皂角刺抑制小鼠宫颈癌U14的生长及对增殖细胞核抗原和p53表达的影响

目的:研究皂角刺醇提物对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用及对增殖细胞核抗原(PCNA)和突变型p53蛋白表达的影响。方法:观察皂角刺醇提物对U14实体瘤和腹水瘤的抑瘤率和生命延长率,并用免疫组化SP法检测PCNA和突变型p53蛋白阳性细胞表达数。结果:以阴性对照组为基数,皂角刺醇提物3个剂量组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组实体瘤各组抑瘤率分别为47.44%,59.49%,63.92%,73.42%(P<0.01);腹水瘤各组生命延长率分别为52.21%,67.26%,78.76%,95.58%(P<0.01)。同时各组药物对PCNA和突变型p53蛋白的表达水平也有不同程度抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论:皂角刺对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用,其机制可能与抑制PCNA和突变型p53蛋白的表达有关。

桔梗多糖对U-14宫颈癌抗肿瘤作用的研究

目的研究桔梗多糖抑制U14宫颈癌实体瘤小鼠肿瘤生长的作用及相关机制。方法建立小鼠宫颈癌(U14)实体瘤模型,观察小鼠桔梗多糖(20,40和60mg·kg-1)灌胃给药15d后,对肿瘤生长抑制作用的影响;用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况;利用免疫组织化学法分析与细胞凋亡密切相关的基因(突变型p53,p19ARF,Bax)蛋白表达的情况。结果桔梗多糖体内有显著抑制小鼠宫颈癌U14实体瘤生长的作用,桔梗多糖上调了p19ARF和Bax蛋白表达量,诱导突变型p53蛋白表达显著下降。结论桔梗多糖具有抑制实体瘤U14生长的作用,推测该多糖可能是通过调节细胞凋亡相关基因的表达,进而促进肿瘤细胞的凋亡而发挥其抗肿瘤作用。

沙樱桃黄酮对小鼠Hep、U14抑制作用及其机制探讨

目的 探讨沙樱桃黄酮对Hep、U1 4肿瘤的抑制作用及其机制。方法 BALB/c小鼠右前肢腋皮下接种Hep或U1 4瘤细胞 ,2 4h后ip沙樱桃黄酮或结合 5 Fu ,对抑瘤率以及免疫功能进行测定。结果 沙樱桃黄酮 1 0 0mg·kg- 1 ·d- 1 或结合 5 Fu(1 0 0mg·kg- 1 ·d- 1 )ip后 ,对Hep、U1 4肿瘤的抑制率分别为 34 1 1 %、32 1 4 %和 50 73 %、47 2 2 % ;对小鼠网状内皮系统吞噬功能、免疫器官的重量及血清溶血素生成值均有明显的提高且均有统计学意义 (P <0 0 5)。

银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞,观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率。测定银莲花素A的急性毒性。结果:银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4.64!g/mL和1.40!g/mL。4.5mg/kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60.5%、36.2%和61.8%。200mg/kg灌胃给药时抑瘤率为64.7%。灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1.1g/kg和16.1mg/kg。结论:银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物。

[A环-U-^(14)C]丙酯草醚在土壤中的迁移和淋溶

在实验室模拟条件下,采用同位素成像及液体闪烁测量技术对[A环-U-14C]丙酯草醚在7种土壤中的迁移和淋溶特性进行了研究。结果显示:[A环-U1-4C]丙酯草醚在7种土壤(S1~S7)薄板层析中的Rf值分别为0.36、0.27、0.21、0.31、0.30、0.15和0.24,这表明丙酯草醚在S1中属于中等移动农药,而在其余6种土壤中均属于不易移动农药。结果还表明,[A环-U1-4C]丙酯草醚在7种土壤中随水(最大降雨量200mm/24h)的淋溶性较弱,在S1和S4中其主要分布在0~6cm土层,其余5种土壤中则主要分布在0~4cm土层。丙酯草醚在7种供试土壤中的最大淋溶量峰值均出现在0~2cm表层。因此,从迁移和淋溶特性看,田间使用丙酯草醚不易对地下水造成污染。

