血清SIGIRR、sTRAIL与传染性单核细胞增多症患儿外周血T细胞亚群和肝脏损伤的关系研究

目的 探讨传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis, IM)患儿血清单免疫球蛋白白细胞介素1相关受体(single immunoglobulin interleukin-1 related receptor, SIGIRR)、可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(soluble tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, sTRAIL)与外周血T细胞亚群和肝脏损伤的关系。方法 选取2020-01/2023-01月作者医院收治的95例IM患儿为IM组,另选取同期100例体检健康儿童为对照组。根据IM患儿是否发生肝脏损伤分为肝脏损伤组(n=49)和无肝脏损伤组(n=46)。采用酶联免疫吸附试验法检测血清SIGIRR、sTRAIL水平,流式细胞术检测外周血T细胞亚群(CD3^(+)、CD16^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))。通过多因素Logistic回归分析探讨IM患儿肝脏损伤的影响因素,受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析血清SIGIRR、sTRAIL对IM患儿肝脏损伤的预测价值。结果 与对照组健康儿童比较,IM组患儿血清SIGIRR水平和外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)降低,血清sTRAIL水平和外周血CD3^(+)、CD8^(+)升高(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,IM患儿血清SIGIRR水平与外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈正相关关系,与CD3^(+)、CD8^(+)呈负相关关系(P<0.05),血清sTRAIL水平与外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关关系,与CD3^(+)、CD8^(+)呈正相关关系(P<0.05)。单因素分析结果显示,病程、白细胞计数、CD3^(+)、CD16^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、SIGIRR水平、sTRAIL水平为IM患儿肝脏损伤的影响因素(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CD3^(+)、CD16^(+)、sTRAIL升高为IM患儿肝脏损伤的独立危险因素,CD4^(+)/CD8^(+)、SIGIRR升高为其保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清SIGIRR、sTRAIL单独和二者联合预测IM患儿肝脏损伤的曲线下面积(area under the curve, AUC)分别为0.786、0.737、0.836,二者联合对IM患儿肝脏损伤预测效能的AUC大于SIGIRR、sTRAIL单独的预测效能。结论 IM患儿血清SIGIRR水平降低和sTRAIL水平升高与外周血T细胞亚群异常、肝脏损伤密切相关,血清SIGIRR、sTRAIL水平联合检测对IM患儿肝脏损伤的预测价值更高。

基于SIRT1/p53/Drp1轴探讨加味芪黄饮减轻糖尿病肾病线粒体损伤及胰岛素抵抗的机制

目的研究加味芪黄饮减轻糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)线粒体损伤及胰岛素抵抗的沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/上游信号抑癌基因(p53)/分子发动相关蛋白1(Drp1)轴的影响及机制。方法40只SPF级C57BL/6小鼠,其中30只小鼠用于建立糖尿病肾病模型设为DKD组,10只不建立糖尿病肾病模型设作为对照组;建模成功后再将DKD组中小鼠随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组各10只;低剂量组、高剂量组分别给予加味芪黄饮400、800 mg/(kg·d),对照组、模型组小鼠给予等体积生理盐水,均为灌胃给药12周后处死,留取小鼠血、尿标本测定尿白蛋白肌酐比值(UACR);尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、β2微球蛋白(β2-MG)、胱抑素C(Cys-C);血糖仪检测空腹血糖(FBG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FIns)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,采用DCFH-DA探针检测肾脏细胞中活性氧(ROS)水平、MitoSOXtmRed探针检测肾脏细胞线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、荧光检测ATP,HE染色观察大鼠肾组织形态,蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肾组织中SIRT1、p53、Drp1水平。结果与对照组小鼠比较,模型组小鼠UACR、BUN、Scr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平升高、SOD、ATP、SIRT1下降(P<0.05);与模型组比较,低剂量组、高剂量组小鼠UACR、BUN、SCr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平下降、SIRT1、SOD、ATP升高(P<0.05),且高剂量组小鼠UACR、BUN、SCr、β2-MG、Cys-C、FBG、FIns、HOMA-IR、ROS、p53、Drp1水平低于低剂量组,SOD、ATP、SIRT1高于低剂量组(P<0.05)。结论加味芪黄饮可延缓糖尿病肾病进展,其机制可能与介导SIRT1/p53/Drp1轴减轻肾脏线粒体损伤,改善胰岛素抵抗状态有关。

