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Expression of Twist Gene in Human Hepatocellular Carcinoma Cell Strains of Different Metastatic Potential 被引量:3
1
作者 朱倩 徐湖波 +2 位作者 徐倩 晏维 田德安 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第2期144-146,共3页
In order to investigate the role of Twist gene in the metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC), total RNA was respectively extracted from three HCC cell strains with different metastatic potentials, HepG2, MHCC-... In order to investigate the role of Twist gene in the metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC), total RNA was respectively extracted from three HCC cell strains with different metastatic potentials, HepG2, MHCC-97L and MHCC-97H. The first strand cDNA was synthesized by reverse transcription, which was then used as template to perform fluorescent quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR). The quantity of Twist gene expression was normalized by that of the housekeeping gene, GAPDH for each sample. ANOVA was used to estimate the relationship between Twist gene and metastasis potential of HCC. The results showed that the normalized initial cDNA concentrations of Twist gene in HepG2, MHCC-97L and MHCC-97H were (9.45±0.25)×10^-4, ( 1.82±0.41 )× 10^-3, (3.06±0.62)×10^-3, respectively. FQ-PCR revealed significan, t differences in the expression level of Twist among HCC cell strains with different metastatic potentials. It was concluded that high expression level of Twist was closely associated with more aggressive behaviors of HCC. Twist provides a novel indicator for HCC metastasis. 展开更多
关键词 hepatocellular carcinoma twist gene METASTASIS fluorescent polymerase chain reaction
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Genetic Analysis and Mapping of TWH Gene in Rice Twisted Hull Mutant 被引量:6
2
作者 LI Jin-bo XIA Ming-yuan +4 位作者 WAN Bing-liang DU Xue-shu ZHA Zhong-ping Yu Da-zhao QI Hua-xiong 《Rice science》 SCIE 2009年第1期79-82,共4页
A mutant with twisted hulls was found in a breeding population of rice (Oryza sativa L.). The mutant shows less grain weight and inferior grain quality in addition to twisted hulls. Genetic analysis indicated that t... A mutant with twisted hulls was found in a breeding population of rice (Oryza sativa L.). The mutant shows less grain weight and inferior grain quality in addition to twisted hulls. Genetic analysis indicated that the phenotype of mutant was controlled by a single recessive gene (temporarily designated as TW(H). To map the TWH gene, an F2 population was generated by crossing the twh