不同季节和基质配方对锐尖山香圆容器扦插育苗的影响

为探究锐尖山香圆扦插育苗适宜的季节和基质配方,以一年生的锐尖山香圆枝条为试验材料,开展不同季节和不同基质的扦插试验。结果表明:锐尖山香圆不同季节和基质扦插生根成活率均达到90%以上,最高达98.66%(夏季、黄心土+轻基质+珍珠岩)。秋季生根时间最短,一般16 d左右开始生根,28 d左右全部生根;冬季生根时间最长,一般30~33 d开始生根,50 d左右全部生根。不同基质配方对锐尖山香圆扦插成活率的影响不显著,一年四季均可扦插。因此根据实际生产和造林的需要,锐尖山香圆可选择春季进行扦插繁育。

山香圆总黄酮体外对大鼠佐剂性关节炎免疫功能的影响

目的观察山香圆总黄酮（total flavonoids of turpinia arguta seen，TFS）体外对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠免疫功能的影响。方法选择健康♂SD大鼠，采用弗氏完全佐剂（freunds complete adjuvant，FCA）诱导AA大鼠模型：将同一批号的的卡介苗80℃水浴1h灭活，用灭菌液体石蜡配成10g·L^-1的乳剂。d28处死大鼠，取AA大鼠的免疫细胞（脾细胞和腹腔巨噬细胞）体外给药培养并检测一些免疫指标：细胞增殖法检测ConA、LPS诱导的大鼠脾淋巴细胞增殖反应及IL-1、IL-2的分泌水平；放免法检测PGE2水平。结果与正常组相比，AA大鼠ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞增殖功能低下，脾淋巴细胞产生的IL-2活性下降，LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生的IL-1、PGE2水平明显升高。TFS（10^-8～10^-4）mg·L^-1可纠正AA大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应和脾细胞IL-2的产生，降低AA大鼠腹腔巨噬细胞产生过高的IL-1和PGE2。结论山香圆总黄酮对AA大鼠的异常免疫功能具有调节作用。

山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响

以2.5%氨水喷咽部建立大鼠慢性咽炎模型,用HE染色法观察咽部病理形态学改变,用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6,用RT-qPCR测定咽部组织NF-κBp65mRNA的表达,用Western blot检测咽部组织NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,探讨山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响.结果显示:山香圆总黄酮能明显改善模型大鼠咽部病理形态学;与模型组比较,山香圆总黄酮各组能不同程度地下调TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κBp65的表达并上调IκBα的表达,其中高剂量组最显著.这表明山香圆总黄酮能通过抑制NF-κB的表达和IκBα的解离下调炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,从而减轻炎症,发挥抗慢性咽炎作用.

山香圆化学成分及药理活性的研究进展

山香圆具有抗菌、抗炎、镇痛等药理作用。现对山香圆的化学成分、药理作用及临床应用等的研究进展做一综述,以期为进一步研究和开发利用提供参考。

山香圆总黄酮提取工艺的研究

目的优化山香圆总黄酮提取工艺。方法采用乙醇回流浸提法,在单因素分析的基础上,通过L16(45)正交试验,优选出山香圆总黄酮的提取工艺。结果山香圆总黄酮的最佳提取工艺为:提取温度60℃、时间1.5 h、乙醇体积分数90%、料液比1:50、提取次数4次。结论该法适用于山香圆总黄酮的提取制备。

分光光度法测定山香圆片中黄酮的含量

采用不同溶剂经超声、微波、热回流三种方法提取山香圆片,以芦丁为对照品,用分光光度法测定总黄酮含量.结果表明:以70%乙醇作溶剂,回流3h的条件下,黄酮的提取量最高.

