抑癌基因PTEN与肿瘤血管生成研究进展

PTEN是具有磷酸脂酶活性的抑癌基因,是双特异蛋白磷酸酶家族(DSPs)的成员,同时具有脂质磷酸酶和蛋白酪氨酸磷酸酶活性。而在肿瘤增殖,侵袭,迁移的过程中,肿瘤血管生成作为肿瘤发生发展中一个关键因素已越来越受到人们的关注。抑癌基因PTEN可以参与PI3K/Akt信号通路,调控缺氧诱导因子1,基质金属蛋白酶,血管内皮生长因子,钠氢交换调控因子1等血管生成相关信号以及一些机体氧化产物来影响肿瘤血管生成。根据近年来PTEN基因与肿瘤血管生成关系最新研究信息,该文综述了其目前的研究现状。

米非司酮对子宫内膜异位症细胞PTEN基因表达与凋亡的影响

目的:探讨米非司酮对子宫内膜异位症细胞PTEN基因表达及凋亡的影响。方法:体外原代培养人异位子宫内膜细胞,应用四甲基偶氮噻唑兰(MTT)法测定子宫内膜异位症细胞体外增殖活性;应用流式细胞仪(FCM)检测在不同浓度米非司酮作用24h后,子宫内膜异位症细胞PTEN蛋白表达率、增殖率和凋亡率;应用吖啶橙荧光染色法和透射电镜技术研究子宫内膜异位症细胞的形态学变化。结果:米非司酮能够抑制子宫内膜异位症细胞的增殖且呈明显的剂量依赖性;AO荧光染色及透射电镜观察表明,经米非司酮培养的子宫内膜异位症细胞出现了典型的细胞凋亡的特征性变化;米非司酮能够使子宫内膜异位症细胞出现细胞周期阻滞,使其停滞于G1 期,降低S期细胞比例;PTEN蛋白的表达率明显增加,与对照组相比差异显著。结论:米非司酮能够明显抑制人异位子宫内膜细胞的体外增殖并促进其凋亡,其促凋亡作用与上调PTEN基因的表达有关。

一种新的抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达及生物学意义(英文)

背景与目的:PTEN基因是新发现的一种抑癌基因,定位于人染色体10q23。它的缺失和突变可能构成一个新的信号转导途径,与人类恶性肿瘤的发生普遍相关。资料报道,肾细胞癌有抑癌基因PTEN的缺失和突变。但目前尚未见到关于抑癌基因PTEN在肾细胞癌中表达的研究,本实验研究抑癌基因PTEN在肾细胞癌的表达和生物学意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测5例正常肾组织、18例癌旁肾组织和40例肾细胞癌组织中抑癌基因PTEN的表达;分析抑癌基因PTEN的表达与肾细胞癌病理类型、淋巴结转移之间的关系。结果:5例正常肾组织和18例癌旁肾组织均有较强的PTEN蛋白的表达,正常肾组织和癌旁肾组织PTEN蛋白的表达强度、阳性细胞的分布形式无明显差异。肾小管上皮细胞的胞质呈PTEN蛋白阳性,免疫组化染色程度较强,肾小球无PTEN蛋白的表达。抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达不同于正常肾组织和癌旁肾组织,12.5%呈PTEN蛋白阴性,17.5%呈弱阳性,70%呈阳性或强阳性。PTEN蛋白阴性、弱阳性和阳性的肾细胞癌,肾门淋巴结转移率分别为80%,51.74%,10.71%。PTEN蛋白阴性和弱阳性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率与PTEN阳性者比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:本实验提示肾细胞癌中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和异常,可能与肾细胞癌的发生。

食管癌中抑癌基因PTEN的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因PTEN在食管癌中的表达及临床意义。方法用免疫组织化学方法检测80例食管癌及其相应的手术远端正常食管组织中PTEN蛋白的表达水平。结果PTEN在食管鳞癌中的表达率明显低于癌旁正常食管黏膜组织(P<0.01),而且PTEN蛋白表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.01)。结论从蛋白水平证明PTEN基因表达缺失或突变在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用,PTEN蛋白表达的检测可作为临床治疗和判断预后的依据。

