TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。

中国成人自身炎症性疾病临床和基因型特点:成人自身炎症性疾病单中心报道

目的探讨中国汉族成人自身炎症性疾病(autoinflammatory diseases,AUID)的临床特点和基因型。方法2015年4月至2016年5月北京协和医院风湿免疫科成人AUID中心前瞻性纳入拟诊单基因AUID的成人患者(≥16岁),收集其临床资料,并对其进行包含单基因AUID致病基因在内的全基因组二代测序。AUID诊断需结合临床表型和基因型。结果本研究中心1年时间共对37例临床拟诊单基因AUID的成人患者进行了基因检测。其中16例(43.2%)确诊单基因AUID,2例诊断周期性发热-阿弗它口炎-咽炎-淋巴结炎(periodic fever,aphthous stomatitis,pharyngitis and adenitis,PFAPA)综合征。最终,共18例成人AUID患者在本中心获得确诊并随访,其中包括家族性地中海热7例(38.9%),肿瘤坏死因子受体相关周期性综合征2例(11.1%),冷炎素相关周期性综合征3例(16.7%),核苷酸结合寡聚化结构域样受体12(NLR family,pyrindomaincontaining12,NLRP12)自身炎症性疾病(autoinflammatory disease,AD)(NLRP12-AD)3例(16.7%),Blau综合征1例(5.6%)以及PFAPA综合征2例(11.1%)。18例患者中成年起病者15例(83.3%),从起病至最终确诊时间平均长达10年。成人AUID的基因型常常为低外显基因变异,均为杂合突变或复合杂合突变。结论成人AUID并不少见,其中以家族性地中海热、冷炎素相关周期性综合征和NLRP12-AD相对常见。由于成人AUID患者基因型多为低外显基因变异,临床表现轻微或不典型,易导致诊断延误。成人拟诊AUID患者的基因检测结果需慎重解读,建议转诊至成人AUID中心专病门诊。

清肠汤联合美沙拉嗪治疗热盛血瘀型活动期溃疡性结肠炎患者的临床效果及其作用机制

目的研究清肠汤联合美沙拉嗪对热盛血瘀型活动期溃疡性结肠炎患者的临床疗效及作用机制。方法选择2018年10月至2019年12月南京中医药大学附属张家港医院就诊的热盛血瘀型活动期溃疡性结肠炎患者60例,按照随机数字表法分为治疗组(清肠汤+美沙拉嗪缓释颗粒)和对照组(美沙拉嗪缓释颗粒),每组各30例。治疗后3个月比较两组临床疗效、中医症状积分、Mayo评分、内镜黏膜愈合率,分析两组肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、核因子κB(NF-κB)的免疫组织化学表达和Toll样受体4(TLR4)的免疫荧光表达情况。结果治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组中医证候单项积分及总积分均较治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组Mayo评分均较治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组黏膜愈合率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组TRAF6、NF-κB表达情况均较治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后两组免疫荧光TLR4表达情况较治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05)。结论清肠汤联合美沙拉嗪可有效改善热盛血瘀型活动期溃疡性结肠炎患者的临床症状、肠道黏膜愈合,提高治疗效果。清肠汤的抗炎效果可能是通过抑制TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路来实现的。

原发性干燥综合征患者外周血单个核细胞内肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达及意义

目的研究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在原发性干燥综合征(pSS)患者外周血单个核细胞(PB-MCs)中的表达及意义。方法采用实时荧光定量反转录PCR法检测了23例pSS患者和23例健康对照个体PBMCs中TRAF6mRNA的相对表达量,分析了其与pSS患者血清类风湿因子(RF)、免疫球蛋白浓度、抗SSA抗体和抗SSB抗体的关系。对其中9名接受糖皮质激素治疗的pSS患者进行了随访,观察了治疗前后患者PBMCs中TRAF6mRNA水平的变化。结果 pSS患者PBMCs中TRAF6mRNA的相对表达量是健康对照个体的2.77倍(P<0.01),且与血清RF(r=0.45,P=0.03)和免疫球蛋白水平(r=0.43,P=0.04)呈正相关,但与抗SSA抗体和抗SSB抗体无关。9名患者经过治疗后TRAF6mRNA表达下调了约50%(P<0.05)。结论 PBMCs中的TRAF6参与了pSS的发病机制,且是一种潜在的pSS标志物。

JNK1、TRAF2在多囊卵巢综合征患者脂肪组织中的表达及意义

目的研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者腹部脂肪组织中c-Jun氨基端激酶1(JNK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)的表达,探讨PCOS发生胰岛素抵抗(insulin resistance IR)的分子机制。方法分别选择PCOS组(肥胖13例和非肥胖15例)、对照组(肥胖、非肥胖各20例)。放射免疫法检测各实验组血清黄体生成激素(1uteinizinghormone LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone FSH)、睾酮(testosterone T)、血清空腹胰岛素(fasting insulin FINS)的水平;用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(fasting plasma glucose FPG);采用稳态模型胰岛素抵抗(Homeostasis model assessment-insulin re-sistance HOMA-IR)模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测PCOS组和对照组患者腹部脂肪组织中JNK1、TRAF2 mRNA的表达情况。结果 (1)所有PCOS组LH、LH/FSH、T、FINS、HOMA-IR均高于对照组(均P<0.05);(2)JNK1、TRAF2mRNA的相对表达量在PCOS肥胖组高于对照肥胖组(均P<0.01),在PCOS非肥胖组高于对照非肥胖组(均P<0.01),且PCOS肥胖组较PCOS非肥胖组高(均P<0.01)。结论 JNK1、TRAF2在多囊卵巢综合征中的高表达可能与PCOS发病机制存在一定关系。

