结核感染T细胞γ干扰素释放试验及结核杆菌抗体在肺结核患者诊断中的应用

目的:探讨对结核感染T细胞γ干扰素释放试验(TB-IGRA)及结核杆菌抗体(TB-Ab)在肺结核患者诊断中的应用价值。方法:选择2022年1—12月荆州市第三人民医院收治的216例疑似肺结核患者,将病理学诊断作为“金标准”,依据是否存在结核病进行分组,分为肺结核组(n=151)和非肺结核组(n=65),采集患者清晨空腹静脉血分别检测TB-IGRA、TB-Ab水平,观察两项指标检测肺结核阳性结果,观察不同检查方式诊断效能。结果:肺结核组中TB-IGRA阳性检出率、TB-Ab阳性检出率均高于非肺结核组,差异有统计学意义(P<0.05)。TB-IGRA、TB-Ab诊断肺结核的阳性预测值、特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05),TB-IGRA诊断肺结核的敏感度、阴性预测值高于TB-Ab,差异有统计学意义(P<0.05)。年龄>60岁肺结核患者TB-IGRA阳性检出率、TB-Ab阳性检出率高于≤60岁肺结核患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:临床肺结核诊断中应用TB-IGRA、TB-Ab检查均有较高诊断效能,但相对而言TB-IGRA检查方式更优,且该检查方式阳性率易受年龄因素影响。

结核菌培养联合结核分枝杆菌-DNA检测对菌阴肺结核诊断效能的研究

目的探究结核菌培养联合结核分枝杆菌-DNA检测对菌阴肺结核的诊断效能。方法选取2021年9月至2022年9月阳江市公共卫生医院收治的188例疑似菌阴肺结核患者,均进行结核菌培养、结核分枝杆菌-DNA检测。以组织培养及病理检查为“金标准”。比较结核菌培养、结核分枝杆菌-DNA检测单独检测、联合检测菌阴肺结核的诊断结果以及诊断效能。结果188例疑似菌阴肺结核患者中132例确诊为阳性,结核菌培养检测检出阳性115例,阴性73例;结核分枝杆菌-DNA检测检出阳性107例,阴性81例;联合检测检出阳性134例,阴性54例。结核菌培养联合结核分枝杆菌-DNA检测对菌阴肺结核的灵敏度、阴性预测值、准确率(91.67%、79.63%、87.23%)高于结核菌培养检测(78.79%、61.64%、79.26%)、结核分枝杆菌-DNA检测(75.00%、59.26%、78.19%),差异有统计学意义(P<0.05)。结核菌培养联合结核分枝杆菌-DNA检测对菌阴肺结核的特异度、阳性预测值(76.79%、90.30%)与结核菌培养检测(80.36%、90.43%)、结核分枝杆菌-DNA检测(85.71%、92.52%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核菌培养联合结核分枝杆菌-DNA检测对菌阴肺结核进行诊断,有利于提升诊断灵敏度、阴性预测值、准确率,诊断效能较高。

