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禽病原性大肠杆菌1型菌毛的分离与鉴定 被引量:9
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作者 高崧 姜焱 +2 位作者 刘业兵 张如宽 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期521-526,共6页
以旋涡混合法使禽病原性大肠杆菌分离株566 、1794 和TK3 菌毛脱落,经硫酸铵沉淀、透析后进行蔗糖密度梯度离心,收集密度为110 至115g/cm3 的蛋白带,经SDSPAGE测定,3 株菌菌毛蛋白的分子量分别... 以旋涡混合法使禽病原性大肠杆菌分离株566 、1794 和TK3 菌毛脱落,经硫酸铵沉淀、透析后进行蔗糖密度梯度离心,收集密度为110 至115g/cm3 的蛋白带,经SDSPAGE测定,3 株菌菌毛蛋白的分子量分别在175 、170 和170kD;提纯菌毛保留了甘露糖敏感性凝集豚鼠红细胞的能力,证明它们为1 型菌毛;从1794 株提取的1 型菌毛免疫BALB/C 小鼠产生的高免血清在Western blot 中与3 个菌株的相应菌毛蛋白均呈阳性反应。上述结果表明,受检的3 株禽病原性大肠杆菌均表达了1 型菌毛,其分子量在175 ~170kD 之间,3 个菌株的1 展开更多
关键词 大肠杆菌 1型菌毛 分离 鉴定 禽源 病原菌
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禽病原性大肠杆菌1型菌毛主要亚单位结构基因的克隆、测序与表达 被引量:5
2
作者 高崧 彭大新 +2 位作者 吴晓东 张如宽 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期292-298,共7页
从禽源大肠杆菌037(O78)、166(O78)、120(O18)分离株和猪源大肠杆菌107/86分离株分别提取基因组DNA,并以此为聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)的模板,扩增上述分离株的1型菌毛主要亚单位结构基因pilA,通过其编码的主要菌毛亚... 从禽源大肠杆菌037(O78)、166(O78)、120(O18)分离株和猪源大肠杆菌107/86分离株分别提取基因组DNA,并以此为聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)的模板,扩增上述分离株的1型菌毛主要亚单位结构基因pilA,通过其编码的主要菌毛亚单位FimA蛋白氨基酸的序列比较发现:3个禽源株间FimA的同源性为94 3%至99 0%;禽源株和猪源株间FimA的同源性为89 6%至91 1%。通过对重组大肠杆菌的菌体裂解物的SDS PAGE电泳分析及Westernblot分析,禽源大肠杆菌O78037株、O18120株出现了一致的强反应,O78166株反应较弱,而猪源大肠杆菌107/86株反应最弱。这些结果表明:禽源大肠杆菌与猪源大肠杆菌1型菌毛间存在抗原多样性,这种多样性甚至出现在禽病原性大肠杆菌同一血清型的2个不同分离株之间,如O78037株O78166株之间,尽管其FimA氨基酸的同源性很高,为99 0%。 展开更多
关键词 病原性大肠杆菌 1型菌毛 亚单位 结构基因 基因克隆 基因测序 基因表达
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鸡大肠杆菌多价1型菌毛亚单位疫苗在鸡体内的免疫原性研究 被引量:7
3
作者 戴鼎震 汤厚宽 +1 位作者 李复中 张纪林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期338-340,共3页
用 1日龄雏鸡免疫评价了鸡大肠杆菌多价 1型菌毛油乳剂苗在鸡体内的免疫原性。用含 1型菌毛的 3个不同血清型 (O1、O78及O88)菌株 ,大容量培养后提取菌毛制备多价菌毛油乳剂苗。接种多价菌毛油乳剂苗的鸡用同源菌株攻毒后出现 10 %~ 11... 用 1日龄雏鸡免疫评价了鸡大肠杆菌多价 1型菌毛油乳剂苗在鸡体内的免疫原性。用含 1型菌毛的 3个不同血清型 (O1、O78及O88)菌株 ,大容量培养后提取菌毛制备多价菌毛油乳剂苗。接种多价菌毛油乳剂苗的鸡用同源菌株攻毒后出现 10 %~ 11.2 %的死亡率 ,阳性对照组鸡攻毒后出现 70 %~ 80 %的死亡率 ;用异源菌株 (O36)攻毒后 ,免疫鸡出现 33.3%的死亡率 ,而未免疫阳性对照组鸡死亡率达 70 %。免疫鸡在气囊 ,心包及肝脏的病变非常轻微 。 展开更多