mutant to R725, an indica rice variety with normal hulls. For bulked segregant analysis, the bulk of mutant plants was prepared by mixing equal amount of plant tissue from 10 twisted-hull plants and the bulk of normal plants was obtained by pooling equal amount tissue of 10 normal-hull plants. Two hundred and seven pairs of simple sequence repeat (SSR) primers, which are distributed on 12 rice chromosomes, were used for polymorphism analysis of the parents and the two bulks. The TWH locus was initially mapped close to the SSR marker RM526 on chromosome 2. Therefore, further mapping was performed using 50 pairs of SSR primers around the marker RM526. The TWH was delimited between the SSR markers RM14128 and RM208 on the long arm of chromosome 2 at the genetic distances of 1.4 cM and 2.7 cM, respectively. These results provide the foundation for further fine mapping, cloning and functional analysis of the TWH gene. 展开更多
关键词 RICE twisted-hull mutant genetic analysis gene mapping
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Twist在肺癌中高表达并与肺癌的分化有关 被引量:10
3
作者 惠林萍 刘冰冰 +4 位作者 赵蕾 张四洋 周宝森 邱雪杉 崔泽实 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第4期294-299,共6页
背景与目的转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用。本研究的目的是检测Twist在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法... 背景与目的转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用。本研究的目的是检测Twist在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法检测68例肺癌及8例癌旁肺组织中Twist的表达;采用RT-PCR方法检测人支气管上皮细胞系(HBE)和8个肺癌细胞系Twist1和Twist2mRNA的表达水平;应用免疫荧光方法检测HBE和8个肺癌细胞系中Twist蛋白的表达和亚细胞定位。结果8例癌旁肺组织中Twist弱表达,在68例肺癌组织标本中,9例为Twist弱表达(13.24%),51例为Twist中高表达(75.00%),癌旁肺组织Twist弱表达。Twist高表达与肺癌分化程度(P=0.002)和患者年龄(P=0.012)有关。Twist1和Twist2的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达水平均有差异(P<0.05)。免疫荧光显示Twist蛋白在HBE细胞系中弱表达,而在肺鳞癌和腺癌细胞系中高表达,主要定位于细胞浆。结论Twist在正常肺组织中低表达,在肺癌中高表达,其表达水平与肺癌的分化有关,可作为肺癌进展的生物学标志。 展开更多
关键词 肺肿瘤 twist 肿瘤标志物
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上调Twist基因对人结肠癌SW480细胞增殖凋亡及侵袭能力的影响 被引量:4
4
作者 张娟 王士杰 +3 位作者 王贵英 于跃明 史健伟 惠捷 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期540-546,共7页
目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤... 目的:上调人结肠癌SW480细胞株中Twist基因的表达,观察其对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法:将高表达Twist基因的质粒和空载质粒稳定转染SW480细胞,分别命名为转染组和对照组,MTT法、细胞划痕实验和Matrige1侵袭实验分别检测肿瘤细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的变化。FCM检测细胞周期及凋亡情况。将肿瘤细胞接种至裸鼠皮下,对比转染前后肿瘤细胞的成瘤情况。结果:从第4天开始,转染组SW480细胞生长速度明显高于对照组(P<0.05):转染组SW480细胞的增殖指数(PI)和S期细胞比例[(61.279±1.709)%,(33.171±3.154)%]均高于对照组[(26.142±1.518)%,(14.112±2.137)%](P<0.05);转染组的细胞凋亡率(6.83I±1.624)%低于对照组(12.223±1.733)%(P<0.05);划痕24 h及48 h时后转染组细胞迁移率[(40.06±5.56)%,(75.77±8.06)%]均高于对照组[(25.25±2.65)%,(35.37±6.79)%](P<0.05);Matrige1侵袭实验结果显示转染组侵袭细胞个数明显高于对照组(p<0.05);将两组细胞分别接种裸鼠,16 d左右可见肿瘤结节,转染组肿瘤体积及瘤重均大于对照组(P<0.05)。结论:上调Twist基因可提高SW480细胞体外增殖、迁移和侵袭能力,降低SW480细胞凋亡率。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 twist基因 增殖 侵袭 凋亡
