人参皂甙对老龄大鼠基底前脑-皮质胆碱能系统TRKB蛋白表达的影响(英文)

目的探讨老龄大鼠基底前脑-皮质胆碱能系统TRKB蛋白表达的老龄性变化,同时对比观察人参皂甙对其改变的影响。方法选用WISTAR♀大鼠30只,随机分为3组(N=10):青年组、老龄组、给药组(第17个月始饲以人参皂甙至25-27月龄)。采用WESTERN BLOT技术结合图像分析对基底前脑、海马结构和大脑皮质进行定量研究。结果老龄组基底前脑、海马结构和大脑皮质TRKB蛋白表达分别较青年组下调了61％、99．7％和57．7％ (P<0．01),但给药组上述3个脑区的TRKB蛋白表达较老龄组有所回升,分别较老龄组上调了65％、78．5％和 22．6％(P<0．01)。结论老龄组基底前脑-皮质胆碱能系统TRKB蛋白表达较青年组下调,而人参皂甙可明显上调该3个脑区TRKB蛋白的表达。

TrkB影响结肠癌细胞SW620侵袭能力及与ERK信号通路活化关系的研究

目的:探讨干扰结肠癌细胞TrkB蛋白表达及抑制ERK活化对细胞增殖、凋亡和侵袭以及细胞内ERK磷酸化水平的影响。方法:应用特异性TrkB-siRNA瞬时转染及ERK特异性抑制剂处理SW620结肠癌细胞,观察SW620细胞增殖、凋亡和侵袭情况以及细胞内ERK磷酸化水平的变化。结果:特异性siRNA转染高表达TrkB的SW620细胞,TrkB蛋白表达减少,ERK的磷酸化水平降低,且转染组细胞数显著低于对照组(P=0.001),转染组的细胞凋亡率显著高于对照组(P=0.000 1),24 h后侵袭至下层小室的细胞数转染组显著低于对照组(P=0.001);ERK抑制剂明显降低SW620细胞ERK磷酸化水平(P=0.001),而对ERK蛋白表达没有影响,且应用ERK抑制剂作用SW620细胞,对照组和处理组中细胞数没有显著差异(P=0.544),对照组和处理组中SW620细胞的凋亡率差异无统计学意义(P=0.103),但对照组24 h后侵袭至下层小室的细胞数显著高于处理组(P=0.0001)。结论:干扰TrkB蛋白表达能够降低高转移结肠腺癌SW620细胞内ERK磷酸化水平,促进细胞凋亡并抑制细胞增殖和侵袭。同时应用ERK特异性抑制剂也显著抑制细胞侵袭。因此ERK信号转导通路可能与TrkB介导的结肠腺癌细胞抗凋亡和侵袭能力的增加相关,沉默TrkB表达可能成为阻断结肠癌转移的新靶点。

糖尿病早期大鼠视网膜中细胞外信号调节激酶与c-fos的变化及脑源性神经营养因子的作用

背景研究表明糖尿病患者视网膜的神经病变出现在血管并发症之前，严重危害患者的视力，而神经营养因子对其具有保护作用。目的观察在糖尿病大鼠玻璃体腔内注射脑源性神经营养因子（BDNF）前后大鼠视网膜中BDNF及其受体TrkB、通路蛋白磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（p-ERKl／2）、c-fos质量浓度的变化。方法9周龄雄性健康Wistar大鼠按随机数字表法随机分为BDNF治疗组、糖尿病对照组和正常对照组，每组20只。BDNF治疗组、糖尿病对照组大鼠应用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射制成糖尿病模型，BDNF治疗组大鼠于成模后2周开始向玻璃体腔内注射1g／LBDNF溶液5μl。于成模后4周处死全部大鼠，取出眼球进行BDNF原位杂交，计数视网膜中BDNF阳性细胞数。采用ELISA抗体夹心法检测视网膜中TrkB、p-ERKl／2以及c-los蛋白质的质量浓度。结果糖尿病对照组大鼠视网膜中BDNF阳性细胞数目明显少于正常对照组及BDNF治疗组，且染色浅，3个组BDNF阳性细胞数及阳性细胞灰度值比较差异均有统计学意义（F=102．36、92．55，P〈0．05）。3个组TrkB、p-ERKl／2及c－fos表达的比较，差异均有统计学意义（F：92．54、95．46、94．84，P〈0．05）。糖尿病对照组较正常对照组及BDNF治疗组TrkB质量浓度降低，而通路蛋白P-ERKl／2、c-los质量浓度升高（P〈0．05）；正常对照组与BDNF治疗组间上述3个指标比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论在糖尿病早期，大鼠视网膜中BDNFmRNA水平及其受体TrkB蛋白质量浓度降低，其下游通路蛋白p-ERKl／2、c-fos质量浓度升高，玻璃体腔内注射BDNF可逆转上述变化。

