姜黄素调控Trx-1/TXNIP复合体防治对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的研究

为了探讨姜黄素(CUR)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠肝脏损伤的保护作用及机制,试验将60只ICR小鼠随机分成正常对照组、模型组、N-乙酰半胱氨酸组(按体重150 mg/kg灌胃N-乙酰半胱氨酸)、姜黄素低剂量组(按体重50 mg/kg灌胃CUR)、姜黄素中剂量组(按体重100 mg/kg灌胃CUR)和姜黄素高剂量组(按体重200 mg/kg灌胃CUR),对模型组、N-乙酰半胱氨酸组及姜黄素低、中、高剂量组连续灌胃10 d,然后一次性按体重300 mg/kg腹腔注射APAP诱导小鼠急性肝损伤,24 h后,摘眼球取血并处死各组小鼠,计算小鼠肝脏指数,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,以及肝脏组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,活性氧(ROS)水平;并取肝脏组织进行H.E.染色,观察小鼠肝脏病理组织学变化。通过RT-qPCR方法检测肝脏中Trx-1/TXNIP/NLRP3通路mRNA相对表达量。结果表明:与正常对照组比较,模型组小鼠的肝脏指数,血清ALT、AST、LDH活性,肝脏组织MDA含量、ROS水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),肝脏组织GSH含量和CAT、SOD活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01)。与模型组相比,姜黄素低中高剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH活性,肝脏指数和肝脏组织MDA、ROS含量极显著降低(P<0.01),肝脏组织CAT、SOD活性和GSH含量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),Trx-1的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组肝脏组织肝索紊乱,肝细胞大量坏死,核溶解,肝窦炎性浸润和充血;姜黄素各剂量组肝索结构基本正常,肝细胞坏死减少。说明姜黄素通过抗氧化和抗炎作用对APAP诱导的小鼠急性肝损伤发挥保护作用,其机制可能与Trx-1表达量增加和TXNIP表达量降低有关。

姜黄素通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻对乙酰氨基酚诱导的大鼠急性肾损伤

目的探究姜黄素(curcumin,CUR)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用及机制。方法48只雄性SD大鼠随机均分为正常组、模型组、阳性药NAC组、CUR低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组。NAC及CUR灌胃给药10 d后,一次性灌胃给予2 g/kg APAP建立急性肾损伤模型,造模24 h后,取血并分离大鼠,计算肾指数;检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色评价大鼠肾病理变化;检测大鼠肾组织谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blot检测大鼠肾组织Trx-1、TXNIP、NLRP3炎症小体等蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肾指数显著增加(P<0.01),血清Cr、BUN水平显著升高(P<0.01),病理切片显示大鼠肾组织出现明显的损伤,大鼠肾组织中GSH、T-SOD、CAT的活性显著降低(P<0.01),MDA的含量显著升高(P<0.01),大鼠肾组织中Trx-1的表达明显下调(P<0.05),TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白的表达明显上调(P<0.01)。与模型组相比,CUR中、高剂量组肾指数显著降低(P<0.01),病理损伤改善,血清Cr、BUN水平显著降低(P<0.01),肾组织中GSH、T-SOD、CAT活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1的表达明显上调(P<0.05或P<0.01)、TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论姜黄素预防性给药通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻APAP诱导的大鼠急性肾损伤。

Trx-1及HIF-1α在胃癌腹膜转移中的表达及意义

目的检测Trx-1及HIF-1α在胃癌腹膜转移者、未转移者中的表达情况,分析其在胃癌腹膜转移中的临床意义。方法免疫组化法检测Trx-1及HIF-1α在胃癌腹膜转移患者原发灶、未转移患者原发灶中的表达情况;利用相关分析分析Trx-1及HIF-1α的相关关系;采用Kaplan-Meier法分析Trx-1及HIF-1α阳性和HIF-1α阴性表达者的平均生存时间;Logistic回归分析胃癌腹膜转移的危险因素。结果Trx-1及HIF-1α在胃癌腹膜转移组与胃癌腹膜未转移组中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析提示,Trx-1与HIF-1α表达呈正相关。Trx-1及HIF-1α在胃癌腹膜转移灶中的阳性表达与肿瘤的Borrmann分型及T分期相关。Trx-1及HIF-1α表达阳性的患者术后生存时间短于Trx-1及HIF-1α表达阴性的患者。Logistic回归分析提示,原发肿瘤Borrmann分型、T分期,以及原发灶中Trx-1及HIF-1α的阳性表达是胃癌腹膜转移的危险因素。结论Trx-1及HIF-1α的表达与胃癌腹膜转移有关,且高表达者预后不良。

