ING1基因及p33 ING1b蛋白的研究进展

尽管生长抑制基因(ING)家族被发现不久,但研究认为它是公认的抑癌基因进化家族的一部分。ING1基因是这个家族的第一个成员,编码几个不同的mRNA变异体,产生一个蛋白家族。目前研究最多的蛋白亚型是p33ING1b,它与限制细胞生长和增殖、凋亡、肿瘤的非锚定生长、细胞衰老、维持基因组稳定和调节细胞周期调节点有关。ING1基因在肿瘤中很少发生突变,尽管p33ING1b的亚细胞位置可能影响它的功能。p33ING1b从胞核转移到胞质可能失去正常的细胞功能,很可能是一些肿瘤发病机制的中枢环节。

不同释放方式对全氟己酮抑制B类火焰的影响研究

全氟己酮作为一种高效环保的灭火剂,需要依托良好的释放方式才能有效发挥其灭火性能。为了检验不同释放方式下全氟己酮的灭火效能,使用20 mL正庚烷油盘火作为火焰模型,分别利用1.2 MPa的氮气和2 g富氮产气物质来推动全氟己酮释放。讨论和比较了全氟己酮在两种释放方式下,对B类火焰的灭火效果、降温能力和作用机理。研究结果表明:施放的压力对全氟己酮灭火效果影响显著。相比于充装氮气的驱动方式,全氟己酮在富氮产气物质产生的高压气流作用下,能充分释放并及时扑灭火灾,在灭火时间、降温效果、火焰抑制上均有优异的表现。机理分析表明,在1.2 MPa的氮气充装驱动下,大部分的全氟己酮在释放过程中尚未与火焰接触便发生了挥发。而全氟己酮在仅2 g富氮产气物质产生的高压气流作用下,能够与火焰燃烧面充分接触,吸热分解并发挥化学抑制作用,快速阻断燃烧反应。

塔里木盆地顺北1号断裂带奥陶系碳酸盐岩储层结构表征及三维地质建模

综合利用地震、测井、岩心以及动态生产资料,对塔里木盆地顺北1号断裂带断控型碳酸盐岩储集体的内部结构进行了层级划分;基于层级划分,通过地震资料属性提取与转换、深度学习、基于目标示性点过程模拟以及离散裂缝网络模拟(DFN)等方法建立了三维地质模型,并以模型进行油气储量和油藏数值模拟,将拟合结果与实际生产数据进行对比。研究结果表明:(1)顺北1号断裂带奥陶系断控型储层按层级由大到小分为走滑断裂影响带、断控体、类洞穴、类洞穴内簇充填和裂缝带共5个层级。(2)走滑断裂影响带受应力差异影响具有分段性,可细分为挤压段、拉分段和平移段;断控体在拉分段发育断裂交会型、单支走滑型,在平移段发育双断裂交错型和两断裂交会型,在挤压段发育双断裂扭曲型和双断裂交会型,共有6种平面组合样式;类洞穴在地震剖面上呈串珠状反射特征;类洞穴内部分为栅体与栅间(基岩),其中栅体又可进一步分为簇(角砾带)、簇间(裂缝带),整体表现为栅状结构,簇的物性更好;裂缝带为类洞穴的主要储集空间,在簇内部比簇间更发育,在一间房组比鹰山组更发育,一间房组和鹰山组均以发育高角度裂缝为主,在两者连接处则以发育水平缝为主。(3)地质模型预测的油气储量与地质分析储量误差为1.75%,模型模拟的生产井地层压力及累产液结果与生产动态吻合度较高,拟合误差小于10%。

p33ING1b和p53在银屑病和基底细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨肿瘤抑制因子p53和生长抑制因子p33ING1b在人类银屑病和基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)中的表达情况及临床意义。方法 :采用免疫组织化学Envision方法检测p53和p33ING1b在36例寻常型银屑病皮损(银屑病组)、28例BCC皮损(BCC组)和14例正常表皮(正常对照组)中的蛋白表达。结果:p53在正常对照组、银屑病组和BCC组中表达递增,p33ING1b在3组中表达递减,组间比较差异均有显著性(均P<0.05)。银屑病组和BCC组中,p53与p33ING1b之间均存在显著正相关(均P<0.05)。结论:p53和p33ING1b协同作用于增生性皮肤病的局部皮损,是细胞异常增殖的重要机制之一。