基于BDNF/TrkB信号通路探讨中药调控阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种以认知和记忆功能呈进行性丧失为主要特征的神经慢性退行性疾病,病理特征主要为过度磷酸化微管相关蛋白(Tau)聚集形成的神经元纤维缠结和β-淀粉样蛋白聚集形成的淀粉样斑块,其发病机制未完全明确,目前临床上尚无有效的特效药及根治手段。近年来,其发病率呈上升趋势,严重影响着人民的生活健康,因此寻找治疗AD的有效药物及成分十分重要。现代医学研究发现,脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白受体激酶(TrkB)信号通路与神经发生、细胞凋亡、神经炎症、突触可塑性及氧化应激等存在密切的联系,在AD的病理生理发展过程中,起着至关重要的作用。此外,中药治疗神经退行性疾病的历史悠久,不良反应少,且具有多靶点、多环节、多途径治疗疾病的特点。因此,作者通过检索和查阅国内外最新研究报道,阐述BDNF/TrkB信号通路在AD发生发展中的作用,总结了中药复方及单体调控BDNF/TrkB通路干预AD的研究进展,以期为研发防治AD的临床药物提供参考和依据,为中药治疗AD提供更广阔的视野。

基于BDNF/TrkB/ERK/CREB信号通路探究温笑散通过促进神经发生抗抑郁的作用机制

目的:探讨温笑散改善皮质酮诱导的小鼠抑郁样行为的作用机制。方法:雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、帕罗西汀组(20 mg·kg^(-1))、温笑散低、高剂量组(3.27、6.54 g·kg^(-1)),正常组和模型组给予等体积的生理盐水,除正常组外其他各组在灌胃0.5 h后皮下注射皮质酮诱导抑郁模型。给药结束后检测小鼠抑郁样行为;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清皮质酮含量;尼氏染色观察海马神经元损伤情况;免疫荧光检测海马齿状回(DG)中双皮质素(DCX)表达;蛋白免疫印迹法检测海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路相关蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠糖水偏好率显著降低、悬尾不动时间显著增加(P<0.01),旷场中心区域的停留时间和运动总距离明显减少(P<0.05,P<0.01),血清皮质酮水平显著升高(P<0.01),海马DG区神经元体积明显缩小、细胞核染色加深,DG区的DCX表达减少,海马中BDNF、磷酸化(p)-TrkB、p-ERK、p-CREB蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,温笑散低剂量组糖水偏好、旷场、悬尾行为学指标明显改善(P<0.05,P<0.01),温笑散高剂量组糖水偏好、旷场行为学指标明显好转(P<0.05,P<0.01);温笑散给药组血清皮质酮水平均显著降低(P<0.01),海马DG区神经元结构和形态正常,细胞核明显、尼氏体丰富,DG区DCX的表达均升高,温笑散高剂量组海马中BDNF、p-TrkB、p-ERK、p-CREB蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:温笑散能改善皮质酮诱导的小鼠抑郁样行为,促进神经发生,其作用机制可能与激活BDNF/TrkB/ERK/CREB信号通路相关。

