紫娟茶提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用

首先对从蘑菇中提取的酪氨酸酶的反应条件进行了探讨。采用单因素和正交实验确定了酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的最适反应条件。结果显示单酚酶最适反应条件为:底物L-酪氨酸为10.0mmol/L,酪氨酸酶为0.30g/mL,反应时间为15min,反应温度为30℃;二酚酶最适反应条件为:底物邻苯二酚为7.5mmol/L,酪氨酸酶为0.035g/mL,反应时间为15min,反应温度为15℃。然后对紫娟茶的3种提取物的酪氨酸酶活性的抑制作用进行了探讨。结果表明,3种提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有较好的抑制作用,特别是含有花青素和茶多酚混合物的提取物I的抑制作用最强;3种提取物对单酚酶和二酚酶的半抑制浓度IC50分别为6.85×10-4、8.21×10-4、16.29×10-4g/mL和6.37×10-4、7.62×10-4、13.53×10-4g/mL。

牛磺酸对酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶的活性与黑色素的形成有关。用Ｌ－酪氨酸作底物，测定了牛磺酸对酪氨酸酶的非竞争性抑制。其抑制常数为５３．７Ｍｇ／Ｌ，牛磺酸浓度为３２μｇ／ｍｌ时，最大抑制率为３５．３％。牛磺酸有望成为治疗和预防黑色素疾病的药物。

中药白芨提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过从水和乙醇中选取一种有效的提取剂,用回流法和超声波提取法提取中药白芨中的有效成分,分别以左旋多巴(L-DOPA)、邻苯二酚为底物,研究了白芨提取物对酪氨酸酶活性的影响。结果表明,白芨提取物对酪氨酸酶活性有抑制作用,66.7 mg/mL的超声波水提取物比醇提取物对酪氨酸酶有更为明显的抑制作用,其对酪氨酸酶的抑制率为62%,IC50值为28 mg/mL。

两种多酸型酪氨酸酶抑制剂的性能研究

以H3 PW12 O40和H4 SiW12 O40（简写为PW12和SiW12）为效应物,测定其对酪氨酸酶活力的抑制作用.通过非变性聚丙烯凝胶（ Native-PAGE）电泳确定酪氨酸酶是多家族基因编码,其分子量为3×10^4-3.4×10^4,4.2×10^4-4.6×10^4,6.4×10^4-6.8×10^4,且均具有活性,测定PW12和SiW12对酪氨酸酶的抑制效果,并结合酶动力学法研究其抑制机理.结果表明,当PW12和SiW12浓度分别达到13和25 mmol/L时,酪氨酸酶的活力完全被抑制,即PW12和SiW12对酪氨酸酶二酚酶具有不同程度的抑制效果.当所加酶量为0.0173 mg/mL时, PW12和SiW12对酪氨酸酶二酚酶活力的半抑制率（ IC50）分别为1.57和2.31 mmol/L,它们对酪氨酸酶二酚酶的抑制均为可逆过程.其中, PW12对二酚酶的抑制类型为混合型,其KI及KIS分别为0.34和0.43 mmol/L, SiW12对二酚酶的抑制类型表现为竞争型,其KI为0.59 mmol/L.综合考虑IC50值和抑制常数等参数, PW12对酪氨酸酶二酚酶的抑制能力优于SiW12.

银杏叶提取物对酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶活性与黑色素的形成有关。用L—酪氨酸作底物,测定了银杏叶提取物对酪氨酸酶的非竞争性抑制作用。其抑制常数(ki)为34mg/ml;银杏叶提取物浓度为0.16mg/ml时,最大抑制率为52.83%,银杏叶提取物有望成为预防和治疗黑色素疾病的药物。