锐尖山香圆生物学特性及其容器育苗技术研究

通过锐尖山香圆种子的采集、处理和贮藏、催芽、袋装、苗期管理和病虫害防治等方面的试验,报道了锐尖山香圆的生物学特征,总结出锐尖山香圆种子繁殖容器苗培育关键技术,以期为药用山香圆仿生栽培提供参考。

山香圆叶药材高效液相指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法(HPLC)对山香圆叶药材的指纹图谱进行分析。方法色谱柱为Eclipse XDB-C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸水溶液,进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长200~400 nm。结果建立了山香圆叶药材高效液相指纹图谱,并得到了10个共有峰,相似度在0.85~0.98。结论此方法稳定可靠,重复性良好,可为山香圆叶药材质量控制提供参考。

山香圆叶提取液纯化工艺的优化

目的优化山香圆Turpinia arguta(Lindl.)Seem.叶提取液纯化工艺。方法以总黄酮、女贞苷、野漆树苷的吸附率和解吸率为评价指标,上样液和洗脱剂(乙醇)的质量浓度(或体积分数)、体积流量、用量为影响因素,静态吸附试验筛选大孔吸附树脂,并结合动态吸附优化工艺。结果最佳条件为HPD300大孔吸附树脂,上样液质量浓度0.2 g/mL,体积流量1 mL/min,上样量30 mL,2 BV去离子水洗涤,6 BV 50%乙醇以1 mL/min体积流量洗脱,总黄酮、女贞苷、野漆树苷含有量分别为53.95%、13.74%、4.07%。结论该方法简单准确,稳定可靠,可用于纯化山香圆叶提取液。

活性生物增产降解剂对锐尖山香圆生长生理、药效成分及土壤质量的影响

【目的】探讨活性生物增产降解剂对锐尖山香圆的应用效果,以期为锐尖山香圆微生物肥料选择及合理施用提供理论依据,也为今后锐尖山香圆提质增效的规模化种植提供技术参考。【方法】以1年生锐尖山香圆为试验材料,设叶面喷施(T1,1∶30;T2,1∶50;T3,1∶100)、灌根(T4,1∶100;T5,1∶200;T6,1∶300)、叶面喷施+灌根(T7,T1+T4;T8,T2+T5;T9,T3+T6)9个施肥处理,以同步等量施清水为对照(CK),比较活性生物增产降解剂不同处理对锐尖山香圆生长生理指标、药效成分及土壤有机质含量和土壤酶活性的影响。【结果】与CK相比,施用活性生物增产降解剂可明显促进锐尖山香圆生长,除T9处理降低株高外,其余处理均可增加株高和单叶厚度,扩大单叶面积,提高折干率与药材干重;其中,T8处理显著增加株高19.5%(P<0.05,下同);T1处理显著增加干重73.4%、折干率31.7%、单叶厚度27.1%和单叶面积47.3%。从生理指标来看,T5处理可降低叶片各项生理指标,T7~T9处理也降低了叶绿素和脯氨酸含量,而T2处理对叶片生理指标的影响最优,较CK显著提高叶绿素含量35.5%、可溶性蛋白含量60.0%、脯氨酸含量94.6%和过氧化物酶(POD)活性82.7%,其次为T1和T4处理。从药效成分来看,T3处理的女贞苷含量和T1处理的野漆树苷含量最高,分别较CK增加59.4%和83.3%,其次为T5和T6处理。从土壤质量来看,除T3和T6处理外,其他处理均可有效改善土壤质量,尤其是T2处理较CK显著提高有机质含量76.1%、脲酶活性12.3%、蔗糖酶活性483.3%、酸性磷酸酶活性18.7%,其次为T1和T5处理。采用隶属函数法对生长生理、药效成分和土壤质量进行综合评价,不同处理的综合排序为T1处理>T2处理>T4处理>T7处理>T6处理>T9处理>T5处理>T8处理>T3处理>CK。【结论】综合考虑锐尖山香圆形态指标、生理性状、产量及药效成分等,叶面喷施活性生物增产降解剂的效果优于灌根,且叶面喷施浓度以低浓度(1∶30~1∶50)为宜,可有效促进锐尖山香圆生长、提高产量,同时增强抗性并提高药效。