关键词 鸡大肠肝菌 1型菌毛 油乳剂疫苗 免疫原性
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鸡源大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)克隆 被引量:4
4
作者 戴鼎震 郑明球 +1 位作者 蔡宝祥 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期85-88,共4页
根据人源大肠杆菌 1型菌毛结构基因 (pilA)DNA序列 ,在其保守区设计了 1对带有 BamHI/Hind Ⅲ酶切位点的引物 ,经PCR扩增 ,从 2 4株鸡源大肠杆菌致病株染色体中得到 2 1个大小约 6 5 7bp的阳性产物 ,经酶切、连接、转化及筛选 ,得到 3... 根据人源大肠杆菌 1型菌毛结构基因 (pilA)DNA序列 ,在其保守区设计了 1对带有 BamHI/Hind Ⅲ酶切位点的引物 ,经PCR扩增 ,从 2 4株鸡源大肠杆菌致病株染色体中得到 2 1个大小约 6 5 7bp的阳性产物 ,经酶切、连接、转化及筛选 ,得到 3种来自不同血清型鸡源大肠杆菌 (O1、O78及O88)PCR产物的阳性克隆。经核酸序列测定 ,确认所克隆的外源基因为 展开更多
关键词 鸡大肠杆菌 1型菌毛 结构基因 克隆
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3个血清型鸡源大肠杆菌1型菌毛蛋白抗原位点变异分析 被引量:3
5
作者 戴鼎震 王晓丽 +6 位作者 侯继波 何家惠 戴建君 恽时锋 赵永前 汤厚宽 李鹏 《江苏农业学报》 CSCD 2003年第2期100-103,共4页
采用Goldkey及DNA Star分析软件对发表的3个不同血清型的鸡大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)进行同源性及抗原位点分析。结果显示,3种鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))l型菌毛pilA基因相似性为91.36%~98.38%,所编码的氨基酸同源性为93... 采用Goldkey及DNA Star分析软件对发表的3个不同血清型的鸡大肠杆菌1型菌毛结构基因(pilA)进行同源性及抗原位点分析。结果显示,3种鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))l型菌毛pilA基因相似性为91.36%~98.38%,所编码的氨基酸同源性为93.50%~97.84%;3种血清型鸡大肠杆菌(O_1、O_(78)及O_(88))1型菌毛蛋白二级结构在1~73位及150~185位氨基酸的二级结构基本相似,而111~150位氨基酸的α螺旋与β折叠的数量有所不同。菌毛蛋白亲水性、抗原性及抗原决定簇预测表明,来源于3种血清型大肠杆菌的1型菌毛蛋白在l~110位及150~184位氨基酸存在相似的二级结构及抗原位点,且不同血清型之间存在一定的共同抗原。 展开更多
关键词 血清型 大肠杆菌 1型菌毛 蛋白抗原 抗原位点 变异分析
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鸡源大肠杆菌1型菌毛菌株粘附鸡呼吸道上皮的电镜观察 被引量:3
6
作者 戴鼎震 赵永前 +5 位作者 侯继波 何家惠 戴建君 恽时锋 王晓丽 董晨红 《江苏农业学报》 CSCD 2002年第2期103-105,共3页
用电子显微镜观察了鸡大肠杆菌 (O78) 1型菌毛在不同温度中的表达情况。细菌在营养肉汤中 37℃培养 4 8h可表达大量的菌毛 ,而 18℃培养 4 8h则缺乏菌毛。扫描电镜观察结果 ,37℃培养的鸡大肠杆菌可大量粘附鸡呼吸道上皮粘膜 ,而 18℃... 用电子显微镜观察了鸡大肠杆菌 (O78) 1型菌毛在不同温度中的表达情况。细菌在营养肉汤中 37℃培养 4 8h可表达大量的菌毛 ,而 18℃培养 4 8h则缺乏菌毛。扫描电镜观察结果 ,37℃培养的鸡大肠杆菌可大量粘附鸡呼吸道上皮粘膜 ,而 18℃培养的同种菌则不能粘附 ,表明鸡大肠杆菌粘附鸡呼吸道上皮的过程由 展开更多
