沈景允论治冻结肩经验介绍

总结介绍名中医沈景允治疗冻结肩的临床经验。沈景允认为阳气不足为冻结肩发病的主要病因。阳气温煦失常,则寒从中生、筋脉失养,经络循行不畅、气血凝滞,久之则挛急疼痛,进而导致肩关节筋骨失衡、屈伸不利为本病关键病机。治疗上首先着眼整体,重视阳气盛衰;其次重视局部,疏经通络;通过辨构论治,恢复肩关节筋骨平衡。采用独创二位分粘法结合推拿治疗冻结肩,术后配合八段锦导引功法防止再次粘连。简而言之,沈景允基于“阴阳为纲、经络为目、筋骨为轴”理论,以调和阴阳、治筋整骨、辨构论治为治疗原则,防、治、养结合,内外兼顾论治冻结肩,收效甚佳。

人肾癌细胞原代培养方法比较及其生长特性观察

目的:分析比较三种方法分离人肾癌组织原代培养肾癌细胞及其传代能力,探讨建立理想的人肾癌细胞体外实验模型。方法:分别采用组织块贴壁法、机械分散法及差速贴壁分离法、混合酶消化法及差速贴壁分离法进行人肾癌细胞的体外培养,并从细胞形态学、表型、增殖生长曲线和细胞活力曲线等方面进行对比研究。结果:三种方法均可获得原代肾癌细胞,采用组织块贴壁法可获得较多数量的肾癌细胞,采用混合酶消化加分步贴壁后培养情况最好,数量较多,形态完整,第4代后肿瘤细胞状态稳定,增殖活跃,有明显的对数生长期,且与肾癌细胞系769-P细胞具有相似的表面抗原表达。结论:采用混合酶消化加分步贴壁法可获得较纯的肿瘤细胞,培养生长时间短,成功率高,适宜体外原代培养。

补肾活血方联合序贯法在中重度宫腔粘连治疗中的疗效

目的:探讨补肾活血方联合序贯法在中重度宫腔粘连的有效性及安全性。方法:采用随机对照试验进行前瞻性研究,选择2019年1月—2020年12月在医院行宫腔镜下宫腔粘连分离术的中重度宫腔粘连患者,同时为符合纳入标准及同意受试的患者,根据术后用药分为实验组(补肾活血方联合序贯法)和对照组(序贯法),疗程均为3个月。实验组61例,对照组57例,以患者的术后3个月宫腔粘连评分、子宫内膜厚度、宫腔容积、月经恢复情况、子宫内膜血流参数、中医伴随症候、术后1年临床妊娠率及流产率和术后3个月肝肾功能及不良反应作为观察指标。结果:用药后,2组均能减轻宫腔粘连程度,增加子宫内膜厚度、宫腔容积和月经量,降低子宫内膜血流参数的RI和PI,升高VI、FI和VFI,且实验组优于对照组(P<0.05)。在中医伴随症候中,小腹胀痛、腰膝酸软、头晕耳鸣、足跟痛、畏寒肢冷及夜尿多方面均较对照组显著减轻,且实验组总疗效优于对照组(P<0.05)。随访1年,实验组在提高临床妊娠率方面明显优于对照组(P<0.05),但在流产率方面差异无统计学意义(P>0.05)。另外研究过程中未见与服用中药相关的不良反应,临床使用安全。结论:补肾活血方联合序贯法可减轻中重度宫腔粘连患者行宫腔镜下宫腔粘连分离术后的宫腔粘连程度,改善子宫内膜厚度、宫腔容积及子宫内膜血流参数,增加月经量,并减少中医伴随症候,提高临床妊娠率。综合疗效优于单纯序贯疗法,临床使用安全。

磁性分离法高效快速培养原代C57BL/6J小鼠眼动脉平滑肌细胞

目的建立一种高效、快速地培养原代C57BL/6J小鼠眼动脉平滑肌细胞(OASMC)的磁性分离法。方法综合组织块贴壁法和酶消化法2种方法,通过优化胶原蛋白酶、琼脂糖氧化铁(Ⅱ,Ⅲ)磁性纳米粉末(以下简称铁粉)配方和铁粉粒径等关键实验环节,培养高纯度OASMC。原代OASMC培养和鉴定步骤:在无菌条件下,向小鼠左心室依次注入4℃PBS、琼脂糖铁粉混悬液,在解剖显微镜下分离出眼动脉。将其划至长为1.0~1.5 mm大小的组织块,用胶原蛋白酶消化45 min后,采用磁力分离器将眼动脉组织块从胶原蛋白酶中分离出来,均匀接种于培养皿中,置于37℃、5%CO_(2)条件下培养,待细胞生长至85%~90%时进行传代。对第3~7代细胞进行形态学及免疫荧光染色鉴定。结果通过改变不同条件确定了最佳实验条件:胶原蛋白酶与M199培养基比例为0.0015 g∶6 mL,胶原蛋白酶消化时间为45 min,铁粉粒径为5μm,琼脂糖与铁粉的比例为0.05 g∶0.05 g;琼脂糖铁粉混悬液的温度为37℃,注射器型号为0.6 mm×25 mm TWLB。原代培养2 d后可见眼动脉组织块周围有长梭形细胞爬出,呈放射状分布。培养7 d后,通过更换新的培养基铁粉逐渐减少,细胞生长速度加快,细胞形态呈现典型长梭形。免疫荧光染色结果显示所培养的OASMC表达α-平滑肌肌动蛋白。结论此方法培养原代C57BL/6J小鼠OASMC具有快速、高效、细胞纯度高等特点,为眼动脉相关疾病的药物活性筛选奠定了基础。