食管癌中候选抑癌基因ING1突变的研究

目的 探讨候选抑癌基因ING1在食管癌发生、发展的作用。方法 用逆转录PCR (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测 3 1例食管鳞状细胞癌 (ESCC)中ING1mRNA和蛋白的表达情况 ;直接测序法检测RT PCR产物的基因变异 ;将染色体 13 q末端的微卫星位点作杂合性缺失 (LOH)分析。 结果 ( 1)几乎所有的肿瘤组织和相应的正常组织都有ING1mRNA表达 ,肿瘤组织中 ,一些表达ING1a少些 ,一些表达ING1b少些 ,但两亚型之间没有明显差别。( 2 )ING1蛋白的表达在肿瘤组织中均为阴性 ,而相应的正常组织中均为阳性。 ( 3 )在 3 1例中发现 4例为体细胞错义突变 ,2例为隐匿突变。 ( 4 ) 3 1例中有 17例 ( 5 5 % )出现LOH ,每一个位置的LOH的发生频率 >3 9%。结论 食管癌中ING1基因的突变和杂合性缺失可能影响它的转录和表达 ,它的表达减少与食管癌的发生、发展有关。

大肠癌中抑癌基因p33/ING1 mRNA的表达及意义

目的 了解p33/ING1表达与大肠癌临床病理特征的关系及其可能作用机制。方法 采用逆转录PCR检测 5 2例散发性大肠癌癌组织及正常大肠粘膜中ING1的表达。结果 在大肠癌组织中p33/ING1mRNA表达较正常粘膜明显减弱 ( 30 /5 2 ,5 7.7% ) ,p33/ING1的低表达与肿瘤的Duke’s分期及淋巴结转移显著相关。

散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况及其意义

目的检测散发性结直肠癌组织p33ING1b启动子甲基化情况,探讨p33ING1b在散发性结直肠癌中转录抑制的可能机制。方法选择2008年10月—2012年3月在广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科住院的散发性结直肠癌患者63例,收集其癌组织及相应癌旁组织切除标本;同时选择在我院行吻合器痔上黏膜环切术(PPH)患者13例,收集其术后痔上黏膜组织。采用巢式-甲基化特异性PCR(nMSP法)检测p33ING1b启动子甲基化情况,RT-PCR检测癌组织p33ING1b mRNA表达水平;采用5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-dC)对人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2进行去甲基化干预实验。结果癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率为82.5%(52/63),癌旁组织为34.2%(27/63),痔上黏膜组织未检测出p33ING1b启动子甲基化,癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率高于癌旁组织和痔上黏膜组织(χ2=21.21,P<0.001;χ2=33.98,P<0.001)。不同性别、年龄、肿瘤位置、分化程度及有无淋巴结转移、远处转移患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);不同Dukes分期患者癌组织p33ING1b启动子甲基化阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。p33ING1b启动子甲基化癌组织p33ING1b mRNA相对表达量为(0.62±0.15),低于p33ING1b启动子非甲基化癌组织的(0.75±0.17)(t=2.553,P<0.05)。5-aza-dC干预后,人结直肠癌细胞株DLD-1、Caco-2的p33ING1b启动子甲基化均被逆转,且p33ING1b mRNA相对表达量较干预前升高(P<0.05)。结论 p33ING1b启动子甲基化与散发性结直肠癌存在关联,并可能通过抑制p33ING1b mRNA的表达参与结直肠癌的发生和发展。