关键词 鸡源大肠杆菌 1型菌毛菌株 粘附 鸡呼吸道上皮
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鸡源致病性大肠杆菌1型菌毛pilA基因的PCR扩增、克隆及序列分析 被引量:3
7
作者 叶如俊 王红宁 谭炳乾 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期83-88,共6页
研究选择从四川规模化鸡场分离鉴定的5株优势血清型鸡源致病性大肠杆菌代表株(O89,O119,O141,O127)的1型菌毛pilA基因的PCR扩增片段分别定向克隆到pUC18质粒的多克隆位点,并转化到DH5α株大肠杆菌载体菌中,对目的基因的序列测定结果表... 研究选择从四川规模化鸡场分离鉴定的5株优势血清型鸡源致病性大肠杆菌代表株(O89,O119,O141,O127)的1型菌毛pilA基因的PCR扩增片段分别定向克隆到pUC18质粒的多克隆位点,并转化到DH5α株大肠杆菌载体菌中,对目的基因的序列测定结果表明:5个克隆片段均含有1型菌毛pilA基因的全序列,全长459bp,编码信号肽和结构蛋白。用生物软件(DNASTAR)对9株大肠杆菌1型菌毛pilA基因序列、氨基酸序列、菌毛蛋白质二级结构预测及抗原性进行了分析比较,结果显示:鸡源致病性大肠杆菌1型菌毛间具有同源性,1型菌毛间存在一定的相同抗原位点。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 1型菌毛 PILA基因 PCR扩增 克隆 序列分析
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禽源和猪源大肠杆菌1型菌毛主要亚单位抗原多样性分子基础的初步研究 被引量:2
8
作者 高崧 彭大新 +2 位作者 吴晓东 张如宽 刘秀梵 《动物医学进展》 CSCD 2003年第1期69-73,共5页
从禽源大肠杆菌037(O78)、166(O78)、120(O18)分离株和猪源大肠杆菌107/86分离株分别提取基因组DNA,并以此为聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)的模板,扩增上述分离株的1型菌毛主要亚单位结构基因pilA,得到了大小约570bp的扩... 从禽源大肠杆菌037(O78)、166(O78)、120(O18)分离株和猪源大肠杆菌107/86分离株分别提取基因组DNA,并以此为聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)的模板,扩增上述分离株的1型菌毛主要亚单位结构基因pilA,得到了大小约570bp的扩增产物,将此扩增产物克隆于T载体,通过内切酶酶切分析得到4个阳性重组质粒;对上述4个大肠杆菌分离株的pilA基因进行序列测定,通过其编码的主要菌毛亚单位FimA蛋白氨基酸的序列比较发现:3个禽源株间FimA的同源性为94.3%至99.0%;禽源株和猪源株间FimA的同源性为89.6%至91.1%。在pilA开放性阅读框所编码的FimA182个氨基酸序列中,禽源大肠杆菌O78血清型的2个分离株037株和166株间只有2个氨基酸不同,其同源性为99.0%。 展开更多
关键词 猪源大肠杆菌 禽源大肠杆菌 l型菌毛 亚单位 抗原多样性 血清型
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鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白氨基酸序列的变异 被引量:1
9
作者 戴鼎震 王晓丽 +3 位作者 赵永前 甘黎明 冯秀丽 夏兴霞 《江苏农业学报》 CSCD 2004年第3期197-198,共2页
关键词 大肠杆菌 1型菌毛蛋白 氨基酸序列 粘附因子
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嗜水气单胞菌J-1株粘附素及其受体分析 被引量:10
10