姜黄素通过抑制TXNIP/TRX-1/GPX4通路介导的铁死亡减轻脓毒症小鼠肺损伤

目的探究姜黄素(Cur)是否通过调控TXNIP/TRX-1/GPX4通路抑制铁死亡减轻脓毒症肺损伤。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、脓毒症(盲肠结扎穿孔术,CLP)组、CLP+各浓度Cur(50、100和200 mg/kg)组、CLP+Cur(200 mg/kg)+TRX-1抑制剂PX-12(25 mg/kg)组,10只/组,检测各组小鼠肺组织炎症因子及铁死亡关键因子MDA、MPO、GSH水平。Beas-2B细胞分为Con组、脂多糖组(LPS,1μg/mL)、LPS+各浓度Cur(2.5、5、10μmol/L)及LPS+Cur(10μmol/L)+PX-12(5μmol/L)组,检测MDA和Fe^(2+)水平,DHE染色评估ROS变化。Western blotting检测肺组织和Beas-2B细胞TXNIP、TRX-1、GPX4和X-CT蛋白表达水平。结果与Sham组相比,CLP组小鼠肺损伤严重,IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、MPO含量增加,GSH含量下降(P<0.01);与CON组相比,LPS组MDA、Fe^(2+)、ROS水平升高;CLP组肺组织和LPS组Beas-2B细胞TXNIP蛋白表达增加,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达减低(P<0.01);与CLP组相比,CLP+Cur各浓度组肺损伤减轻,炎症因子和脂质过氧化因子含量降低,GSH水平升高;与LPS组相比,LPS+Cur各浓度组Fe^(2+)、MDA和ROS水平下降(P<0.05);TXNIP蛋白表达降低,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达增加(P<0.01)。PX-12干预后,取消了Cur对脓毒症肺组织和Beas-2B细胞的保护作用(P<0.05)。结论姜黄素通过升高TRX-1、GPX4,降低TXNIP抑制铁死亡,减轻脓毒症肺损伤。

TXNIP/Trx-1/GPX4通路促进新生大鼠缺氧缺血后海马神经元铁死亡的作用机制

目的 观察新生大鼠缺氧缺血后海马神经细胞铁死亡的变化,并从TXNIP/Trx-1/GPX4信号通路探讨其机制。方法 将健康7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组(n=30)、缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)组(n=30)及siRNA (TXNIP siRNA)组(n=12)。采用经典Rice-Vannucci法建立新生大鼠HIBD模型。造模后6 h、24 h、72 h、7 d,Western blot法检测新生大鼠损伤侧海马组织铁死亡蛋白GPX4蛋白表达水平变化;造模后24 h,采用激光散斑成像结合苏木精-伊红染色法鉴定模型;采用NeuN/GPX4、GFAP/GPX4免疫荧光双标染色结合Western blot等方法检测各组新生大鼠损伤侧海马组织GPX4、TXNIP、Trx-1蛋白表达水平;检测新生大鼠血清铁和损伤侧海马组织铁含量的变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组新生大鼠TXNIP、Trx-1、GPX4 mRNA的表达水平。结果 造模后6 h、24 h、72 h、7 d,HIBD组GPX4蛋白表达水平低于假手术组(P<0.05)。造模后24 h,HIBD组损伤侧脑血流量低于假手术组(P<0.05),HIBD组损伤侧海马CA1区神经细胞排列疏松紊乱,形态不规则。HIBD组损伤侧海马CA1区TXNIP^(+)细胞数高于假手术组,Trx-1^(+)细胞数、NeuN^(+)GPX4^(+)/NeuN^(+)低于假手术组(P<0.05),海马CA1区几乎未见GFAP^(+)GPX4^(+)细胞。HIBD组和siRNA组血清铁、损伤侧海马组织铁含量高于假手术组,且siRNA组血清铁、损伤侧海马组织铁含量低于HIBD组(P<0.05)。HIBD组和siRNA组TXNIP mRNA及蛋白表达水平均高于假手术组,且siRNA组TXNIP mRNA及蛋白表达水平低于HIBD组(均P<0.05);HIBD组和siRNA组损伤侧海马组织Trx-1、GPX4 mRNA及蛋白表达水平均低于假手术组,且siRNA组损伤侧海马组织Trx-1、GPX4 mRNA及蛋白表达水平高于HIBD组(均P<0.05)。结论 新生大鼠缺氧缺血通过激活TXNIP/Trx-1/GPX4通路,导致新生大鼠海马神经元铁死亡,进而导致HIBD。