食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达

目的 :探讨食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达及其与食管癌病理特征的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测P33/ING1、Survivin蛋白在 6 0例食管癌手术后大体标本中食管正常黏膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌组织的表达。结果 :P33/ING1蛋白从正常黏膜→单纯增生→不典型增生→原位癌→浸润癌呈渐进性低表达 ,而Survivin蛋白则呈渐进性高表达。正常黏膜与不典型增生、原位癌及浸润癌中P33/ING1、Survivin蛋白的表达差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;P33/ING1蛋白表达情况与食管癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。食管浸润癌组织中P33/ING1蛋白的低表达与Survivin蛋白的高表达呈负相关 (r =- 0 .4 80 ,P <0 .0 1 )。结论 :P33/ING1、Survivin 2种蛋白与食管癌的发生发展密切相关 。

血管内皮生长因子和抑癌基因P^(33ING1)与胃癌生物学行为的关系

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)和抑癌基因P33ING1蛋白表达与胃癌临床特征之间的关系.方法:采用免疫组化法检测102例胃癌患者手术切除的癌组织和癌周正常组织中VEGF和P33ING1表达水平.结果:VEGF在正常组织中呈高表达,在肿瘤组织中呈低表达,两者比较差异有统计学意义(χ2=68.0,P<0.01);P33ING1在正常组织中呈高表达,在肿瘤组织中呈低表达,两者比较差异有统计学意义(χ2=40.3,P<0.01).VEGF蛋白表达水平与胃癌浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、5a生存率有关(P<0.05),P33ING1蛋白表达水平与胃癌肿瘤部位、浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、5a生存率有关(P<0.05).结论:VEGF与P33ING1的表达和胃癌生物学行为有关,同时进行VEGF与P33ING1免疫组化法检测对胃癌患者病情判断和预后评价有一定的临床意义.

C-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1在食管鳞状细胞癌中的表达和意义

目的研究C-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1在食管鳞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用荧光定量PCR法检测60例食管鳞癌患者的食管鳞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中c-myc、PTEN、p33/ING1和P-gp/MDR1的表达水平。分析它们在食管鳞癌浸润、分化、转移时表达的差异性及其相关性。结果 C-myc和P-gp/MDR1在正常食管组织、癌旁组织、食管鳞癌组织中的表达逐渐升高(P<0.05)。PTEN和p33/ING1在正常食管组织、癌旁组织、食管鳞癌组织中的表达逐渐降低(P<0.05)。C-myc在有淋巴结转移、低分化、浸润深的食管鳞癌组织中的表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN和p33/ING1在有淋巴结转移、低分化、浸润深的食管鳞癌组织中的表达低,差异有统计学意义(P<0.05)。P-gp/MDR1的阳性表达与食管鳞癌组织的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移差异无统计学意义(P>0.05)。结论 C-myc和PTEN的协同作用共同参与了食管鳞癌的发展、浸润和转移。联合检测癌基因c-myc、抑癌基因PTEN,p33/ING1和P-gp/MDR1基因在食管鳞癌组织中的表达可能为临床诊断病情发展程度、化疗治疗疗效、预后等提供指导意义。

肺癌中ING1基因变化及其表达水平的研究

目的:检测肺癌中抑癌基因ING1微卫星杂合性缺失(LOH)及其主要蛋白产物p33ING1b的表达情况,以探讨ING1基因改变与肺癌发生发展的关系。方法:采用银染PCR-SSCP法检测肺癌组织ING1基因微卫星LOH发生的频率;应用组织芯片技术和免疫组化方法,检测肺癌p33ING1b蛋白表达水平。结果:70例肺癌组织ING1基因4个微卫星位点的总杂合性缺失率为55.7%(39/70),并且越靠近ING1基因位点,发生率越高,但与临床病理参数无关。217例肺癌p33ING1b蛋白的LOH发生率为47.0%(102/217),鳞状细胞癌高于腺癌、腺鳞癌和细支气管肺泡癌(P<0.05),其余类型间差异无显著性(P>0.05);p33ING1b的表达与其他临床病理参数不相关(P>0.05),但与LOH发生频率相关(P<0.05)。结论:p33ING1b蛋白在肺癌组织中存在高频率的低表达或失表达,并且ING1基因的微卫星LOH发生频率也很高。推测LOH是该基因异常表达的重要原因,其结果可能导致该基因的下调和(或)蛋白质功能的失活,从而丧失其对细胞的生长抑制作用,促进了肿瘤的发生。