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原发性肝癌Twist基因表达的研究 被引量:9
5
作者 徐静 陈孝平 向秋 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第13期994-996,共3页
目的:研究Twist基因在人原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SABC染色方法检测45例PLC组织及癌旁组织中Twist蛋白并采用RT-PCR对TwistmR-NA的表达进行分析研究。结果:PLC组织、癌旁... 目的:研究Twist基因在人原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SABC染色方法检测45例PLC组织及癌旁组织中Twist蛋白并采用RT-PCR对TwistmR-NA的表达进行分析研究。结果:PLC组织、癌旁组织及正常肝组织中Twist的阳性表达率分别为80.0%、57.8%和22.2%。PLC和癌旁组织与正常对照肝组织中Twist的表达相比较差异均有统计学意义,P<0.05。肿瘤包膜也可见Twist表达。RT-PCR检测Twist结果显示,PLC组织中Twist mRNA表达显著上调。结论:PLC组织中高表达转录因子Twist对肿瘤的发生、发展起着重要作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤/病理学 twist 基因表达 免疫组织化学
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子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞癌中Twist基因蛋白及Skp2表达 被引量:5
6
作者 何春年 张鸿瑞 +3 位作者 徐翠清 张秀智 赵焕芬 徐明堂 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期468-472,共5页
目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对... 目的研究Twist和Skp2在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞癌(squamous cell carci-noma,SCC)中的表达及其在癌变中的作用。方法 SP法检测Twist和Skp2在CIN和SCC中的表达,并与正常子宫颈鳞状上皮组对照。结果正常组、CIN1级组、CIN 2级组、CIN 3级组及SCC组的Twist和Skp2表达阳性率分别为:0、10%、42.3%、48.3%、52.5%,23.1%、46.5%、73.1%、93.1%和92.5%。Twist和Skp2在正常组与CIN组及SCC组间表达差异有显著性(P<0.005)。CIN1级组与CIN2级组间表达差异有显著性(P<0.005)。结论 Twist和Skp2随着CIN从轻到重至SCC,表达逐渐增强,表明两者在SCC癌变过程中起到协同性作用,共同参与CIN的进展及SCC癌变机制。检测到Twist和Skp2表达增强有助于SCC发生的判断及CIN1级与CIN2级分级的临床病理诊断。 展开更多
关键词 子宫颈鳞状细胞肿瘤 子宫颈上皮内瘤变 twist基因 S期激酶相关蛋白2
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非小细胞肺癌中Twist通过TGF-β/Smad3信号通路促进EMT的发生 被引量:8
7
作者 崔凯 王武平 +7 位作者 孙盈 赵芳 高贵洲 王晓东 倪云峰 张涛 卢强 李小飞 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第11期1462-1465,共4页
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织转录因子Twist调控TGF-β/Smad3的表达,促进上皮间质转化(EMT)的发生机制。方法:采用免疫组织化学法检测NSCLC组织样本中Twist、TGF-β/Smad3以及EMT中代表性分子E-cadherin和Vimentin蛋白表达,并统计... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织转录因子Twist调控TGF-β/Smad3的表达,促进上皮间质转化(EMT)的发生机制。方法:采用免疫组织化学法检测NSCLC组织样本中Twist、TGF-β/Smad3以及EMT中代表性分子E-cadherin和Vimentin蛋白表达,并统计分析二者表达之间的相关性。结果:Twist、Smad3、Vimentin蛋白阳性着色定位于细胞质和细胞核内,Ecadherin蛋白阳性着色定位于细胞膜。Twist、Smad3、E-cadherin、Vimentin蛋白在NSCLC中阳性率分别为72.3%(120/166)、71.1%(118/166)、54.2%(90/166)、69.9%(116/166),显著高于癌旁组织,差异有统计学意义。Twist与Smad3、Smad3与E-cadherin、Vimentin在NSCLC不同分化程度及不同TNM分期均呈显著相关。结论:NSCLC中Twist可能通过TGF-β/Smad3信号通路促进EMT的发生。 展开更多