MEBT/MEBO通过调控TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路促进糖尿病创面愈合

目的:探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病创面中TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路表达的影响。方法:将48只Wistar雄性大鼠随机平均分为对照组、模型组、美宝组和贝复新组。其中对照组构建急性创面模型,其余组构建糖尿病创面模型。随后美宝组和贝复新组分别采用湿润烧伤膏和重组牛碱性成纤维生长因子进行换药,对照组及模型组采取生理盐水进行换药。通过H&E染色、免疫荧光法及实时荧光定量PCR检测观察各组创面第3、7、14天愈合情况及TXNIP、NLRP3及Caspase-1表达情况。结果:(1)治疗第3天,对照组创面愈合率高于模型组,且具有统计学差异性(P<0.05);治疗第7、14天,对照组、美宝组和贝复新组创面愈合率高于模型组(P<0.05)。(2)治疗第3、7、14天,对照组、美宝组和贝复新组的TXNIP、NLRP3表达量低于模型组(P<0.05):治疗第3、7、14天,对照组和美宝组的Caspase-1表达量低于模型组(P<0.05)。结论:MEBT/MEBO可通过抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路表达,减轻糖尿病创面的炎症反应,从而促进糖尿病创面的愈合。

益母草碱调节IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路对急性呼吸窘迫综合征大鼠炎症反应的影响

目的探究益母草碱调节IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠炎症反应的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、益母草碱低剂量组、益母草碱高剂量组、联用HY-N2485组(高剂量益母草碱+NLRP3激活剂)。检测大鼠肺功能;血气分析仪检测氧分压(PaO_(2))和二氧化碳分压(PaCO_(2));ELISA法检测肺泡灌洗液白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测肺组织干湿比;检测肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;HE染色观察大鼠肺组织病理形态;Western blotting检测肺组织中IRE1α、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果与空白组相比,模型组肺组织形态有明显损伤,PEF、FVC和FEV0.3/FVC水平、PaO_(2)、OI水平、肺泡灌洗液IL-10水平、肺组织CAT和SOD活性降低,PaCO_(2)水平、肺泡灌洗液IL-1β、IL-6、TNF-α水平、肺组织病理评分、肺组织MDA含量、IRE1α、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,益母草碱低、高剂量组大鼠肺组织损伤明显减轻,PEF、FVC和FEV0.3/FVC水平、PaO_(2)、OI水平、肺泡灌洗液IL-10水平、肺组织CAT和SOD活性升高,PaCO_(2)水平、肺泡灌洗液IL-1β、IL-6、TNF-α水平、肺组织病理学评分、肺组织MDA含量、IRE1α、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05);HY-N2485可减弱益母草碱对ARDS大鼠的改善作用(P<0.05)。结论益母草碱可降低ARDS大鼠炎症和氧化应激,减轻肺组织损伤,改善肺功能,可能与抑制IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路有关。