作者 朱兴国 范红结 +1 位作者 陆承平 陈怀青 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期82-84,共3页
以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有... 以EPC细胞和HEp 2细胞为细胞模型 ,用嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila ,Ah)J 1株进行粘附试验 ,同时以Ah4型菌毛的抗血清作粘附抑制试验 ,用以分析AhJ 1株的粘附素及其受体。EPC细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,AhJ 1株粘附素受体具有甘露糖、胆固醇成分 ,有少量半乳糖成分 ,无葡萄糖成分。HEp 2细胞粘附和粘附抑制试验证实 ,与其它非菌毛粘附素如S层及外膜蛋白相比 ,Ah 4型菌毛的粘附作用较为显著。抗 4型菌毛抗体抑制细菌的粘附力达 80 %以上。抗S层、外膜蛋白抗体也能使细菌的粘附力下降 ,表明Ah的粘附作用由菌毛粘附素与非菌毛粘附素共同参与。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌J-1 4型菌毛 细胞粘附和粘附抑制试验 粘附素受体
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地高辛标记大肠杆菌1型菌毛结构基因核酸探针对鸡大肠杆菌分离株的检测 被引量:1
11
作者 戴鼎震 陆福军 +1 位作者 龚大春 杨待建 《畜牧与兽医》 北大核心 2000年第4期8-9,共2页
将PCR扩增的鸡大肠杆菌 1型菌毛蛋白结构基因 (pilA)用地高辛标记成核酸探针与分属 2 8个血清型的 50个鸡大肠杆菌分离株进行斑点杂交 ,阳性率达 84% ,用甘露糖敏感血凝试验 (MSHA)检测阳性率为 72 % ,表明核酸杂交比MSHA法更敏感。
关键词 大肠杆菌 型菌毛结基因 核酸探针 检测
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鸡大肠杆菌1型菌毛fimH蛋白结构基因克隆及序列测定 被引量:4
12
作者 戴鼎震 崔生玲 +2 位作者 蒋加进 陈钟鸣 张志成 《金陵科技学院学报》 2011年第4期69-74,共6页
根据已发表的大肠杆菌1型菌毛fimH基因序列,以产1型菌毛菌株MG2(O11)、YR5(O78)、MG12(O18)基因组DNA为模板,对大肠杆菌1型菌毛fimH基因进行扩增并与国外同源菌株基因序列进行比对。结果表明:核酸同源性分别为97.8%、99.7%、97.8%,氨基... 根据已发表的大肠杆菌1型菌毛fimH基因序列,以产1型菌毛菌株MG2(O11)、YR5(O78)、MG12(O18)基因组DNA为模板,对大肠杆菌1型菌毛fimH基因进行扩增并与国外同源菌株基因序列进行比对。结果表明:核酸同源性分别为97.8%、99.7%、97.8%,氨基酸序列的相似性分别达到98.7%、99.3%、98.0%。运用DNA-STAR软件对fimH蛋白抗原决定簇进行预测分析,发现它们的抗原决定簇基本相似,这说明fimH基因序列及氨基酸序列的变异并未对fimH蛋白的抗原结构产生明显影响。 展开更多
关键词 鸡大肠杆菌 1型菌毛 fimH基因 克隆 序列测定
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鸡大肠杆菌1型菌毛基因簇E基因的克隆与序列测定 被引量:1
13
作者 薛茂云 蒋加进 +4 位作者 陈钟鸣 崔生玲 张志成 高琴 戴鼎震 《金陵科技学院学报》 2010年第4期67-72,共6页
