多层开管毛细管酶反应器的制备及在蛋白质酶切中的应用

以石英毛细管作为酶固定化的载体,在毛细管内壁上逐步合成树枝形大分子聚酰胺-胺(PAMAM),再通过交联剂戊二醛将胰蛋白酶直接键合到该大分子的末端氨基上,并对酶固定化条件进行了优化,制备了多层酶反应器.利用该酶反应器对马心细胞色素C等蛋白质进行了酶切,并对酶切的条件进行了优化.实验结果表明,该固定化酶反应器具有较高的酶切效率、良好的重现性和稳定性,可用于蛋白质组学的研究.

祛风活血方联合缬沙坦治疗IgA肾病的疗效评价及对肾小管标志性蛋白和酶的影响

目的:评价祛风活血方联合不同剂量缬沙坦治疗IgA肾病的有效性。方法:将60例IgA肾病患者随机分为两组,A组(祛风活血方联合160 mg缬沙坦)30例,B组(祛风活血方联合80 mg缬沙坦)30例,疗程12周,两组均观察治疗前后的血压、血常规、肝肾功能、电解质等安全性指标和治疗前后血、尿TGF-β_1、尿RBP酶、尿NAG酶、尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)、24小时尿蛋白定量及血浆白蛋白(ALB)等疗效性指标。结果:(1)治疗前两组患者年龄、性别、病程、血压、血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)等临床资料差异无统计学意义(P>0.05);(2)两组治疗前后收缩压和舒张压、BUN和Scr均无明显变化(P>0.05),两组治疗前24h尿蛋白和ALB的差异无统计学意义(P>0.05),A组治疗后24h尿蛋白由(1.83±0.48)g/24h降至(1.07±0.45)g/24h,ALB由(32.79±2.27)g/L升至(37.53±2.63)g/L,差异有统计学意义(P<0.05);B组治疗后24h尿蛋白由(1.95±0.52)g/24h降至(1.47±0.57)g/24h,ALB由(32.76±2.74)g/L升至(34.01±1.92)g/L,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后A组24 h尿蛋白明显下降,ALB明显上升,与B组相比,差异有统计学意义(P<0.05);(3)A组治疗后尿NAG由(19.29±7.03)U/L降至(13.71±6.60)U/L,尿RBP由(2.84±1.20)mg/L降至(1.40±0.63)mg/L,尿β_2-MG由(0.57±0.12)mg/L降至(0.36±0.19)mg/L,尿TGF-β_1由(329.5±42.1)pg/ml降至(221.7±32.7)pg/ml,血TGF-β_1由(231.8±99.7)pg/ml降至(123.9±67.4)pg/ml,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05),而B组治疗前、后尿NAG、尿RBP和尿β_2-MG无明显变化(P>0.05);但B组治疗后尿TGF-β_1由(326.2±40.4)pg/ml降至(268.6±65.5)pg/ml,血TGF-β_1由(228.4±98.5)pg/ml降至(161.8±91.5)pg/ml,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后A组尿TGF-β_1和血TGF-β_1明显下降,与B组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:祛风活血方联合缬沙坦有降低蛋白尿、提升血浆白蛋白,降低肾小管标志性蛋白/酶,减轻肾小管损伤,同时提示双倍剂量的缬沙坦组疗效更优于常用剂量组。

肾小管1号方治疗肾小管间质损伤的疗效及对尿RBP、NAG、β2-MG的影响

目的研究肾小管1号方治疗肾小管间质功能受损的CKD1~3期患者的临床疗效。方法将60例肾小管间质功能损伤的CKD1~3期患者随机分为对照组和治疗组,对照组予缬沙坦胶囊160 mg qd+百令胶囊1.5 g tid口服,治疗组加用肾小管1号煎服,总疗程12周,采集患者治疗前后血、尿标本,观察血肌酐、尿RBP酶(视黄醇结合蛋白,Retinol-Binding Protein,RBP)、尿NAG酶(N-乙酰-β氨基葡萄糖苷酶,N-Acetyl-β-Glucosaminidase,NAG)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、24 h尿蛋白定量的变化。结果两组治疗12周后24 h尿蛋白定量、尿RBP酶、尿NAG酶、尿β2-微球蛋白指标均较治疗前改善,治疗组比对照组各指标改善情况更显著(P<0.05)。结论肾小管1号方治疗肾小管间质功能损伤的慢性肾脏病1~3期患者疗效显著,能够降低肾小管的标志性蛋白/酶,减轻肾小管间质功能损伤。