脊柱结核脓液中结核杆菌的复苏培养

目的:探讨结核杆菌复苏因子(rpf)对脊柱结核脓液中结核杆菌生长的影响。方法:由宁夏医学院第一附属医院骨科提供的临床诊断为脊柱结核的住院患者手术获取的脓液标本25份,氢氧化钠溶液常规处理后,每份标本分为低浓度培养组、高浓度培养组和对照组。高浓度和低浓度组各设6管,分别含高、低两种浓度的rpfA、B、C、D、E及各种复苏因子组合,每管中加入7ml7H9液体培养基,并加入处理后的标本和相应的rpf;对照组1管,不加rpf。37℃培养,分别在第6天、第11天、第16天、第30天检测培养物600nm处的吸光度(OD值),同时于上述各时间点每管取10!l培养物涂7H11平板培养,取第30天培养物行抗酸染色检查,以证实培养物为结核杆菌。同时将处理后的脓液标本进行集菌法涂片抗酸染色和改良罗氏培养检测结核杆菌。结果:结核杆菌复苏培养阳性率(84%)显著高于涂片阳性率(60%)和改良罗氏培养阳性率(44%)(P<0.05或0.01)。复苏培养低浓度各组与高浓度各组在培养第11天、第16天和第30天时培养物OD值均显著高于对照组(P<0.05);复苏培养同一组内第11天、第16天和第30天时培养物OD值均显著高于第6天(P<0.01),而第16天和第30天与第11天比较无显著性差异(P>0.05);对照组第11天、第16天和第30天培养物OD值与第6天比较均无显著性差异(P>0.05);同一时间、同一浓度时,5种复苏因子单独应用与联合应用之间两两比较,除高浓度rpfA、B在培养第30天时分别与同一浓度、同一时间的rpfC、D、E和组合组之间及rpfA与B之间比较有显著性差异(P<0.05)外,其余均无显著性差异;同一种复苏培养,在同一时间高、低浓度比较,第30天时高浓度rpfA、B的OD值高于低浓度rpfA、B(P<0.05),低浓度rpfD高于高浓度rpfD(P<0.05),其余均无显著性差异。11例改良罗氏培养阳性和21例复苏培养阳性者的培养生长物抗酸染色检查均为抗酸杆菌,复苏培养生长物7H11平板培养第20d时可见淡黄色菜花状菌落,证实为结核杆菌。结论:结核杆菌复苏因子能有效促进脊柱结核脓液中结核杆菌的迅速生长,复苏培养法能提高脊柱结核脓液中结核杆菌的检出率。

肺痨康对结核杆菌体内抑菌实验研究

[目的]观察肺痨康对结核杆菌体内抑菌作用。[方法]小鼠随机分为空白组,模型组,阳性组(RFP,灌胃150mg/kg),肺痨康高、中、低剂量组6组,空白组,模型组给予等容积的生理盐水。实验当天,将结核菌配制成1mg/ml生理盐水菌悬液,尾静脉注射0.2ml/只。于第二天灌胃药物。一周后死亡的动物作解剖记录;观察肝,脾,肺的重量指数及每个脏器的结核结节,脏器的病理形态学变化(HE染色)与结核菌数(Z-N染色)。观察并记录各组动物的存活时间。[结果]肺痨康高剂量对感染肺结核小鼠有明显的治疗效果,中剂量组有较明显的疗效。[结论]肺痨康高剂量、中剂量有较好的抗结核杆菌的作用。

经纤支镜支气管冲洗液涂片及刷片检查对痰菌阴性肺结核的诊断价值

采用经纤支镜支气管冲洗液及涂片查抗酸杆菌的方法,对67例痰菌阴性肺结核进行检查。结果显示:支气管冲洗液抗酸杆菌检出率79.1%,直接刷片检出率55.2%,两者比较有非常显著性差异(P<0.01);支气管冲洗液+刷片联合检出率91.0%。说明支气管冲洗液查抗酸杆菌对痰菌阴性肺结核是一种简单、实用的诊断技术,支气管冲洗液+刷片联合检查可以提高结核杆菌的检出率。

应用抑制消减杂交技术构建耐多药结核杆菌差异表达基因消减cDNA文库

目的:构建结核杆菌耐多药株与敏感株的差异表达消减cDNA文库,进一步探索结核杆菌耐多药的分子机制。方法:以耐多药菌株cDNA为实验组(Tester),敏感株cDNA为驱动组(Driver)应用抑制消减杂交(Suppression subtractive hybridiza-tion,SSH)技术结合T/A克隆技术构建结核杆菌耐多药株与敏感株的差异表达消减cDNA文库。结果:成功构建了耐多药结核菌株差异表达消减cDNA文库,获得113个差异表达cDNA片段。结论:研究表明SSH技术是筛选新功能基因的有效方法;多种已知或未知基因均参与了结核杆菌耐多药的调节,大规模筛选与克隆这些基因为进一步研究结核杆菌耐多药机制的产生奠定了必要的理论基础。