鸡大肠杆菌1型菌毛是一种重要的致病因子,可以黏附到家禽机体的呼吸道上皮,从而引起机体发病。1型菌毛基因簇由fimB,fimE,fimA,fimI,fimC,fimD,fimF,fimG和fimH等组成。在国外K12株大肠杆菌1型菌毛fimE基因是一个大小为为555 bp,具有相... 鸡大肠杆菌1型菌毛是一种重要的致病因子,可以黏附到家禽机体的呼吸道上皮,从而引起机体发病。1型菌毛基因簇由fimB,fimE,fimA,fimI,fimC,fimD,fimF,fimG和fimH等组成。在国外K12株大肠杆菌1型菌毛fimE基因是一个大小为为555 bp,具有相变开关功能的片段,我国鸡源大肠杆菌1型菌毛fimE基因序列尚未见报道。本研究通过聚合酶链式反应扩增、克隆到了鸡大肠杆菌MG10株1型菌毛的fimE基因,测定了基因序列,并运用相关软件将其翻译成氨基酸序列。通过对fimE基因序列分析比较及对fimE蛋白进行预测分析,发现鸡大肠杆菌与K12大肠杆菌1型菌毛的fimE基因之间的同源性达到99.1%以上;亲水性、抗原性预测表明,二者之间都存在密切的相似相关性。结果表明,核酸同源性为99.5%。fimE基因的核苷酸序列中有5个核苷酸残基发生了改变,而预测氨基酸序列变化仅第184位氨基酸由缬氨酸V变为丙氨酸A;其余无核苷酸的变化。 展开更多
关键词 大肠杆菌 1型菌毛 fimE结构基因 PCR
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鸡大肠杆菌1型菌毛疫苗的免疫原性
14
作者 甘黎明 王晓丽 +3 位作者 刘洪珍 夏兴霞 戴鼎震 秦爱建 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期322-325,共4页
将由DNA-Star软件分析得到的具有1型菌毛抗原差异性的鸡大肠杆菌M10(O11)、GX7(O78)及YR10(O18)株,分别经营养肉汤37 ℃、48 h大容量培养后,提取O18菌毛制成单价1型菌毛油乳剂亚单位疫苗,制备O18全菌灭活疫苗及O11、O78、O18多价灭活疫... 将由DNA-Star软件分析得到的具有1型菌毛抗原差异性的鸡大肠杆菌M10(O11)、GX7(O78)及YR10(O18)株,分别经营养肉汤37 ℃、48 h大容量培养后,提取O18菌毛制成单价1型菌毛油乳剂亚单位疫苗,制备O18全菌灭活疫苗及O11、O78、O18多价灭活疫苗.将4周龄SPF鸡分别免疫接种O18菌毛油乳剂疫苗(每雏菌毛免疫量 200 μg)和O18菌毛菌体灭活疫苗,均隔离饲养至7周龄,进行后胸气囊攻毒.结果表明,未免疫鸡的死亡率为66.67%~88.88%;免疫鸡用同源菌株攻毒死亡率为0;用异源菌株YR17(O2)攻击后死亡率为6.25%~41.17%.另有SPF鸡免疫O11-O78-O18多价菌毛菌体灭活油乳剂疫苗,隔离饲养至7周龄同法攻击,结果显示,免疫鸡用同源混合菌株攻击的死亡率为13.33%,未免疫攻击的死亡率为70.00%;免疫鸡用异源菌株O2攻击的死亡率为3.33%,未免疫鸡为61.53%.表明多价菌毛1型灭活疫苗不仅具有良好的免疫原性,而且具有一定的交叉保护作用. 展开更多
关键词 鸡大肠杆菌 1型菌毛 疫苗 免疫原性
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鸡致病性大肠杆菌O_1、O_2和O_(78)Ⅰ型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析
15
作者 王忠山 《福建畜牧兽医》 2009年第5期10-13,共4页
提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA作模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出0.55KB的I型菌毛结构基因(piliA)。将扩增得到的piliA基因片段,用TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼... 提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA作模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出0.55KB的I型菌毛结构基因(piliA)。将扩增得到的piliA基因片段,用TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到含阳性重组子的菌株,提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定,结果证实,所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因。经DNA序列分析,其结构基因阅读框架大小为549bp,但其中O1菌株I型菌毛基因在第72位发生突变,有6个碱基插入。经DNAStar核酸分析软件分析,3个基因同源性为89.9%~92.0%。 展开更多
