树鼩乳腺肿瘤模型的代谢组学分析

目的研究树鼩乳腺肿瘤发生、发展过程中代谢组学的变化,探讨机体代谢物质改变与肿瘤发生、发展的密切关系,以期筛选出反映乳腺肿瘤病情进展的生物标志物。方法通过连续3次、每次间隔15 d的方式给20只树鼩每只灌胃7,12-二甲基苯并蒽(7,12-dimethylbenzoanthracene,DMBA)0.15 mg/kg,并添加高脂高糖饲料,诱导实验观察24个月或直至树鼩生成乳腺肿瘤。使用气相色谱-飞行时间质谱联用技术(gas chromatography-time-of-flight mass spectrometry,GC-TOFMS)对DMBA诱导发生乳腺肿瘤的树鼩、DMBA诱导未发生乳腺肿瘤的树鼩以及未诱导正常树鼩(12只)的血清代谢物进行非靶向测定,通过主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法分析(orthogonal partial least squares analysis,OPLS-DA)等多维统计分析,进一步结合t检验进行组间差异比较,以VIP>1且P<0.05的标准筛选差异性代谢物,并结合HMDB在线数据库对显著变化的差异代谢物进行鉴定,最后应用京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genesand Genomes,KEGG)通路数据库富集代谢相关基因调控通路。结果DMBA诱导后树鼩的乳腺肿瘤发生率为40%(8/20)。DMBA造模成瘤组与正常对照组相比,树鼩血清中检测到有30种代谢差异产物,其中18种下调,12种上调,差异均具有统计学意义(VIP>1,P<0.05),KEGG通路分析发现,谷氨酸代谢、甘油酯代谢、柠檬酸循环、丙氨酸代谢这4个代谢通路发生显著改变。DMBA造模成瘤组与DMBA造模未成瘤组相比,检测到有18种代谢差异产物,其中7种下调,11种上调,差异具有统计学意义(VIP>1,P<0.05),KEGG通路分析发现,柠檬酸循环、谷氨酸代谢这2个代谢通路发生显著改变。DMBA造模未成瘤组与正常对照组相比,检测到有31种代谢差异产物,其中14种下调,17种上调,差异具有统计学意义(VIP>1,P<0.05),KEGG通路分析发现,柠檬酸循环、谷氨酸代谢、甘油酯代谢这3个代谢通路发生显著改变。结论代谢组学分析可展示乳腺肿瘤树鼩血清中代谢产物的变化特点,结果提示谷氨酸代谢、甘油酯代谢、柠檬酸循环、丙氨酸代谢途径与高脂高糖饮食下DMBA诱导树鼩乳腺肿瘤的发生与发展有相关性,这为进一步研究乳腺肿瘤发病的生物机制奠定了基础。

中缅树鼩社群行为的观察研究

为了探究中缅树鼩(Tupaia belangeri)的社群行为规律,对中缅树鼩的社群行为进行了观察与统计分析。采用竞技场观察了中缅树鼩的社群行为。结果表明,中缅树鼩的社群行为中,成年雌性之间的友好行为较成年雌雄个体之间增加,成年雄性之间的攻击行为较成年雌雄个体之间增加。大多数雌性树鼩会选择争斗中占优势的雄性,说明雌性在选择配偶时可能和雄性的适合度有关。雄性或雌性均能优先识别出之前与之配对的树鼩,这可能与气味识别等有关;成年雌性间的友好相处和成年雄性间攻击行为较成年雌雄个体之间增加,符合中缅树鼩单雄配偶系社会结构。

锦龟酯酶与树鼩酯酶对部分有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性研究

以Ellman法测定锦龟头部酯酶酶活,以吲哚乙酸酯为底物测定树鼩肝部酯酶酶活,并用正交试验确定最佳反应体系条件,比较几种特异性酶抑制剂的抑制效果;采用酶抑制法考察锦龟酯酶和树鼩酯酶对有机磷农药和氨基甲酸酯类农药的敏感性。结果表明:锦龟酯酶酶活测定方法的最佳条件为孵育温度35℃、孵育时间15min、缓冲液pH 7.5;树鼩酶酶活测定的最佳条件为孵育温度25℃、孵育时间15min、缓冲液pH 8.0;锦龟酯酶对盐酸多奈哌齐敏感性最高;树鼩脂酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高;锦龟酯酶和树鼩酯酶对敌百虫、辛硫磷、敌敌畏、速灭磷、磷铵、速灭威、克百威、灭多威、涕灭威、甲萘威的检出限均低于国标所规定的农药最大残留量限量。锦龟酯酶与树鼩酯酶粗提物具有良好的农药敏感性,可作为新型酶源用于酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留。