羧胺三唑对白细胞介素-1β介导自身炎症性疾病的治疗作用

目的初步探索羧胺三唑(CAI)对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白12(NLRP12)相关自身炎症性疾病(NLRP12-AID)、家族性地中海热(FMF)和肿瘤坏死因子受体相关周期性综合征(TRAPS)等3种白细胞介素(IL)-1β介导自身炎症性疾病(AIDs)的治疗作用。方法分离患者外周血单核细胞(PBMCs),加入CAI培养后取细胞培养上清,酶联免疫吸附测定(ELISA)测定上清液中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果CAI明显降低NLRP12-AID患者PBMCs分泌IL-1β的水平(P<0.05或P<0.01),对IL-6和TNF-α水平有降低趋势,但差异无统计学意义;CAI对FMF患者PBMCs分泌IL-1β、IL-6和TNF-α水平有不同程度降低作用(P<0.05或P<0.01);CAI降低TRAPS患者PBMCs分泌IL-1β水平(P<0.05),对IL-6水平有降低趋势,但差异无统计学意义。结论CAI可能通过减少IL-1β等促炎细胞因子产生从而具有治疗NLRP12-AID、FMF和TRAPS等3种IL-1β介导AIDs的作用。

具有消化道症状的成人自身炎症性疾病临床特点

目的分析具有消化道症状的成人自身炎症性疾病(autoinflammatory disease,AUIDs)患者的临床特点,寻找提示AUIDs的临床线索。方法2015年4月至2018年4月北京协和医院风湿免疫科成人AUIDs中心诊治的具有消化道症状的拟诊成人(≥16岁)AUIDs患者共39例,收集其临床资料,并进行全基因组二代测序。分析最终确诊为AUIDs患者的临床表现和基因型特点,并比较基因阳性组和基因阴性组临床表现的差异。结果39例患者中26例(66.7%)检测到与AUIDs相符的基因变异,并最终确诊为AUIDs(基因阳性组),包括家族性地中海热11例(42.3%),冷炎素相关周期性综合征、肿瘤坏死因子受体相关周期性综合征、NLRP12相关自身炎症性疾病各4例(各15.4%),要氏综合征3例(11.5%)。基因阴性组共13例(33.3%),包括未分化AUIDs、周期性发热-阿弗它口炎-咽炎-颈淋巴结炎(PFAPA)综合征等。基因阳性组成人AUIDs的消化道症状为发作性,常伴发热(100%)、咽痛(57.7%)、关节痛/炎(53.8%)、肌痛(50%)、皮疹(46.2%)等。每次发作多持续数天或数周,间隔数周或数月再发,发作间期一切如常。AUIDs的消化道症状主要表现为腹痛(84.6%)、恶心呕吐(34.6%)、腹胀(30.8%)及腹泻(11.5%)。影像学、内镜及病理多为非特异性炎症。与基因阴性组相比,基因阳性组平均病程更长[(11.6±11.2)年比(5.5±4.8)年],腹痛(84.6%比38.5%)更常见,伴胸痛/胸腔积液(26.9%比0%)、肌痛(50.0%比7.7%)和咽痛(57.7%比23.1%)亦更多见(P<0.05)。结论成人AUIDs常有消化道症状,对病程长、反复腹痛发作、伴不明原因胸痛/胸腔积液、肌痛等患者,应警惕AUIDs,建议转诊至专病门诊,进行基因检测并提供适宜的诊治方案。

肿瘤坏死因子受体相关周期性发热综合征研究进展

肿瘤坏死因子受体相关周期性发热综合征(TRAPS)是一种常染色体显性遗传的自身炎性反应综合征,其特征是长期反复发作发热、腹痛和/或胸痛、关节痛、肌痛和红斑疹。该疾病的发病机制可能与编码肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)受体的TNFRSF1A基因突变有关。肾脏淀粉样变(AA)是TRAPS发病率和病死率的重要原因。文章通过总结分析数例中国TRAPS患者的临床数据,结合相关文献,对TRAPS的诊断、发病机制和治疗选择等进展做一综述。

肿瘤坏死因子受体相关周期性发热综合征1例报告

肿瘤坏死因子受体相关周期性发热综合征（tumournecrosisfactorreceptor—assoeiatedperiodicsyndrome，TRAPS）是常染色体显性遗传自身炎症性疾病，特征是周期性发热、关节痛、肌痛、多浆膜炎（腹痛、胸痛、心包炎）、眶周水肿和皮疹[110TRAPS非常少见，发病率约为1／100万。尽管是常染色体显性遗传病，有家族史者不足2／3。国内文献鲜有报道。

自身炎症性疾病50例临床特点研究

目的观察自身炎症性疾病的特征,评价国际自身炎症性疾病临床诊断标准在患者中的适用性。方法对2011年4月至2015年12月北京大学第一医院诊断自身炎症性疾病患者资料进行回顾性临床分析。结果共50例患者纳入研究,其中儿童起病18例,成人起病32例。发病中位年龄25.5岁(1~74岁)。35例(70%)为周期性发热;15例(30%)为持续性发热。发病时伴炎症指标升高,间期下降。所有患者均存在1种或以上炎症基因突变。MEFV基因杂合突变多见,最常见为E148Q位点(23/46例,50%)。其中仅5例(10.8%)符合家族性地中海热成人诊断标准。共7例患者明确诊断为单基因遗传性自身炎症性疾病。结论被研究患者缺乏特征性的临床表现及基因突变位点,仅少数患者可确诊为单基因遗传性自身炎症性疾病。目前国际上的自身炎症性疾病诊断标准不适用于研究患者。