脱乙酰基利福喷丁抗结核杆菌生长活性的研究

目的 探讨和研究脱乙酰基利福喷丁体内及体外抗结核杆菌生长活性的作用。方法 测定脱乙酰基利福喷丁抗人型、牛型、草型结核杆菌的最低抑菌浓度 (MIC10 0 )及小鼠半数动物存活时间 (ST50 )。并以利福喷丁作为对照药物。结果 脱乙酰基利福喷丁抗人型、牛型、草型结核杆菌的最低抑菌浓度 (MIC10 0 )分别为 2mg/L ,2mg/L及 0 .2 5mg/L(利福喷丁的MIC10 0 分别为 2mg/L ,2mg/L及 0 .5mg/L)。 10～ 4 0mg/kg剂量的利福喷丁组及脱乙酰基利福喷丁组小鼠的ST50 均超过 2 8d ;2 .5mg/kg剂量和 5 .0mg/kg剂量的脱乙酰基利福喷丁组小鼠的ST50 分别为 16d和 2 7d(而同剂量的利福喷丁组的小鼠ST50 分别为 18d和 18d) ;感染对照组小鼠的ST50 为 13d。结论 脱乙酰基利福喷丁与利福喷丁比较 ,具有相似及良好的体内外抗结核杆菌生长活性的作用。

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｅｈｅｒｎ杂交。其中临床确诊为结核病的１０９例，二者的阳性率分别为４９．６％、６０．６％。未确诊结核病的１９８例，二者均为阳性２例、单纯ＰＣＨ阳性３例。结果表明ＤＮＡ探针检测的灵敏性和特异性高于ＰＣＲ。二者联合使用，有助于对疑难电泳图谱的分析和判断，降低假阴性和假阳性率。

307例抗酸染色阳性病例的临床分析

目的通过对307例抗酸染色阳性病例的临床分析．探讨结核病的发病率及流行趋势．为结核病的防治提供流行病学依据。方法统计2003年1月～2005年12月我院所做抗酸染色的全部病例，结合病例的临床资料．获得近年来结核痛的发病率及其流行趋势变化。结果3年共做抗酸染色14060例．阳性307例．阳性率为2、18％．2003、2004和200j年的阳性检出率分别为1．12％（55／3876）、2．14％（98／4580）、2．75％（154／5604）．经统计学分析差异有统计学意义．P〈0．05。其中．经临床及实验室确诊为免疫功能受损或低下患者1151例．抗酸染色阳性55例，阳性率为4．78％．2003、2004和2005年的阳性率分别为2．83／（9／318）、4．76％（17／357）、6．09％（29／476），统计学分析差异有统计学意义．P〈0．01。结论结核杆菌的感染率呈逐年上升趋势．尤其是免疫功能受损或低下患者的感染率明显上升．结核病的防治将面临严重的挑战。

比例法测定结核菌药敏试验中菌液浓度的研究

为了探讨比例法测定结核菌药敏试验中结核菌悬液的最佳实验浓度 ,采用国际推行的比例法 ,用 10 -2 mg ml、10 -3 mg ml、10 -4 mg ml、10 -5mg ml、10 -6mg ml,5个浓度进行试验 ,并与国际推行的比例法进行比较。结果用 10 -2 mg ml、10 -4 mg ml、接种培养基 ,其药敏试验结果成功率高 ;基础培养基上结核菌生长良好 ,便于结果判断 ;结果报告及时 ;与国际推行的比例法进行相比较 ,药敏试验结果差异性不显著 (P >0 0 5)。试验结果表明 ,比例法测定结核菌药敏试验时 ,最佳菌液浓度是10 -2 mg ml、10 -4 mg ml。

肺泡灌洗液联合肺组织PCR方法检测结核杆菌DNA对肺结核早期诊断的意义

目的探讨肺泡灌洗液(BALF)联合肺组织聚合酶链反应(PCR)方法检测结核杆菌DNA对肺结核早期诊断的意义。方法对104例结核杆菌痰阳性和确诊肺结核的痰菌阴性患者经纤维支气管镜采集BALF及活检肺组织进行石蜡包埋,对标本采用PCR方法检测结核杆菌DNA。结果 104例患者BALF中PCR检测结核杆菌DNA阳性92例,阳性率为88.46%;肺组织石蜡包埋检测结核杆菌DNA阳性98例,阳性率为94.23%。两组阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BALF联合肺组织PCR方法检测结核杆菌DNA有较高的敏感性及特异性,对肺结核病的早期诊断有重要临床意义。

