抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的培育

以大白菜栽培品种“福山大包头”的子叶柄为供试材料 ,对影响大白菜植株再生和基因转化频率的因素进行了研究。在此基础上 ,建立了大白菜高效再生体系和有效的基因转化体系 ,并将芜菁花叶病毒的 CP基因 (Tu MV- CP)导入大白菜中 ,获得转化植株。 PCR检测和 Southern杂交分析证明Tu MV- CP基因已整合于大白菜的基因组中 ;Northern杂交分析及 EL ISA检测表明 Tu MV- CP基因在转录和翻译水平上进行了有效表达。转基因植株 T1代的遗传分析表明 ,外源基因在转基因植株后代中遵循 3∶ 1的分离规律。抗病性测定结果显示 ,转基因植株具有明显的抗病毒侵染能力。

转基因结球大白菜的遗传转化

采用农杆菌介导法将TuMV-CP基因导入结球大白菜中,确定了影响大白菜离体再生的主要因素,并确定了最佳大白菜离体培养的条件,建立了高效的大白菜离体再生体系、遗传转化体系。

转基因结球大白菜分子生物学检测

采用农杆菌介导法将TuMV-CP基因导入结球大白菜中,建立了高效的大白菜离体再生体系、遗传转化体系,并对转基因植株进行分子生物学检测,证实得到的再生植株为转基因植株,目的基因已在部分植株上表达。同时,对转基因植株的后代进行检测,分析该基因所控制性状的遗传稳定性以及基因表达情况,为大白菜基因工程抗病毒病育种奠定基础。