人肝细胞癌中抑癌基因PTEN/MMAC1/TEP1的突变分析

PTEN/MMAC1/TEP1(PTEN)是新近分离到的抑癌基因,在多种肿瘤中存在突变。我们检测了34例人肝细胞癌中PTEN基因第5外显子和第8外显子的突变。采用聚合酶链方法以内含子引物扩增第5和第8外显子,继之以单链构象多态性和测序技术分析PTEN基因突变。有4例肝细胞癌SSCP显示异常条带并经测序证实存在突变。2例发生于第4内含子,突变位点相同;另两例发生于第8外显子,其中1例碱基颠换导致PTEN蛋白产物304位半胱氨酸突变为甘氨酸。

抑癌基因PTEN在腮腺肿瘤中的突变与缺失

目的:探讨抑癌基因PTEN在腮腺多形性腺瘤及腮腺粘液表皮样癌的发生、发展过程中的作用。方法:应 用聚合酶链反应(PCR)及克隆、基因测序的方法来分析腮腺多形性腺瘤、腮腺粘液表皮样癌及正常腺体组织中 PTEN基因第5、第6及第8外显子有无突变及缺失。结果:通过对PTEN基因3个外显子的克隆测序,发现有2例 腮腺多形性腺瘤外显子8发生突变,其中1例引起编码的氨基酸发生变化;而腮腺粘液表皮样癌中均未发现有突 变及缺失。结论:初步推断,在DNA水平抑癌基因PTEN在腮腺多形性腺瘤中存在突变,在其发生发展过程中可能 起到一定的作用;在DNA水平抑癌基因PTEN在腮腺粘液表皮样癌的发生过程中可能不起重要作用。

抑癌基因PTEN在食管癌中的表达

目的 研究抑癌基因PTEN在食管癌组织的表达 ,探讨PTEN与食管癌发生发展之间的关系。方法 应用免疫组织化学SABC法对食管癌及癌旁食管粘膜PTEN的表达进行检测。结果 PTEN在食管鳞癌 (4 8 2 2 % )中的表达率明显低于癌旁正常食管粘膜组织 (90 6 3% ) ,有显著性差异 (P <0 0 1)。而且从食管鳞癌Ⅰ至Ⅲ级PTEN表达率逐渐降低 ,鳞癌Ⅰ至Ⅲ级PTEN的表达率分别是 :78 5 7%、 6 0 0 %、 2 7 2 7% ,有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 从癌旁正常食管鳞状上皮组织 ,到Ⅰ～Ⅲ级食管鳞癌组织的PTEN表达依次降低 ,表明PTEN在食管癌的发生以及进展过程中有表达缺失。

抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义

目的 研究一种新的抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学SP法 ,检测了 2 8例乳腺癌及2 1例癌旁乳腺组织PTEN蛋白的表达 ;EnVision法检测癌组织中雌、孕激素受体的表达。结果 2 1例癌旁乳腺组织中均有PTEN蛋白的表达 ,免疫组化染色较强 ,阳性物质位于乳腺小叶腺泡上皮细胞及导管上皮细胞的胞质和胞核。在乳腺癌组织中PTEN蛋白表达于癌细胞的胞质和胞核 ,2 8例乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达不同。 14 .2 8%乳腺癌组织无PTEN蛋白的表达 ;2 1.4 %乳腺癌组织PTEN蛋白呈弱阳性 ;6 4 .2 8%乳腺癌组织中有较强的PTEN蛋白表达 ,表达强度与正常乳腺组织无明显差异。此外 ,PTEN蛋白的表达与乳腺癌的临床病理学特点相关 ,PTEN蛋白阴性的乳腺癌 ,2 5 %为雌、孕激素受体阳性 ;而PTEN蛋白表达较强的乳腺癌 ,6 6 .6 7%为雌、孕激素受体阳性 ,且差异有显著性 (P <0 .0 5 )。另外 ,PTEN蛋白阳性的乳腺癌组织 ,腋窝淋巴结转移率为 2 2 .2 % ;而PTEN蛋白阴性的乳腺癌腋窝淋巴结转移率为 75 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 乳腺癌组织中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和减弱 ,抑癌基因PTEN的表达异常可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关。

