核转录因子Sp1在二氧化硅活化的Ⅱ型肺泡细胞中的表达及作用

目的 研究二氧化硅（SiO2）刺激的Ⅱ型肺泡细胞（A549）中核转录因子Sp1表达和定位的动态变化，探讨其在矽肺发生发展中的作用。方法 复制SD大鼠矽肺模型，免疫组化检测体内SiO2刺激的Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化；逆转录-聚合酶链反应检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1 mRNA的动态变化；免疫细胞化学、Western印迹检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化。结果 大鼠矽肺模型中，SiO2刺激组与空白对照组相比，Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达上调，于第7-14天达高峰；体外SiO2作用A549细胞30—960min，Sp1 mRNA表达呈现先升后降，峰值位于60min；Sp1总蛋白和核蛋白表达亦呈现先升后降的趋势，总蛋白表达峰值位于120min，核蛋白峰值位于240min；Sp1蛋白于60min开始发生明显的核移位，240min时核移位最明显。结论 SiO2能通过增强Ⅱ型肺泡细胞（A549）中Sp1的表达和核移位，从而在矽肺的发生发展过程中起重要的作用。

布地奈德对哮喘小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响

目的探讨布地奈德对哮喘小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响。方法40只昆明小鼠随机分为哮喘模型组(A组)、治疗对照组(B组)、布地奈德治疗组(C组)及正常对照组(D组),以卵蛋白致敏和激发制备哮喘小鼠模型,透射电镜下观察肺泡Ⅱ型细胞形态。结果A、B组小鼠可见肺泡Ⅱ型细胞板层小体有明显排空和空泡化改变,C组小鼠肺泡Ⅱ型细胞板层小体排空和空泡化改变减轻。结论布地奈德可减轻哮喘诱发的肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构损伤,肺泡Ⅱ型上皮细胞可能是抗哮喘治疗的一个重要作用靶点。

钙信号转导途径介导肺炎链球菌侵袭人肺Ⅱ型上皮细胞

用F actin特异性FITC phalloidin荧光染料 ,观察肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae)作用A54 9细胞前后的F actin细胞骨架重排情况 ;用细胞松弛素D预处理A54 9细胞 ,观察肺炎链球菌对A54 9细胞的侵袭率 ;使用Datrolene预处理A54 9细胞 ,观察其与F actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系 ;用Fura 2 AM荧光探针负载A54 9细胞后测定肺炎链球菌粘附A54 9细胞后的胞内Ca2 +浓度。结果发现肺炎链球菌作用A54 9细胞后 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ;而松弛素D可明显降低肺炎链球菌对A54 9细胞的侵袭率 ;肺炎链球菌粘附A54 9细胞后胞内Ca2 +高于对照 ;Datrolene可部分抑制A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,且与F actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系。以上结果提示肺炎链球菌可通过Ca2 +细胞信号转导途径触发A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,进而导致肺炎链球菌侵袭A54 9细胞。

博莱霉素诱导大鼠实验性肺纤维化肺泡Ⅱ型上皮细胞MMP-2和MT1-MMP mRNA表达的动态变化

目的 探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞MMP 2和MT1 MMP在肺纤维化中的表达及意义。方法 气管内注射博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型 ,在肺纤维化形成过程的不同阶段分离和提取肺泡Ⅱ型上皮细胞 ,应用RT PCR方法 ,观察其MMP 2及MT1 MMPmRNA表达的动态变化。结果 (1)在博莱霉素作用后 1～ 7d大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞MT1 MMP转录水平明显增高 ,分别为对照组的 1.8和 1.9倍 ;(2 )肺纤维化早期肺泡Ⅱ型上皮细胞MMP 2转录水平也增强。结论 肺泡上皮不单是致纤维化因素的损伤对象 ,其损伤后活跃增生的肺泡Ⅱ型上皮细胞可以通过释放MT1 MMP ,催化MMP 2 ,从而引起和 (或 )

肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX与特发性肺间质纤维化的关系

目的研究肺间质纤维化模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX表达的改变。方法 SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组及川芎嗪预防用药组,每组6只,分别于给药7、14、28 d后提取肺泡Ⅱ型上皮细胞体外培养,免疫组织化学法检测WWOX蛋白表达。结果与假手术组比较,注射博莱霉素7 d后模型组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因WWOX蛋白表达无显著变化。用药14、28 d后,WWOX蛋白表达则明显下降。而川芎嗪预防用药组WWOX蛋白表达比模型组有显著上调。结论肺间质纤维化过程中可能存在染色体脆性位点基因WWOX的改变,川芎嗪可以在一定程度上抑制这种改变而发挥防治作用。