抑癌基因ING1在鼻咽癌中的表达及突变分析

本研究运用免疫组化技术、逆转录 - PCR( RT- PCR) ,PCR- SS-CP技术对鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中 ING1的表达和突变进行检测 .结果发现 3 0例鼻咽癌标本中 ING1蛋白表达下调率为 70 % ( 2 1/ 3 0 ) ;ING1m RNA表达明显下调率为 4 6% ( 12 / 2 6) ,6例鼻咽癌细胞系中有 2例鼻咽癌细胞系表达明显下调 ,而 11例 ( 4 2 .5 % ) NPC组织及其它 4例细胞系表达与正常水平相当 ,另有 3例 ( 11.5 % )鼻咽癌组织过表达 ;单链构像多态性分析 ( SSCP)在鼻咽癌及鼻咽癌细胞系中均未发现突变 .结果表明ING1基因的转录及翻译表达水平与鼻咽癌的发生 /发展呈负相关 。

p33ING1b与p53在胆管癌中的表达及临床意义

目的:研究p33ING1b与p53在胆管癌中的表达情况,探讨它们与胆管癌临床病理参数间的关系,及两者的表达在胆管癌中的相关性。方法:采用免疫组织化学法,检测40例胆管癌组织与20例正常胆管组织中p33ING1b与p53的表达情况。结果:p33ING1b和p53在胆管癌中的阳性表达率分别为55.0%(22/40)和57.5%(23/40),而在正常胆管组织中阳性表达率分别为100%(20/20)和0(0/20),差异具有统计学意义(P<0.01)。p33ING1b与p53在胆管癌中的表达与年龄、性别、胆红素水平、肿瘤直径大小及肿瘤所在部位无相关性(P>0.05),而与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、神经侵犯及肿瘤的TNM分期密切相关(P<0.05)。p33ING1b与p53在胆管癌中的表达呈负相关(r=-0.472,P<0.01)。结论:在胆管癌组织中,p33ING1b呈低表达,而p53呈高表达。提示p33ING1b与p53可能参与了胆管癌的发生、发展、浸润及转移的过程。

胃癌中医病理因素特征与ING1甲基化及CD133、CD44表达间关系

目的:探讨胃癌中医病理因素特征与胃癌组织抑癌基因ING1甲基化及CD133、CD44基因表达间的关系。方法:采集100例胃癌术前临床资料,进行中医病理因素的提取,探求其病理因素特征,并采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)测其手术切除的胃癌组织和相应的癌旁组织中ING1甲基化水平,RT-PCR和免疫组织化学法测CD133、CD44水平,探讨ING1甲基化对CD133、CD44表达水平的影响,并采用二元logistic回归分析胃癌病理因素与ING1甲基化状况、CD133和CD44基因表达水平的相关性。结果:胃癌病理因素主要为气虚、痰、瘀、气滞;胃癌组织和癌旁组织ING1甲基化和CD133、CD44表达差异有显著性意义(P<0.05);胃癌组织ING1甲基化状况对CD133、CD44表达产生显著影响(P<0.05);ING1甲基化状况、CD133和CD44表达水平对胃癌中医病理因素气虚、痰、瘀产生显著影响(P<0.05)。结论:胃癌病理因素气虚、痰、瘀与ING1甲基化状况、CD133和CD44表达水平具有显著相关性。

结直肠癌中抑癌基因ING1蛋白的表达及其意义

目的 了解大肠癌中ING1表达及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测 5 2例大肠癌组织及正常大肠粘膜中ING1及p5 3蛋白表达。结果 在 5 2例大肠癌组织中ING1蛋白表达较正常粘膜明显减弱 (+ + :9 6% ;+ :3 8 5 % ) ,其表达减弱与Dukes分期及淋巴结转移情况有关 ,ING1蛋白表达与p5 3蛋白表达有关。结论 ING1蛋白表达下调在大肠癌发生、发展过程中起重要作用 ,表达情况与大肠癌的Dukes分期及转移。