肾细胞癌中抑癌基因PTEN的表达及生物学意义

目的 :研究抑癌基因PTEN在肾细胞癌的表达及其生物学意义。方法 :应用免疫组织化学S P法检测 5例正常肾组织、18例癌旁肾组织和 40例肾细胞癌组织中抑癌基因PTEN的表达。结果 :5例正常肾组织和 18例癌旁肾组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,二者PTEN蛋白的表达强度、阳性细胞的分布形式无差异。抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达不同于正常肾组织和癌旁肾组织 ,12 5 %的肾细胞癌呈PTEN蛋白阴性 ;17 5 %的肾细胞癌PTEN蛋白呈弱阳性 ;70 %的肾细胞癌PTEN蛋白呈阳性或强阳性 ,与癌旁组织PTEN蛋白的染色强度无差异。PTEN蛋白阴性的肾细胞癌 ,肾门淋巴结转移率为80 % ;PTEN蛋白阳性的肾细胞癌 ,肾门淋巴结转移率为 2 0 %。PTEN蛋白阴性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率与PTEN阳性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :肾细胞癌中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和异常 ;抑癌基因PTEN的表达异常可能与肾细胞癌的发生、发展有关 ,抑癌基因PTEN是肾细胞癌的一种新的相关基因。

PTEN抑癌基因转染粘液表皮样癌细胞系M_3SP_2的建立和鉴定

目的 :为了研究外源性基因PTEN对粘液表皮样癌细胞生物学行为的影响 ,建立稳定表达PTEN的粘液表皮样癌细胞系。方法 :应用脂质体介导方法将野生型PTEN基因导入高转移性粘液表皮样癌细胞系M3 SP2 ,嘌呤霉素筛选阳性克隆 ,用免疫印迹法和ABC免疫酶染色法检测转染细胞中PTEN蛋白的表达。结果 :野生型PTEN基因成功地导入细胞M3 SP2 ,转染细胞稳定表达PTEN蛋白 ,PTEN蛋白分布于细胞质。结论 :M3 SP2 细胞能稳定表达外源性基因PTEN。

肺癌中Pten/MMAC1/Tep1蛋白的表达及临床意义

目的:探讨抑癌基因Pten/MMAC1/Tep1蛋白在不同病理分期(pTNM)的肺腺癌、鳞癌中表达及其临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学方法检验87例肺腺癌、鳞癌中Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达,与其临床病理分期pTNM的关系。结果:肺腺癌组织中的Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达阳性率为61.9%,肺鳞癌中表达阳性率为40.0%。二者Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达均与肺癌的临床病理分期pTNM、分化程度有关(P<0.01),而与肿瘤的大小无关。结论:检验Pten/MMAC1/Tep1蛋白在肺癌中的表达可能对肺腺癌、鳞癌的疗效评估和预后评价具有一定意义。

抑癌基因PTEN与肿瘤

PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶(DPS)活性的抑癌基因,该基因在细胞的生长、增殖、迁移和细胞凋亡中具有重要的生物学功能。PTEN基因的突变、缺失或转录水平降低常见于多种原发性恶性肿瘤,如脑胶质瘤、乳腺癌、肾癌、子宫内膜癌和恶性黑色素瘤,表明PTEN基因与肿瘤的形成与发展密切相关。

PTEN表达在胃癌发生及分化中的作用

目的:探讨PTEN的表达与胃黏膜癌变及癌细胞分化程度的关系。方法:采用免疫组织化学方法对胃癌组织、癌前病变和对照组正常胃黏膜进行PTEN表达的检测。结果:胃癌组PTEN阳性率为53.3%,较正常组和癌前病变组明显下降(P<0.01);低分化组PTEN阳性率为36.0%,显著低于胃癌高中分化组(P<0.01);高中分化组PTEN阳性率与癌前病变组无差异(P>0.05)。结论:PTEN与胃癌的分化程度密切相关,可作为判断胃癌恶性程度的指标。