人参皂苷Rh_2对宫颈癌U14荷瘤小鼠的治疗作用研究

目的观察20(S)-人参皂苷Rh2、20(R)-人参皂苷Rh2及人参次苷H滴丸对宫颈癌U14的荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,比较R/S立体异构体的抗肿瘤活性差异。探讨人参次苷H滴丸对荷瘤小鼠耐缺氧、耐疲劳时间的影响。方法U14宫颈癌的腋下移植瘤小鼠各70只,各随机分成7组,实验组灌胃给予人参皂苷Rh2(10 mg/kg),阳性药组灌胃给予环磷酰胺(50 mg/kg),模型组给予等量生理盐水,给药14 d后处死动物剥离瘤组织称质量,计算抑瘤率。采用常压密闭容器法和强迫游泳法研究人参次苷H滴丸对荷瘤小鼠耐缺氧、耐疲劳时间的影响。结果 20(S)-人参皂苷Rh2对小鼠U14宫颈癌的抑瘤率为65.09%(P<0.01),20(R)-人参皂苷Rh2组抑瘤率为40.98%(P<0.01),人参次苷H滴丸组抑瘤率为53.83%(P<0.01)。人参次苷H滴丸中剂量组耐缺氧、耐疲劳时间较模型组明显延长(P<0.05),高剂量组耐缺氧时间显著延长(P<0.01)。结论人参皂苷Rh2对小鼠宫颈癌U14有显著抑制作用,且20(S)型的抑制作用显著优于20(R)型,表现出一定的构型优势。人参次苷H滴丸抑瘤同时具备耐缺氧和抗疲劳的作用。

鬼针草90%醇提物对U_(14)荷瘤小鼠的抑瘤效应

以U14细胞株接种小鼠制成荷瘤模型,研究鬼针草90%醇提物对荷瘤小鼠的抑瘤效应。结果表明,90%鬼针草醇提物通过提高机体免疫力抑制小鼠肿瘤生长。

苦参碱联合顺铂对小鼠u14移植瘤中TSLC1表达影响的实验研究

目的观察苦参碱以及苦参碱联合顺铂对小鼠宫颈癌细胞株u14移植瘤中肺癌抑制因子1(TSLC1)蛋白表达的影响。方法通过接种小鼠宫颈癌细胞株u14建立荷瘤小鼠模型,随机分为组:阴性对照组(给予生理盐水),阳性治疗组(给予顺铂2mg.kg-1),苦参碱高、中、低剂量组(分别给予75mg.kg-1、50mg.kg-1、35mg.kg-1的苦参碱),苦参碱高、中、低剂量组分别联合2mg.kg-1顺铂治疗组,均采用腹腔注射,用药10天后,采用脱臼处死小鼠并剥取肿瘤组织;通过HE染色观察移植瘤组织细胞形态变化,免疫组化方法观察移植瘤组织中TSLC1蛋白的表达情况。结果 HE染色结果显示移植瘤组织呈现典型的鳞状细胞癌的表现;免疫组化结果显示,随着苦参碱剂量的增加,移植瘤组织中的TSLC1蛋白的阳性表达率逐渐上升,苦参碱高、中剂量组显著高于阴性对照组(P<0.01);高、中、低剂量的苦参碱联合2mg.kg-1顺铂治疗后TSLC1蛋白阳性表达率分别为90%、80%、70%,与阴性对照组比较均具有显著统计学意义(P<0.01)。结论苦参碱具有上调u14移植瘤组织中TSLC1蛋白表达的作用,可能是苦参碱抗宫颈癌的重要作用机制之一。