钒取代硅钨氧酸盐对酪氨酸酶的抑制作用

测定了自制的α-1,2,3-K6H[SiW9V3O40]、α-1,2-K6[SiW10V2O40]和α-K5[SiW11VO40](以下分别简写为α-SiW9V3、α-SiW10V2和α-SiW11V)钒取代多金属氧酸盐对蘑菇酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,在pH=6.8的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液中,α-SiW9V3对酪氨酸酶有较强的抑制作用,表现为对酶稳态活力的抑制作用和对迟滞时间的延长作用,在DMSO溶液中,其IC50为0.6841 mmol/L,0.7 mmol/Lα-SiW9V3可使单酚酶的迟滞时间由235 s延长至650 s,增加了2.77倍。α-SiW9V3对酪氨酸酶单酚酶的抑制为可逆作用过程,抑制类型为混合型,其抑制常数KI、KIS分别为4.22和2.39 mmol/L。α-SiW10V2不溶于DMSO,故未研究其对酶的抑制作用,α-SiW11V对酪氨酸酶抑制作用很弱。

甘草废渣中有效成分对酪氨酸酶活性的抑制作用

目的研究提取甘草酸后的甘草废渣中的有效成分—异甘草素、光甘草定对酪氨酸酶活性抑制的影响。方法以L-酪氨酸作为底物,采用比色法测定异甘草素、光甘草定对酪氨酸酶活性的影响,并以Lineweaver-Burk双倒数法绘制酶动力学曲线,推断抑制类型。结果异甘草素、光甘草定都不同程度的抑制酪氨酸酶活性,其中异甘草素抑制酪氨酸酶单酚酶的IC50值为1.66 mmol·L-1,对二酚酶无抑制效果;光甘草定抑制酪氨酸酶单酚酶、二酚酶的IC50值分别为31.16μmol·L-1、20.38μmol·L-1;且光甘草定对酪氨酸酶的效应表现为竞争型抑制。结论该研究可为开发利用废弃甘草渣中有效成分作为植物源美白添加剂提供依据。

海蓬子提取物抑制酪氨酸合成酶活性的研究

研究海蓬子水提物、醇提物、超声波水提物、超声波醇提物,分别经蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩所得浓缩物对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,蒸馏浓缩和旋转蒸发仪蒸发浓缩对提取物的抑制率几乎没有影响。这4种提取物对以酪氨酸为底物的酪氨酸酶抑制作用存在显著性差异。抑制率分别为:水提物32.48%,醇提物62.37%,超声波水提物43.56%,超声波醇提物75.81%。其中海蓬子超声波醇提物表现出最好的抑制作用。

文冠果壳黄酮提取物抑制酪氨酸酶活性的研究

为开发文冠果壳中黄酮的功能,实现文冠果壳废物利用。本试验分别采用水、70%的乙醇2种溶液浸提文冠果壳粉,确定最佳提取溶剂。通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,研究了文冠果壳粉的乙醇提取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,文冠果黄酮对酪氨酸酶的抑制率与抑制剂浓度呈非线性变化,随着浓度的增加,黄酮提取液对酪氨酸酶活性的抑制率增加幅度呈下降趋势。当黄酮质量浓度为0.48 mg/mL时,抑制率最高可达45.1%。

文冠果壳皂苷提取物抑制酪氨酸酶活性的研究

分别采用70%的乙醇溶液、蒸馏水2种浸提液提取文冠果壳中的皂苷,并测定其含量以确定最佳提取溶剂。通过对酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率的测定研究了文冠果壳粉的乙醇提取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,皂苷粗提液对酪氨酸酶的抑制率与浓度呈非线性变化,随着浓度的增加,抑制剂对酪氨酸酶活性的抑制率先增加后趋于平稳。当皂苷质量浓度为0.36 mg/mL,抑制率可达到64.6%。通过酶抑制作用的Lineweaver-Burk图,分析结果显示,文冠果壳皂苷粗提液对酪氨酸酶的抑制作用类型为非竞争性抑制。上述研究为进一步开发文冠果壳中的美白成分提供了依据,同时又实现了废物利用,提高了农产品的经济价值。