Fascin⁃1 mRNA联合肿瘤标志物对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后的评估价值

目的探讨Fascin⁃1 mRNA联合肿瘤标志物对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后的评估价值。方法选取2018年2月至2021年7月于淮南东方医院集团总院接受手术治疗患者97例作为研究对象,术后检测患者血清Fascin⁃1 mRNA、糖类抗原199(CA199)、肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)水平,术后随访12个月。根据是否发生淋巴结转移分为淋巴结转移组(n=34)与无淋巴结转移组(n=63),比较两组血清Fascin⁃1 mRNA、CA199与CEA表达水平;根据随访12个月患者生存情况分为死亡组(n=37)与生存组(n=60),比较两组临床资料与Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA水平,进行单、多因素分析,绘制ROC曲线检验Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移与生存预后的诊断效能。结果淋巴结转移患者血清CA199、CEA与Fascin⁃1 mRNA表达水平均高于无淋巴结转移患者,差异具有统计学意义(t=4.299、4.271、4.492,P<0.05);死亡组与生存组患者肿瘤大小、TNM分期、术后是否接受化疗、有无淋巴结转移、CA19⁃9、CEA、Fascin⁃1 mRNA水平比较差异具有统计学意义(χ^(2)=5.167、5.167、2.428、9.488,t=4.360、4.497、6.993,P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示淋巴结转移、CA19⁃9、CEA、Fascin⁃1 mRNA表达水平为结直肠腺癌患者术后12月生存预后独立影响因素(P<0.05);ROC曲线结果显示Fascin⁃1 mRNA联合CA199、CEA检测均对术后淋巴结转移和生存预后的AUC分别为0.940、0.989,敏感度分别为0.882、0.946,特异度分别为0.857、0.983。结论Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后具有良好的预测价值,三项指标联合可提高预测价值。

乳腺癌肿瘤转移相关基因1蛋白及转化生长因子-β1蛋白的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织肿瘤转移相关基因(MTA)1蛋白及转化生长因子(TGF)-β1蛋白的表达及临床意义。方法选择2019年8月至2021年7月于该院行乳腺癌根治术及淋巴结清扫术的乳腺癌患者60例作为研究对象,对所有患者均进行MTA1蛋白、TGF-β1蛋白检测。分析MTA1蛋白、TGF-β1蛋白在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达情况,MTA1蛋白、TGF-β1蛋白的表达与乳腺癌的病理特征的关系,以及乳腺癌组织中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白间表达的相关性。结果乳腺癌组织中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白阳性率高于正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同淋巴结转移情况患者的MTA1蛋白、TGF-β1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同人类表皮生长因子受体2表达情况的患者TGF-β1蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,MTA1蛋白、TGF-β1蛋白在乳腺癌表达中呈负相关(r=-0.367,P=0.003)。结论乳腺癌中MTA1蛋白、TGF-β1蛋白的表达水平对判断患者病情具有重要作用,同时可为治疗方案制订提供有力依据,临床应用价值较高。

颅底肿瘤术后血浆内皮素-1、降钙素基因相关肽的动态变化及其与脑血管痉挛的相关性

目的研究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在颅底肿瘤术后并发脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)时的动态变化水平,探讨其在CVS中的作用。方法根据是否合并CVS,将34例颅底肿瘤术后患者分为症状性脑血管痉挛组、无症状脑血管痉挛组和非痉挛组。采用放射免疫法测定34例颅底肿瘤患者术后不同时点血浆ET-1及CGRP的含量,同时行经颅多普勒(transcranial doppler,TCD)检查判定患者CVS情况。同期选择10例健康成人进行对照研究。结果①颅底肿瘤术后1 d内血浆ET-1开始升高,5-7 d达高峰,随后又逐步降低,14 d时接近正常水平;血浆CGRP术后3 d开始降低,7 d降到最低,随后又逐步升高,14 d时接近正常水平。②术后3组患者血浆ET-1水平均高于正常组,CGRP水平均低于正常组。③术后痉挛组血浆ET-1含量较非痉挛组明显增高(P<0.01),症状性痉挛组高于无症状痉挛组(P<0.01)。而CGRP含量痉挛组较非痉挛组明显降低(P<0.05),症状性痉挛组低于无症状痉挛组(P<0.05)。④术后5-7 d时CVS患者达最高峰,14 d又明显减少。⑤CVS与血浆ET-1水平变化呈明显正相关(r=0.521,P=0.002),与CGRP呈明显负相关(r=-0.491,P=0.02)。结论颅底肿瘤术后血浆ET-1升高及CGRP降低可能是引起CVS的重要因素,可作为术后CVS的一种预测指标。

