鸡cENS-2基因U3-R序列的克隆分析与表达载体的构建

克隆并测序了1.2 kb的鸡cENS-2(chicken normastem cell gene-2,cENS-2)基因3′端U3-R样结构调控序列。经序列分析和同源性比较表明,所克隆的U3-R序列包含多个转录因子结合位点如AP-1、GATA-1等,同时还包括一个重要的顺式调控元件B区,该区域在鸡正常的胚胎干细胞中有特异的增强子活性。该序列经pMD-18T载体过渡后,定向连接于切去启动子的pEGFP-N1载体的上游,构建了鸡cENS-2基因U3-R样序列调控的绿色荧光蛋白基因报告载体,为下一步对鸡胚胎干细胞(CES)细胞标记研究打下基础。