MicroRNA-21反义寡核苷酸可以抑制U373MG细胞对替尼泊苷VM-26的耐受性

脑胶质瘤患者对化疗药物的耐受性是亟待解决的问题之一.microRNA参与了肿瘤发生发展的诸多过程.选取目前临床上常用的治疗脑恶性胶质瘤的化疗药物替尼泊苷(teniposide)VM-26和人恶性胶质瘤细胞系U373MG为研究对象,通过反义寡核苷酸技术,应用MTT及细胞生长曲线等方法,发现抑制microRNA-21的功能后,细胞活性明显降低,且可以在一定程度上抑制U373MG细胞对VM-26作用的耐受性,而且这种耐受性的抑制与细胞生长速度关系不大,从而为指导临床用药,探索肿瘤细胞耐受化疗药物的机制提供新的线索.

铅引发细胞株U373MG细胞表现肿瘤坏死因子α之信号传导通路

[目的 ]在研究探究铅暴露对于神经胶原细胞的影响以及其诱发细胞内信号传导的通路。 [方法与结果 ]在生物体外培养条件下 ,低浓度的铅暴露 ( 0 0 1μmol/L)会诱发神经胶原细胞株U 373MG内的肿瘤坏死因子 α(TNF α)过量产生。而且 ,C5 7BL/6小鼠经腹腔注射含 12 5mg/kg体重之醋酸铅溶液后 ,也能诱导小鼠脑部之神经胶原细胞及神经细胞表达TNF α。TNF α可能会刺激astroglia的增生 ,或者使neuroncells死亡 ,并且这样的状况一般被认为与病理性的astrogliosis与demyelinisa tion有关。虽然铅使细胞表达TNF α ,但是不管是在体外培养的状态 ,分析U 373MG细胞增生速率以及用propidiumiodinestain ing侦测细胞凋亡 (apoptosis)的数目所得的结果 ;或是利用 (ter minaldeoxynucleotidyltransferaselabeling ;TUNEL)染色法直接分析铅处理以后小鼠的脑部神经和胶原细胞凋亡的细胞数目 ,结果显示铅并不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡。同样的以细菌内毒素 (lipopolysaccharide ;LPS)处理小鼠 ( 10mg/kg体重 )或是细胞株U 373MG也不会直接抑制细胞生长或是引起凋亡。虽然细胞的存活所受的影响会因实验条件而有些差异性。除此之外 ,U373MG细胞在暴露 0 0 1μmol/L到 10 μmol/L等不同浓度之醋酸铅后 。

九节龙皂苷对胶质瘤U373MG的抑制作用及其机制研究

目的探讨九节龙皂苷对人脑胶质瘤细胞U373MG增殖的抑制作用及其机制。方法培养U373MG细胞系,随机分为二甲基亚砜对照组(control组)和九节龙皂苷治疗(ADS)组。采用甲基噻唑基四唑法检测不同剂量ADS对人胶质瘤细胞U373MG增殖的影响;流式细胞仪观察细胞凋亡情况。免疫组化检测凋亡蛋白Caspase-3、p-Caspase-3的表达变化。结果与对照组比较,ADS可显著降低U373MG细胞的生存率;流式细胞仪检测结果显示,随着ADS浓度的增大,U373MG细胞的凋亡率明显上升,免疫组化结果同样证明,ADS可呈剂量依赖性的促进凋亡信号Caspase-3和p-Caspase-3的高表达,不同组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ADS可呈剂量依赖性的抑制U373MG细胞增殖,可能通过促进Caspase-3、p-Caspase-3的表达,诱发U373MG细胞大量凋亡,发挥重要的抗肿瘤作用。

高压氧联合替莫唑胺对神经胶质瘤U373 MG细胞凋亡的影响

目的探讨高压氧(HBO)联合替莫唑胺(TMZ)对神经胶质瘤U373MG细胞凋亡的影响及其作用机制.方法U373MG细胞培养完成后分为4组:对照组(不作HBO及药物处理)、TMZ处理组(只给予50μmol/L TMZ处理)、HBO组(0.24 MPa HBO处理3 h)和HBO+TMZ处理组(HBO预处理3 h后加入50μmol/L TMZ).CCK-8法检测HBO和TMZ单用或联用对U373MG细胞增殖的影响;流式细胞术检测HBO和TMZ单用或联用对U373MG细胞情况及细胞中活性氧(ROS)水平变化情况;Western blotting实验检测U373MG细胞凋亡相关蛋白的表达.结果HBO+TMZ组中U373MG细胞的增殖抑制情况较TMZ组更明显(P<0.05);TMZ处理组中U373MG细胞出现了早期凋亡和晚期凋亡,HBO+TMZ组中凋亡率明显高于对照组[(73.19±3.58)%vs.(30.5±2.27)%,P<0.01].与空白组和HBO组比较,TMZ组中Bcl-2表达量明显降低,Bax、caspase-3表达量明显升高,且HBO+TMZ组较TMZ组变化更明显(P<0.05或P<0.01).HBO+TMZ组U373MG细胞中ROS水平明显升高(P<0.01);加入ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,HBO+TMZ组的细胞凋亡被抑制(P<0.01).结论HBO联合TMZ能够增强对U373MG细胞增殖的抑制作用,并通过上调节U373MG细胞中的ROS水平促进TMZ诱导细胞凋亡.