锐尖山香圆叶中三萜类成分的研究

从锐尖山香圆(Turpinia arguta(Lindl.)Seem.)叶中分离得到了11个三萜类化合物。通过光谱分析,分别鉴定其结构为熊果酸(1),3β,6β,23-trihydroxy-12-oleanen-28-oic acid(2),3β,6β,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid(3),3β,6β,19α,23-tetrahydroxyurs-12-en-28-oic acid(4),1α,3β,23-trihydroxy-12-oleanen-28-oic acid(5),arjunglucoside II(6),rosamultin(7),3β-O-β-D-glucopyranoylcincholic acid(8),cinchonaglycoside C(9),mussaendoside S(10)和3β-O-β-D-glucopyranosyl quinovic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester(11)。除化合物1和6,其它化合物均为首次从山香圆叶中分离得到。

表面活性剂-超声协同提取山香圆叶总黄酮工艺的优化

目的优化表面活性剂-超声协同提取山香圆Turpinia arguta Seem.叶总黄酮工艺。方法在单因素试验基础上,以十二烷基硫酸钠(SDS)用量、液料比、乙醇体积分数为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,Box-Behnken设计优化提取工艺。结果最佳条件为十二烷基硫酸钠用量0.64%,液料比25∶1,乙醇体积分数50%,超声温度60℃,超声时间40 min,总黄酮提取率为3.48%。结论该方法简单、节能、省时,可用于山香圆叶总黄酮的提取。

山香圆叶化学成分的研究

目的:对省沽油科山香圆属植物山香圆Turpinia arguta Seem.叶乙醇提取物的正丁醇部位的化学成分进行研究。方法:通过大孔树脂柱层析、聚酰胺柱层析、硅胶柱层析、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和制备液相等色谱技术进行分离纯化,并应用核磁共振(NMR)以及质谱等波谱技术进行化合物结构鉴定。结果:从山香圆叶中分离鉴定了12个化合物,分别为:科罗索酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、坡模酸(2)、23-羟基齐墩果酸(3)、积雪草苷A(4)、2α,3α,23-三羟乌苏酸(5)、乌苏酸(6)、咖啡酸(7)、3,4-二羟基苯甲酸(8)、对羟基苯甲酸(9)、绿原酸(10)、对羟基肉桂酸(11)、没食子酸(12)。结论:其中,化合物1、3~5、7~10为首次从该植物中分离得到。

锐尖山香圆基因组DNA提取方法比较研究

为了研究不同方法对锐尖山香圆基因组DNA提取质量的影响,以选择出最适宜的提取方法。以锐尖山香圆叶片为试验材料,采用CTAB法、SDS法、高盐低pH值法和尿素法提取其基因组DNA,并对提取的基因组DNA OD_(260/280)值、OD_(260/230)值、DNA浓度、DNA产率、琼脂糖凝胶电泳、酶切验证和ISSR-PCR扩增产物进行比较分析。结果表明,应用高盐低pH值法和尿素法提取的基因组DNA含有蛋白质和多糖等杂质较多,DNA纯度较低;CTAB法提取的基因组DNA含有一些酚类物质和盐等杂质,DNA纯度较低;SDS法提取的基因组DNA纯度、浓度和产率最高,酶切和ISSR-PCR检测效果最好。SDS法提取的锐尖山香圆基因组DNA质量和产量最好,可用于后续相关分子生物学研究。

山香园营养器官性状变异的数量研究

山香园(TurpiniaargutaSeem)的营养器官性状在其分布区内表现出明显的变异,应用数量分析方法研究了山香园在营养器官上的性状变异规律,结果是:1山香园在营养器官上的性状变异分为四个类型(I、II、III、IV),其中类型I变异显著,具有较高的育种价值;II、III是过渡类型,性状不稳定.2山香园在营养器官的性状变异分化中,叶宽、株高和地径3个性状的信息贡献率最大,是主要的变异性状.3山香园的形态特征有明显的变异趋势.