WT1、PRAME和ERG基因在儿童急性白血病中的表达

目的研究肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)和ETS相关基因(ERG)在儿童急性白血病(AL)中的表达特点,并分析其在白血病微小残留病灶(MRD)监测中的意义。方法收集92份AL标本(84例患儿),其中初发标本28份,包括急性淋巴细胞白血病(ALL)标本18份,急性髓系白血病(AML)标本10份;AL完全缓解标本63份,包括ALL标本45份,AML标本18份;AL复发标本1份。采用Real-time PCR法检测AL患者骨髓中WT1、PRAME和ERG mRNA的相对表达量,并以同期住院的10例非恶性血液病患儿为对照。结果 AL初发组患儿的WT1、PRAME和ERG mRNA相对表达量均显著高于缓解组和对照组(P<0.05),但缓解组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);AML初发组的PRAME mRNA相对表达量显著高于ALL初发组(P<0.05)。28例初发组WT1、PRAME和ERG mRNA的阳性表达率分别为82.4%、92.9%和64.3%,三者间比较差异有统计学意义(P<0.05);三种基因联合检测的阳性率为100%。跟踪15例AL初发患者,诱导化疗缓解后三种基因的相对表达量均显著低于诱导化疗前(P<0.05)。1例复发患者初发时三种基因均呈阳性表达,缓解后转为阴性,复发时又变为阳性。结论与非白血病患者相比,WT1、PRAME和ERG mRNA在AL初发患者的骨髓中高度表达,三种基因联合检测可提高阳性率。AL患者的WT1、PRAME、ERG mRNA表达水平与疾病状态相关,适用于MRD的监测。

MRP-1/CD9与高转移人乳腺癌MDA-MB-231细胞恶性行为相关性的体外研究

目的:观察MRP-1/CD9对高转移人乳腺癌细胞系MDA-MB-231体外增殖和侵袭的抑制效应,并初步探讨其作用机制。方法:应用MRP-1/CD9特异性扩增引物,借助RT-PCR获得MRP-1/CD9全长cDNA片段,正向插入pcDNA3.1表达载体中,并将重组质粒导入MDA-MB-231细胞中,G418稳定筛选;应用CFSE-流式细胞仪检测,单层伤口愈合实验,软琼脂克隆形成实验等方法观察了MDA-MB-231细胞转染前后,细胞体外增殖及侵袭能力等指标的变化。Western blot检测AKT、p-AKT和SRC在转染前后的细胞中的表达变化。结果:成功构建全长MRP-1/CD9真核表达载体,将其转染入MDA-MB-231细胞后获得稳定表达MRP-1/CD9的MDA-MB-231克隆株(MDA-MB-231/CD9)。与空质粒转染后的MDA-MB-231细胞相比,MDA-MB-231/CD9细胞运动能力明显减弱,侵袭能力降低;p-AKT和SRC在MDA-MB-231/CD9细胞中表达明显降低。结论:MRP-1/CD9对细胞的运动和侵袭有抑制作用,这种作用与p-AKT和SRC的下调引起E-cadherin介导的粘附增强有关。

肝炎后肝硬化ET-1、CGRP、TNF-α和IL-8联合检测的临床意义

目的:探讨肝炎后肝硬化血浆活性物质ET-1、CGRP和血清TNFα-、IL-8的临床意义。方法:68例肝炎后肝硬化患者,根据Ch ild-Pugh分级分为A级(23例)、B级(20例)、C级(25例)三组。采用放射免疫(R IA)方法联合检测ET-1、CGRP、TNF-α和IL-8水平,并与30例健康组相对照。结果:肝炎后肝硬化组ET-1、CGRP、TNF-α和IL-8水平较健康组明显升高(均P<0.01),且A、B、C三组中ET-1、CGRP、TNF-α和IL-8水平差异显著(均P<0.01),C级>B级>A级。结论:ET-1、CGRP、TNF-α和IL-8水平是反映肝炎后肝硬化肝脏损害程度,可作为预后判断的重要指标。