关键词 鸡致病性大肠杆菌 I型菌毛 TA 克隆 同源性
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尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH基因真核表达质粒的构建及表达
16
作者 尹晓琳 张永红 魏林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期41-43,共3页
目的 构建以尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛 fimH基因为靶位的真核表达质粒 ,并使其在小鼠肌肉中表达。 方法 应用PCR方法及基因重组技术 ,克隆了尿路致病性大肠杆菌标准菌株J96 fimH基因 ,并将fimH基因插入真核表达载体pcDNA3中。免疫BA... 目的 构建以尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛 fimH基因为靶位的真核表达质粒 ,并使其在小鼠肌肉中表达。 方法 应用PCR方法及基因重组技术 ,克隆了尿路致病性大肠杆菌标准菌株J96 fimH基因 ,并将fimH基因插入真核表达载体pcDNA3中。免疫BALB/c小鼠 ,用免疫组化染色法观察表达情况。结果与结论 成功地构建了真核表达质粒pcDNA3-fimH ,序列分析显示 ,fimH基因核苷酸序列与GenBank上登录的一致 ,fimH蛋白在小鼠肌肉组织细胞内呈分散表达。 展开更多
关键词 尿路致病性大肠杆菌 Ⅰ型菌毛 fimH基因 真核表达质粒 构建 基因表达 兔疫组化
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尿路致病性大肠埃希菌1型菌毛黏附特性与分子流行病学分析 被引量:1
17
作者 刘健平 龙一飞 +3 位作者 孙凤 蔡依玫 陈茶 肖倩 《热带医学杂志》 CAS 2023年第6期749-752,767,共5页
目的了解尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)1型菌毛黏附特性、耐药表型及分子流行病学特征,为临床诊疗提供理论基础。方法收集2020年1-11月广东省中医院大学城医院临床分离的80株UPEC,利用VitekⅡ细菌鉴定药敏分析仪鉴定细菌并进行药敏实验。... 目的了解尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)1型菌毛黏附特性、耐药表型及分子流行病学特征,为临床诊疗提供理论基础。方法收集2020年1-11月广东省中医院大学城医院临床分离的80株UPEC,利用VitekⅡ细菌鉴定药敏分析仪鉴定细菌并进行药敏实验。利用PCR方法检测UPEC的1型菌毛fimH基因的携带情况,酵母细胞黏附实验检测UPEC的黏附特性,比较黏附阳性UPEC和黏附阴性UPEC菌株间的抗生素耐药差异。通过随机扩增多态性DNA(RAPD)法分析黏附阳性UPEC间的亲缘关系。结果80株UPEC中1型菌毛fimH基因阳性菌株为74株,占94.5%,其中黏附阳性菌株为37株,占50.0%。黏附阳性UPEC头孢呋辛耐药率(45.9%)和产超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性率(45.9%)均高于黏附阴性UPEC(21.6%、21.6%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。37株黏附阳性UPEC可基因聚类,分为18个基因型,其中以R010基因型为主,包含11株UPEC,占29.7%;另外R006基因型包含4株UPEC,占10.8%;其余基因型均包含1~2株菌。结论临床分离的UPEC 1型菌毛fimH基因携带率高,黏附能力强,应用头孢呋辛抗感染治疗时应注意耐药。黏附阳性菌株虽可聚类,但未出现院内流行性感染趋势。 展开更多
关键词 尿路致病性大肠埃希菌 1型菌毛 黏附 耐药性 随机扩增多态性DNA
