谷斑皮蠹分子检测方法

根据Simon(1994)发表的COI基因的通用引物,扩增了谷斑皮蠹、黑斑皮蠹、条斑皮蠹和花斑皮蠹不同地理种群的COI基因片段。经序列比对后,依据多态位点,设计了检测谷斑皮蠹的特异引物。PCR结果表明:引物可成功扩增出谷斑皮蠹样品的基因片段。而其他斑皮蠹属种类基因片段不能被扩增。

花斑皮蠹和黑斑皮蠹(鞘翅目:皮蠹科)的快速分子鉴定

斑皮蠹属昆虫个体小,形态高度相似,仅依据外部形态难以鉴定。用线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)基因的通用引物,分别以黑斑皮蠹(Trogoderma glabrum)、花斑皮蠹(Trogoderma variabile)的DNA为模板,进行PCR扩增、测序。比较二者COI的碱基序列,找出所有序列多态性位点及相应的限制性内切酶,最终选取限制性内切酶AflⅡ对二者进行酶切。结果表明,黑斑皮蠹的COI序列可被限制酶AflⅡ切开,形成535bp和347bp两部分,而花斑皮蠹COI片段中因不具有AflⅡ酶切位点而不能被切开,从而将二者成功区分,实现对黑斑皮蠹和花斑皮蠹的快速分子鉴定。

谷斑皮蠹与黑斑皮蠹的分子鉴定

本文首次报道了可用于谷斑皮蠹(Trogoderma granarium)和黑斑皮蠹(Trogoderma glabrum)种间鉴定的线粒体COⅠ基因部分标记序列(883bp),两条序列在GenBank数据库的登录号分别为FJ589736和FJ589737。

谷斑皮蠹幼虫标本的制作与检疫鉴定

在植物检疫领域,有害生物标本在进出境植物检疫性有害生物的检疫鉴定中具有重要作用。本文提供了谷斑皮蠹幼虫玻片标本的制作方法,同时介绍了在检疫鉴定过程中谷斑皮蠹幼虫的几个重要特征。