关键词 肺肿瘤/免疫学 @twist基因 转化生长因子Β SMAD3蛋白 间质细胞 细胞系 转化
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Twist基因检测对大肠癌临床病理诊断价值的探讨 被引量:9
8
作者 宫奇林 林梅青 +1 位作者 时昌文 孙涛 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第16期1259-1260,1274,共3页
目的:探讨转录调节因子Twist在大肠癌组织中的表达及其在临床病理诊断中的应用价值。方法:应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测112例大肠癌组织及40例正常肠黏膜组织中Twist的表达,并与临床病理指标进行比较。结果:在... 目的:探讨转录调节因子Twist在大肠癌组织中的表达及其在临床病理诊断中的应用价值。方法:应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测112例大肠癌组织及40例正常肠黏膜组织中Twist的表达,并与临床病理指标进行比较。结果:在112例大肠癌组织中,Twist基因阳性表达78例(69.6%),正常组织中为15例(17.5%),两者比较差异有统计学意义,χ2=11.21,P=0.001;进一步结合临床病理资料分析,Twist在大肠癌组织中表达与肿瘤的分化程度(χ2=9.575,P=0.008)、肿瘤浸润(χ2=8.183,P=0.017)、淋巴结转移(χ2=4.05,P=0.044)和Duke分期(χ2=11.114,P=0.011)有关;而与患者年龄(P=0.286)、性别(P=0.887)无关。结论:Twist基因表达对大肠癌临床病理学诊断有明确的指导作用。 展开更多
关键词 基因 twist 肠肿瘤 免疫组织化学
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Twist基因在卵巢癌中的研究进展 被引量:3
9
作者 洪莉 杨将 邢辉 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第32期4019-4022,共4页
卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对T... 卵巢癌是继子宫内膜癌和宫颈癌发病率居第三位的妇科恶性肿瘤,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。碱性螺旋-环-螺旋(b HLH)转录因子家族成员Twist基因在卵巢癌组织中高度表达,其异常表达在卵巢癌的发生、发展及恶化过程中发挥着重要作用。对Twist基因沉默处理后,卵巢癌细胞的增殖及迁移将受到明显的影响。本文通过结合近年来国内外的研究成果,简述了Twist基因在卵巢癌发生、发展中最新的作用机制。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 twist基因 细胞增殖 综述
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肝癌细胞中Twist基因表达变化与WNT信号传导通路的关系 被引量:3
10
作者 刘瑞鸣 徐静 马晓飞 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第6期16-17,共2页
目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WN... 目的探讨肝癌细胞中Twist基因表达与WNT信号传导通路激活的关系。方法将0.05mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为A1、A2、A3组;将0.1mol/L氯化锂加入人肝癌SMMC7721细胞中培养2h激活WNT通路,然后分别培养6、12、24h,分别为B1、B2、B3组;另设空白对照组。用RT-PCR及荧光定量PCR法检测各组细胞的TwistmRNA。结果RT-PCR法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.38±0.05、0.60±0.08、0.69±0.06,B1、B2、B3组分别为0.56±0.05、0.59±0.06、0.69±0.04,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.18±0.03相比,P均<0.05。荧光定量法测得TwistmRNA在A1、A2、A3组分别为0.43±0.01、0.56±0.01、0.67±0.01,B1、B2、B3组分别为0.52±0.01、0.58±0.00、0.65±0.00,以上各组细胞TwistmRNA与对照组的0.21±0.00相比,P均<0.05。结论肝癌细胞中Twist基因的表达程度与WNT通路的激活有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 twist基因 WNT通路 聚合酶链反应
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Twist、Slug基因在宫颈癌中的表达及与预后的关系 被引量:2
11
作者 张一鸣 张铭 +2 位作者 王一 钱晖 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期757-760,共4页