用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i

肺炎链球菌触发人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排与TPK信号转导的相关性研究

目的 :通过体外实验 ,研究Streptococcuspneumoniae(S pn)是否通过肺Ⅱ型上皮细胞 (A5 4 9)酪氨酸蛋白激酶 (TPK)信号转导途径触发微丝肌动蛋白 (Filamentousactin ,F actin)细胞骨架重排 ,进而导致S pn对A5 4 9细胞的侵袭。 方法 :采用F actin特异性FITC phalloidin荧光染料 ,观察S pn作用A5 4 9细胞前后的F actin细胞骨架重排情况 ,依照重排百分率得分标准以 (% )表示 ;用F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松驰素D预处理A5 4 9细胞 ,观察S pn对A5 4 9细胞的侵袭率 ;使用TPK信号转导抑制剂Genistein预处理A5 4 9细胞 ,观察其与F actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系。结果 :S pn作用A5 4 9细胞后 ,经FITC phalloidin荧光染色 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ;F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松驰素D可明显降低S pn对A5 4 9细胞的侵袭率 ,在其浓度为 0 2 5 μg/ml时 ,未得到可测的细菌数 ;TPK信号转导途径抑制剂可部分抑制A5 4 9细胞F actin细胞骨架重排 ,并与F actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系 ,其相关系数分别为rTPK= 0 91(P <0 0 5 )。结论 :上述结果提示S pn可通过TPK细胞信号转导途径触发A5 4 9细胞F actin细胞骨架重排 ,进而导致S pn侵袭A5 4 9细胞。

肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT与肺间质纤维化的关系

目的：研究肺间质纤维化模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT表达的改变.方法：SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组及川芎嗪用药组,分别于给药7、14、28 d后提取肺泡Ⅱ型上皮细胞行体外培养,RT-PCR法检测FHIT基因mRNA表达的改变,免疫组织化学检测FHIT蛋白表达.结果：与假手术组比较,造模7d后模型组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞染色体脆性位点基因FHIT mRNA及蛋白表达无变化.用药14、28 d后,FHIT基因mRNA及蛋白表达则明显下降.而川芎嗪组比模型组有显著上调.结论：在肺间质纤维化过程中存在染色体脆性位点基因FHIT的改变,川芎嗪可以一定程度上抑制这种改变从而起到防治作用.

放射性间质性肺炎的病变规律及其机理研究

本实验采用203只雄性Wistar大鼠经^(60)Coγ线胸部(全胸、半胸),单次(10、30、50、70Gy)及分次(累积30、60Gy)照射。于照射后0.5,1、2、3、6、9、12个月分批活杀,通过病理学(光镜、电镜)、免疫组化、定性定量等多项指标观察结果表明:于30Gy剂量组发生了典型放射性间质性肺炎(RIP)。肺脏病变呈进行性发展,可分为四期:渗出期、肉芽生长期、纤维增生期、胶原化期。认为RIP分为四期更能较准确客观反映其病变的发生发展过程。照射后肺组织肥大细胞、Ⅱ型细胞均可能参与其肺纤维化形成。

新疆绵羊肺腺瘤病回顾性研究

本文对1955～1980年间几次绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis,SPA)调查中的部分病例进行了回顾性研究。在31例 SPA 肺病变中,发现有5例并发绵羊进行性肺炎或梅迪(maedi)病变;在所检查的12例纵膈淋巴结中只有1例有转移的腺瘤病灶,转移率为8.3%。6例的超微结构表明腺瘤细胞起源于Ⅱ型肺细胞。其中2例的瘤细胞有病毒从细胞表面出芽,病毒体形态上类似于逆转录病毒。

大容量肺灌洗对家兔肺脏影响的研究

模拟临床大容量肺灌洗方法，用生理盐水对家兔进行右肺灌洗。结果显示：灌洗后３天支气管肺泡灌洗液中总磷脂、二棕榈酰卵磷脂含量明显降低，蛋白质含量增高；灌洗后即刻的肺形态学表现为肺泡结构轻度紊乱等；１５天时，上述变化均趋于恢复。提示：大容量肺灌洗可因所致肺表面活性物质大量丢失及肺组织形态学改变而对肺脏产生一定影响。

经气管灌注血管紧张素Ⅱ导致凋亡性急性肺损伤(英文)

