .琼脂糖凝胶电泳分析RT -PCR产物表明 ,TrkA和TrkB受体基因在R2和R2L1细胞中均有表达 ,而无TrkC受体基因的表达 .测序结果进一步证实了RT -PCR的结果 。