植物U-box／ARM蛋白

文章介绍了高等植物特有的U-box/ARM蛋白在结构、植物自交不亲和性、抗病性和激素信号转导等方面的研究进展。

植物U-box蛋白研究进展

U-box结构是真核生物体内尤其是植物中广泛存在的一种高度保守的基序,其构象与RING-finger极其相似,两者都能发挥泛素连接酶E3的作用,促进底物蛋白泛素化降解。U-box基序还是泛素链聚集酶E4最主要的功能因子。在植物体内U-box经常与ARM重复耦联形成U-box/ARM结构,影响蛋白-蛋白互作,参与信号传导级联反应。许多植物U-box蛋白(PUB)能有效提高植株对干旱、高盐、异常温度等非生物胁迫的抵抗能力。此外,在植物对许多病原物的抗病反应中也需要U-box蛋白的参与。

烟草腺毛发育相关基因U-box的克隆

烟草腺毛是表皮组织进化而来的结构,腺毛分泌物对烤烟的香味及香气具有重要贡献,同时还与烟草的抗虫性密切相关。因烟草基因组测序已完成但数据库未公开,本实验采用同源引物克隆获得转ChIFN-γ烟草腺毛发育相关基因U-box,主要过程包括提取转ChIFN-γ烟草RNA、一步法反转录得到U-box基因、U-box基因克隆到T载体上测序。测序得到U-box序列大小为2 049 bp,登录号为Genbank ID:KJ003854。经生物信息学分析可知,U-box编码一个U-box/ARM重复蛋白,由一个U-box结构域和两个ARM串联重复组成,属于泛素连接酶类,具有泛素连接酶活性。推测其可能通过泛素/26S蛋白酶体途径、激素信号传导反应以及与ChIFN-γ基因作用调控烟草腺毛的生长和发育,另外U-box/ARM重复蛋白对烟草抗病具有重要意义。

结直肠癌中ARMCX2的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中ARM重复X连锁蛋白2(ARMCX2)的表达与临床病理特征的关系及与K-ras基因突变的相关性。方法选取2012年1月至2014年8月在浙江中医药大学附属第二医院确诊为结直肠癌的患者87例,并留取距结直肠癌组织边缘>3 cm的正常结肠黏膜组织(癌旁组织)87例作为对照。采用免疫组化法检测结直肠癌组织和癌旁组织中ARMCX2表达和结直肠癌中增殖细胞核抗原(PCNA)表达,Western blot检测结直肠癌组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,qRT-PCR检测结直肠癌组织中K-ras基因突变并分析其与ARMCX2的相关性。结果结直肠癌组织中ARMCX2阳性表达率为51.7%,高于癌旁组织的10.3%,差异有统计学意义(P<0.01)。结直肠癌组织中PCNA阳性表达率为43.7%。结直肠癌组织中ARMCX2阳性表达与肿瘤最大径、浸润深度、淋巴结转移、血管淋巴管侵犯和TNM分期均有关(均P<0.05),而与性别、年龄和分化程度均无关(均P>0.05)。与癌旁组织相比,结直肠癌组织中Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析显示ARMCX2与BAX的表达呈负相关(r=0.63,P<0.01),与Bcl-2、PCNA的表达均呈正相关(r=0.35和0.70,均P<0.05)。有K-ras基因突变的结直肠癌组织中ARMCX2阳性表达率为85.7%,高于无K-ras基因突变的40.9%,差异有统计学意义(P<0.01)。结直肠癌患者术后生存时间为10~60个月,中位生存时间29个月。生存分析显示ARMCX2的表达与生存时间有关(P<0.05)。结论结直肠癌中ARMCX2表达升高,其高表达在促进肿瘤细胞增殖和凋亡过程中有重要作用。ARMCX2与K-ras基因突变有关。ARMCX2可能是结直肠癌重要的预后因子。