目的探讨Twist、Slug基因在宫颈癌中的表达水平及与临床预后的关系。方法用实时定量PCR检测56例宫颈癌患者、120例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者组织和血浆中Twist、Slug mRNA的表达,以35例正常宫颈及慢性宫颈炎组织和血浆作为对照。免疫组... 目的探讨Twist、Slug基因在宫颈癌中的表达水平及与临床预后的关系。方法用实时定量PCR检测56例宫颈癌患者、120例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者组织和血浆中Twist、Slug mRNA的表达,以35例正常宫颈及慢性宫颈炎组织和血浆作为对照。免疫组化染色检测Twist、Slug蛋白在宫颈癌组织中的表达,并分析其与宫颈癌复发的关系。结果对照组、CIN组、宫颈癌组组织中Twist mRNA表达水平分别为(1.98±0.48)×10-3、(3.89±0.86)×10-3、(6.53±1.25)×10-3,血浆中Twist mRNA表达水平分别为(1.62±0.55)×10-4、(1.76±0.68)×10-4、(2.08±0.90)×10-4;3组组织中Slug mRNA表达水平分别为(1.33±0.32)×10-2、(3.02±0.95)×10-2、(4.69±1.02)×10-2,血浆中Slug mRNA表达水平分别为(2.08±0.75)×10-3、(2.30±0.78)×10-3、(3.09±1.02)×10-3;宫颈癌组、CIN组组织中Twist、Slug mRNA表达水平均高于对照组(F分别为46.69、55.30,P<0.01);宫颈癌组血浆中Twist、Slug mRNA相对表达水平最高(F分别为10.56、17.97,P<0.01),且术前血浆中Twist、Slug相对表达水平高于术后2周的水平(t分别为2.12、2.03,P<0.05)。宫颈癌组Twist mRNA与Slug mRNA呈正相关(r=0.483,P<0.01);免疫组化结果表明,宫颈癌组织Twist、Slug蛋白表达阳性率(55.4%、78.6%)高于对照组的表达阳性率(8.6%、37.1%)(χ2分别为20.15、15.80,P<0.01)。宫颈癌组Twist蛋白阳性者复发率高于Twist蛋白阴性者(29.0%vs 4.0%,χ2=5.91,P<0.05)。结论 Twist、Slug基因在宫颈癌组织和血浆中表达上调,Twist阳性表达与宫颈癌的复发关系密切。 展开更多
关键词 twist基因 SLUG基因 宫颈癌 上皮-间质转化 预后
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重组质粒pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响 被引量:3
12
作者 尉春艳 张熙 +3 位作者 孙学军 彭慧霞 贺赛 王桂贤 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第8期695-698,784,785,共6页
目的评估重组质粒pEGFP-N1-Twist对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用real-time PCR和Western blot检测Twist基因与蛋白的表达情况;通过Transwell及MTT试验检测pEGFP-N1-Twist对SK... 目的评估重组质粒pEGFP-N1-Twist对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用real-time PCR和Western blot检测Twist基因与蛋白的表达情况;通过Transwell及MTT试验检测pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞的作用。结果转染了pEGFP-N1-Twist的SKOV3细胞中Twist基因/蛋白的表达明显上调;转染组较空白对照组侵袭及迁移能力增强(P<0.05),细胞增殖能力明显增加(P<0.05)。结论成功构建了Twist基因的真核表达载体并能在细胞内稳定表达,Twist基因能增强SKOV3细胞的侵袭及迁移能力、细胞增殖能力。 展开更多
关键词 重组质粒 twist基因 卵巢癌 真核表达载体pEGFP-N1 基因克隆
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Twist基因的研究进展 被引量:7
13
作者 肖雄升 李有柱 《医学综述》 2009年第7期1031-1034,共4页
Twist是一种高度保守的碱性螺旋.环.螺旋转录因子家族重要成员,在动物与人类的胚胎发育中起关键调控作用。在动物胚胎发育过程中,Twist作为转录因子在诱导细胞移动及组织塑形中起主要作用。最近研究表明,Twist在表皮一间叶细胞转... Twist是一种高度保守的碱性螺旋.环.螺旋转录因子家族重要成员,在动物与人类的胚胎发育中起关键调控作用。在动物胚胎发育过程中,Twist作为转录因子在诱导细胞移动及组织塑形中起主要作用。最近研究表明,Twist在表皮一间叶细胞转换调控中起着关键作用,Twist过表达在肿瘤的发生、侵袭转移、血管生成与肿瘤细胞耐药中发挥重要作用。Twist能通过多种途径引起肿瘤的发生,目前已在多种人类上皮来源肿瘤中发现Twist表达增高,并与患者预后关系密切。 展开更多
关键词 twist 基因 表皮-间叶细胞转换 肿瘤
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重组质粒pEGFP-N1-Twist的构建、表达及其对SKOV3细胞克隆形成能力的影响 被引量:1
14
作者 尉春艳 张熙 +3 位作者 孙学军 彭慧霞 史玉霞 王桂贤 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期447-450,共4页