对香豆酸对慢性束缚应激诱导小鼠抑郁样行为的作用

目的:探索对香豆酸(p-CA)对慢性束缚应激(CRS)诱导小鼠抑郁样行为的作用。方法:实验分两批进行,第一批小鼠随机分成对照组(Control),慢性束缚应激组(CRS)和慢性束缚应激+p-CA组(CRS+p-CA),每组8只,其中慢性束缚应激小鼠每天接受4 h的束缚应激,连续束缚21 d,而对照组小鼠留在笼中不被打扰。第22日小鼠腹腔注射溶媒(10%吐温80)或p-CA(100 mg/kg),注射后1 h进行自发活动测试(LMA),注射后4 h进行强迫游泳测试(FST),注射后24 h进行悬尾测试。第二批小鼠随机分成慢性束缚应激组(CRS),慢性束缚应激+ANA-12(原肌球蛋白激酶B拮抗剂)组(CRS+ANA-12)和慢性束缚应激+p-CA组(CRS+p-CA)慢性束缚应激+p-CA+ANA-12组(CRS+p-CA+ANA-12),每组8只,4组小鼠每天接受4 h的束缚应激,连续束缚21 d。第22日小鼠腹腔注射溶媒(10%吐温80)或p-CA(100 mg/kg),ANA-12(0.5 mg/kg)在p-CA注射前30 min给药。注射后1 h进行自发活动测试(LMA),注射后2 h进行强迫游泳测试(FST),注射后24 h进行悬尾测试。结果:①在实验一中,与Control组相比,CRS组小鼠强迫游泳和悬尾测试中不动时间显著性增多(P<0.05);而与CRS组相比,CRS+p-CA组小鼠不动时间显著性减少(P<0.05,P<0.01)。②在实验二中,与CRS组相比,CRS+p-CA组小鼠强迫游泳和悬尾测试中不动时间显著性减少(P<0.05);而与CRS+p-CA组相比,CRS+p-CA+ANA-12组小鼠强迫游泳和悬尾测试中不动时间显著性增多(P<0.05)。结论:P-CA改善慢性束缚应激诱导小鼠抑郁样行为,TrkB受体可能介导了此作用。

补骨脂汤对血管性痴呆大鼠海马内BDNF/TrkB、GAP-43蛋白的影响

目的探讨补骨脂汤改善血管痴呆大鼠学习记忆的作用靶点。方法将60只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、银杏叶片组、补骨脂汤低剂量组(补低组)、补骨脂汤高剂量组(补高组),每组12只,制备血管性痴呆大鼠模型,手术后第3d开始给药,采用二维电泳分离海马内总蛋白,用ImageMaster软件分析蛋白差异点,用蛋白印迹法、免疫组化分析差异蛋白的表达量。结果补高组、补低组总蛋白二维电泳的结果与模型组比较,发现差异蛋白点19个,其中与空间学习记忆相关的蛋白脑源性神经营养因子(BDNF)、生长相关蛋白-43(GAP-43)灰度比值及TrkB阳性细胞数补高量组明显高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论补骨脂汤可能通过提高BDNF/TrkB、GAP-43基因的表达水平,改善和治疗血管性痴呆者学习记忆能力。