TRX-1和STAT-3在结直肠癌组织中的表达及相关性研究

目的检测人结直肠癌组织中TRX-1和STAT-3的表达,探讨二者之间的相关性。方法用免疫组织化学法分别检测60例结直肠癌和22例远癌正常大肠黏膜中TRX-1和STAT-3的表达情况,并结合临床资料,对其进行分析。结果 TRX-1和STAT-3均定位于细胞质和细胞核,TRX-1在结直肠癌与正常大肠黏膜组织阳性率分别为78.33%与31.82%(免疫组化染色平均评分分别为4.03±1.92和1.42±1.20),二者间差异有统计学意义(P<0.01);STAT-3在结直肠癌与正常大肠黏膜组织的阳性率分别为65.00%与27.27%(免疫组化染色平均评分分别为3.34±1.81和1.26±1.19),二者间差异有统计学意义(P<0.01)。TRX-1与STAT-3在低分化癌中比高分化者表达增强;二者的表达与淋巴结转移和TNM分级密切相关(P<0.05或P<0.01)。TRX-1和STAT-3在结直肠癌中的表达呈正相关(r=0.964,P<0.01)。结论 Trx-1和STAT-3在结直肠癌组织中过度表达,并与其发生发展有关,二者可能参与了结直肠癌恶化的调控。

肠道恶性肿瘤中Trx-1表达及生物学意义研究

目的检测大、小肠癌中Trx-1的表达情况,并探讨该癌蛋白在两者之间的相关性。方法用免疫组化法分别检测36例小肠癌、20例癌旁正常小肠黏膜中Trx-1和60例结直肠癌、22例癌旁正常大肠黏膜中Trx-1的表达情况。用半定量方法对免疫组化染色做评分,结合临床和病理数据进行分析。结果 Trx-1定位于细胞质和胞核,在大、小肠恶性肿瘤中过度表达,均较癌旁正常组织的表达显著增高。其在两部位的表达与对应正常肠组织的表达有统计学差异,且与病理分化不同有关(P<0.01)。它们在中低分化肿瘤比高分化者表达增强(P<0.05或P<0.01);也同淋巴结转移(P<0.05)和TNM分级密切相关(P<0.01)。Trx-1在大、小肠癌中的表达呈正相关(r=0.756,P<0.05)。结论 Trx-1在肠癌组织中的过度表达并与其发生发展有关,可能参与了大、小肠癌恶化的调控。

鄂尔多斯细毛羊LMNB1基因和TXNIP基因多态性与羊毛性状关联分析

该研究旨在寻找细毛羊主要经济性状的分子标记。以462只周岁鄂尔多斯细毛羊母羊为试验动物,联合DNA混池和Snapshot技术,检测LMNB1基因和TXNIP基因多态性,采用SAS9.2对LMNB1基因和TXNIP基因突变位点与羊毛性状进行关联分析。结果表明:鄂尔多斯细毛羊的LMNB1基因有1个Indel(Indel1)、4个SNP同义突变(SNP1、SNP2、SNP3、SNP4);TXNIP基因在3'UTR区有1个突变(SNP5)。LMNB1基因Indel1-SNP1突变位点ATCT基因型和TTTT基因型群体纤维直径变异系数显著高于AACC基因型(P<0.05),ATCT基因型和TTTT基因型之间差异不显著(P>0.05);TXNIP基因SNP5突变位点TT基因型平均纤维直径显著高于CT基因型(P<0.05),极显著高于CC基因型(P<0.01);CC基因型和CT基因型之间平均纤维直径差异不显著(P>0.05)。结果提示,TXNIP基因SNP5可作为影响鄂尔多斯细毛羊绒毛纤维直径的分子标记,为鄂尔多斯细毛羊超细型群体的选育提供试验依据。

弥漫大B细胞淋巴瘤中Trx、TrxR-1及TXNIP的表达及临床意义

目的探讨硫氧还蛋白(Trx)、硫氧还蛋白还原酶1(TrxR-1)及硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测60例DLBCL和20例淋巴结反应性增生组织中Trx、TrxR-1及TXNIP的表达,并分析三者表达与DLBCL临床病理特征的关系。结果DLBCL中Trx和TrxR-1的阳性率分别为68.33%和76.67%,淋巴结反应性增生组织中Trx和TrxR-1的阳性率分别为25.00%、35.00%,DLBCL中Trx和TrxR-1的阳性率均明显高于淋巴结反应性增生组织,差异有统计学意义(P<0.05);TXNIP在DLBCL中的表达(20.00%,12/60)低于淋巴结反应性增生组织(80.00%,16/20),差异有统计学意义(P<0.05)。DLBCL中Trx、TrxR-1和TXNIP的表达与临床分期、IPI评分有关(P<0.05),与患者性别、年龄、乳酸脱氢酶水平无关(P>0.05)。ROC结果显示,Trx、TrxR-1单项检测曲线下面积(AUC)分别为0.717与0.708,而两者联合检测AUC为0.767,高于单独检测。结论Trx、TrxR-1及TXNIP表达异常可能与DLBCL发生、发展有关,联合检测Trx和TrxR-1表达可为DLBCL的诊断提供参考价值。