抑癌基因PTEN蛋白在人胃癌中的表达与预后的关系

目的通过对胃癌及癌旁组织中PTEN蛋白表达水平检测,随访观察其生存率,初步探讨PTEN基因蛋白在胃癌发生发展过程中可能作用及对预后影响。方法用免疫组织化学技术检测53例胃癌标本的癌组织和癌旁组织基因组内PTEN蛋白表达水平改变,并统计分析PTEN蛋白表达与胃癌临床病理学参数的关系,随访观察其一年、三年、五年生存率。结果PTEN蛋白阳性表达均明确定位于胞浆,呈黄色或棕黄色颗粒。53例癌旁组织内PTEN蛋白表达情况:(+)为18.8%、(++)34.0%(、+++)47.2%,总阳性率为100%,而在胃癌组织中(-)为34.0%、(+)26.4%、(++)24.5%、(+++)15.1%,总阳性率为66.0%,显著低于癌旁组织(P<0.005)。PTEN蛋白在胃癌组织中的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、有无癌栓等临床病理学指标无明显关系(P>0.05),而与浸润深度、淋巴结转移、分化程度PTNM分期呈显著相关(P<0.05)。在胃癌组织PTEN蛋白表达阳性胃癌患者中,其一年、三年、五年的生存率较PTEN蛋白表达阴性胃癌的患者生存率高,两者比较有显著性差异。结论PTEN蛋白异常表达在胃癌发生发展过程中可能有重要作用。

子宫内膜癌组织中PTEN基因突变及蛋白表达的检测

背景与目的:肿瘤抑制基因———第10染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen,PTEN)被称为子宫内膜的看家基因。但有关PTEN基因在子宫内膜癌发生发展中的确切作用尚不清楚。本研究旨在检测子宫内膜癌组织中PTEN基因的突变及蛋白表达情况。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerasechainreaction-singlestranconformationpolymorphism,PCR-SSCP)和DNA序列分析法,检测52例子宫内膜癌组织和10例正常子宫内膜组织中PTEN基因第5和第8外显子的突变;免疫组织化学法检测PTEN蛋白的表达,并结合临床病理特征进行分析。结果:子宫内膜癌组织的PTEN基因突变率和蛋白缺失率分别为25%和60%,高于正常子宫内膜组织(0%),差异有显著性(P<0.05)。病理学分级为G1、G2及肌层浸润深度<1/2的组织的PTEN基因突变率高于病理学分级为G3及肌层浸润深度≥1/2者,而病理学分级为G1、G2组织的PTEN蛋白表达缺失率低于病理学分级为G3者,差异有显著性(P<0.05)。PTEN基因突变率和蛋白表达缺失率在子宫内膜样腺癌和其它组织类型之间比较,差异有显著性(P<0.05),而在不同手术分期之间差异无显著性(P>0.05)。

乳腺癌组织中核转录因子NF-κB和抑癌基因PTEN的表达及其意义

目的:探讨乳腺癌中核转录因子NF-κB和抑癌基因PTEN的表达及意义。方法:用免疫组织化学方法检测58例乳腺癌、20例乳腺增生症组织中NF-κB和抑癌基因PTEN的表达。结果:乳腺癌中NF-κB表达明显高于乳腺增生症组织,NF-κB表达强度与组织学分级和腋淋巴结转移有关(P<0.05)。与患者年龄、肿瘤大小、组织学分型无关。乳腺癌中PTEN蛋白阳性率低于乳腺增生症组织,乳腺癌PTEN蛋白的表达与乳腺癌组织学分级有关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、组织学分型、腋淋巴结无明显相关性(P>0.05)。NF-κBp65与PTEN蛋白在乳腺癌组织中表达呈负相关(r=-0.355,P<0.05)。结论:提示乳腺癌中NF-κB的高表达及PTEN缺失表达与乳腺癌的发生发展有关。