糖枣多糖经硫酸化修饰前后对酪氨酸酶抑制作用分析

为促进湖南地区枣果资源的开发与利用,探索糖枣多糖对酪氨酸酶活性的影响。以三年生糖枣为试材,将其水提多糖依次采用DEAE-52纤维素和Sephadex G-100葡聚糖柱层析,分离出多糖组分;分别测定各组分多糖经硫酸化修饰前后对酪氨酸酶的抑制作用,并对抑制活性最强的部分进行动力学研究。结果表明:DT_(B3)的酶活性抑制率最高,达到77.94%,DT_C的酶活性抑制率次之为69.93%,其余组分对酶活性抑制率均小于50%;经硫酸化修饰后,多糖组分DT_(B3)和DT_C对酪氨酸酶抑制率变化较小,DT_A、DT_(B1)、DT_(B2)对酪氨酸酶抑制率在原有的基础上都有较大的提高,分别提高了60.19%、41.66%、29.55%,其抑制率分别达到了56.54%、58.53%、61.60%,但都远低于70%。同时DT_(B3)能在短时间内与酶快速的结合,并显示出较强的活性抑制能力,且呈现非竞争性抑制类型。由上可知,各组分多糖对酪氨酸酶活性抑制率的大小存在一定的差异,多糖经硫酸化修饰后对酪氨酸酶的抑制率具有一定的影响,糖枣多糖中DT_(B3)对酪氨酸酶具有较高的抑制作用,存在一定的开发利用价值。

维药没食子对酪氨酸酶抑制作用的研究

目的研究维药没食子对酪氨酸酶活性的影响。方法以L-酪氨酸作为底物,测定来源于没食子药材中的没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物干预前、后酪氨酸酶的活性的变化,计算酪氨酸酶抑制率。结果没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物对酪氨酸酶的活性均具有明显下调作用,其中1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷对酪氨酸酶的抑制作用最强。结论该研究为深入开发利用没食子药材中的美白成分提供了依据。

中草药多效美白润肤霜的制备及性能研究

采用体外酪氨酸酶抑制法和3种抗氧化测试方法筛选出较佳复配美白剂和中草药组分,并添加多种保湿赋活成分制备出中草药多效美白润肤霜;对其性能进行了研究,对使用后的效果进行了评价。结果表明,研制的中草药多效美白润肤霜性能稳定、粒度均匀,具有较好的美白、抗氧化、保湿功效,长期使用可令皮肤白皙、水润、柔软、有弹性。

紫荆叶提取物对酪氨酸酶活性抑制作用的谱效关系研究

目的:研究紫荆叶提取物对酪氨酸酶活性抑制作用的谱效关系。方法:取不同采收时期的紫荆叶样品16批,以70%乙醇进行加热提取。采用高效液相色谱法对紫荆叶提取物进行分析,色谱柱为InertSustain C_(18),流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,柱温为30℃,检测波长为254 nm,进样量为10μL。将所获得的16个批次紫荆叶提取物色谱图采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004(A版)》进行匹配,获得量化特征色谱图并确定共有峰。采用体外酪氨酸酶多巴速率氧化微量法测定紫荆叶提取物对酪氨酸酶活性的抑制率。采用偏最小二乘回归分析法,以紫荆叶提取物特征共有峰峰面积为自变量、其对酪氨酸酶活性的抑制率为因变量进行谱效关系分析,筛选出与酪氨酸酶活性抑制作用有显著相关性的色谱峰。结果与结论:匹配得到紫荆叶提取物的16个特征共有峰;酪氨酸酶活性抑制试验结果显示,紫荆叶提取物质量浓度为100 mg/mL(按生药计)时对酪氨酸酶活性的抑制作用最强;谱效关系分析结果显示,紫荆叶提取物特征色谱图中P5、P8、P10、P12、P15、P16号共有峰与其对酪氨酸酶活性的抑制作用呈正相关(相关系数R>0.1),P2、P4号共有峰与其对酪氨酸酶活性的抑制作用呈负相关(相关系数绝对值│R│>0.1),提示上述特征共有峰代表的化合物可能对酪氨酸酶活性具有抑制或激活作用。

3，4-二羟基氰苯对蘑菇酪氨酸酶的抑酶和抑菌作用

研究3,4-二羟基氰苯对酪氨酸酶的抑制作用和对几种微生物的效应.结果表明:3,4-二羟基氰苯对蘑菇酪氨酸酶活力有明显的抑制作用,其效应除了对稳态酶活力有较强的的抑制作用外,对酶促反应的迟滞时间也有延长作用.10.0μmol/L的3,4-二羟基氰苯可使稳态酶活力下降53.5%,并使迟滞时间从18 s延长到225 s.3,4-二羟基氰苯对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌3种细菌和真菌白色假丝酵母均有明显的抑制作用,其对细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均分别为500和1000μg/mL,对白色假丝酵母的MIC和MFC分别为1000和2000μg/mL.本研究为3,4-二羟基氰苯在酪氨酸酶抑制剂中的应用提供实验理论依据.