GLP-1受体激动剂联合二甲双胍片对NAFLD患者肝纤维化及PTX3、TXNIP的影响

目的:探讨GLP-1受体激动剂联合二甲双胍片对非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者肝纤维化及血清五聚体蛋白-3(pentraxin 3,PTX3)、硫氧还蛋白结合蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)的影响。方法:选取2016年5月-2019年6月本院收治的308例NAFLD患者,随机分为观察组和对照组,各154例。对照组患者予以二甲双胍片进行治疗,观察组患者在对照组的基础上联合GLP-1受体激动剂利拉鲁肽进行治疗,比较两组患者治疗前后总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2 h血糖(postprandial 2 h plasma glucose,2 h PG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)等血糖血脂指标,空腹血糖、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)(HOMA-IR)等胰岛素抵抗指标,血清透明质酸(serum hyaluronic acid,HA)、层黏蛋白(laminin,LN)、IV型胶原(IV collagen,IV-C)、Ⅲ型前胶原(Ⅲprocollagen,PCⅢ)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)等肝纤维化指标和肝纤维化评分及PTX3和TXNIP水平表达情况。结果:治疗后,两组患者TC、TG、LDL-C、FPG、2 h PG、HbA1c等指标水平较治疗前降低,且观察组较对照组更低(P<0.05),而两组HDL-C水平较治疗前升高,且观察组较对照组更高(P<0.05)。治疗后,观察组FPG、FINS、HOMA-IR等指标水平较治疗前降低,且低于对照组(P<0.05),而治疗后对照组FPG较治疗前升高,FINS、HOMA-IR较治疗前降低(P<0.05)。治疗后,两组患者LN、IV-C、PCⅢ、HA、AST、ALT等肝纤维化指标水平及NAFLDFS评分较治疗前显著降低,且观察组较对照组更低(P<0.05)。治疗后,两组患者血清TXNIP、PTX3水平较治疗前降低,且观察组血清TXNIP、PTX3水平较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GLP-1受体激动剂联合二甲双胍片可有效缓解NAFLD患者肝纤维化情况,改善胰岛素抵抗情况,降低血清PTX3、TXNIP水平表达,进而改善患者肝功能。

桑黄素通过抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨桑黄素(Morin)通过调控硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶1(Caspase-1)信号通路,对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡的影响。方法将60只大鼠随机均分为假手术组、模型组、Morin低剂量(Morin-L,10 mg/kg)组、Morin高剂量(Morin-H,40 mg/kg)组、Morin-H+pLVXNC组(40 mg/kg Morin+pLVX-NC)、Morin-H+pLVX-TXNIP组(40 mg/kg Morin+pLVX-TXNIP)。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(除外假手术组),给药1 h后再灌注。再灌注72 h后,进行神经功能缺损评分;取出全脑进行脑含水量测定;苏木精-伊红(HE)染色观察脑皮质半暗带病理损伤情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)检测脑组织梗死面积;酶联免疫吸附试验检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量;Western blot检测脑皮质中TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分,IL-1β、IL-18水平,脑含水量,梗死面积,TXNIP、NLRP3、Caspase-1蛋白表达均增加(P<0.05);与模型组比较,Morin-L组、Morin-H组神经功能缺损评分,IL-1β、IL-18水平,脑含水量,梗死面积,TXNIP、NLRP3、Caspase-1蛋白表达均降低(P<0.05);与Morin-H+pLVX-NC组比较,Morin-H+pLVX-TXNIP组神经功能缺损评分,IL-1β、IL-18水平,脑含水量,梗死面积,TXNIP、NLRP3、Caspase-1蛋白表达增加(P<0.05)。结论Morin可以减轻脑缺血再灌注大鼠脑损伤,抑制神经元凋亡,作用机制可能与抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路活化有关。