血清EGFL7、MTA1表达与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系

目的探究鼻咽癌患者血清表皮生长因子样结构域7(EGFL7)、肿瘤转移性相关基因1(MTA1)蛋白表达及与临床特征及预后的相关性。方法选取本院2014年1月至2016年1月收治的鼻咽癌患者病毒组织60例,其中转移患者22例作为转移组,未转移患者38例作为未转移组,以同期20例正常鼻咽部组织作为对照组,对比3组血清EGFL7、MTA1蛋白水平、微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)水平,比较不同临床特征患者EGFL7、MTA1水平,Spearman相关性分析血清EGFL7、MTA1蛋白与MVD、LVD相关性,Kaplan⁃meier生存函数分析EGFL7、MTA1与患者预后的关系。结果3组血清EGFL7、MTA1蛋白及MVD、LVD水平比较结果:鼻咽癌患者转移组>鼻咽癌患者未转移组>对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、EB病毒相关抗体阴阳性血清EGFL7、MTA1蛋白水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同TNM肿瘤分期、有无淋巴结转移、浸润深度、分化程度患者血清EGFL7、MTA1蛋白水平比较差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,EGFL7及MTA蛋白分别与MVD、LVD存在显著正相关性(P<0.05)。以鼻咽癌患者血清EGFL7、MTA1平均值为中位数,分为低EGFL7组、高EGFL7组及低MTA1组、高MTA1组,Ka⁃plan⁃meier生存函数结果显示,低EGFL7组的MST高于高EGFL7组的MST,差异具有统计学意义(P<0.05)。低MTA1组MST高于高MTA1组的MST,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清EGFL7、MTA1表达水平与鼻咽癌患者临床分期及淋巴结转移存在密切关系,血清EGFL7、MTA1高表达鼻咽癌患者预后较差。

白花丹醌增强TRAIL诱导Kasumi-1细胞凋亡及其机制

目的:观察白花丹醌、rsTRAIL单独及其联合体外诱导Kasumi-1细胞凋亡的作用,探讨其作用机制。方法:采用WST-8(CCK-8)比色法测定rsTRAIL、白花丹醌单独和联合应用对Kasumi-1细胞的生长抑制率;用流式细胞术、TUNEL法观察并且检测凋亡率;实时定量PCR检测白花丹醌作用后DR4和DR5 mRNA水平变化;Western blotting法检测单独应用及联合应用后DR5、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bid、Bax及c-FLIP的变化。结果:(1)白花丹醌和rsTRAIL单独应用均可抑制Kasumi-1细胞的生长,联合应用可增加对Kasumi-1细胞的生长抑制率且呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。(2)rsTRAIL(100μg/L)和白花丹醌(2μmol/L)单用及其联合使用诱导Kasumi-1细胞Annexin V阳性细胞百分率分别为(27.7±2.9)%、(25.6±3.1)%和(52.1±3.3)%。(3)TUNEL法检测发现联合应用组较单用组凋亡细胞显著增多。(4)实时定量PCR检测发现白花丹醌可以上调DR5的表达。(5)Western blotting发现白花丹醌单独作用及其联合rsTRAIL应用时上调DR5、激活caspase-8和下调c-FLIP表达。结论:白花丹醌具有增强TRAIL诱导Kasumi-1细胞凋亡的作用,其机制与DR5上调、caspase-8激活和c-FLIP下调有关。