宣肺汤对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响

目的:观察宣肺汤对B16黑素瘤细胞的作用,探讨其美白作用的机理及安全性。方法:测定宣肺汤对体外培养的B16黑素瘤细胞细胞活力、酪氨酸酶活性及细胞内黑素含量的影响,并与熊果苷作对照比较。结果:25、50、100μg/ml宣肺汤对黑素瘤细胞的细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的抑制作用,并呈剂量依赖性,且优于同浓度熊果苷,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:宣肺汤有较强的抑制黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素生成的作用,同时对黑素瘤细胞的细胞毒性较低,是较为安全有效的美白药物。

氨基葡萄糖对酪氨酸酶的抑制作用

通过对酪氨酸酶催化底物L-DOPA反应速率的观察测定,研究了氨基葡萄糖(G-NH2)对酪氨酸酶的抑制作用。在反应液中加入50μL浓度为2.2 mg/mL G-NH2时(体系中G-NH2终浓度为36μg/mL),酶抑制率为50%。GNH2对酪氨酸酶的抑制作用是个复杂的过程,酶反应呈先促进后抑制。分析酶抑制曲线Lineweaver-Burk双倒数图,得出G-NH2为混合抑制剂,进一步研究发现多巴醌生产量会减少,抑制类型是不可逆抑制。

几种美白剂抑制酪氨酸酶活性的研究

对几种美白剂抑制酪氨酸酶活性的作用进行测定。以L-酪氨酸为底物,测定一定质量分数下的美白剂对酪氨酸酶活性具有良好的抑制效果;选用α-熊果苷测定实验方法的重现性与精密度,相对标准偏差分别为1.3%与0.96%;几种美白剂对酪氨酸酶活性具有抑制效果,抑制作用为可逆抑制,抑制类型为非竞争性抑制。

甘薯叶提取物对酪氨酸酶的抑制作用

为探究甘薯叶提取物对酪氨酸酶活性的影响,利用不同极性溶剂萃取甘薯叶乙醇提取物,分别得到石油醚层、三氯甲烷层、乙酸乙酯层及正丁醇层萃取物,并采用多巴速率氧化法考察不同溶剂提取物对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,甘薯叶提取物中存在能抑制酪氨酸酶活性的物质,其中甘薯叶正丁醇萃取物对酪氨酸酶的抑制作用最明显,根据正丁醇萃取物抑制酪氨酸酶的Lineweaver-Burk双倒数拟合方程可得,甘薯叶提取物对酪氨酸酶的抑制作用是可逆过程,其抑制类型是混合型,K_(I)与K_(IS)分别为0.198、0.209 mg/mL,即甘薯叶提取物与游离酶的结合程度大于与酶-底物络合物的结合。

连翘花中抑制酪氨酸酶活性成分研究

本文首次对连翘花抑制酪氨酸酶活性成分进行了研究。首先,对连翘不同器官[叶、果实(青翘、老翘)、花]抑酶活性进行比较分析,发现连翘花对酪氨酸酶的抑制表现出了浓度依赖性;进而对连翘花不同溶剂提取物进行抑酶活性评价,结果表明95%乙醇提取物抑酶活性最高。然后根据活性导向分离方法,对连翘花95%乙醇提取物进行了化学成分分离,从中分离得到5个化合物,鉴定为:连翘酯苷A(1)、芦丁(2)、(+)-松脂素-β-D-葡萄糖苷(3)、(+)-甲基松脂素-β-D-葡萄糖苷(4)、连翘苷(5),其中化合物4是首次从连翘花中分离得到。酪氨酸酶抑制活性测试表明化合物均显示出一定的抑酶活性,同时各化合物之间表现出明显的协同作用,这表明这些成分可能是连翘花美白作用的物质基础。