结核分枝杆菌临床分离株耐药特点分析

目的 :分析临床分离结核分枝杆菌的耐药特点。方法 :用改良罗氏培养基间接药敏实验绝对浓度法检测结核菌的耐药情况。结果 :结核菌总耐药率 83.2 % ,耐多药率为 6 6 .4 %。其中初始耐药率 6 8.4 % ,初始耐多药率 36 .8% ,复治耐药率92 .4 % ,复治耐多药率 84 .7%。结论 :耐药及耐多药结核菌感染是临床治疗结核病的一个严重问题。临床分离结核杆菌耐药率和耐多药率高。分析临床分离株耐药特点 ,对控制结核病传染及指导临床合理用药具有重要意义。

艾滋病与结核病相关性研究

目的 调查结核病人群的艾滋病病毒（HIV）感染情况,了解HIV与结核分枝杆菌（MTB）的相关性。方法 对2 272例诊断为结核病的住院病人进行HIV抗体检测,初筛阳性者进一步做免疫印迹试验（WB）。结果 检出HIV抗体阳性者7例,检出率为0.308％。7例 HIV抗体阳性者中,男性 5例,女性 2例。其中 6例为活动性肺结核,1例结核性胸膜炎,发病年龄以 20～40岁为主,占86％。结论 结核病人群中的HIV抗体阳性者比一般人群高10倍。建议对有HIV高危行为的结核病患者尤其是中青年患者做常规HIV抗体检测,以便早期发现、治疗HIV/MTB双重感染者,顶防与控制艾滋病和结核病的流行。

结核菌药敏试验方法(比例法)改进的研究

目的 为了使比例法推广应用 ,在不影响药敏试验结果的前提下 ,对比例法进行改良。方法 用比例法进行结核菌药敏试验时 ,将用接种环接种改成用 0 5毫升无菌玻璃刻度吸管 ;将菌悬液浓度由 10 -3 mg/ml、10 -5mg/ml改用 10 -2 mg/ml、 10 -4 mg/ml。同时与比例法作对比。 结果 改良法的敏感性、特异性、正确率、重复性与比例法无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,而改良法结核菌生长情况、接种需要时间及药敏试验结果的成功率 ,都明显优于比例法。结论 用改良法测定结核菌耐药性 ,方法简便 ,肉眼观察方便 ,结果准确 ,重复性好 。

痰中结核杆菌检查方法的比较

目的分析比较痰涂片、痰培养及FQ-PCR检查结核杆菌对肺结核的诊断价值。方法痰直接涂片和浓集涂片找抗酸杆菌;痰结核杆菌培养;FQPCR检测痰中TB-DNA。结果浓集法较直接法阳性率有大幅提高,培养阳性率较低,FQ-PCR法敏感度最高,三种方法检测结果具有很好的相关性。结论涂片检查结核杆菌应提倡浓集法,FQ-PCR法检测TB-DNA可列入TB实验诊断的常规项目,涂片、培养及FQPCR同时对结核杆菌进行检测可从不同方面满足临床的需要。

SRID检测活动性结核标志物在妇科疾病中的运用探讨

目的:探讨无症状的体内结核活动与妇科疾病的关系。方法:运用单向免疫扩散法(SRHD)检测5O例不同妇科疾患患者血清中活动性结核标志物(ATB-M),并根据不同治疗方法对(ATB-M)阳性者增加抗痨治疗及随访。结果:18例子宫肌瘤病人中94.4％ATB-M阳性(P<0.01),10例卵巢囊肿病人中80％ATB—M阳性(P<0.01),手术加抗痨治疗3个月后,ATB—M转阴率分别为100%和87.5％。9例非妇科病理性疾病患者中无1例ATB—M阳性发现。5例结核性盆腔炎中ATB-M均为阳性,对症加抗痨治疗3个月后无1例转阴。结论:本实验中大部份病人在患妇科病的同时体内有不易察觉的结核感染存在。持续、少量的结核菌感染或许是某些妇科疾病的发病诱因。