温胆汤对精神分裂症模型大鼠海马TrKB、CREB表达的影响

目的:探讨温胆汤对精神分裂症(SCZ)模型大鼠海马组织酪氨酸蛋白激酶受体B(TrKB)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)表达变化的影响。方法:将54只大鼠随机分为正常组、模型组、温胆汤高、中、低剂量组和氯氮平组,每组9只。各组大鼠均以灌胃的方式给药21 d,温胆汤高、中、低剂量组的给药剂量分别为40、20、10 g·kg^(-1)温胆汤药液,氯氮平组为0.02 g·kg^(-1)氯氮平原液,正常组和模型组则灌胃同等容量的生理盐水。在末次给药2 h后,除正常组外,对其余5组大鼠予以腹腔注射0.6 mg·kg^(-1)地卓西平马来酸盐(MK-801),建立SCZ模型。通过旷场实验观察大鼠的自发活动水平,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马CA1区病理形态变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织TrKB、磷酸化(p)-TrKB、CREB和p-CREB的蛋白表达,免疫组化检测海马CA1区TrKB、CREB的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马组织TrKB、CREB mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠自发活动水平显著增加(P<0.01),海马CA1区神经元细胞排列松散紊乱,部分神经元细胞变性,海马组织TrKB、p-TrKB、CREB、p-CREB蛋白、海马CA1区TrKB、CREB蛋白及海马组织TrKB、CREB mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,温胆汤各组大鼠自发活动水平显著降低(P<0.01),海马CA1区神经元细胞排列相对整齐、胞体形态较为规则,神经元变性等现象较少;温胆汤中、低剂量组海马组织TrKB蛋白表达明显升高(P<0.05),温胆汤各剂量组海马组织p-TrKB、CREB、p-CREB蛋白表达明显升高(P<0.05);温胆汤各剂量组海马CA1区TrKB蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),温胆汤中、低剂量组海马CA1区CREB蛋白表达显著升高(P<0.01);温胆汤高、低剂量组海马组织TrKB mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01),温胆汤中、低剂量组CREB mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:温胆汤可以通过降低SCZ模型大鼠自发活动水平、改善海马神经元病理损伤、增加TrKB、p-TrKB、CREB、p-CREB的表达,从而预防SCZ及其认知障碍的发生、发展。

颅脑损伤后BDNF及其小分子模拟物的治疗潜力

颅脑损伤（traumatic brain injury,TBI）是一个全球性的公共卫生问题[1],是全球死亡、致残的主要原因.TBI是由外力所致的脑功能的损失或改变.原发性损伤指外部损害导致细胞立即死亡,继发性损伤是原发性损伤周围区域的一系列生物化学变化的结果,进一步导致记忆、认知等功能缺陷.

电离辐射对大鼠海马区神经发生及TrkA和TrkB表达的影响

海马组织,应用免疫荧光染色观察神经元增殖变化,Golgi染色观察海马树突棘形态变化,Western blot及RT-PCR分别检测TrkA、TrkB蛋白及RNA水平变化.结果 与健康对照组比较,免疫荧光染色显示照射组双皮质素（DCX）数量明显减少（t=6.49,P＜0.05）.照射组海马树突棘明显减少,且树突棘的形态变化明显.与健康对照组相比,照后不同时间照射组TrkA蛋白表达明显升高（t=2.64、3.06、4.80、2.64,P＜0.05）,而TrkB的表达则显著下降（=4.59、3.06、2.81、2.57,P＜0.05）;TrkA mRNA表达水平明显升高（t=4.57、3.06、5.39、5.86,P＜0.05）,TrkB的表达显著下降（t=14.87、11.69、4.98,P＜0.05）.结论 作为神经生长因子、脑源性神经因子重要的下游信号通路分子,全脑照射后TrkA、TrkB的表达变化,可能在电离辐射所致海马神经发生损伤中发挥重要作用.

温胆汤含药血清对CREB mRNA沉默海马神经元细胞凋亡及BDNF/TrkB/CREB信号通路的影响

目的:探讨温胆汤对环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)mRNA沉默海马细胞活性、凋亡及海马脑源性神经营养因子/原肌球蛋白相关受体激酶/CREB(BDNF/TrkB/CREB)信号通路作用的影响。方法:制备温胆汤含药血清,将SD雄性大鼠随机分为温胆汤高、中、低剂量组、氯氮平组、正常生理盐水组,每组10只,其中每组15只。正常组予20 mL·kg-1生理盐水灌胃,氯氮平组给予0.02 g·kg-1氯氮平原药灌胃,温胆汤高、中、低剂量组分别予质量浓度为2,1,0.5 g·mL-1的等量温胆汤浓缩生药灌胃,1次/d,连续灌胃8 d后,股动脉取血,5 000 r·min-1离心15 min,倾取上清液,灭活,-80℃保存,备用。通过脂质体转染至海马细胞中,构建CREB mRNA沉默海马神经元细胞系,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证小分子干扰核糖核酸(siRNA)转录后效果。检测海马细胞周期和凋亡,正常海马细胞和CREB基因沉默海马细胞内BDNF,TrkB,CREB,钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA表达水平。结果:对于细胞凋亡,与正常大鼠血清组比较,各组别在24,48 h时,细胞凋亡显著降低(P<0.01);与正常大鼠血清-siRNA组比较,各给药组细胞凋亡显著降低(P<0.01)。对于BDNF,TrkB,CREB,CaMKⅡmRNA表达,与正常大鼠血清组比较,基因沉默正常组CREB,BDNF mRNA表达均显著下降(P<0.01);与正常大鼠血清-siRNA组比较,各给药组可显著提高BDNF mRNA表达(P<0.01),其中TrkB,CaMKⅡ各组间差异无明显统计学意义。结论:温胆汤含药血清可提高BDNF mRNA表达,通过调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,以保护海马神经元,达到防治精神分裂症认知障碍的目的。