转染人乳头瘤病毒的宫颈癌U14移植同系小鼠后的生长特性和转移规律

目的 :探讨转染人乳头瘤病毒 (HPV)的小鼠宫颈癌U1 4移植同系小鼠后生长特性和转移规律。方法 :用电穿孔法及阳离子脂质体将HPV 1 6型的早期基因E6 ,E7分别转染小鼠宫颈癌U1 4,筛选、鉴定表达E6 ,E7的转化细胞即E6 +U1 4,E7+U1 4,然后分别经皮下和腹腔移植于同系小鼠 ,观察其生长特性和转移规律。结果 :皮下移植野生型U1 4,E6 +U1 4及E7+U1 4后 ,出瘤时间分别为 5～ 7d ,1 1～ 1 4d及 8～ 1 0d (P <0 .0 5 ) ;平均生存期分别为 2 9d ,43 .3d及 3 5d ;淋巴转移率分别为 90 % ,3 0 %及 40 % ;肺转移率分别为 6 0 % ,1 0 %及 2 0 %。腹腔内移植后 ,荷瘤小鼠平均寿命分别为 1 4.2d ,2 0 .6d及 1 8.3d ;未发现淋巴和肺转移。结论 :转染HPV的小鼠宫颈癌U1 4移植同系小鼠后 ,显示出与移植野生型不同的生长特性和转移规律。该模型为研究以HPVE6 ,E7为靶的免疫或其他方法治疗宫颈癌提供了有价值的动物模型。

咖啡酸锗对小鼠U14瘤的抑制作用及其诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究

目的:研究咖啡酸锗对荷瘤U14小鼠的体内抑瘤作用及体外抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤作用机制。方法:观察咖啡酸锗对小鼠U14宫颈癌的抑制率;用MG-P染色和透射电镜的方法观察肿瘤细胞的凋亡情况;流式细胞术(FCM)观察瘤组织的细胞凋亡率并分析细胞周期;免疫组化方法观察肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达情况;MTT法评价咖啡酸锗体外抑制U14肿瘤细胞活性。结果:咖啡酸锗低、中、高剂量组对宫颈癌U14的抑瘤率分别为38.50%、47.17%和64.04%(P<0.01)。MG-P染色及电镜观察可见,咖啡酸锗治疗组出现较多的凋亡细胞(P<0.05),可见典型的细胞凋亡的形态学特征。流式细胞术检测表明咖啡酸锗能诱导U14肿瘤细胞凋亡,在G0-G1前出现1个明显的凋亡峰,细胞被阻滞在S期。咖啡酸锗处理后肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调。咖啡酸锗对体外培养的U14细胞增殖均有一定程度的抑制作用,48h的IC50值为48.57mg/L。结论:咖啡酸锗在体内、外均能有效抑制小鼠U14瘤细胞的增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡。咖啡酸锗上调U14细胞中Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达,进而促进肿瘤细胞凋亡,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

阿魏菇多糖联合顺铂对小鼠宫颈癌U14细胞的凋亡诱导作用

目的:观察阿魏菇多糖(polysaccharides from Pleurotus ferulae,PFP)、顺铂(DDP)及两者联合对小鼠宫颈癌细胞株U14移植瘤的抑制作用及凋亡诱导作用,并初步探讨阿魏菇多糖的抗肿瘤作用机制。方法:建立昆明小鼠U14宫颈癌模型,并随机分为四组:模型对照组、PFP组、DDP组、PFP+DDP组,治疗10天后检测各组瘤重及抑瘤率,采用TUNEL法检测各组瘤组织凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:模型组小鼠体内瘤体积、瘤重明显高于各干预组(P<0.01),PFP+DDP组小鼠体内瘤重和瘤体积分别为[(0.40±0.61)g,(197.84±11.99)mm3]低于DDP组[(0.61±0.26)g,(211.46±14.58)mm3];PFP组、DDP组、PFP+DDP组瘤组织凋亡指数均高于模型对照组,其中以PFP+DDP组最明显。结论:PFP联合DDP比两药单独应用抑制肿瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡的作用更强,二者具有协同抗癌作用。PFP可以增强DDP的药物敏感性,其作用机制可能是通过诱导宫颈癌细胞凋亡而实现的。