PTEN与MMP-9在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探讨PTEN与MMP-9在子宫内膜癌中的表达、临床意义及二者之间的相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例子宫内膜腺癌,10例子宫内膜不典型增生和12例正常子宫内膜石蜡标本中PTEN及MMP-9的表达情况。结果:子宫内膜腺癌组织与子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜组织相比,PTEN阳性表达率降低,差异有非常显著性(2χ=12.476,P<0.01);MMP-9的阳性表达率增加,差异有非常显著性(2χ=24.996,P<0.01)。PTEN阳性表达与子宫内膜腺癌病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05),与手术病理分期无关(P>0.05)。MMP-9强阳性表达与子宫内膜腺癌病理分级及淋巴结转移相关(P<0.05),与手术病理分期显著相关(P<0.01)。在子宫内膜腺癌中,PTEN与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.447,P<0.01)。结论:PTEN的表达缺失可能是诊断子宫内膜腺癌组织与癌前病变的分子标志物,MMP-9在子宫内膜腺癌的浸润转移中起促进作用,与子宫内膜腺癌的预后不良有关。

抑癌基因PTEN在急性白血病发病中临床意义的探讨

目的:研究抑癌基因PTEN在恶性血液病中的表达情况,探讨其与急性白血病(AL)的相关性。方法:选取恶性血液病74例[AL35例,骨髓增生异常综合征(MDS)20例,慢性粒细胞白血病(CML)13例,骨髓增殖性疾病(MPD)6例]。另取非恶性血液病24例及正常骨髓10例作为对照。采用S-P免疫组织化学检测骨髓单个核细胞中的PTEN表达情况,同时分析PTEN与临床指标的相关性,并对疾病转归进行跟踪随访。结果:PTEN阳性表达率在对照组中非恶性血液病患者(83.33%)低于正常人(90.0%),但差异无统计学意义(P>0.05),恶性血液病AL组(57.14%)与对照组差异有显著性(P<0.05);AL-完全缓解(AL-CR)组(63.16%)与对照组差异有显著性(0.05>P>0.01),AL-初治组(55.17%)与AL-CR组无显著差异(P>0.05),MDS组难治性贫血伴原始细胞增多(MDS-RAEB)为53.33%,CML组为53.85%。MDS-RAEB组和CML组与对照组相比均有显著性差异(均P<0.05),但与AL-初治组相比差异无显著性(P>0.05)。PTEN低表达与外周血中白细胞计数及发病时骨髓中原始细胞比例有一定相关性(r≈0.50),与MDS-RAEB转化AL、慢性粒细胞白血病急性变(CML-AL)呈正相关性(r≈0.53)。结论:AL存在PTEN表达异常,PTEN与AL的发病可能有一定的关系,提示PTEN在AL的发病中有一定意义。

体外转染PTEN基因对人结肠癌细胞生长的影响

目的探讨野生型PTEN基因表达对结肠癌细胞体外生长的影响。方法应用脂质体转导技术,将含野生型PTEN基因重组真核表达质粒pBp-PTEN转染Lovo细胞并稳定表达。Western blotting鉴定后,观察Lovo细胞转染前后生长、细胞周期、凋亡的改变。结果转染后细胞生长曲线提示转染组曲线平缓,无明显对数生长期,生长速度较对照组明显降低(P<0.01);细胞周期测定显示转染组细胞G1期比例上升,提示PTEN可能对G1/S期转换点起阻滞作用;转染组细胞凋亡比率增高(P<0.01),尤其是早期凋亡。结论外源性PTEN基因的转染可以抑制结肠癌细胞的体外生长。

野生型抑癌基因PTEN真核表达载体的构建及鉴定

目的:构建野生型PTEN基因真核表达载体pcDNA3.0PTEN,并进行鉴定。方法:参照野生型PTEN基因mRNA全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点。从正常人外周血淋巴细胞中提取mRNA作为模板合成PTENcDNA第一链,并扩增目的基因全表达序列片段,经双酶切后定向克隆至pcDNA3.0真核表达载体中,蓝白斑试验筛选阳性重组质粒。分别经双酶切、特异PCR及测序法对重组质粒进行鉴定。结果:双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约为1.2kb;测序法进一步证实该基因为野生型PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与GenBank中PTEN基因序列同源性为99.92%,编码的氨基酸同源性为100%。结论:成功构建了PTEN真核表达载体pcDNA3.0PTEN,为研究PTEN在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。