为研究外源性血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANG)在急性肺损伤和肺泡上皮细胞凋亡中的作用,经气管分别给雄性Wistar大鼠(175～200g)灌注ANG、ANG加caspase抑制剂ZVAD-fmk、ANG加ANG受体1阻断剂losartan和仅灌注磷酸盐缓冲溶液(PBS)。6或20h后在体灌洗动物肺脏,测定灌洗液中血红蛋白(hemoglobin,Hb)和荧光物质(BODIPY)标定的白蛋白含量(在灌洗前15min静脉注入BODIPY-白蛋白)。TUNEL测定显示,灌注ANG6h后,支气管和肺泡上皮细胞内标定的DNA片断显著增加(P<0.05);ANG所致的DNA片断增加可被同时灌注ZVAD-fmk或losartan阻断。灌注ANG后免疫标定caspase3阳性细胞数量显著增多(P<0.01),ZVAD-fmk或losartan同样显著减少caspase3阳性细胞的数量。灌注ANG显著增加肺泡灌洗液中荧光标定的白蛋白(P<0.01)和Hb的含量(P<0.05);ZVAD-fmk或losartan亦显著抑制荧光白蛋白和Hb含量的变化。结果表明,肺泡上皮细胞在体暴露于外源性ANG足以引起ANG受体1介导的上皮细胞凋亡和肺泡屏障损伤。

肺炎链球菌在体外触发人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排

目的 通过体外实验研究肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae ,S .pn)侵袭A54 9细胞和微丝肌动蛋白细胞骨架重排之间的关系。方法 采用F actin特异性FITC phalloidin荧光染料 ,观察S .pn作用于A54 9细胞前后的F actin细胞骨架重排情况 ;用F actin细胞骨架重排抑制剂———细胞松弛素D预处理A54 9细胞 ,观察S .pn对A54 9细胞的侵袭率 ;分别使用PLC、TPK信号转导抑制剂U7312 2、Genistein处理因素预处理A54 9细胞 ,观察其与F actin细胞骨架重排的关系。结果 S .pn作用A54 9细胞后 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ;F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低S .pn对A54 9细胞的侵袭率 ,在其浓度为 0 .2 5 μg ml时 ,未得到可测的细菌数 ;PLC(磷脂酶C)、TPK(酪氨酸蛋白激酶 )信号转导途径抑制剂可部分抑制A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,其相关系数分别为 :rPLC =- 0 .88(P <0 .0 5 ) ;rTPK =- 0 .91(P <0 .0 5 )。S .pn细胞壁作用A54 9细胞后 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ,二者间存在剂量依赖关系。结论 S .pn可通过PLC、TPK细胞信号转导途径触发A54 9细胞F actin细胞骨架重排 ,进而导致S .pn侵袭A54 9细胞。

犬急性出血坏死性胰腺炎肺Ⅱ型上皮细胞的酶组织化学改变

急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）易并发呼吸衰竭。本研究采用犬制作ＡＨＮＰ肺损伤模型，对肺Ⅱ型上皮细胞辅酶Ⅰ黄递酶等１１种酶进行观察。结果显示：ＡＨＮＰ组肺Ⅱ型上皮细胞定位于内质网的酶有辅酶Ⅱ黄递酶和中性非特异性脂酶；定位于线粒体的酶有细胞色素氧化酶、辅酶Ⅰ黄递酶、苹果酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶；与细胞浆有关的酶有乳酸脱氢酶、α－甘油磷酸脱氢酶和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶。与对照组比较，ＡＨＮＰ组上述酶的活性明显下降，而与溶酶体有关的酸性磷酸酶和β－葡萄糖胺则显著升高。作者认为，ＡＨＮＰ组上述酶活性的明显下降，导致肺Ⅱ型上皮细胞糖代谢严重障碍和表面活性物质合成减少，从而引起肺不张、肺通气功能障碍，是引起呼吸衰竭的重要原因之一。

经后上腰腹膜后引流术──治疗腹膜后型急性坏死性胰腺炎的引流术式

经后上腰腹膜后引流术──治疗腹膜后型急性坏死性胰腺炎的引流术式张肇达，严律南，韦靖江，吴和光急性坏死性胰腺炎时胰液通常在腹膜后间隙广泛蔓延，并造成组织坏死和感染；由于手术引流不彻底形成的继发脓肿也多发生在此间隙，井成为术后死亡的主要原因。为提高引流术...

氧自由基与急性胰腺炎

氧自由基与急性胰腺炎陈海龙，吴咸中，郑显理近年来，急性胰腺炎（ＡＰ）的病因及发病机理的研究又有一定进展，但其治疗效果仍不满意。究其原因与ＡＰ的发病机理尚未完全阐明有关。现有的研究结果表明，氧自由基（ＯＦＲ）在ＡＰ的病理机制中具有重要作用。为将ＡＰ的病...