中药多糖、胸腺肽对U14宫颈癌荷瘤鼠外周血TLC亚群及NK细胞的影响

目的比较四种中药多糖及胸腺肽对U14宫颈癌荷瘤鼠肿瘤生长、外周血TLC、NK细胞的影响,试图找到对宫颈癌有相对特异性的免疫增强剂。方法 70只昆明小鼠,建立U14宫颈癌荷瘤鼠模型60只,设立正常对照组、肿瘤对照组、LBP、APS、GLP、PGE、胸腺肽组,每组10只,正常对照组、肿瘤对照组用生理盐水灌胃21d、其他组分别用四种中药多糖和胸腺肽灌胃21d。第22天,所有动物处死后检测各治疗组的抑瘤率,流式细胞术比较各治疗组与正常和肿瘤对照组小鼠外周血CD4+CD8+TLC和CD49b+NK细胞亚群的改变。结果肿瘤抑制率排序:胸腺肽<LBP<GLP,PGE和APS组与肿瘤对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤对照组外周血CD4+/CD8+TLC和CD49b+NK细胞与正常组比较均有所增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。LBP、GLP、胸腺肽组CD4+/CD8+TLC较正常组和肿瘤对照组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05),APS、PGE组CD4+/CD8+TLC明显低于肿瘤对照组。各组外周血CD49b+NK明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LBP、GLP和胸腺肽对U14宫颈荷瘤鼠有明显的免疫增强作用,但PGE、APS是否能用于宫颈癌的治疗,还需进一步研究。

白芷生物碱对小鼠U14宫颈癌抗肿瘤活性作用的研究

白芷生物碱(AAD)作为天然药物,生物活性强,具有防癌、抗突变及抑制酪氨酸酶等作用,是天然抗氧化剂。但迄今为止,关于AAD对宫颈癌治疗的研究,国内外一直未见相关报道。本研究以U14移植性实体瘤小鼠为模型,将其分为阴性对照组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组、AAD低、高剂量组。采用HE染色法、免疫组织化学SP法,对AAD抗宫颈癌作用进行了研究。通过对白芷生物碱的提取,得白色结晶,得率为2%,经鉴定为白芷生物碱且含量为0.16 mg/g。动物体内试验表明,AAD能有效地抑制U14荷瘤鼠瘤体生长,对肿瘤细胞内突变型P53和Ki-67相关蛋白表达量降低。本文初步地研究了AAD抗宫颈癌的作用及其机理,为AAD治疗宫颈癌提供了重要的科学依据和理论基础。

香菇C_(91-3)菌丝发酵液蛋白抑制小鼠宫颈癌细胞株U14生长及诱导凋亡的实验研究

目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白LFP91-3对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用。方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法LFP91-3浓度5、10、15μgml和流式细胞仪对经LFP91-3作用的U14进行观察和检测。结果LFP91-3能明显延长U14所致荷瘤小鼠的生存期。对体外培养的U14有直接杀伤作用,抑制率随LFP91-3浓度的增加和作用时间的延长而升高。流式细胞仪检测结果显示LFP91-3阻滞U14于细胞周期的分裂中期。结论LFP91-3能抑制小鼠宫颈癌细胞株的生长并诱导其凋亡。

U14细胞接种昆明小鼠舌体后癌周淋巴管的改变及其与淋巴道转移的研究

目的 :建立小鼠舌体移植瘤颈淋巴结转移模型 ,探讨癌周淋巴管的病理改变与淋巴道转移的关系。方法 :将U14的腹水瘤细胞移植于昆明小鼠舌体内 ,分期分批切取舌体组织 ,改良 5′ 核苷酸酶组化染色法显示癌周淋巴管。结果 :小鼠舌体接种U14肿瘤细胞后颈淋巴结转移率可达 70 % ;U14肿瘤细胞进入淋巴管腔的方式主要有 2种 ,即通过正常管壁开放间隙和造成管壁缺损进入淋巴管腔。结论 :随着移植瘤的生长 ,瘤周淋巴管不断扩张 ,管壁结构出现不完整 ,有利于肿瘤细胞进入淋巴管腔进而发生淋巴结转移。

褪黑激素对U_(14)的抑制作用

目的 探讨褪黑激素 (melatonin ,MT)对U14 的抑瘤作用及对常用化疗药环磷酰胺 (cytoxan ,CTX)的增效作用。方法 用小鼠移植性肿瘤模型 ,观察药物对荷U14 小鼠的肿瘤抑制率的影响。在可耐受剂量下治疗小鼠的实体瘤U14 ,观察药物对小鼠脾脏重量及肝脏组织结构的影响。结果 高剂量MT( 80mg·kg-1·d-1,sc)组对小鼠U14 有抑制作用 ,抑瘤率为 2 7 1% (P <0 0 5 )。高剂量组及低剂量MT( 4 0mg·kg-1·d-1,sc)组与CTX( 2 5mg·kg-1·d-1× 1,ip)合用对U14 的抑瘤作用可相加。高剂量MT与CTX合用对小鼠脾脏重量及肝脏组织结构均无明显影响。结论 MT有抑制U14 的作用 ,与CTX合用具有疗效相加的作用 ,毒性无明显增加。