“通督调神”针刺对脑卒中后抑郁大鼠海马CREB/BDNF/TrkB信号通路的影响

目的:观察“通督调神”针刺对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠抑郁样行为以及海马环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)通路的调节作用,探讨其改善PSD的可能机制。方法:将36只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、通督调神组,每组12只。模型组、通督调神组大鼠采用Zea Longa线栓法和慢性不可预知性温和应激(CUMS)法复合制备PSD模型。通督调神组大鼠于造模结束后第4天予针刺“大椎”“水沟”“百会”“神庭”,每次干预40 min,每天1次,每周6次,连续干预4周。分别于PSD模型造模结束后第2天和干预4周后进行大鼠Zea Longa神经行为学评分、蔗糖水消耗实验和敞箱实验;生化法检测大鼠海马CA1区超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;ELISA法检测大鼠血清BDNF含量;实时荧光定量PCR法检测大鼠海马CA1区BDNF、Trk B、CREB mRNA表达;Western blot法检测大鼠海马CA1区BDNF、Trk B、CREB,p-CREB蛋白表达。结果:与假手术组比较,造模后、干预后模型组及造模后通督调神组大鼠Zea Longa神经行为学评分升高(P<0.05),蔗糖水消耗百分比、敞箱实验水平与垂直运动评分降低(P<0.05)。与模型组比较,通督调神组大鼠干预后Zea Longa神经行为学评分降低(P<0.05),蔗糖水消耗百分比、敞箱实验水平与垂直运动评分升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区SOD、CAT活性及血清BDNF含量降低(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05);与模型组比较,通督调神组大鼠海马CA1区SOD、CAT活性及血清BDNF含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、CREB mRNA及BDNF、TrkB、CREB、p-CREB蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,通督调神组大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、CREB mRNA及BDNF、Trk B、p-CREB蛋白表达、p-CREB/CREB比值升高(P<0.05)。结论:“通督调神”针刺可改善PSD大鼠抑郁样行为,其作用机制可能与抑制海马神经组织氧化应激,增强CREB/BDNF/Trk B信号通路活性有关。

芍甘木瓜汤通过BDNF/TrkB/CREB信号通路改善脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学研究

目的观察芍甘木瓜汤对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学的影响,并探讨对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的调控机制。方法取50只SD大鼠采用改良线栓法制作大脑中动脉梗死模型,选取建模成功大鼠随机分为模型组、巴氯芬(0.008 g/kg)组和芍甘木瓜汤低、中、高剂量(0.05、0.10、0.15 g/kg)组。另取10只SD大鼠不栓塞大脑中动脉作为假手术组,于再灌注2 h后ig给药,每天1次,连续2周,假手术组和模型组ig等量生理盐水。干预前后分别采用Zea Longa量表、改良Ashworth量表评价神经行为学、肌张力变化,采用大鼠多导生理记录仪测定上肢伸直幅度;酶联免疫法检测大鼠干预前后血清BDNF、TrkB水平;苏木素-伊红(HE)染色观察缺血半暗带脑组织病理变化,透射电镜下观察缺血半暗带脑组织神经元超微结构;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB mRNA表达;Western blotting检测BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB蛋白表达及p-CREB水平。结果干预后巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组的Zea Longa量表、改良Ashworth量表分级均较干预前和模型组(干预后)显著改善(P<0.05),上肢伸直幅度均较干预前和模型组(干预后)均显著增加(P<0.05),血清BDNF、TrkB水平均较干预前和模型组(干预后)显著升高(P<0.05),缺血半暗带脑组织病理变化和神经元超微结构均较模型组明显改善。模型组缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达,p-CREB蛋白水平均显著低于假手术组(P<0.05),巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著升高(P<0.05);模型组缺血半暗带脑组织TrkB-T1 mRNA与蛋白表达显著高于假手术组(P<0.05),巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著下降(P<0.05)。各组缺血半暗带脑组织CREB mRNA表达差异无统计学意义。结论对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠ig予以芍甘木瓜汤可改善其神经行为学,降低肌张力,增加血清BDNF、TrkB水平,减轻缺血半暗带脑组织病理和神经元超微结构变化,推测与激活BDNF/TrkB/CREB通路,上调BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达,下调TrkB-T1 mRNA与蛋白表达,增加p-CREB水平有关。

