人参总皂苷增强成骨分化的间充质干细胞促造血作用研究

目的观察人参总皂苷(TSPG)诱导间充质干细胞向成骨细胞分化的作用,探讨TSPG增强成骨分化的间充质干细胞促造血的可能机制。方法贴壁法培养人源骨髓间充质干细胞(h MSCs),成骨细胞分化和免疫表型进行鉴定。不同剂量的TSPG联合成骨细胞条件诱导液培养h MSCs,MTT法检测细胞增殖活性,对-硝基苯磷酸盐(p NPP)法检测培养上清碱性磷酸酶含量,茜素红染色法观察钙结节数量,Western blot法检测成骨细胞分化转录因子-核心结合蛋白因子2(RUNX2)蛋白表达水平,Elisa法检测培养上清造血相关因子含量,造血祖细胞集落生成实验检测培养上清造血支持能力。结果 MTT和p NPP结果均显示随着TSPG剂量增加,吸光值逐渐增加,呈剂量依赖性。钙结节数量和RUNX2蛋白表达水平明显高于对照组。造血相关生长因子和造血祖细胞集落数明显高于对照组。结论TSPG通过上调RUNX2蛋白表达诱导h MSCs向成骨细胞分化,同时增强成骨分化的MSCs支持造血。

外泌体在肿瘤侵袭转移中作用的研究进展

外泌体(exosome)是多种细胞分泌的一种40~100 nm的由磷脂双层膜包裹的微囊体,其组成主要包括脂质体、蛋白质、DNA及mi RNA等。研究表明外泌体通过携带生物活性物质参与了机体许多重要的生理及病理过程,尤其是在肿瘤的侵袭及转移方面。外泌体主要通过诱导肿瘤转移的启动、促进肿瘤血管生成、参与肿瘤转移前微环境形成及肿瘤微环境的免疫调控等途径,在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用。

经当归补血汤干预的肌源性干细胞Wnt信号相关基因表达分析

目的:探讨在体外造血微环境中肌源性干细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达情况及当归补血汤(DBD)载药血清的干预作用。方法:将分离纯化并经流式细胞仪鉴定的MDSCs与BMSCs体外培养,根据实验需要随机分为6组进行药物干预,即空白对照组、共培养Wnt激动剂组、共培养Wnt抑制剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组及DBD+共培养抑制剂组。Real-time PCR检测各实验组MDSCs Wnt通路上下游节点基因Wnt3、Wnt3a、β-catenin及MDSCs增殖分化相关基因Cyclin D1、C-myc、CD34 mRNA的表达变化。结果:流式细胞仪检测结果显示MDSCs CD34、Sca-1阳性。倒置显微镜下观察:共培养Wnt激动剂组、DBD+共培养组、DBD+共培养激动剂组MDSCs较空白对照组生长密集且生长速度快,激动剂组聚团明显,共培养Wnt抑制剂组MDSCs增殖明显受到抑制。Real-time PCR检测结果显示:DBD+共培养激动剂组的Wnt3、Cyclin D1、CD34 mRNA表达水平最高,共培养激动剂组与DBD共培养组其次,空白对照组最低。结论:当归补血汤载药血清作用于共培养体系下的肌源性干细胞,Wnt信号通路持续激活后,体外造血微环境中的MDSCs更易增殖并分化。

肝细胞癌中TLR3介导的间质微环境细胞改变

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)的表达及其与临床病理特征、间质微环境的相关性。方法采用专利技术(CN101319971B)制备人体HCC组织芯片,应用免疫组化SP法染色检测HCC细胞中TLR3的表达,同时检测间质中各项指标。采用多因素相关分析HCC中TLR3表达与其临床病理特征及间质微环境的关系。结果 HCC中TLR3的阳性率为71.57%,与癌脉管侵犯(P=0.001)、肝硬化背景(P=0.007)、Edmondson分级(P=0.001)、TNM分期(P=0.000)呈负相关;与癌乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)阳性呈正相关(P=0.000);与间质浸润的T细胞(P=0.002)和自然杀伤(natural killer,NK)细胞(P=0.000)呈正相关;与癌相关肌纤维母细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)(P=0.000)和微血管密度(microvessel density,MVD)(P=0.000)呈负相关。结论TLR3对HCC间质微环境具有十分重要的影响。