肿瘤坏死因子-α刺激对IPEC-1细胞活力、物理屏障以及炎症相关基因表达的影响

本试验探讨了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激对IPEC-1细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、紧密连接蛋白和炎症相关基因表达的影响。分别选取0(对照组)、10、20、40、50 ng/mL的TNF-α刺激IPEC-1细胞12、24、48 h,检测相关指标。结果表明:1)与对照组相比,当刺激时间为24 h时,不同浓度的TNF-α均导致细胞活力显著下降(P<0.05);当刺激时间为48 h时,40和50 ng/mL的TNF-α导致细胞活力显著下降(P<0.05)。2)与对照组相比,当刺激时间为24和48 h时,40和50 ng/mL的TNF-α导致LDH活性显著升高(P<0.05)。3)与对照组相比,当刺激时间为24 h时,40和50 ng/mL的TNF-α导致IPEC-1细胞紧密连接蛋白闭合小环蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白-1(Claudin-1)、咬合蛋白(Occludin)的mRNA表达量显著上升(P<0.05);当刺激时间为48 h时,不同浓度的TNF-α对Claudin-1蛋白表达量无显著影响(P>0.05)。4)与对照组相比,当刺激时间为24和48 h时,不同浓度的TNF-α均导致TNF-α和白细胞介素-8(IL-8)的mRNA表达量显著上升(P<0.05),并呈时间和剂量依赖关系。以上结果表明,TNF-α刺激诱导了IPEC-1细胞的炎症反应,引起了IPEC-1细胞损伤。综合考虑各指标,可采用40 ng/mL TNF-α刺激IPEC-1细胞48 h构建IPEC-1细胞损伤模型。

TREM-1与肿瘤关系的研究进展

有关炎症与肿瘤相互关系的研究已成为目前肿瘤研究的热点之一。髓样细胞表达触发受体-1(TREM-1)作为一种免疫球蛋白超家族激活型受体,在炎症反应发生、级联放大中具有重要作用,可影响肿瘤微环境中各种相关细胞因子(如IL-8、MCP-1、TNF-α)水平,通过损伤、抑制修复等机制参与肿瘤发生、浸润和转移等病理性过程,影响患者预后。本文主要就TREM-1在肿瘤方面的相关研究进展进行综述。

前列腺癌患者血液中PSA、TAP、MACC1的表达及其诊断价值

目的·探讨前列腺癌患者血液中前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)、肿瘤异常蛋白(tumor abnormal protein,TAP)及结肠癌转移相关基因1(colon cancer metastasis related gene 1,MACC1)的表达及临床诊断价值。方法·以2019年1月至2020年12月于上海市徐汇区大华医院就诊的107例前列腺癌患者为病例组,另选择同期该院60名健康体检者为对照组。回顾性分析2组患者血液中PSA、TAP及MACC1的水平,及其与Gleason评分、T分期的相关性;采用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价各项指标诊断前列腺癌的灵敏度和特异度。结果·病例组患者血液PSA、TAP及MACC1水平均显著高于对照组(P<0.05);随着Gleason分级的升高,病例组患者血液PSA、TAP及MACC1水平逐渐升高;随着T分期的进展,病例组患者血液PSA、TAP及MACC1水平逐渐升高;有淋巴结转移的患者血液PSA和MACC1水平高于无淋巴结转移患者,TAP水平低于无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。血液PSA诊断前列腺癌的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.764,灵敏度为86.12%,特异度为88.63%,截断值为6.01μg/L;血液TAP诊断前列腺癌的AUC为0.796,灵敏度为88.18%,特异度为89.58%,截断值为135.62μm^(2);血液MACC1诊断前列腺癌的AUC为0.873,灵敏度为78.46%,特异度为80.10%,截断值为37.80 pg/mL;3项指标联合检测的AUC为0.941,灵敏度为93.15%,特异度为94.08%,均高于各单项指标(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,血液PSA、TAP及MACC1水平均与Gleason评分呈正相关(r值分别为0.648、0.513和0.501,均P=0.000),与T分期呈正相关(r值分别为0.616、0.537和0.542,均P=0.000)。结论·前列腺癌患者血液PSA、TAP及MACC1水平均与Gleason评分、T分期之间关系密切,对前列腺癌有一定的诊断价值;3项联合检测,诊断价值更高。