大补元煎通过上调BDNF/TrkB/CREB信号通路改善APP/PS1双转基因痴呆小鼠海马突触可塑性

目的:观察大补元煎对APP/PS1痴呆小鼠海马突触可塑性及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的作用,并探讨其改善突触可塑性的可能机制。方法:将APP/PS1小鼠36只分为模型组、多奈哌齐组(6.5×10-4g·kg-1·d-1)和大补元煎组(13.2 g·kg-1·d-1),野生鼠12只设为正常组,正常组和模型组给予等体积生理盐水,各组连续灌胃30 d。应用Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆能力,应用尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化,应用免疫荧光(IF)观察海马突触后致密蛋白95(PSD95)及突触素(SYN)的蛋白表达水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马中BDNF,TrkB,CREB及磷酸化CREB(p-CREB)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠平台潜伏期和游泳总路程增加(P<0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间减少(P<0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体减少或消失,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量、树突棘密度减少(P<0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平减少(P<0.01)。与模型组比较,多奈哌齐组和大补元煎组小鼠平台潜伏期和游泳总路程减少(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数和目标象限停留时间增加(P<0.05,P<0.01),小鼠海马CA3区神经元胞内尼氏体数量增多,小鼠海马CA3区神经元及树突分支数量,树突棘密度增加(P<0.05,P<0.01),小鼠海马SYN,PSD95,BDNF,TrkB及p-CREB的蛋白表达水平增加(P<0.05,P<0.01)。结论:大补元煎改善APP/PS1双转基因小鼠突触可塑性的机制可能与其上调小鼠海马中BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。

柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的:基于脑源性神经营养因子(BDNF)/络氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)途径探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激抑郁大鼠海马的影响。方法:取60只SD大鼠,其中10只作为空白组,余50只建立慢性应激抑郁大鼠模型后,随机分为5组,即模型组,盐酸氟西汀组(0.003 g·kg^(-1)),柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组(1.625,3.25,6.5 g·kg^(-1))。连续灌胃给药8周,1次/d,分别于造模前、造模后及给药后进行行为学实验评估大鼠抑郁状态。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马形态学变化,免疫组织化学法(IHC)检测大鼠海马组织中BDNF蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)定量检测大鼠海马组织中BDNF,TrkB,CREB蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水偏嗜率明显降低(P<0.05),水平得分、垂直得分明显降低(P<0.05),不动时间明显增加(P<0.05),漂浮时间显著增加(P<0.05),HE染色结果显示海马神经元结构损伤,免疫组织化学染色中BDNF表达明显降低(P<0.05),BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,盐酸氟西汀组及柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组大鼠糖水偏嗜率明显升高(P<0.05),水平得分、垂直得分明显增加(P<0.05),不动时间明显减少(P<0.05),漂浮时间明显减少(P<0.05),海马神经元结构明显复原,免疫组织化学染色中BDNF表达明显增加(P<0.05),BDNF,TrkB,CREB mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤能显著改善经慢性应激刺激后大鼠的抑郁样行为,增强海马组织神经元的再生与修复,其机制可能与上调大鼠海马BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。