肾炎康复片对早期糖尿病肾病患者肾小球、肾小管标志性蛋白/酶的影响

目的 研究肾炎康复片对早期糖尿病肾病患者肾小球、肾小管标志性蛋白/酶的影响.方法 早期糖尿病肾病患者50例,随机分为治疗组和对照组,各25例,两组均采用糖尿病适宜的饮食、运动方案,在控制血糖、血脂等基础上,治疗组给予肾炎康复片5片,每日3次口服,3个月为1个疗程,对照组给予安慰剂.观察治疗前、后两组血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、糖化血红蛋白A1c（HbA1c）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）及24 h尿总蛋白、白蛋白、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、β2-微球蛋白（β2-MG）、视黄醇结合蛋白（RBP）的变化.结果 治疗组治疗后血hs-CRP由（4.52±2.01） mg/L降至（3.09±0.85） mg/L,尿NAG由（19.28±7.04） U/L降至（13.70±6.61） U/L,β2-MG由（0.56±0.13） mg/L降至（0.35±0.20） mg/L,RBP由（2.83±1.21） mg/L降至（1.40 ± 0.69） mg/L,较治疗前明显下降,差异有统计学意义（t值分别为2.808,4.523,3.418,3.977,P ＜0.05）,而对照组治疗前、后无明显变化（P均＞0.05）.治疗组治疗后24h尿总蛋白由（0.40±0.12） g/24h降至（0.28±0.15） g/24h,ALB由（105.91±41.50） mg/24h降至（65.05±42.52） mg/24 h,治疗前、后差异有统计学意义（t值分别为5.726,4.234,P均＜0.05）,对照组24 h尿总蛋白和ALB也均下降（t值分别为2.325,1.701,P均＜0.05）,但治疗组下降更明显（P＜0.05）.结论 肾炎康复片可减少肾小球性尿白蛋白排泄,减轻肾小管损伤.

尿视黄醇结合蛋白酶免疫测定法的建立和初步应用

我们自制兔（抗人ＲＢＰ）ＩｇＧ－ＨＲＰ酶标记物，建立了一种灵敏、简便、可靠的尿视黄醇结合蛋白（ＲＢＰ）双抗体夹心酶免疫测定法。方法灵敏度为０．４ｎｇ／ｍｌ；批内Ｃ．Ｖ．６．３％，批间Ｃ．Ｖ．１４．１％；工作范围０．４～５０ｎｇ／ｍｌ。本法的１００例正常健康人（２０～７４岁，平均４６岁）的尿ＲＢＰ值，以μｇ／ｍｍｏｌＣｒ表示，其算术均数（）±标准差（ｓ）为１１．２±６．０１；几何均数和９５％位点分别为９．５和２２。１０２例尿Ａ１ｂ正常的糖尿病患者，其尿ＲＢＰ值为４５．３±１０５．７μｇ／ｍｍｏｌＣｒ，较正常人明显增高（Ｐ＜０．００１），其中４０例（占３９．３％）高于正常上限。２５例肾功能正常的慢性肾盂肾炎中有２１例（占８４％）以及２４例其它各种肾小管间质疾病中的２２例（占９１．７％），尿ＲＢＰ值超越正常上限。肾小管损害可以是糖尿病肾病的一种早期症状。尿ＲＢＰ是近曲肾小管损害的一项敏感指标，对肾小管间质疾病的早期诊断具有重要价值。