目的构建含有Twist基因的重组质粒pEGFP-N1-Twist,为进一步研究上皮性卵巢癌的发生及转移机制奠定基础。方法生物合成Twist cDNA基因序列,定向克隆至pEGFP-N1表达载体内,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用Real-time PCR和Western b... 目的构建含有Twist基因的重组质粒pEGFP-N1-Twist,为进一步研究上皮性卵巢癌的发生及转移机制奠定基础。方法生物合成Twist cDNA基因序列,定向克隆至pEGFP-N1表达载体内,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用Real-time PCR和Western blot检测Twist基因的表达情况;通过克隆形成实验检测pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞的作用。结果 Twist基因的cDNA已克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞后,Twist基因/蛋白的表达明显上调,转染组较对照组克隆形成明显增加(P<0.05)。结论成功构建了Twist基因的真核表达载体并能在细胞内稳定表达,Twist基因能增强SKOV3细胞的克隆形成能力。 展开更多
关键词 重组质粒 twist基因 卵巢癌 真核表达载体pEGFP-N1 基因克隆
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shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响 被引量:3
15
作者 谢环 田洁 黄娅芬 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第5期18-23,共6页
目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组... 目的 观察shRNA Twist基因对人绒毛膜癌细胞JEG-3增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 以人源性绒毛膜癌细胞为种子细胞,构建shRNA-Twist小干扰RNA载体,通过慢病毒转染绒毛膜癌细胞,根据转染慢病毒质粒的不同分成3组,即空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组。RT-qPCR和Western Blot检测Twist和凋亡蛋白caspase-3和caspase-9的表达。Transwell法检测人绒毛膜癌细胞侵袭能力,CCK-8法检测人绒毛膜癌细胞增殖能力,AV-PI试剂盒检测人绒毛膜癌细胞凋亡水平。结果 RT-PCR结果显示,空白质粒组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(1.011±0.125);shRNA干扰组的Twist的mRNA的相对表达量(与空白对照组相比)为(0.377±0.021),高于空白质粒组的mRNA表达水平(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的mRNA含量具有同样的趋势。Western-Blot结果显示,空白质粒组和shRNA干扰组的的Twist蛋白相对表达量(与空白对照组相比)分别为(7.211±0.934)和(0.213±0.091),2组比较差异具有统计学意义(P < 0.05)。Caspase-3和Caspase-9的蛋白含量具有同样的趋势。空白对照组、空白质粒组和shRNA干扰组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(F = 23.983,P < 0.05)。shRNA干扰组与空白质粒组的Transwell结果比较具有明显的统计学差异(q =10.322,P < 0.05)。CCK-8和AV-PI检测结果具有同样的趋势。结论 shRNA-Twist可以明显的抑制绒毛膜癌细胞的增殖和侵袭,促进细胞凋亡,可以作为绒毛膜癌新的治疗靶基因。 展开更多
关键词 twist基因 绒毛膜癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡
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RNA干扰Twist基因真核表达载体的构建与筛选 被引量:1
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作者 沈彬 胡敬海 +1 位作者 管旌旌 王春喜 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期59-63,195,共6页
目的:构建编码Twist mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:以Twist mRNA编码区中第777位和第845位序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体... 目的:构建编码Twist mRNA的短发卡样RNA(shRNA)质粒表达载体,并筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法:以Twist mRNA编码区中第777位和第845位序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,构建后通过PCR酶切电泳和质粒测序进行鉴定。经鉴定后分别转染稳定表达Twist基因的膀胱癌T24细胞,RT-PCR和Western blotting分别从mRNA和蛋白质水平检测抑制效果。结果:构建的质粒表达载体PCR鉴定均可扩增出400 bp的目的条带,插入片段测序结果与合成的shRNA结果一致。靶向Twist基因的shRNA对膀胱癌T24细胞中Twist基因mRNA抑制率为90%,蛋白质抑制率为86%,两种干扰质粒中shRNA1干扰效果最明显。结论:成功构建了靶向Twist基因的shRNA质粒表达载体,其中抑制效果最为明显的shRNA质粒表达载体为pGenesil-shRNA1质粒。 展开更多