过表达TRX-1通过调控Nrf2/HO-1通路影响帕金森病PC12细胞凋亡

目的探讨过表达TRX-1在帕金森病PC12细胞中通过调控Nrf2/HO-1通路对细胞凋亡的影响。方法用1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^+)诱导PC12细胞建立帕金森病细胞模型。将pcDNA-hTRX-1质粒转染至PC12细胞中,qRT-PCR检测TRX-1 mRNA的表达。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率以及细胞内活性氧水平,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、细胞色素c(Cyt-c)、裂解Caspase-3(cleaved Caspase-3)和氧化应激相关蛋白Nrf2和HO-1的表达。结果TRX-1在帕金森病PC12细胞中低表达;过表达TRX-1能提高帕金森病PC12细胞活力,抑制细胞凋亡,并且能激活Nrf2/HO-1通路。结论过表达TRX-1能通过激活Nrf2/HO-1通路进而抑制帕金森病PC12细胞的凋亡。

Trx-1在脓毒症小鼠内皮细胞铁死亡中的表达

目的研究脓毒症小鼠血管内皮细胞是否存在铁死亡以及硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)在这一过程中的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型。将动物随机分成3组:假手术组(Sham组)、CLP组、铁死亡抑制剂组(Fer-1组)。观察12h后,取外周血制备血清,采用ELISA法检测各组小鼠外周血中Trx-1、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮素-1(ET-1)的表达。提取及培养小鼠原代内皮细胞,应用荧光探针技术测定内皮细胞内Fe^(2+)及ROS的水平,试剂盒法测定内皮细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平。结果与Sham组相比,CLP组内皮细胞内GSH含量降低,Fe^(2+)、ROS、MDA含量升高,Fer-1预处理能够缓解这一过程;与Sham组相比,CLP组Trx-1、ET-1及VEGF含量升高,Fer-1组较CLP组降低。结论脓毒症小鼠内皮细胞存在铁死亡,Trx-1在脓毒症铁死亡中高表达。

急性白血病患者WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因表达的检测及其与疾病分型、疗效的关系

目的:研究急性白血病患者肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)、ETS相关基因(ERG)、硫氧还蛋白-2(TRX-2)基因表达及其与疾病分型、疗效的关系。方法:将本院收治的90例白血病患者纳入研究的白血病组,将同期体检健康者纳入健康组;进一步根据分型将白血病患者分为ALL组和AML组,根据化疗后疗效将白血病患者分为完全缓解组和复发组。采集患者的外周血,检测WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量。结果:白血病组血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AML组血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于ALL组,差异有统计学意义(P<0.05);复发组的血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于完全缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因异常高表达与白细胞的发生有关,也与疾病的分型、化疗的效果密切相关。

lncRNA KCNQ1OT1通过miR-499a-5p/TXNIP调控缺氧心肌细胞活性和凋亡的机制

目的探讨长链非编RNA(lncRNA)、KCNQ1重叠转录物(KCNQ1OT)1对缺氧心肌细胞活性和凋亡的影响及分子机制。方法将心肌细胞随机分为对照(NC)组、缺氧预处理(HPC)组、si-NC+HPC组、si-lncRNA KCNQ1OT1+HPC组、miR-NC+HPC组、miR-499a-5p+HPC组、si-硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)+HPC组、pcDNA-NC+si-lncRNA KCNQ1OT1+HPC组、pcDNA-TXNIP+si-lncRNA KCNQ1OT1+HPC组;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA KCNQ1OT1、miR-499a-5p和TXNIP mRNA的表达水平;Western印迹法检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒分别检测MDA含量和细胞SOD活性;双荧光素酶报告实验检测lncRNA KCNQ1OT1、miR-499a-5p、TXNIP之间的靶向关系。结果心肌梗死患者血清及缺氧诱导的心肌细胞中lncRNA KCNQ1OT1表达水平显著升高(P<0.05)。下调lncRNA KCNQ1OT1、下调TXNIP或上调miR-499a-5p后,心肌细胞H9C2中CyclinD1表达、细胞活性、SOD活性显著升高,Cleaved-caspase-3表达、细胞凋亡率、MDA含量显著降低(P<0.05)。lncRNA KCNQ1OT1通过靶向miR-499a-5p调控TXNIP表达。过表达TXNIP可以逆转lncRNA KCNQ1OT1下调对缺氧诱导的心肌细胞H9C2的影响。结论下调lncRNA KCNQ1OT1可能通过miR-499a-5p/TXNIP轴抑制缺氧诱导心肌细胞凋亡和氧化应激,促进细胞存活。