宫颈鳞癌老年患者术后组织中ARMCX1和MMP-2的表达及意义

目的检测老年宫颈鳞癌术后组织中ARM重复X连锁蛋白(ARMCX)1和基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达特征,分析其临床病理特征中的表达差别,探讨二者的相关性。方法以67例宫颈鳞癌的老年患者临床资料及留取的术后新鲜组织作为观察组,以20例非肿瘤性宫颈组织作为对照组,应用流式细胞术检测两组ARMCX1和MMP-2的表达。结果观察组ARMCX1和MMP-2的表达量显著高于对照组(P<0.05);观察组ARMCX1及MMP-2表达量与肿瘤组织学分型、肿瘤脉管累犯及淋巴转移情况明显有关(P<0.05)。肿瘤的增值指数增高,ARMCX1的表达量显著增加(P<0.05)。观察组ARMCX1和MMP-2的表达具有正相关性(P<0.05)。结论宫颈鳞癌老年患者术后组织中ARMCX1和MMP-2的表达明显增加,且存在相互协同作用。检测宫颈组织中ARMCX1和MMP-2的表达对肿瘤发生、发展具有重要预测价值。

结肠腺癌组织中ARMCX1的表达及临床意义

目的探讨结肠腺癌组织中ARM重复X连锁蛋白1(ARMCX1)的表达及临床意义。方法收集65例结肠腺癌患者癌组织(研究组)及其癌旁正常结肠黏膜组织(对照组),应用免疫组化染色和Western blot检测两组ARMCX1蛋白的表达,应用实时荧光定量PCR检测两组ARMCX1 mRNA的表达。分析结肠腺癌组织ARMCX1阳性表达与临床病理特征的相关性。随访5年,观察结肠癌患者生存情况。结果研究组ARMCX1阳性表达率高于对照组(53.8%vs.9.2%)(P<0.05)。研究组ARMCX1蛋白和mRNA表达高于对照组(1.15±0.21 vs.0.69±0.19和0.85±0.12 vs.0.72±0.14)(P<0.05)。发生脉管和神经累犯以及有淋巴结转移的结肠腺癌患者癌组织ARMCX1阳性表达率高于未发生者(P<0.05)。增殖指数≥25%的结肠腺癌患者癌组织ARMCX1阳性表达率高于增殖指数<25%者(P<0.05)。随访期间,存活20例,死亡42例,失访3例;死亡患者术后的生存时间为8~60(35.3±8.9)个月。与结肠腺癌组织ARMCX1阴性表达患者相比,阳性表达患者5年生存率低(P<0.05)。结论ARMCX1在结肠腺癌组织中表达增高,可能对病变形成和进展有促进作用。

口腔鳞癌中ARMCX1的表达及其对预后判断价值的研究

目的:检测口腔鳞癌中ARM重复X连锁蛋白1(ARMCX1)的表达,分析其临床意义。方法:以112份口腔鳞癌患者切除的肿瘤组织标本作为观察组1,选择上述标本中距肿物边缘>3cm的正常口腔黏膜组织45份作为对照组1,留取术后的蜡块组织。以上述标本中15份口腔鳞癌患者切除的肿瘤组织作为观察组2,距肿物边缘>3cm的正常口腔黏膜组织15份作为对照组2,留取术后新鲜组织。应用免疫组化方法检测观察组1和对照组1中ARMCX1蛋白的表达,应用荧光PCR技术检测观察组2和对照组2中ARMCX1mRNA的表达。结果:观察组1和对照组1中ARMCX1蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05),观察组1中ARMCX1蛋白表达的阳性率与脉管累犯、淋巴结转移、肿瘤最大径和增殖指数相关(P<0.05),与分化程度、神经侵犯无明显相关性(P>0.05)。观察组2和对照组2中ARMCX1 mRNA表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示观察组1中ARMCX1蛋白的表达与生存时间密切相关(P<0.05)。结论:ARMCX1蛋白和mRNA在口腔鳞癌组织中表达下调,对病变形成和进展具有促进作用,ARMCX1蛋白的表达对判断口腔鳞癌的预后可能有一定价值。