五味子乙素对慢性应激抑郁大鼠海马BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的 研究五味子乙素对慢性应激抑郁大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B(TrkB)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法 40只SD大鼠随机选择10只作为对照组,其余大鼠采用慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养制备抑郁症模型,造模结束后随机分为3组:模型组、盐酸氟西汀(3 mg·kg^(-1))组、五味子乙素(5 mg·kg^(-1))组,每天ig给药1次,连续8周。分别于造模前、造模后及给药后进行旷场、悬尾、强迫游泳行为学实验;通过苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马形态学改变;免疫组织化学染色(IHC)法观察大鼠海马BDNF蛋白表达;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测大鼠海马BDNF、 TrkB、 CREB mRNA相对表达量;Western blotting检测大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,模型组大鼠旷场实验水平、垂直得分显著降低(P<0.05),悬尾不动时间和强迫游泳漂浮时间显著增加(P<0.05);HE染色结果 显示海马神经元结构损伤,IHC结果 显示海马BDNF表达明显降低;海马BDNF、TrkB、CREB mRNA及蛋白相对表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,盐酸氟西汀及五味子乙素组大鼠水平、垂直得分显著增加(P<0.05),不动时间和漂浮时间显著减少(P<0.05);海马神经元结构明显复原,海马组织中BDNF染色明显增加;BDNF、TrkB、 CREB mRNA和蛋白相对表达量显著增加(P<0.05)。结论 五味子乙素可以改善慢性应激抑郁大鼠抑郁样行为、海马区神经元数量及形态,其机制可能与上调BDNF/TrkB/CREB信号通路有关。

褪黑素对抑郁症睡眠障碍模型大鼠行为的影响及机制的研究

目的探讨褪黑素对抑郁症睡眠障碍模型大鼠的改善作用和可能机制。方法大鼠构建抑郁症睡眠障碍模型。造模成功的大鼠随机分为模型组、褪黑素低、中、高剂量组(10、20和40 mg·kg^(-1)褪黑素腹腔注射给药),连续21 d,正常大鼠为对照组,每组11只。采用新奇抑制摄食实验评估对大鼠抑郁样行为。比色法检测大鼠脑组织中超氧化歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中5-羟色胺(5-HT)、谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。蛋白质印迹法和免疫组化法检测大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(TrkB)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)蛋白表达水平。结果对照组、模型组、褪黑素低、中、高剂量实验组大鼠进食潜伏期分别为(281.75±34.77),(567.30±51.56),(514.52±33.65),(405.21±46.94)和(395.73±35.04)s;SOD活性分别为(62.28±8.80),(38.97±2.67),(44.99±2.32),(49.49±3.59)和(52.39±6.34)U·mL^(-1);MDA含量分别为(3.31±0.38),(6.11±0.61),(5.02±0.44),(4.07±0.40),(3.99±0.44)nmol·mg^(-1);5-HT含量分别为(566.78±78.85),(342.28±46.63),(400.15±37.07),(480.35±22.90)和(566.34±54.45)pg·mL^(-1);Glu含量分别为(39.96±3.26),(68.28±9.48),(51.68±3.24),(45.74±3.78),(40.11±2.62)ng·mL^(-1);GABA含量分别为(32.53±2.45),(46.58±5.45),(41.45±3.88),(37.18±4.70),(35.71±3.02)ng·mL^(-1);BDNF蛋白表达水平分别为(0.85±0.07),(0.24±0.04),(0.45±0.07),(0.57±0.06),(0.57±0.06);TrkB蛋白表达水平分别为(0.78±0.10),(0.29±0.04),(0.45±0.07),(0.58±0.05),(0.69±0.10);CREB蛋白表达水平分别为(1.00±0.07),(0.43±0.06),(0.63±0.05),(0.75±0.08),(0.83±0.08)。上述指标,对照组与模型组相比,褪黑素低、中、高剂量组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论褪黑素可能通过上调BDNF/TrkB/CREB通路来调控神经递质水平、抑制氧化应激反应,进而改善抑郁症睡眠障碍。