颅底肿瘤术后血清ET-1、IL-1β及CGRP水平与术后脑血管痉挛发生的相关性分析

目的检测颅底肿瘤手术患者术后血清内皮素-1(ET-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平的动态变化,分析它们与脑血管痉挛(CVS)的关系。方法分别于术前及术后3 d、1 w、2 w,采集148例颅底肿瘤患者(病例组)早晨空腹静脉血,采用ELISA法检测血清IL-1β水平,采用放射免疫法检测血清ET-1、CGRP水平;并行经颅多普勒检查以判断CVS情况。同期选取50例健康体检者作为对照组。结果病例组各时间点血清IL-1β、ET-1水平均明显高于对照组(P<0.05),CGRP水平明显低于对照组(P<0.05)。病例组术后1w血清ET-1、IL-1β、CGRP与其他各时间点相比均有统计学差异(P<0.05);术后2 w血清ET-1、IL-1β、CGRP与术前相比均无统计学差异(P>0.05)。以术后1 w为观察时间点,CVS组血清IL-1β、ET-1水平明显高于非CVS组(P<0.05),CGRP水平明显低于非CVS组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,血清IL-1β、ET-1水平与痉挛程度呈正相关(γ=0.771、0.615,P<0.05),血清CGRP水平与痉挛程度呈负相关(γ=0.623,P<0.05)。结论血清IL-1β、ET-1、CGRP或许可作为颅底肿瘤术后CVS预测的重要参考指标。

不同基因突变的急性髓系白血病患者的疗效及预后研究进展

急性髓系白血病(AML)是一组起源于造血干细胞的血液系统恶性肿瘤。近年来细胞遗传学改变被认为是AML患者重要的独立预后因素。FLT3、NPM1、RUNX1及WT1基因突变已成为重要的危险分层评价指标。其中FLT3-ITD突变可导致白血病细胞增殖失控,是独立预后不良因素。NPM1突变预示着更好的预后,可考虑选择全反式维甲酸和砷剂联合治疗、抗CD33单抗、放线菌素等治疗。RUNX1基因突变是近年来在髓系肿瘤中发现的热点突变,在初发核型正常AML中频发,与短的总体生存时间及不成熟的细胞形态有关,被认为是维持AML生存所必需的肿瘤抑制因子。WT1基因为调节造血和凋亡的肿瘤抑制基因,表达高低可能与临床缓解和复发有关,可作为潜在的预后因素和特异性免疫治疗的新靶点。复发时用定量PCR方法检测NPM1突变较WT1更具优势。本文就以上分子标志作一综述。旨在寻找潜在的基因靶点,为开发精准治疗AML的新型基因靶向药物提供参考。

Si-1基因中一个多态位点的初步分析

通过PCR -RFLP技术分析了Si- 1基因的外显子在肿瘤样本与正常人群外周血液样本的突变情况 ,初步确定了Si- 1基因的第 15号外显子的第 5 6位发生点突变 ,突变类型为C—T的置换突变 ,其编码的P(脯氨酸 )变化为S(丝氨酸 ) .在正常人群外周血液样本中的突变频率为 14 % ,而在肿瘤中的突变频率为 2 4 .7% ,尤其在肠癌中的突变频率高达 5 1.5 % .上述结果表明Si-

Si-1基因在肿瘤中的缺失和突变状况初步研究

通过对Si-1基因6,14和15号外显子区段的PCR扩增,分析了Si-1基因在116例恶性肿瘤组织、1例良性肿瘤和21例非肿瘤组织的缺失和突变.发现恶性肿瘤中有7例缺失,8例有内含子突变;良性肿瘤中没有缺失和突变;非肿瘤组织中没有缺失,1例有内含子突变.脑肿瘤的缺失率最高,达到57.1%,内含子突变率42.9%;肝癌的缺失率达15%,内含子突变率26.7%.上述结果表明,Si-1基因在脑肿瘤和肝癌组织中有较高的缺失和内含子突变,显示该基因有可能是这2种肿瘤的易感基因.