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群体感应系统受体SdiA与大肠埃希菌1型菌毛的相关性研究 被引量:1
18
作者 刘健平 肖倩 +3 位作者 孟少伟 曾建明 陈茶 龙一飞 《热带医学杂志》 CAS 2022年第1期1-5,共5页
目的探讨群体感应系统受体SdiA与大肠埃希菌1型菌毛的相关性。方法在有或无群体感应系统信号分子处理下检测大肠埃希菌SM10λpir的野生株、sdiA敲除株和sdiA过表达回复株与酵母细胞的黏附能力,并用荧光定量PCR检测1型菌毛相关基因fimC、... 目的探讨群体感应系统受体SdiA与大肠埃希菌1型菌毛的相关性。方法在有或无群体感应系统信号分子处理下检测大肠埃希菌SM10λpir的野生株、sdiA敲除株和sdiA过表达回复株与酵母细胞的黏附能力,并用荧光定量PCR检测1型菌毛相关基因fimC、fimF的表达情况。转录组测序分析上述菌株1型菌毛相关基因的表达差异。结果群体感应系统信号分子处理组中野生株和sdiA敲除株出现肉眼可见的凝集,强度分别为+和++,而过表达回复株未出现凝集。加入甘露糖后野生株和sdiA敲除株的凝集强度减弱,强度均为±。对照组上述三株菌均未出现凝集。染色镜检发现,与野生株相比较,sdiA敲除株对酵母细胞黏附率较高(P<0.01),sdiA过表达回复株对酵母细胞黏附率较低(P<0.01)。在SdiA差异表达菌株间sdiA敲除株1型菌毛相关基因fimC、fimF表达增高(P<0.05),反之sdiA过表达回复株表达降低(P<0.05)。转录组测序中群体感应系统信号分子处理组菌毛相关基因fimA、fimB、fimC、fimD、fimE、fimF、fimG、fimH、fimI的表达均随着SdiA的表达量增高而降低,反之SdiA低表达,1型菌毛相关基因表达量增高,而在DMSO对照组中,上述基因与SdiA的表达量相关性不明显。结论大肠埃希菌中群体感应系统受体SdiA在信号分子的介导下可通过抑制1型菌毛相关基因的表达,降低细菌的黏附能力。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 群体感应系统 抑制细胞分裂抑制子 高丝氨酸内酯 1型菌毛
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伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC和ERK及NF-κB活化的影响
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作者 汪付兵 涂建成 《临床血液学杂志(输血与检验)》 CAS 2012年第2期206-210,共5页
目的:初步探讨伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化的影响。方法:将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,底物磷酸激酶测定法检测PKC活性变化,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,荧光素酶报... 目的:初步探讨伤寒杆菌IVB型菌毛对THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化的影响。方法:将THP-1细胞分别与有IVB型菌毛的A21-6菌、缺失IVB型菌毛的pilS-菌共同孵育,底物磷酸激酶测定法检测PKC活性变化,免疫印迹法检测ERK磷酸化水平,荧光素酶报道基因分析法检测NF-κB激活表达。结果:THP-1细胞经有IVB型菌毛的A21-6菌刺激后,PKC活性变化、ERK磷酸化水平和NF-κB激活表达均显著高于相应的处理组;PKC、ERK、NF-κB活化水平分别于刺激10、30、60min后即明显升高;并分别于30、60、120min左右达到峰值。结论:伤寒杆菌IVB型菌毛显著增强了THP-1细胞PKC、ERK、NF-κB活化水平,IVB型菌毛在伤寒杆菌诱导单核/巨噬细胞PKC、ERK、NF-κB活化过程中是一种重要的强刺激因素。 展开更多
关键词 伤寒杆菌IVB型菌毛 THP-1细胞 PKC ERK NF-ΚB
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