肾结核患者尿液抗酸杆菌与自然杀伤T细胞的关系

目的探索肾结核患者尿液抗酸杆菌与自然杀伤细胞T(natural killer T cells,NKT)功能的相关性。方法将54例肾结核患者分为活动期组(n=28)及非活动期组(n=26),并选取20名健康者作为对照;采用多色流式细胞仪检测外周血NKT细胞百分含量,同法检测NKT胞内细胞因子白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及白介素-12(IL-12)含量;采用荧光定量PCR法检测尿液抗酸杆菌TB-DNA含量,使用ELISA法检测尿液细胞因子IL-4、IFN-γ及IL-12含量。结果在外周血NKT及其细胞因子、以及尿液细胞因子含量比较方面,均为活动期患者<非活动期患者<健康人;而尿液TB-DNA含量比较显示活动期患者>非活动期患者>健康人,以上任意两组间均有显著性差异(P<0.05)。相关性分析表明外周血NKT与尿液TB-DNA含量呈显著负相关(r=-0.878,P<0.000 1)。结论肾结核患者NKT细胞功能明显降低,且与是否处于活动期密切相关;反映病灶局部的尿液抗酸杆菌的含量与反映全身免疫功能的NKT细胞数量级功能均有紧密联系。

含药血清作用巨噬细胞感染模型对抗结核药物活性的评价

目的：建立含药血清作用结核杆菌感染巨噬细胞模型的抗结核杆菌药物活性检测方法，探讨该方法在评价抗结核杆菌药物活性中的应用。方法：以结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞，加入低剂量或高剂量异烟肼给药小鼠的含药血清共同培养数天后，破碎巨噬细胞释放可能仍存活的细菌，体外培养后检查形成的菌落数，评价异烟肼的抗结核活性，并与传统最低抑菌浓度试验进行比较。结果：培养数天后，低剂量和高剂量异烟肼含药血清组菌落生成数均低于空白对照组（P〈0．05-P〈0．01）。结论：应用含药血清及感染巨噬细胞模型可对抗结核药物活性作出较客观的评价结果。

宁波市肺结核病痰检室间质控抽查

加强结核病痰检质量控制 ,提高全市肺结核病痰检阳性检出率。 [方法 ]全市共抽查痰涂片 779张 ,由市结防所痰检质控人员按《结核病诊断细菌学检验规程》标准进行统一镜检复验。 [结果 ]镜检总符合率平均为93.8% ,痰涂片痰细胞数 (>10个 /视野 )、大小、厚薄、染色、脱落符合要求者分别为 73.7% ,6 5 .6 %、6 3.8%、92 .6 %、87.2 % ,结防专业机构痰检工作的各项质量指标均高于市、县综合医院。 [结论 ]提高痰检质量 ,不但要提高镜检技术 ,更应提高痰片制作质量 ,并参照《结核病诊断细菌学检验规程》实施 ,加强结防专业机构对综合医院的直接督导。

丙泊酚和氯胺酮对结核病小鼠术后T淋巴细胞亚群和结核杆菌复制能力的影响

目的比较丙泊酚和氯胺酮对结核病小鼠术后T淋巴细胞亚群和结核杆菌复制能力的影响。方法建立实验小鼠结核病模型,选取实验小鼠36只,随机分为3组:P组、K组和C组,每组12只。P组、K组和C组分别施以麻醉药丙泊酚和氯胺酮及生理盐水。然后对3组小鼠行腹腔切开并对肠管施行牵拉刺激术。分别在术前30分钟、术后1天、术后3天抽取小鼠尾静脉血。利用流式细胞仪检测血液样本中CD3^+、CD4^+细胞、CD4^+/CD8^+细胞比值及γ-干扰素(IFN-γ)的表达。术后第3周、6周每组各取6只小鼠,处死后取肺组织进行病理形态学染色及结核菌培养实验。结果与C组相比,P组及K组术后CD3^+细胞、CD4^+、CD4^+/CD8^+T细胞比值及IFN-γ表达下降,肺内结核菌定植数增高(P<0.05)。与K组比较,P组术后3天的CD3^+、CD4^+T细胞水平较高,IFN-γ含量较低(P<0.05),但上述两组对肺内结核菌复制的影响无明显差异(P>0.05)。结论丙泊酚和氯胺酮均可抑制结核病小鼠术后T淋巴细胞功能,肺内结核菌定植数增高,但两者对T淋巴细胞亚群及IFN-γ的抑制不同步,尚需进一步开展相关研究。