锐尖山香圆叶化学成分的研究

目的研究锐尖山香圆叶(Turpinia arguta)的化学成分。方法采用硅胶柱及Sephadex LH-20等色谱技术进行分离,利用现代波谱学技术确定化合物的结构。结果从中分离并鉴定了13个化合物,分别为香草酸(1),反式对羟基肉桂酸(2),环丁二酸酐(3),芹菜素(4),焦没食子酸(5),α-呋喃甲酸(6),没食子酸(7),2-4'-羟基-苄基-2-羟基-丁二酸(8),木犀草素(9),芹菜素-7-O-葡萄糖苷(10),木犀草素-7-O-葡萄糖苷(11),芹菜素-7-O-新橙皮糖苷(12),芹菜素-7-O-2'-鼠李糖基芸香糖苷(13)。结论化合物1～13均为首次从本科植物中分离得到。

山香圆叶中黄酮苷类成分及其抗炎活性研究

应用大孔树脂、聚酰胺、Sephadex LH-20,HPLC等各种色谱技术对山香圆叶95%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后的水部位进行分离纯化,分离得到8个黄酮苷类化合物,采用NMR等谱学方法分别鉴定为:野漆树苷(1),女贞苷(2),刺槐素-7-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),刺槐素-7-O-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(密蒙花新苷,4),木犀草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),金圣草素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),刺槐素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(蒙花苷,7),芹菜素6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。其中化合物3～8为首次从该植物中分离获得。采用脂多糖(LPS)刺激RAM264.7巨噬细胞炎症模型对分离得到的化合物进行抗炎活性评价,结果表明化合物2,3在1×10-5mol.L-1浓度下,对LPS刺激RAW264.7细胞NO生成的抑制率分别为33.7%和23.8%,提示化合物2,3具有较弱的抗炎活性。

大孔树脂纯化山香圆叶中的总黄酮

目的研究大孔树脂纯化山香圆叶中总黄酮的工艺条件。方法采用静态吸附法筛选6种大孔树脂,再用动态吸附法优化山香圆叶中总黄酮的纯化工艺。结果山香圆叶中总黄酮的最佳纯化工艺为:上样浓度为0.1 g·m L-1(以生药计),上样速率为2 BV·h-1,上样体积为2 BV,用2 BV去离子水洗脱、5 BV 50%乙醇以2 BV·h-1的速率洗脱;在此工艺下,总黄酮的转移率为60.48%,产物中总黄酮的纯度为41.11%。结论 HPD400型大孔树脂对山香圆叶中总黄酮有良好的纯化效果。

山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS,COX-2,NF-кB表达的影响

目的观察山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS、COX-2及NF-кB表达的抑制作用。方法采用Griess法检测山香圆总黄酮对NO生成的影响,通过westernblot分析i NOS、COX-2及NF-кB的表达。结果山香圆总黄酮能显著抑制RAW264.7细胞中NO的生成以及iNOS、COX-2及NF-кB蛋白的表达,且随着浓度的增加,抑制效果明显。结论山香圆总黄酮的抗炎作用是通过下调NF-кB的活性进而抑制i NOS、COX-2的表达来实现的。

山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞MAPK信号通路的影响

目的观察山香圆总黄酮对脂多糖诱导的RAW264.7细胞MAPK信号通路的影响。方法采用脂多糖刺激RAW264.7细胞制备炎症模型;CCK-8法测定细胞活力;ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量;westernblot法检测ERK1/2、JNK和p38蛋白的磷酸化水平。结果低于400μg/mL的山香圆总黄酮对RAW264.7细胞生长无影响;山香圆总黄酮各剂量组均能抑制p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白的表达以及TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,中、高剂量组呈显著性抑制(P<0.05,P<0.01)。结论山香圆总黄酮能通过抑制ERK1/2、JNK、p38磷酸化水平,降低TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,发挥抗炎作用。