关键词 RNA干扰 质粒 表达载体 短发卡样RNA twist基因
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TWIST基因甲基化在肿瘤发生发展中的研究进展 被引量:1
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作者 高峰 薛明明 尹化斌 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期486-490,共5页
TWIST基因属于碱性螺旋-环-螺旋(bosic Helix-Loop-Helix farily,bHLH)转录因子家族成员之一,在多种种属的基因组中高度保守并调控胚胎发育。该基因的功能包括参与上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抗细胞凋亡、... TWIST基因属于碱性螺旋-环-螺旋(bosic Helix-Loop-Helix farily,bHLH)转录因子家族成员之一,在多种种属的基因组中高度保守并调控胚胎发育。该基因的功能包括参与上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抗细胞凋亡、促进肿瘤血管生成和导致染色体不稳定等,但是其在肿瘤发生发展中的调节机制仍不清楚。近年来,大量文献报道证实了表观遗传学为肿瘤发病重要机制之一,其中TWIST基因启动子的高甲基化与肿瘤的发生、进展以及临床病理特征都有关系,本文就此作一综述。 展开更多
关键词 twist基因 甲基化 肿瘤
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Twist基因与乳腺癌关系的研究进展 被引量:1
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作者 伏铠文 肖秀丽 《川北医学院学报》 CAS 2014年第6期640-644,共5页
乳腺癌的发生和发展是一个多种基因参与调节的复杂过程,近年来研究发现Twist过表达在乳腺癌的发生、侵袭转移、血管生成与肿瘤细胞耐药中发挥重要作用,且其在乳腺癌中的表达对早期诊断和临床个体化治疗有重要意义。
关键词 乳腺癌 twist 侵袭转移
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Twist对小鼠乳腺癌细胞基因表达谱的调控研究 被引量:7
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作者 杨静 顾玉超 于文功 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期1-6,共6页
Twist是一个bHLH(basic Helix-loop-Helix)类型的转录因子,近年来研究发现,Twist在乳腺癌中的表达显著升高,并能促进乳腺癌的转移。为了探索Twist促进乳腺癌转移的分子机制,采用RNA干扰技术在小鼠乳腺癌细胞株4T1中沉默Twist的表达,通... Twist是一个bHLH(basic Helix-loop-Helix)类型的转录因子,近年来研究发现,Twist在乳腺癌中的表达显著升高,并能促进乳腺癌的转移。为了探索Twist促进乳腺癌转移的分子机制,采用RNA干扰技术在小鼠乳腺癌细胞株4T1中沉默Twist的表达,通过全基因组基因芯片技术检测了Twist沉默前后4T1细胞基因表达谱的差异性。体内实验结果证明Twist表达被沉默后4T1细胞的肺转移能力明显被抑制。芯片结果表明:表达差异显著的基因有167条,其中与肿瘤相关的基因有26条,包括15条上调基因和11条下调基因。这些基因中可能存在能被Twist调控并与肿瘤转移相关的基因,为以后研究Twist影响乳腺癌转移的分子机制提供了帮助。 展开更多
关键词 twist乳腺癌 肿瘤转移 基因表达谱
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Twist在几种不同肿瘤细胞系中的差异表达 被引量:3
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作者 刘晓燕 王丽 +1 位作者 何涛 崔维佳 《泸州医学院学报》 2010年第2期128-130,共3页
目的:探讨Twist基因在不同肿瘤细胞系中的表达水平。方法:运用RT-PCR方法检测Twist在人类乳腺癌、结肠癌、肾癌、胃癌、肝癌、正常肝细胞等6种细胞系中mRNA水平上的表达。结果:正常肝细胞系中Twist的相对表达量最低,在不同癌细胞系中,... 目的:探讨Twist基因在不同肿瘤细胞系中的表达水平。方法:运用RT-PCR方法检测Twist在人类乳腺癌、结肠癌、肾癌、胃癌、肝癌、正常肝细胞等6种细胞系中mRNA水平上的表达。结果:正常肝细胞系中Twist的相对表达量最低,在不同癌细胞系中,结肠癌的相对表达量最高,肝癌最低,组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:Twist在不同肿瘤细胞系中的表达差异性可能为肿瘤发生发展的研究以及肿瘤的诊断与鉴别诊断提供一定线索。 展开更多
关键词 细胞株 肿瘤 twist基因 RT-PCR
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