白介素-17及其相关信号通路支持幽门螺杆菌诱导胃癌发生的机制研究进展

幽门螺杆菌感染作为胃癌的Ⅰ类致癌原,其引起的慢性炎症-萎缩性胃炎-萎缩性胃炎伴肠上皮化生-异型增生而逐渐向胃癌演变,而IL-17作为关键的促炎细胞因子之一,IL17+细胞和相关信号通路参与胃癌的发生、进展,并与胃癌预后不良相关。全文综述IL-17介导胃癌发生、进展、治疗耐药、转移的可能机制,包括促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,创造免疫耐受微环境,诱导T细胞耗竭,持续的血管生成,以及诱导上皮-间充质转化。

硫化氢在肿瘤发生发展中的作用机制及其供体抗肿瘤作用

硫化氢是人体内的一种气体信号分子,可影响血管新生,调控肿瘤细胞凋亡、自噬,且可与肿瘤微环境中其他信号分子相互作用,通过多种途径抑制肿瘤发生发展。硫化氢供体主要表现为抑制肿瘤进展,许多研究致力于使用各种供体、以平稳的方式释放硫化氢并维持在治疗浓度,传统中药有较大的应用前景。硫化氢作用方式复杂多样,尚需进一步的研究探讨证实,为调控硫化氢的治疗药物提供理论基础。

内皮素受体拮抗剂对前列腺癌细胞PC3和成骨细胞相互作用的影响

目的在细胞共培养微环境下，观察内皮素（ET）受体拮抗剂阻断内皮素轴对前列腺癌细胞PC3和成骨细胞SaOS2相互作用的影响。方法利用细胞体外共培养系统，比较前列腺癌细胞PC3和成骨细胞SaOS2在共培养微环境下和单独培养环境下细胞增殖的差异。共培养微环境下，分别以ETA受体（ETAR）拮抗剂BQ123和ETB受体（ETBR）拮抗剂BQ788阻断相应的ET受体，观察其对前列腺癌细胞和成骨细胞增殖的影响。同时，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定各组培养液中的ET-1浓度，通过逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）测定PC3细胞、SaOS2细胞ET-1及其受体的mRNA表达，比较它们的表达差异。结果与单独培养比较，共培养微环境下的PC3细胞和SaOS2细胞的增殖数量均显著升高（P均〈0．05）。ETAR拮抗剂BQ123能阻断共培养微环境对SaOS2细胞的生长促进作用，部分阻断共培养微环境对PC3细胞的生长促进作用，而ETBR拮抗剂BQ788则无显著的干预作用。ELISA结果显示共培养组培养液中ET-1浓度[（14．26±1．06）μg/L／10^5个细胞]显著高于单独培养组[（6．58±0．74）μg／L／10^5个细胞，P〈0．05]。RT—PCR结果显示PC3细胞表达ET-1和ETAR，SaOS2细胞只表达ETAR；与单独培养比较，共培养微环境下PC3细胞ET-1的表达显著升高（P〈0．05），而PC3细胞和SaOS2细胞ETAR的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ET-1及ETAR构成的内皮素轴是共培养微环境中前列腺癌细胞PC3和成骨细胞之间相互作用促进增殖的重要链接因子，而ETAR拮抗剂能有效地抑制两者间的相互作用，抑制PC3细胞增殖。

基于肿瘤能量代谢失衡探讨扶正解毒法在慢性结肠炎“炎癌转化”分期干预中的应用

慢性结肠炎在一定情况下可发生癌转化。慢性结肠炎“炎癌转化”是在线粒体能量代谢损伤、有氧糖酵解代谢上调的机制下,肠道上皮细胞代谢失衡,促使炎症微环境向肿瘤微环境转化的过程。认为由正气虚损而致太阴经、阳明经的寒热分离是结肠炎癌转化的触发机制,由邪毒鸱张诱发的气机升降失调是打破促瘤抑瘤平衡,进而邪聚成瘤的关键。临床治疗上应在中医恒动观理论指导下分清慢性结肠炎炎癌转化的不同阶段,灵活把握扶正与解毒的主次,改善肠道炎性环境,调节异常能量代谢,以延缓恶化时间,截断炎癌转化的进程。

天然多糖及其纳米递药系统调控肿瘤微环境的研究进展

天然多糖具有较好的生物相容性和独特的肿瘤免疫调节活性,是临床重要的抗肿瘤辅助治疗药物。在药剂学领域,天然多糖既可以作为活性成分,也可以作为递药载体以及肿瘤靶向配体,并且基于多糖设计的各种新型递药系统在调控肿瘤免疫微环境中已经表现出独特的优势。本文综述了天然多糖在肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的免疫调控及其纳米递药系统组装方面的研究,并对基于多糖在抗肿瘤新型递药系统领域的发展前景和面临挑战展开讨论。