大蒜素调节Bcl-2/Bax促进宫颈癌U14细胞凋亡的研究

目的探讨大蒜素对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养U14细胞,将细胞分为对照组(不加大蒜素处理组)和大蒜素组(质量浓度分别为5、10和20mg.L-1)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法测定大蒜素作用24、48、72h时对U14细胞的增殖抑制率;膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测U14细胞的凋亡率;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测U14细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达水平。结果 5、10和20mg.L-1大蒜素组对U14细胞增殖的抑制率:24h时分别为(6.6±1.41)%、(23.5±2.79)%和(58.9±1.65)%,48h时分别为(25.5±2.89)%、(47.9±8.78)%和(69.5±3.72)%,72h时分别为(58.9±1.66)%、(78.9±1.19)%和(92.6±7.33)%,均显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖抑制率呈浓度和时间依赖性。5、10和20mg.L-1大蒜素组作用24h后,细胞凋亡率分别为(9.22±0.55)%、(22.34±1.53)%和(35.73±1.98)%,与对照组的(3.23±0.35)%比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。与对照组比较:10、20mg.L-1组Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而10、20mg.L-1组Bax mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。结论大蒜素可能通过上调Bax表达,下调Bcl-2的表达诱导U14细胞凋亡。

牛蒡子醇提物抑制小鼠宫颈癌U14生长的研究

通过建立小鼠宫颈癌U14实体瘤与腹水瘤2种动物模型,观察牛蒡子醇提物对实体瘤抑瘤率和腹水瘤生命延长率的影响。结果发现,以阴性对照组为基础,牛蒡子醇提物3个剂量组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组实体瘤各组抑瘤率分别为31.7%、49.7%、57.4%和83.6%(P<0.01);腹水瘤各组生命延长率分别为39.8%、46.6%、62.5%和91.6%(P<0.01)。表明牛蒡子醇提物对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用。

墓头回提取液对荷U14宫颈癌小鼠血液流变学的影响

目的观察墓头回提取液对荷U14宫颈癌小鼠血液流变学的影响。方法将荷U14宫颈癌小鼠分为墓头回提取液高、中、低剂量组及顺铂组、模型组和空白对照组,观察各组给药后血液流变学的变化。结果墓头回提取液高、中剂量组及顺铂组均可降低荷U14宫颈癌小鼠不同切变率下的全血粘度、血细胞比容;低剂量组全血粘度、血细胞比容均无明显变化;墓头回提取液各剂量组血浆粘度无明显变化;顺铂组可降低全血粘度、血细胞比容,而对血浆粘度无明显影响。结论墓头回提取液可降低荷U14宫颈癌小鼠血液粘度,改善血液流变性质。

维泰醇对小鼠宫颈癌U_(14)细胞抗肿瘤作用的研究

目的:研究维泰醇对宫颈癌U14细胞的抑制增殖与诱导凋亡作用,以探讨维泰醇的抗肿瘤作用机制。方法:采用MTT法检测维泰醇对宫颈癌U14细胞增殖抑制率的影响;采用AO/EB双染色法观察细胞凋亡形态并计算其凋亡率;免疫细胞化学法检测U14细胞内Bcl-2,Bax、Survivin蛋白表达水平。结果:维泰醇对U14细胞增殖有明显的抑制作用,呈剂量及时间依赖性;维泰醇能引起细胞凋亡,并出现典型的凋亡形态。维泰醇下调U14细胞内Bcl-2、Survivin蛋白表达水平,上调Bax蛋白表达水平。结论:维泰醇可抑制宫颈癌U14细胞增殖并诱导细胞凋亡;维泰醇抗宫颈癌的作用机制可能与其下调Bcl-2、Survivin蛋白的表达及上调Bax蛋白的表达有关。