TRX-1在肝细胞肝癌中的表达与临床病理特征及预后的相关性分析

目的分析TRX-1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与临床病理特征及预后的相关性.方法 选取59例HCC患者作为观察对象,收集患者的HCC组织、癌旁组织活检标本,应用免疫组化法(SP法)检测所有标本的TRX-1表达水平,探讨TRX-1表达与HCC临床病理特征、预后的关系.结果 59例HCC患者中,HCC组织的TRX-1表达率为67.80％,癌旁组织的TRX-1表达率为15.25％;两组数据具有显著性差异(P＜0.05);TRX-1与HCC患者的年龄、病理分级、病灶直径具有相关性(P＜0.05),与性别、是否患有乙肝、肝硬化无相关性(P＞0.05).结论 TRX-1在HCC中的表达具有特异性,表达水平显著高于癌旁组织,与年龄、病理分级、病灶直径具有相关性,为临床诊断HCC、评估疗效及预后而提供依据.

血清硫氧还蛋白-1水平与幽门螺杆菌感染及胃黏膜病理改变的相关性研究

目的探讨血清硫氧还蛋白(TRX-1)水平与幽门螺杆菌(H.pylori)感染及胃黏膜病理改变的关系,进一步明确其临床意义。方法选择2009年4—7月于北京大学第三医院进行胃镜检查的患者116例,于胃镜检查前抽血检测血清TRX-1水平,同时检测血清H.pylori抗体。检测方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法。所有患者进行胃镜检查时于胃窦和胃体分别钳取至少一块组织进行病理组织学HE染色及Warthin-Starry染色。结果H.pylori阳性患者血清TRX-1水平(9.45 ng/ml)高于H.pylori阴性患者(8.99 ng/ml),但差异无统计学意义(U=1 488.000,P=0.775)。慢性浅表性胃炎(CSG)患者血清TRX-1水平(8.98 ng/ml)低于慢性萎缩性胃炎(CAG)患者(10.40 ng/ml),但差异无统计学意义(u=1 068.000,P=0.641)。无论在CSG还是CAG患者,H.pylori感染与否对血清TRX-1水平影响间差异均无统计学意义(P值分别为0.475和0.423)。男性患者血清TRX-1水平(8.24ng/ml)低于女性患者(10.27 ng/ml),差异有统计学意义(P=0.044)。结论 H.pylori感染与否对血清TRX-1水平无影响,在胃黏膜不同炎性状态下,以及不同炎性状态下H.pylori感染与否,血清TRX-1水平没有差异,性别对血清TRX-1水平可能有影响。

硒多糖抗肝细胞癌效应与硫氧还蛋白1的关系

目的探讨硒多糖抗肝细胞癌(HCC)效应与硫氧还蛋白(Trx)-1的关系。方法设置0、50、100、200和400μg/ml共计5组浓度梯度,利用MTT细胞毒活性检测法在细胞水平研究硒多糖对HepG2细胞活力的影响;在分子水平,使用Western印迹检测硒多糖对HepG2细胞内Trx-1表达的影响,并进一步检测凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达。结果硒多糖200μg/ml、400μg/ml组的细胞活力较其他浓度显著下降(P<0.05),显著抑制HepG2细胞活性;200μg/ml、400μg/ml组的硒多糖处理使HepG2细胞Trx-1表达量显著降低(P<0.01);凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达量分别在200μg/ml及100μg/ml时开始显著变化(P<0.05)。结论硒多糖可能是通过下调Trx-1的表达诱导HepG2细胞发生凋亡从而抑制HepG2细胞的生长。