清热化痰方药对慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰热壅肺证细胞因子的影响

目的:基于清热化痰方药治疗AECOPD痰热壅肺证临床疗效基础上,通过检测治疗前后患者外周血中白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)的水平变化,进而探讨清热化痰方药治疗AECOPD痰热壅肺证的作用机制。方法:选取符合入选标准的病例140例,随机分为两组。两组分别于治疗前及疗程结束后留取血清测定IL-8、TNF-α、ICAM-1水平,留取血浆测定ET-1、CGRP含量,并与健康组对照。结果:治疗后,两组TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平均明显降低(P<0.01、P<0.05),CGRP水平明显升高(P<0.01);试验组治疗后TNF-α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平的降低较对照组显著(P<0.05),CGRP升高较对照组明显(P<0.05)。结论:IL-8、TNF-α、ICAM-1、ET-1、CGRP细胞因子参与COPD的急性加重和形成,清热化痰方药能够降低AECOPD的TNF-α、ICAM-1、IL-8、ET-1高水平表达、升高CGRP表达水平,可能是清热化痰方药治疗AECOPD发挥临床疗效的作用机制之一。

TRAIL和endostatin双基因-放射治疗对人血管内皮细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的:观察重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES携带的双基因TRAIL和endostatin联合X射线照射后,对血管内皮细胞ECV304增殖、周期和凋亡的影响。方法:实验分为对照组、空载体pshuttle转染组、TRAIL单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL转染组、endostatin单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shES转染组和TRAIL、endostatin双基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES转染组。细胞转染采用脂质体介导的方法进行,对照组不转染。细胞转染后给予X射线照射(照射剂量分别为0、0.1、0.5、1.0、2.0和5.0Gy),采用ELISA法检测转染细胞中TRAIL和endostatin蛋白的表达,并分别采用MTT及PI单染或/和AnnexinⅤ双染流式细胞术(FCM)检测TRAIL、endostatin单/双基因治疗联合放射治疗对ECV304细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。结果:2.0Gy X射线照射后与0h比较,各时间点转染pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES的ECV304细胞上清中TRAIL和endostatin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),分别于12和24h达峰值;不同剂量X射线照射可诱导TRAIL和endostatin蛋白表达,且蛋白表达水平随照射剂量的增加而明显升高(P<0.05或P<0.01)。MTT结果显示,X射线照射后,pshuttle-Egr1-shTRAIL、pshuttle-Egr1-shES和pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组ECV304细胞A490值均明显低于对照组和pshuttle组,并显示一定的时间-效应和剂量-效应关系,并伴有细胞凋亡率明显增加、G2+M期细胞百分数明显上升和G0/G1期细胞百分数明显下降。上述细胞效应,尤以pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组变化最为明显,与pshuttle-Egr1-shTRAIL和pshuttle-Egr1-shES组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TRAIL和endostatin双基因联合放射治疗可抑制ECV304细胞生长,影响细胞周期进程,促进细胞凋亡,且其治疗效果优于单纯放射治疗或TRAIL/endostatin单基因-放射治疗。

活血化瘀方药对慢性阻塞性肺疾病急性加重期血瘀证患者细胞因子及内皮素的影响

目的从细胞因子及内皮素-1（ET-1）水平变化，探讨活血化瘀方药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）血瘀证的作用机制。方法采用随机、双盲、安慰剂对照的临床设计，选取符合入选标准的AECOPD患者65例，按随机数字表法分为试验组（34例，血瘀兼痰热证19例，血瘀兼痰湿证15例）和对照组（31例，血瘀兼痰热证21例，血瘀兼痰湿证10例）。两组均给予常规治疗，试验组加用活血化瘀方药、每日1剂，对照组给予安慰剂，7d为1个疗程，共观察2个疗程。于治疗前后采用放射免疫分析法测定外周血肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、细胞间黏附分子1（ICAM—1）、白细胞介素-8（IL-8）、ET-1、降钙素基因相关肽（CGRP）水平；并且以50例健康体检者作为健康对照。结果与健康组比较，AECOPD组TNF—α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平均明显升高（均P〈0．01），CGRP水平明显降低（P〈0．01）。两组治疗后TNF—α、ICAM-1、IL-8及ET-1水平均较治疗前明显降低（P〈0．05或P〈0．01），CGRP水平均明显升高（均P〈0．01）；且试验组较对照组改善显著（均P〈0．05）。结论TNF—α、ICAM-1、IL-8、ET-1和CGRP等参与了AECOPD的病理过程，活血化瘀方药可能通过降低TNF—α、ICAM-1、IL-8和ET-1水平，升高CGRP水平，对AECOPD血瘀证发挥治疗作用。