P33ING1b和KAI1/CD82在贲门癌组织中的表达及其意义

目的:探讨抑癌基因P33INGlb和KAI1/CD82在贲门癌(GCA)组织中的表达及二者在GCA的发生和恶性进展中的作用。方法:选取20例成人正常贲门黏膜(正常组)和51例GCA组织(GCA组),采用免疫组织化学方法检测2组组织中P33INGlb和KAI1/CD82蛋白表达的阳性率,结合临床病理资料进行统计学分析。结果:GCA和贲门黏膜细胞的胞浆见KAI1/CD82蛋白阳性表达颗粒。正常贲门黏膜组织中KAI1/CD82蛋白表达的阳性率为85.0%,GCA组织中KAI1/CD82蛋白表达的阳性率为65.7%。伴淋巴结转移患者GCA组织中的KAI1/CD82蛋白表达水平明显低于无淋巴结转移者(P<0.05);侵透浆膜患者的GCA组织中KAI1/CD82蛋白表达水平明显低于未侵及浆膜者(P<0.05)。KAI1/CD82蛋白表达的降低或缺失与肿瘤的临床分期有关联(P<0.05)。GCA和贲门黏膜细胞的胞浆和胞核见P33INGlb蛋白阳性表达颗粒。GCA组织较正常贲门黏膜组织的P33INGlb蛋白阳性表达率降低(P<0.05);P33INGlb蛋白表达的降低或缺失与肿瘤的临床分期有关联(P<0.05)。结论:KAI1/CD82蛋白在GCA组织的表达与肿瘤的临床分期、浸润深度和淋巴结转移有关联;GCA组织中P33INGlb蛋白表达率与肿瘤的临床分期有关;抑癌基因P33INGlb和KAI1/CD82在GCA组织中的表达可作为从分子水平判定人GCA恶性生物学行为的指标。

病理性瘢痕组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3蛋白的表达

目的检测病理性瘢痕组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3蛋白的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测30例病理性瘢痕组织、10例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中Survivin、P33ING1、Caspase-3的表达情况。结果病理性瘢痕、非病理性瘢痕和正常皮肤组织中Survivin、P33ING1和Caspase-3的阳性表达率分别为80.0%、50.0%、35.0%,43.3%、70.0%、85.0%和30.0%、80.0%、90.0%;病理性瘢痕组织与非病理性瘢痕和正常皮肤组织比较,3指标差异均有统计学意义(P<0.05)。病理性瘢痕组织中Caspase-3与Survivin(r=-0.400)和P33ING1(r=0.602)表达均具有相关性(P<0.05)。结论Survivin的高表达与Caspase-3和P33ING1的表达下调在病理性瘢痕的形成中可能起协同作用。

胶质瘤细胞ING1基因表达水平与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系研究

目的 探讨胶质瘤细胞ING1基因表达水平及其与肿瘤细胞增殖活性和凋亡程度的关系。方法 采用原位杂交及免疫组织化学染色方法 ,分别检测 71例不同级别的人胶质瘤组织ING1mRNA及ING 1、PCNA蛋白 ,并采用TUNEL法检测原位细胞凋亡的情况。结果 ING 1mRNA的阳性表达率为 94.6% (3 5 / 3 7) ,ING 1蛋白的阳性表达率为 90 .1% (64 / 71) ,两者的表达水平呈正相关 (γ =0 .714 ,P <0 .0 1) ,均随肿瘤恶性程度的增高而降低 ,具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。ING 1表达水平降低时伴随着凋亡程度的降低及增殖活性的增强。结论 胶质瘤细胞中ING1基因的表达水平与肿瘤恶性程度密切相关 ,并随肿瘤恶性程度的增加而相应降低。其表达异常的改变主要是转录水平调控异常的结果 ,并可能通过促进细胞增殖和抑制细胞凋亡 ,在胶质瘤的发生、发展中发挥重要作用。